试验方法
试验方法

1、马歇尔、浸水马歇尔试验操作过程?⑴试验操作方法和步骤准备工作①制备符合要求的马歇尔试件,一组试件的数量最少不得少于4个。②量测试件的直径及高度:用卡尺测量试件中部的直径,用马歇尔试件高度测定器或用卡尺在十字对称的4个方向量测离试件边缘10mm处的高度,准确至O.1mm,并以其平均值作为试件的高度。如试件高度不符合63.5mm±1.3mm或95.3mm±2.5mm要求或两侧高度差大于2mm时,此试件应作废。③将恒温水槽调节至要求的试验温度,对粘稠石油沥青或烘箱养生过的乳化沥青混合料为60℃±1℃。④将马歇尔试验仪的上下压头放入水槽或烘箱中达到同样温度。将上下压头从水槽或烘箱中取出擦试干净内面。为使上下压头滑动自如,可在下压头的导棒上涂少量黄油。再将试件取出置于下压头上,盖上上压头,然后装在加载设备上。在上压头的球座上放妥钢球,并对准荷载测定装置的压头。(2)试验步骤①将试件置于已达规定温度的恒温水槽中保温,保温时间对标准马歇尔试件需30~40min,对大型马歇尔试件需45-60min。试件之间应有间隔,底下应垫起,离容器底部不小于5cm。②当采用自动马歇尔试验仪时,将自动马歇尔试验仪的压力传感器、位移传感器与计算机或X-Y记录仪正确连接,调整好适宜的放大比例。调整好计算机程序或将X-Y记录仪的记录笔对准原点。(当采用压力环和流值计时,将流值计安装在导棒上,使导向套管轻轻地压住上压头,同时将流值计读数调零。调整压力环中百分表,对零。③启动加载设备,使试件承受荷载,加载速度为50mm/min±5mm/min。计算机或X-Y记录仪自动记录传感器压力和试件变形曲线并将数据自动存入计算机。④当试验荷载达到最大值的瞬间,取下流值计,同时读取压力环中百分表读数及流值计的流值读数。(3)浸水马歇尔试验方法浸水马歇尔试验方法与标准马歇尔试验方法的不同之处在于,试件在已达规定温度恒温水槽中的保温时间为4
材料性能试验方法

材料性能试验方法
材料性能试验方法是用来评估材料的物理、化学和力学性能的实验方法。
不同材料具有不同的性能特点,因此需要针对具体材料类型和所需评估的性能来选择相应的试验方法。
以下是一些常见的材料性能试验方法:
1. 强度试验:用来评估材料的抗拉、抗压、抗弯、抗剪等强度指标。
常见的强度试验方法包括拉伸试验、压缩试验、弯曲试验和剪切试验。
2. 硬度试验:用来评估材料的硬度,即材料抵抗压入或划痕的能力。
常见的硬度试验方法包括布氏硬度试验、洛氏硬度试验和维氏硬度试验。
3. 冲击试验:用来评估材料的抗冲击性能,即材料在受到冲击载荷时的反应。
常见的冲击试验方法包括冲击韧性试验、冲击强度试验和冲击脆化试验。
4. 耐磨试验:用来评估材料的抗磨损性能,即材料在摩擦、磨损和磨料作用下的耐用程度。
常见的耐磨试验方法包括滑动磨损试验和磨损试验机试验。
5. 热膨胀试验:用来评估材料的热膨胀性能,即材料在热膨胀或收缩时的变形程度。
常见的热膨胀试验方法包括线膨胀试验和热膨胀系数试验。
6. 导热性能试验:用来评估材料的导热性能,即材料传导热量的能力。
常见的导热性能试验方法包括热传导试验和热导率试验。
7.电气性能试验:用来评估材料的导电性能、绝缘性能和电磁性能等电气特性。
常见的电气性能试验方法包括电阻试验、绝缘强度试验和磁性能试验。
这些试验方法可以通过标准化机构制定的相关标准进行实施,例如国际标准化组织(ISO)和美国材料和试验协会(ASTM)等制定的标准。
通过这些试验方法,可以评估材料的性能特点,为材料的选择和应用提供科学依据。
初中物理五大实验方法

初中物理五大实验方法1 实物试验法实物试验法是中学物理学中常用的实验方法之一,有时也被称作“物体实验”或“现象实验”。
