实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究
压力蒸汽灭菌器的参数验证及维修后的检测

压力蒸汽灭菌器的参数验证及维修后的检测压力蒸汽灭菌器是一种常见的消毒设备,广泛用于医疗机构、实验室和制药行业等各个领域。
为了确保其有效性和可靠性,压力蒸汽灭菌器在使用前需要进行参数验证,并在维修后进行检测。
本文将从参数验证和维修后检测两个方面进行讨论。
首先,参数验证是确保压力蒸汽灭菌器工作正常的重要步骤。
参数验证可以分为物理参数验证和生物指标验证两个部分。
物理参数验证主要包括灭菌器的压力、温度和时间等参数的测量。
首先,需要检测灭菌器的压力传感器和压力表是否准确,可以通过与标准压力计进行比对来验证。
接下来,需要验证灭菌器的温度控制系统,可以使用温度计和温度控制器进行测量和比对。
此外,还需要验证灭菌器的灭菌时间是否符合要求,可以通过计时装置进行检测。
生物指标验证主要是通过使用生物指标来验证灭菌器的灭菌效果。
常用的生物指标是密度较高、抗菌能力较强的芽孢菌,如枯草杆菌和芽孢梭菌等。
可以将这些生物指标放置在经过灭菌的材料中,然后放入灭菌器进行灭菌处理。
处理后,将生物指标培养在适当的培养基上,观察是否有菌落生长,以确定灭菌器的灭菌效果。
在维修后的检测中,首先需要进行外观检查,以确保灭菌器的各个部件完好无损。
特别需要关注的是密封件和管路连接部分,如果发现有破损或松动,应及时更换或修复。
同时,还需要检查压力传感器、温度控制器和计时装置等关键零部件的工作状态,如果发现故障,应及时修复或更换。
维修后的检测还包括物理参数验证和生物指标验证。
物理参数验证可以通过与标准仪器进行比对来进行,确保灭菌器的压力、温度和时间等参数测量的准确性。
生物指标验证则是通过灭菌处理具有生物指标的材料,然后观察是否有菌落生长来确定灭菌效果。
需要注意的是,维修后的灭菌器可能会由于零部件更换或修复而导致参数的偏差,因此需要根据厂家提供的维修说明书进行验证。
总之,对于压力蒸汽灭菌器来说,参数验证和维修后的检测是确保其正常工作和有效消毒的重要步骤。
压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项

压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项,这个话题听起来有点儿高大上,但是咱们今天就来聊聊,让大家都能够轻松理解。
咱们要明确一点,压力蒸汽灭菌器是一种非常厉害的设备,它可以有效地杀灭细菌、病毒和其他微生物。
但是,这并不意味着所有的细菌、病毒和微生物都会被彻底消灭掉。
所以,在进行灭菌效果鉴定试验的时候,我们需要注意以下几点:
第一,要选择合适的样品。
这个样品可以是医院里常用的医疗器械、药品或者其他需要灭菌处理的物品。
样品的选择也要根据实际需求来定,不能随便选。
第二,要注意样品的数量和质量。
样品的数量要足够多,这样才能保证测试结果的准确性。
样品的质量也非常重要,如果样品有问题,那么测试结果也会受到影响。
第三,要注意灭菌的时间和温度。
不同的细菌、病毒和微生物对温度和时间的要求是不同的,所以在进行灭菌效果鉴定试验的时候,我们需要根据实际情况来设定温度和时间。
第四,要注意灭菌后的处理方式。
灭菌后的样品需要进行适当的处理,比如说包装、标记等等。
这些步骤也是非常重要的,不能忽略哦!