它是指用具体物品进行实验,对自然现象的研究,并基于实践结果,对物理规律的探索过程。
实物实验是物理学研究中最有说服力的外在检验表现方式,它支持人们以实际实物为基础去发明、改良或验证相关科学理论。
2 数学模拟法数学模拟法是中学物理学中常用的实验方法之一,也是将复杂的物理过程或物理问题用数学方法分析的实验方法。
实验的主要目的在于使用数学模型来发现和描述物理现象,并为实现物理现象给出数学证明提供依据。
另外,在物理研究中,还可以通过数学模拟法得出经验公式,以便更好地揭示物理现象。
3 配方实验法配方实验法是指实验用户按照特定的配比和程序进行实验,目的是发现出物理规律、建立实验模型或完善已有模型。
实验中,用户可以设定变量,并按照一定的步骤操作,控制环境条件,运用仪器设备,改变和控制参数,将实验结果用表格的形式以数据形式记录下来。
4 比较法比较法是一种比较测试的实验方法,其实质是在实验中把物理量的两个变量的变化进行比较,从而以此来发现变量之间的关系。
通常,比较法是通过改变变量值的大小,或两个变量的值在某个范围内有明显的变化来发现物理量之间的关系。
5 仿真实验法仿真实验法是指在计算机模拟系统中模拟复杂实验过程和数学模型的实验过程。
实验者使用计算机模拟技术以及有关仿真软件,建立物理系统的软件模型,表示相关物理量的变化,进行实验操作,并记录下观察和测量结果。
实验者还可以对不同情景进行模拟测试,从而验证和发现物理现象。
技术试验方法

技术试验方法技术试验方法是指通过实验或测试来验证或证明某种产品或服务是否符合其预期特性或标准的方法。
在本文中,我们将介绍一些常见的技术试验方法,包括实验设计、实验条件、实验结果分析和结论。
1. 实验设计实验设计是技术试验方法的核心。
实验设计应该考虑实验目的、实验对象、实验条件、实验方法、实验数据收集和分析等方面。
下面是一个基本的实验设计流程:- 确定实验目的和假设:明确实验的目的和要证明的假设。
- 确定实验对象和样本:根据实验目的和假设,选择实验对象和样本。
- 确定实验条件:包括实验环境、实验设备、实验人员等。
- 确定实验方法:选择适当的实验方法,如盲法、随机化、对比试验等。
- 设计实验数据收集和分析方案:设计好数据收集和分析的方案,包括数据采集方式、数据分析方法等。
- 进行实验并分析实验结果:按照实验设计流程,进行实验并分析实验结果。
- 撰写实验报告:根据实验结果,撰写实验报告,包括实验目的、实验设计、实验结果、结论等。
2. 实验条件实验条件是影响实验结果的关键因素之一。
实验条件应该尽可能模拟实际应用场景,以确保实验结果的准确性和可靠性。
以下是一些常见的实验条件:- 实验环境:包括温度、湿度、光照、噪音等。
- 实验设备:包括仪器、工具、设备等。
- 实验人员:包括实验人员的技能和经验等。
- 实验时间:包括实验时间、实验次数等。
3. 实验结果分析实验结果是实验设计的结果,也是验证实验假设的结果。
实验结果分析应该根据实验目的和假设,对实验结果进行统计分析和描述性统计。
以下是一些常见的实验结果分析:- 描述性统计:对实验数据进行平均数、中位数、标准差等描述性统计,以了解实验数据的分布情况。
- t检验:t检验用于比较实验组和对照组之间的差异,以确定实验结果是否显著。
- 方差分析:方差分析用于比较不同实验条件下的平均值差异,以确定实验结果是否显著。
- 回归分析:回归分析用于建立实验结果与变量之间的关系,以预测实验结果。
试验方法及原理

试验方法及原理一、试验方法试验方法是指在科学实验中,为了验证某个假设或者研究某个现象,而采取的一系列操作步骤和技术手段。
下面将介绍一种常用的试验方法——双盲实验法。
双盲实验法是一种常用的研究方法,用于评估药物、治疗方法或其他干预措施的有效性。
该方法的特点是在试验过程中,既使参与者不知道自己所接受的是实验组还是对照组,也使实验人员不知道哪个组是实验组,以减少主观偏见的影响。
具体操作步骤如下:1. 确定研究对象和研究目的:确定需要研究的对象(如患者、动物等)和研究的目的(如疗效评估、副作用观察等)。
2. 随机分组:将研究对象随机分为实验组和对照组,保证两组之间的基线特征相似。
3. 盲法操作:实验组和对照组的研究对象在试验过程中不知道自己所属的组别,同时实验人员也不知道哪个组是实验组。
4. 干预操作:根据研究目的,对实验组进行特定的干预措施(如给予药物治疗),对对照组进行相应的安慰剂或常规治疗。
5. 数据收集和分析:记录和收集研究对象的相关数据,并进行统计学分析,比较两组之间的差异。
6. 结果解读:根据统计学分析的结果,解读实验的结论,评估干预措施的有效性和安全性。
二、试验原理试验原理是指试验方法背后的科学原理或理论基础。
下面将介绍一种常见的试验原理——贝叶斯统计学原理。
贝叶斯统计学原理是一种基于贝叶斯定理的概率统计方法,用于根据已有的先验知识和新的试验数据,更新对未知事件的概率估计。
该原理的核心思想是将概率视为一种主观度量,通过不断更新和修正概率的估计,逐步逼近真实的概率。
具体原理如下:1. 先验概率:根据已有的先验知识或经验,对未知事件的概率进行初始估计。
2. 似然函数:根据试验数据,计算在不同假设下观察到该数据的概率,得到似然函数。
3. 贝叶斯定理:根据贝叶斯定理,将先验概率和似然函数结合,计算得到后验概率。
4. 更新估计:通过不断进行试验和观察,更新对未知事件的概率估计。
每次试验后,将后验概率作为下一次试验的先验概率,重复上述步骤,逐步逼近真实的概率。
试验方法标准

试验方法标准
试验方法标准是指对试验过程中使用的仪器、操作步骤、数据记录、结果计算等都进行了详细的规定和说明,以保证试验结果的准确性和可靠性。
不同的试验方法标准可能会有一些差异,但通常都包括以下几个方面的内容:
1.试验原理:说明试验的基本原理和理论依据,以便对试验结果进
行解释和分析。
2.试验仪器:列出试验所需的仪器和设备,并说明其规格、型号、
性能指标等,以保证试验结果的准确性和可靠性。
3.试样准备:描述试样的采集、制备、处理和保存等过程,以确保
试样的代表性和一致性。
4.操作步骤:详细说明试验的步骤和操作方法,包括试验前的准备、
试验过程中的操作和试验后的处理等。
5.数据记录:规定试验数据的记录方式和格式,以确保试验结果的
准确性和可追溯性。
6.结果计算:给出试验结果的处理和计算方法,包括数据的统计和
分析、误差的修正等。
7.精度和误差:说明试验的精度和误差要求,并给出相应的测试方
法和数据处理方法。
8.安全防护:列出试验过程中的安全注意事项和防护措施,以确保
试验人员的人身安全和实验室的安全运行。
常用试验方法

2
3
5
10
表7.2.2针状和片状颗粒的总含量试验的粒级划分及其相应的规准仪宽或间距;
公称粒级(mm)
5.00~10.0
10.0~16.0
16.0~20.0
20.0~25.0
25.0~31.5
31.5~40.0
片状规准仪上相对应的孔宽(mm)
2.8
5.1
7.0
9.1
11.6
13.8
片状规准仪上相对应的间距(mm)
表2砂中泥块含量
混泥土强度等级
≥C60
C55~C30
≤C25
含泥块量(按质量计%
≤0.5
≤1.0
≤2.0
对于有抗冻或其他特殊要求的小于或等于C25混凝土用砂,其含泥块量不应大于1.0%.