第五,要注意安全问题。
在使用压力蒸汽灭菌器的过程中,一定要注意安全问题。
比如说戴好手套、口罩等等防护用品,避免发生意外事故。
在进行压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的时候,我们需要认真对待每一个细节。
只有这样才能够得到准确可靠的测试结果。
希望大家都能够掌握这些技巧,让我们的生活更加健康、美好!。
生物安全实验室压力蒸汽灭菌器要求

生物安全实验室压力蒸汽灭菌器要求压力蒸汽灭菌器,俗称高压灭菌器,主要用于实验材料与器具的消毒灭菌和感染性废物的去污染,也是实验室特别是生物安全实验室必须具备的物理消毒设备。
压力蒸汽灭菌器具有灭菌效果可靠、快速、稳定、方便等特点,是一种物理灭菌方法。
1.分类压力蒸汽灭菌器根据冷空气排放方式不同,可分为下排气式蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器两大类。
下排气式蒸汽灭菌器也称为重力置换式压力蒸汽灭菌器,预真空压力灭菌器分为预真空压力灭菌器和脉动真空压力灭菌器。
根据灭菌器容积的大小可以分为大型压力灭菌器和小型压力灭菌器(根据GB/T30690-2014标准,不超过60L的压力蒸汽灭菌器,属于小型压力蒸汽灭菌器);如果根据压力蒸汽灭菌器的形状特征可以分为立式、卧式、台式、移动式压力灭菌器几种。
2.基本工作原理根据热力对细胞壁和细胞膜的损伤以及对核酸的作用,均可导致微生物的死亡,而热力主要使微生物蛋白质发生凝固而导致其死亡。
压力蒸汽灭菌器正是利用湿热杀灭微生物的原理而设计的。
(1)重力置换式压力灭菌器利用重力置换的原理,使热蒸汽在灭菌器中从上而下,将冷空气由下排气孔排出,排出的冷空气由饱和蒸汽取代,利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。
此类灭菌器用于感染性废物灭菌时,存在安全隐患。
(2)预真空压力灭菌器利用机械抽真空的方法使灭菌器内形成负压,蒸汽得以迅速穿透到物品内部进行灭菌,根据抽真空次数的多寡,分为预真空和脉动真空两种,后者应多次反复抽真空,空气排除更彻底,效果更可靠。
灭菌器可以在蒸汽进入前使空气从灭菌器排出。
气体是通过一个装有HEPA过滤器的排气阀排出。
在灭菌结束时,燕汽自动排出。
预真空式压力蒸汽灭菌器对于多孔性物品的灭菌很理想,但由于要抽真空而不能用于液体的压力蒸汽灭菌。
预真空式压力蒸汽灭菌器温度可达132℃~135℃,具有灭菌周期短、效率高,完成整个灭菌周期只需25分钟;冷空气排除较彻底,对物品的包装、摆放要求较宽,而且真空状态下物品不易氧化损坏的特点。
压力蒸汽灭菌生物监测阳性原因分析及干预对策研究进展

2021年第7卷第4期Vol.7,No.4,2021中西医结合护理Chinese Journal of Integrative Nursinghttp ://压力蒸汽灭菌生物监测阳性原因分析及干预对策研究进展王宝莲1,颜美琼1,2,张育红1,2,卢晓燕1(1.复旦大学附属中山医院厦门医院护理部,福建厦门,361015;2.复旦大学附属中山医院护理部,上海,200032)摘要:压力蒸汽灭菌是临床常用的灭菌方法,其灭菌质量影响临床医疗安全。
生物监测是压力蒸汽灭菌质量监测的金标准,压力蒸汽灭菌生物监测阳性受诸多影响。
本文综合文献中报道的生物监测阳性案例,分析其灭菌失败原因,并针对根本原因制定干预措施,为做好医院感染防控工作提供科学依据。