表3砂中石粉含量
混凝土强度等级
≥C60
C55~C30
≤C25
石粉含量(%)
MB<1.4(合格)
≤0.5
≤7.0
≤10.0
试验时,每批混凝土拌合物取一个试样,含气量以三个试样测值的算术平均值来表示,若三个试样中的最大值或最小值中有一个与中间值之差超过0.5%时,将最大值与最小值一并舍去,取中间值作为该批的试验结果,如果最大值与最小值均超过0.5%,则应重作。
三、泌水率
泌水率比测定:泌水率比按式计算,精确到小数点一位数
BR=Bt/Bc×100
M≥1.4(不合格)
≤2.0
≤3.0
≤5.0
表4砂中的有害物质含量
项目
质量指标
云母含量(按质量计,%)
≤2.0
轻物质含量(按质量计,%)
≤1.0
硫化物及硫酸盐含量(折成SO3按质量计,%)
试验方法

试验方法试验方法是科学研究中至关重要的一环。
通过试验方法,研究人员可以验证假设、获得数据、展示结果,并推动知识的进步。
在科学研究中,试验方法被广泛应用于各个领域,包括物理学、化学、生物学、社会学等等。
本文将介绍试验方法的基本原理、步骤和应用,并探讨试验设计中需要注意的一些问题。
试验方法是一种通过对自然界或人类活动进行有计划的操作来观察和测量现象的方法。
试验的目的是验证或反驳某个假设,通过对实验组和对照组的比较来确定因果关系。
在进行实验之前,研究人员需要明确研究目的、设计适当的实验条件,并制定合理的实验方案。
试验方法的基本步骤包括:问题定义、假设提出、实验设计、数据收集和数据分析。
首先,研究人员需要明确研究的问题或目标,然后根据问题制定一个或多个假设。
接下来,研究人员需要设计实验,包括选择实验对象、确定实验条件和操作方法等。
在实验过程中,需要准确地记录数据,并确保实验的可重复性。
最后,通过对数据的分析,研究人员可以得出结论,并根据结论来验证或反驳假设。
试验方法在科学研究中有着广泛的应用。
在物理学中,试验方法被用来验证理论预测,例如通过实验验证引力定律。
在化学中,试验方法被用来合成新的化合物,测试其性质和应用。
在生物学中,试验方法被用来研究生物现象,例如通过对特定基因的敲除实验来探索其功能。
在社会学中,试验方法被用来研究人类行为和社会系统,例如通过随机实验来评估教育政策的效果。
然而,在进行试验设计时,研究人员需要注意一些问题。
首先,实验样本的选择需要具有代表性,以保证结果的普适性。
其次,实验条件应该尽量模拟实际情况,以增加结果的可靠性。
此外,实验过程需要被严格控制,以排除其他可能的干扰因素。
最后,数据处理和统计分析需要科学合理,以确保结果的可信度。
综上所述,试验方法是科学研究中不可或缺的一环。
通过试验方法,研究人员可以验证假设、获得数据、展示结果,并推动知识的进步。
同时,在进行试验设计时需要注意一些问题,以确保结果的可靠性和可信度。
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实验内生真菌的分离及鉴定实验学时:18实验类型:综合实验要求:选修一、实验目的 1.了解真菌形态的基本特征。
2.掌握丝状真菌制片方法和真菌鉴定方法。
二、实验内容采集植物样品包括叶、茎、根、花、种子或果实,然后对分离样品的内生真菌,并进行形态和分子生物学方法的鉴定。
三、实验原理、方法和手段(一)实验原理根据真菌的形态特征和ITS 序列等分子证据对分离到真菌进行归类和鉴定。
(二)实验手段和方法1、内生真菌分离纯化方法 1.1 样品的表面消毒及预处理分别取根、茎、叶、果实,用洗涤剂在自来水下洗净。
老树皮用75酒精进行表面消毒后,用镊子取出,于酒精灯上烧灼15 秒至表面焦糊,切成1×1cm2 大小置于PDA 固体培养基上。
对于根、茎、叶、果实按下列程序进行表面消毒:75的酒精漂(浸)洗2-3min→无菌水冲洗4-6 次→0.1升汞不同的消毒时间(共设置7 个梯度)→无菌水冲洗4-6 次→用灭菌滤纸吸干多余水分→无菌刀片将材料切成小块将根、茎的表皮、韧皮部、木质部大致分开,并切成0.5×0.5cm2 大小。
将果实的外种皮去掉,消毒之后将内种皮去掉。
灭菌时,沥干的植物材料转放到烧杯中,记好时间,倒入消毒溶液,不时用玻璃棒轻轻搅动,以促进材料各部分与消毒溶液充分接触,驱除气泡,使消毒彻底。
在快到时间之前1-2 分钟,开始把消毒液倾入一备好的大烧杯内,要注意勿使材料倒出,倾净后立即倒入无菌水,轻搅漂洗。
灭菌时间是从倒入消毒液开始,至倒入无菌水时为止。
灭菌液要充分浸没材料。
宁可多用些灭菌液,切勿勉强在一个体积偏小的容器中使用很多材料灭菌。
1.2 内生真菌的分离与纯化将上述组织块置于分离培养基上(每一平皿培养 5 块组织块)于27℃恒温培养,同时将上述消毒过程中最后一次冲洗组织块后的无菌水滴在培养基上平行培养,用以检测消毒是否彻底。
观察菌丝生长情况及污染情况。
培养3-4 天后及时采用尖端菌丝挑取法,挑取形态不同的菌丝或菌落移种到新鲜PDA 培养基上。
纯化3-4 次以保证所得菌落为纯培养。
2、真菌的形态学鉴定方法对分离到的内生真菌的分类鉴定主要根据宏观的培养性状(菌落形态),微观的个体形态特征及一些生物学特性进行经典分类研究。
2.1 培养性状(菌落形态)培养基:查氏培养基(Czapek agar)、沙氏培养基和PDA 培养基。
方法:将固体培养基制成平板,以点植法接钟,即用接种针尖沾取少量孢子点植在平板的中心位置,然后于25-28℃培养一定时间(通常为7 天或14 天)进行观察,观察时可用肉眼或借助放大镜等。
观察的要点:大小:以菌落的直径(mm)表示。
颜色:包括菌落表面和背面的颜色,及色素是否渗入培养基。
菌落表面的纹饰:如皱纹、辐射沟纹、同心环、整个菌落致密或疏松等。
菌落的质地:毡状、毯状、绒毛状、棉絮状、粉粒状、革质状、有无成束状或绳状的气生菌丝。
菌落的高度:扁平、凸起或隆起,及菌落中心部分状况等。
菌落边缘:全缘、锯齿状、树枝状等。
渗出物:菌落表面有无液滴及液滴的颜色等。
2.2 个体形态菌丝的特征:表面性状(粗糙或光滑),宽度等分生孢子梗:分支情况--简单或复杂,轮生或单生等;长短;基部粗糙或光滑等。
产孢结构的形态特征:形状,大小,着生状况(位置,单生、互生或成轮生体)分生孢子的形态:形状,大小,表面状况,聚集方式(直链、斜链或聚集成头)2.3 真菌制片方法——粘片法胶带粘贴法:选用在显微镜油镜下观察细致不粗糙且粘性好的胶带。
取一小段胶带从菌落表面的中心向边缘粘,75乙醇固定,乳酸石炭酸棉蓝染色液染色,将粘有菌丝的一面向上,盖上盖玻片,于显微镜下观察产孢结构等特征。
2.4 显微摄影照片在Motic 数码显微镜下,观察并选取具典型性状特征的视野拍照、直接测量相关数据和进行描述记载。
2.5 菌种的鉴定根据描述的菌种的特征,索引分析相关文献,综合分析对比相关特征的异同,最后确定待定菌株的分类地位。