关键词:压力蒸汽灭菌;生物监测;阳性原因;干预对策中图分类号:R 473文献标志码:A文章编号:2618-0219(2021)04-0107-04Cause analysis of positive results of biological monitoring onpressure steam sterilization and research progress ofintervention countermeasuresWANG Baolian 1,YAN Meiqiong 1,2,ZHANG Yuhong 1,2,LU Xiaoyan 1(1.Department of Nursing ,Xiamen Branch of Zhongshan Hospital Affiliated to Fudan University ,Xiamen ,Fujian ,361015;2.Department of Nursing ,Zhongshan Hospital Affiliated to Fudan University ,Shanghai ,200032)ABSTRACT :Pressure steam sterilization is a commonly used clinical sterilization method ,andits sterilization quality affects clinical medical safety.Biological monitoring is the gold standard for quality monitoring of pressure steam sterilization.At present ,there are more and more posi⁃tive cases of pressure steam sterilization biological monitoring reported in the literature ,which brings unnecessary losses to hospitals and patients.This article analyzed potential factors of posi⁃tive results of biological monitoring reported in different literatures ,analyzed the causes of steril⁃ization failures ,and formulated intervention measures for the root causes ,in order to provide a scientific basis for the prevention and control of hospital infections.KEY WORDS :pressure steam sterilization ;biological monitoring ;positive reasons ;intervention countermeasures压力蒸汽灭菌是医院消毒供应中心灭菌方式首选方法[1],其灭菌质量高低是控制和预防院内感染的关键,《WS 310.3-2016消毒供应中心消毒与灭菌监测标准》指出,我国灭菌效果监测已从终末灭菌质量监测扩展到灭菌全过程的质量监测[2]。
压力蒸汽灭菌器生物监测结果的分析

压力蒸汽灭菌器生物监测结果的分析摘要】目的观察压力蒸汽灭菌器的运行情况及其影响因素,提高灭菌质量。
方法通过回顾性调查,对连续3年生物监测结果进行分析并做出评价。
结果连续3年对本中心两台压力蒸汽灭菌器进行72次生物监测,2次出现阳性结果,合格率97.2%。
结论压力蒸汽灭菌器灭菌效果稳定、可靠,操作人员只有按照正确的操作方法,熟悉和掌握灭菌器的各种性能、故障原因,才能保证灭菌器的正常运行并提供合格的灭菌物品。
【关键词】压力蒸汽灭菌器生物监测结果原因分析压力蒸汽灭菌法是目前最可靠的灭菌方法,压力蒸汽灭菌是预防院内感染与病原微生物实验室生物安全管理的主要手段,只有生物监测的准确性才能决定压力蒸汽灭菌的可靠性,从而使院内感染与病原微生物实验室生物安全管理得到彻底保障. 但其灭菌质量易受蒸汽温度及压力、灭菌器性能及装载等因素影响,因此其灭菌过程的质量监测相当重要。
生物监测是确定压力蒸汽灭菌是否有效的最可靠方法, 是判定灭菌是否达标的权威性依据[1],通过监测可以了解设备运转是否正常.为了有利于及时修正消毒灭菌方案,保证灭菌效果,我们连续3年对本中心使用的两台压力容器进行了监测,现将结果报告如下:1、材料与方法1.1材料脉动真空压力蒸汽灭菌器1台,型号:MZQD-0.4A,武汉市江汉医疗制药设备有限公司生;下排式压力蒸汽灭菌器1台,型号:XGI.X,山东新华医疗器械股份有限公司生产,生物监测指示物所用细菌芽孢为嗜热脂肪杆菌芽孢指示管,美国3M公司生产。
标准生物监测包由16条41cmx66cm 的全棉手术巾,将每条手术巾的长边先折成3层,短边折成2层,然后叠放,作成23cm×23cm×15cm 大小的测试包[2] 。
1.2方法参照(GB15981-19955)《消毒与灭菌效果的评价方法与标准》《消毒技术规范》(2002年)《压力蒸汽灭菌器灭菌效果生物监测方法》, 将标准测试包放在灭菌器排气口的上方,经一个灭菌周期后, 在无菌条件下, 取出指示菌管, 投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中, 经56℃±1℃培养7d,观察培养基颜色变化。
压力蒸汽灭菌器:高效安全的微生物灭菌工具

压力蒸汽灭菌器:高效安全的微生物灭菌工具
压力蒸汽灭菌器是一种常用的微生物灭菌设备,广泛应用于医疗、实验室和食品加工等领域。
它利用高温高压的蒸汽来杀灭细菌、病毒和真菌,以保证工作环境的卫生安全。
灭菌器通过加热水并产生压力,将水转化为蒸汽。
在高温高压的环境下,蒸汽能够迅速穿透被灭菌物品,并在微观层面上破坏细菌的细胞结构,实现对微生物的灭活。
灭菌过程通常包括加热、均热、保温和排气等阶段,以确保灭菌效果的可靠性。
压力蒸汽灭菌器以其高效能力和安全可靠而备受青睐。
相比其他灭菌方法,蒸汽灭菌具有更高的杀菌效率和更广泛的适用范围。
它能够在短时间内完成大批量物品的灭菌,确保微生物的全歼灭。
此外,还能够杀灭各类抵抗力较高的致病菌,并有效预防交叉感染的发生。
蒸汽灭菌器在医疗、实验室和食品加工等领域都有着广泛的应用。
在医疗机构中,它常用于灭菌手术器械、医疗器械和药品容器等设备;在实验室中,它用于灭菌培养皿、试管和培养基等实验物品;在食品加工领域,它可以对罐
头、饮料瓶和食品包装等进行灭菌处理。
蒸汽灭菌器的广泛应用为各个行业提供了可靠的微生物控制手段。
压力蒸汽灭菌器相比其他灭菌设备具有许多优势。
首先,它能够提供高温高压的灭菌环境,有效杀灭各类微生物。
其次,蒸汽灭菌器具有较大的容积和高效的工作效率,可以同时处理大批量物品,提高工作效率。
此外,灭菌过程经过严格的监测和自动控制,确保了灭菌的可靠性和稳定性。
实验室生物安全:04压力蒸汽灭菌器运行管理
2012年北京市特种设备事故统计
• 2012年,全市共发生特种设备事故2起(其 中较大事故、一般事故各1起),造成死亡2人, 受伤3人;与2011年相比,特种设备事故下降 33.3%,死亡人数持平,受伤人数下降90.3%。 近五年来,全市特种设备万台事故率和万台事 故死亡率稳中有降,安全状况总体平稳, • 但是,在特种设备使用环节发生与特种设备相 关的事故21起,死亡19人,受伤23人。
1千克力/厘米2(kgf/cm2)=0.098MPa; 1兆帕(Mpa)=10.197kgf/cm2 在工程实际计算中常常按照1kgf/cm2约等 于0.1MPa来进行换算。
• 饱和压力与饱和温度的对应关系如下: • 饱和压力 (Mpa) 饱和温度(C) • 0.1 99.63 • 0.101325 100.00 • 0.15 111.37 • 0.2 120.23 • 0.25 127.43 • 0.3 133.54 • 0.4 143.62 • 0.5 151.84
压力容器的法规标准和管理