3、真菌的分子生物学鉴定方法3.1 真菌菌丝的获得(1)固体培养基培养菌丝体对于气生菌丝较多的真菌可以选择PDA 固体培养基在培养皿上培养,在固体培养基平板上铺一层玻璃纸,27℃培养5-7 天。
将3-4 个用培养皿平行培养的新鲜菌丝小心地刮下,收集在一起,以备进行DNA 提取。
在刮取菌丝体时,要注意的是不要把培养基一起刮下来,以免对提取DNA 造成影响。
(2)液体培养基培养菌丝体培养基成分与不加琼脂的PDA 固体培养基成分相同。
将液体培养基以100mL 每瓶分装至250mL 三角瓶中,8 层纱布封口。
用121℃,蒸汽灭菌20min。
将菌丝致密的真菌接种到液体培养基中,于恒温振荡培养箱中27℃、120rpm培养5-7 天。
用两层灭菌纱布过滤菌丝球,用无菌蒸馏水冲洗菌丝球 5 次,避免培养基中的糖类和蛋白对DNA 提取的影响。
40℃下烘干菌丝,但是不要过于干燥,然后进行DNA 的提取。
3.2 基因组DNA 的提取DNA 提取采用CTAB 法。
CTAB(cetyltriethylammonium bromide,十六烷基三乙基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度时,从溶液中沉淀,通过离心可将CTAB 与核酸的复合物同蛋白质、多糖类物质分开,然后将CTAB 与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液,再加乙醇使核酸沉淀,CTAB 能溶解于乙醇。
CTAB法的好处是能很好地去掉糖类杂质,提取前期可得到高含量的DNA。
用CTAB 法提取材料DNA 的具体步骤如下:1 将CTAB buffer 在65℃水浴锅中预热,研钵用液氮预冷;2 取0.1g 左右菌丝体,在液氮中迅速研磨成粉末后,迅速加入5mL 预热的提取液及10μLβ-巯基乙醇,混合均匀后把混合液转入 1.5mL 离心管中700μL/管;3 于65℃水浴保温0.5-1h,时间不能超过1.5h。
保温期间要轻轻振摇几次;4 冷却至室温后,加入等体积700μL的饱和酚:氯仿:异戊醇25:24:1,充分混匀后静置10min5 离心12000rpm,10min,室温,去沉淀,将上清液转入干净离心管中。
6 根据杂质的去除情况重复步骤4、5 数次,直至无杂质;7 加入等体积氯仿:异戊醇24:1抽提一次以去除饱和酚,离心12000rpm,10min,室温;8 将上清液逐滴加入两倍体积的-20℃预冷无水乙醇,以沉淀出DNA。
室温放置10-20min,可以过夜;9 挑取或离心去上清液10000 rpm,5min的方法取出DNA;用75乙醇洗涤两次;10 37℃保温箱中干燥后溶于适量的TE 缓冲液中4℃备用。
3.3 多聚酶链式反应PCR 扩增3.3.1 引物ITS5:GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC3.3.2 扩增条件扩增体系PCR 反应体系为50μL 体系,包括:10×PCRbuffer:1/10MgCl2 :1.5mM,dNTPs(dATP、dTTP、dCTP、dGTP):各200μM,Primer1 0.2μM,Primer2 0.2μM,Taq 酶:12.5U,DNA 模板:约100ng。
扩增条件预变性95℃5min 变性95℃1min 复性51℃1min 3035 个循环延伸72℃1min 延伸补齐72℃10min3.3.3 扩增产物的纯化及序列的测定送测序公司。