• 我国有哪些压力容器技术标准?常用技术标准的名 称是什么?标准要求压力容器哪些方面要符合其规 定? • 我国压力容器技术标准有国家标准、部颁标准及相 关标准约160个。GB表示国家标准。部颁标准中, JB表示机械工业部标准、TB表示化工通用机械专业 标准、YB表示冶金部标准、HG表示化工部标准、SY 表示石油部标准。常用的是GB150《钢制压力容 器》、GB151《钢制管壳式换热器》、GB12337《钢 制球形容器》。这些标准要求压力容器在设计、制 造、检验和验收等方面要符合相关的规定。
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高等级生物安全实验室消毒灭菌关键技术与设备
高等级生物安全实验室消毒灭菌关键技术与设备摘要:生物安全实验室是一种为保护研究人员不受感染、防止有害微生物进入环境的实验室。
为了更好地保护研究人员和环境,生物安全实验室按照防护级别可分为BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4。
高等级生物安全实验室包括BSL-3和BSL-4,核心是“安全”。
在这些实验室中,研究人员处理的微生物是高度致病的,因此需要特别的设施来确保实验过程中不会出现外泄或者感染。
实验室的消毒灭菌技术是非常重要的,它可以预防感染,防止病原微生物外泄,保障试验顺利开展。
高等级生物安全实验室的消毒灭菌技术包括压力蒸汽灭菌器、污水处理设备和气(汽)体消毒设备。
关键词:高等级生物安全实验室;消毒灭菌;关键技术;设备1高等级生物安全实验室消毒灭菌关键技术1.1蒸汽和气体消毒剂在人们的工作、生活中,对其进行消毒、杀菌十分关键。
为保证医疗器械及医疗器械的健康,很多医疗器械及医疗器械均采用各种类型的消毒剂进行消毒。
水蒸气杀菌是一种十分有效的杀菌手段。
在密闭的环境中,在可控的温、湿环境中,水蒸气、水蒸气等都能发挥出优异的杀菌作用。
其中有戊二醛,甲醛,双氧水;二氧化氯,过醋酸等.在某些情况下,能实现消毒杀菌。
在高级别的生物安全实验室中,为了保证实验室内部环境的完全清洁,需要使用气溶胶、水蒸气或气态的消毒灭菌。
本发明适用于生物安全柜,动物房及其有关系统的消毒,以及不能使用液体消毒水的大型或静止设施;其它灭菌方式对设备或光学设备,房间,建筑物及其相关的空调设备等进行了灭菌。
近年来,蒸馏双氧水在高级生物安全实验室中应用日益广泛。
蒸馏双氧水是一种高效的杀菌剂,能杀灭多种细菌,病毒,真菌。
与其它杀菌方式比较,蒸发双氧水杀菌效果好,适用面广。
1.2加热在室内使用的加热消毒方法主要有两种:湿热消毒法和干热消毒法。
在这些消毒方式中,以湿热法为最普遍的消毒方式,以水蒸气法为最普遍的消毒方式。
高压水蒸气杀菌是利用高压水蒸气来杀死细菌,最方便快捷地将各种形态的细菌全部杀死。
压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项
压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项压力蒸汽灭菌器是我们生活中非常实用的一种设备,它可以帮助我们消毒、杀菌,让我们的生活更加健康。
但是,你知道如何正确地使用压力蒸汽灭菌器吗?今天,我就来给大家讲一讲关于压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项,希望对大家有所帮助。
我们要明确一个概念,那就是压力蒸汽灭菌器。
它是一种利用高温高压的蒸汽来杀灭细菌、病毒等微生物的设备。
在使用压力蒸汽灭菌器的时候,我们需要遵循一定的操作规程,否则可能会导致灭菌效果不佳。
那么,我们应该注意哪些问题呢?下面就让我来给大家一一道来。
第一条,准备工作要做足。
在使用压力蒸汽灭菌器之前,我们需要先对设备进行检查,确保其正常运行。
我们还需要准备好需要灭菌的物品,将其放入灭菌袋中,并标注上相应的信息。
这样一来,我们在进行灭菌试验的时候就可以更加方便快捷了。
第二条,温度和时间要控制好。
在使用压力蒸汽灭菌器的时候,我们需要控制好温度和时间,以确保灭菌效果达到最佳。
一般来说,我们可以根据不同的物品选择不同的温度和时间进行灭菌。
比如说,对于一些比较脆弱的物品,我们可以选择较低的温度和较长的时间进行灭菌;而对于一些比较坚硬的物品,我们则可以选择较高的温度和较短的时间进行灭菌。
第三条,要注意安全问题。
在使用压力蒸汽灭菌器的时候,我们还需要注意安全问题。
我们要确保设备的电源已经接好,并且没有漏电现象;我们要避免在设备运行过程中将手伸进去;我们还要定期对设备进行维护保养,以确保其正常运行。
第四条,要留足空间。
在使用压力蒸汽灭菌器的时候,我们还需要留出足够的空间来进行灭菌试验。
因为在灭菌的过程中,会产生大量的水蒸气和热量,如果周围空间太小的话,可能会导致设备过热或者发生意外事故。
第五条,要有记录。
在使用压力蒸汽灭菌器进行灭菌试验的时候,我们还需要做好记录工作。
具体来说,我们可以记录下每个物品所使用的温度和时间、灭菌后的状况等等信息。
这样一来,在后续的使用过程中就可以更好地掌握设备的性能和使用方法了。
压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项
压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验的注意事项1. 了解压力蒸汽灭菌器的工作原理大家好,今天咱们聊聊压力蒸汽灭菌器。
说到这个,大家是不是觉得有点陌生?其实,压力蒸汽灭菌器就是一个利用高温高压蒸汽来杀灭微生物的小“机器”。
听起来是不是挺高大上的?但说实话,它就像是厨房里的高压锅,只不过这个锅是用来消毒的。
一般来说,它能把温度抬到121℃,然后再加压,把那些顽固的细菌一网打尽。
就像打篮球的时候,看到对方的防守很紧,我们就得想办法突破,灭菌器也是这样,越高的压力和温度,越能确保那些微生物无处可逃。
1.1 注意设备的选择首先,我们在进行灭菌之前,一定要选对设备。
市场上的压力蒸汽灭菌器琳琅满目,有些就像手机一样,功能多得让人眼花缭乱。
可是,咱们可不能盲目跟风,得考虑清楚自己的需求。
如果你只是需要灭菌一些简单的器械,可能一台普通的就够了。
但如果你是医院,或者实验室,那可就得选一台性能好的。
这就像买车一样,家用小轿车和拉货的卡车功能可不一样。
记得好好研究一下各个品牌的参数,别让自己的工作“车”选错了。
1.2 检查设备的状态选好了设备,还得检查一下状态。
设备就像人一样,也有“身体健康”的问题。
使用前,先看看有没有漏水,压力表是不是正常,门是不是密封得好。
你想啊,蒸汽灭菌器要是漏气,那就跟打了一场半场篮球,结果发现没上篮,白忙一场。
所以,别嫌麻烦,检查是必须的,确保万无一失。
2. 试验前的准备工作准备工作可是相当重要,真是“好事多磨”。
试验前,咱们得把所有的器械准备齐全,还得清洗干净。
试想一下,如果你吃的东西都是脏兮兮的,那味道肯定会打折扣。
这就像在准备一桌好菜,材料不新鲜,做出来的菜再怎么努力也不会好吃。
所以,清洗、消毒,这是个不容小觑的步骤。
2.1 灭菌袋的使用然后,咱们还要选对灭菌袋。
其实,这些袋子就像你出门时用的包,要能装得下你的东西,还得能防水。
如果袋子不耐高温,到了关键时刻可能就会“掉链子”。
所以,选用高温耐受的灭菌袋,确保袋子能经得起考验。
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中国疾病预防控制中心硕士学位论文实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究姓名:沈瑾申请学位级别:硕士专业:劳动卫生与环境卫生学指导教师:张流波20070601—j@:j!实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究4)胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA):将169TSA成品溶于400ral蒸馏水中,并调节pH值在7.O±0.2,经121"C压力蒸汽灭菌后使用。