4、保存方法将所分离的所有纯化菌株采用两种方法保存。
①斜面低温保藏法:将菌株接种至PDA 固体斜面培养基上于27℃下培养,待菌落长满斜面,观察没有污染后,放于4℃的冰箱中保存。
这种保藏方法适合本实验条件下各菌种的保藏,保藏时间为三个月到六个月,传代次数过多时容易导致菌种变异退化。
②无菌水保存法:在柱形Eppendorf 离心管中加入2/3 体积的蒸馏水,蒸汽灭菌,将带有菌丝的琼脂小块放入无菌水中,4℃的冰箱中保存。
此法保存菌株的时间要长于斜面保存。
用这种保藏方法可以保藏1-2 年。
比较而言这种方法是较好的菌种保藏方法。
四、实验组织运行要求采用“集中授课,学生自主训练为主的开放模式组织教学。
”五、实验条件仪器设备:高压蒸汽灭菌锅,培养箱,调温电炉、摇床、磁力搅拌器、15W 紫外灯、超净工作台、离心机等。
1.5mL eppendorf 离心管,研钵,解剖刀,镊子,纱布,滤纸,三角瓶等;胶带,剪刀,镊子,解剖刀,纱布,滤纸,脱脂棉,三角瓶,9或10cm 培养皿,玻璃棒,接种钩,接种环药品和试剂:葡萄糖、蛋白胨、KH2P043H2O、MgSO47H2O,马铃薯、琼脂。
孟加拉红,青霉素,链霉素,甲基蓝,蛋白胨,酵母膏,蔗糖,磷酸盐,葡萄糖,琼脂条,无菌水等。
消毒剂:75的乙醇,0.1升汞(HgCl2),次氯酸钠溶液(含活性氯10),30双氧水。
双蒸水、琼脂糖,Tris 饱和酚、巯基乙醇β- Mercaptoethanol,石英砂,Tris 饱和酚,氯仿,异戊醇,无水乙醇,硼酸,冰醋酸,氯化钠,盐酸,氢氧化钠,EDTA,CTAB。
六、实验步骤(一)培养基配置1、马铃薯、葡萄糖琼脂培养基马铃薯汁1000ml,葡萄糖20g,琼脂20g(注:取去皮马铃薯200 克,切成小块,加水1000 毫升煮沸30 分钟,滤去马铃薯块,将滤液补足至1000 毫升,加葡萄糖20 克,琼脂15 克,溶化后分装,15磅灭菌30 分钟。
)2、察氏琼脂培养基蔗糖30g,NaNO3 3g,MgSO4.7H2O 0.5g,KCl 0.5g,FeSO4.7H2O 0.01g,K2HPO41g,琼脂13g,蒸馏水1000ml,自然pH 3、沙氏培养基蛋白胨1g,葡萄糖或麦芽糖4 g,琼脂1.5 克,水100 ml。
制法:1 将上述物质称好,放入水中煮沸溶解(不必调PH 即有 5 左右)分中号试管(约4 毫升)包扎,高压115℃20 分钟。
趁热斜好,凝固备用。
4、马丁氏培养基葡萄糖10g,KH 蛋白胨5g,2PO4 1g,MgSO47H2O 0.5g,1孟加拉红3.3mL,琼脂20g,水1000mL,pH 值自然。
抗生素用法与用量:培养基灭菌之后分装前按链霉素40U/mL,青霉素30U/mL 用量加入,冷却到45℃左右未凝固时加入抗生素,混匀倒平板。
乳酸石炭酸棉蓝染色液棉蓝(苯胺蓝或甲基蓝)0.025g,乳酸(比重1.20)10g 石炭酸(结晶)10g,甘油(比重1.25)20g,蒸馏水10 mL。
(二)实验步骤1、采样2、内生真菌分离、纯化并保存菌种3、菌种形态鉴定(1)将4℃保存菌种活化2 次;(2)将活化菌种分别点种PDA、沙氏、察氏平板,每重复3;(3)25℃恒温培养箱培养7 天;(4)然后进行菌落特征描述,取一个平行进行制片(胶带子粘片法),观察个体形态;(5)另两个平行继续培养至14 天,取出;(6)重复步骤4,作为最终描述结果;(7)根据真菌分类鉴定手册和相关资料分析确该菌的归属。