5)0.1%的胰蛋白胨生理盐水溶液(0.I%TPS):胰蛋白胨0.49;NaCI3.49:TWEEN一800.4ml;加400ml蒸馏水溶解,并调节pH值在7.0±0.2,经121℃压力蒸汽灭菌后使用。
6)固体负载:空试管、三角瓶、吸管、镊子等7)液体负载:水、试剂、培养基等8)温度压力测定仪(图卜1)9)下排气式压力蒸汽灭菌器:日本HIRAYAblA公司HVE一50容积50L10)脉动真空式压力蒸汽灭菌器:XHJC-A型BD抗力综合检测器(图卜2)11)两个贮物铝盒(图卜3):A盒上下均有透气小孔,B盒仅上盖有透气小孔。
图卜1温度压力测定仪图卜2)【HJC_A型肋抗力综合检测器—迥实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究●●●●~●●铝盒A(上下通气)铝盒B(仅上盖通气)图卜3贮物铝盒1.2.2方法实验室灭菌固体一般用115"C、121"C、126"C、132"C、134"C:斤种温度““,下排气式压力蒸汽灭菌器用115"C、121℃和126"C,预(脉动)真空式压力蒸汽灭菌器一般用132℃和134℃。
实验室灭菌液体一般用115。
C和121"C两种不同的温度,最常用的是121。
C,但在灭菌含糖试剂或含糖培养基时必须用115"C,以免高温破坏试剂的成分。
实验剩余的菌悬液和培养物是实验室最常见的废弃物,现以嗜热脂肪杆菌芽孢作为实验指示菌,观察下排气式压力蒸汽灭菌器在灭菌温度为121℃时,不同灭菌时间下悬液和培养物的灭菌情况。
1.2.2.1实验前物品的灭菌情况(固体负载)1)下排气式压力蒸汽灭菌器①灭菌器内装入70%的固体负载,靠近排气口处横放一个装有十支中试管的试管包(图卜4),内含两支装入化学指示卡和生物指示剂的试管(其中一支有试管帽另一支没有);竖放一个装有十支中试管的试管包(图1—5),内含三支装入化学指示卡和生物指示剂的试管(一支竖放有试管帽,一支竖放没有试管帽,一支倒放有试管帽);并放置温度压力探头。
设定固体灭菌程序(表1-1),开启灭菌器。
实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究图卜4横放试管包的组成图卜5竖放试管包的组成②灭菌循环结束后,取出化学指示卡观察其变色情况,若变为标准色或超过标准色则变色合格;取出生物培养指示剂,将其内含培养基的玻璃管捏碎后于56。
C培养48d',时,观察变色情况,同时设阴、阳性对照,阳性对照变色,阴性对照和实验用生物培养指示剂不变色,则灭菌合格;探头取出后联机读数(图1-6),确定灭菌周期所有时间点的温度和压力,判定灭菌温度、时间是否与设定值一致。
表卜1下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌固体的实验灭菌程序灭菌程序重复实验次数⑧一●●一’.—^Sj!实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究图卜6温度压力探头联机读数2)脉动真空式压力蒸汽灭菌器(肋抗力综合检测器)灭菌器置物筐中装入70%的固体负载,横放一试管包,竖放一试管包(试管包的组成同上),放入温度压力探头。
将置物筐放置于排气口上方,关闭灭菌器柜门,选择“抗力测定程序”,脉动三次,设定灭菌程序(表1—2),启动灭菌。
灭菌循环结束后,取出化学指示卡、生物指示剂及温度压力探头,结果判断同上。
表卜2脉动真空式压力蒸汽灭菌器灭菌固体的实验灭菌程序灭菌程序重复实验次数i.国j竺竺兰曼垄苎釜圣堕兰竺竺塞全堡!壅、~∥,3)相同灭菌程序下,不同包装固体的灭菌效果比较贮物铝盒A、B各装入十支中试管(图卜7),每层中间两支试管装有生物指示剂和化学指示卡;另将十支中试管(中间两支试管装有生物指示剂和化学指示剂)用新牛皮纸包成试管包C(图卜8)。
铝盒A、B,试管包C和温度压力探头放置于下排气式压力蒸汽灭菌器中,装入其他固体负载,使灭菌器总的装载量为70%,设定固体灭菌程序(表卜3)。
灭菌循环结束后,取出化学指示卡、生物指示剂及温度压力探头,结果判断同上。
表卜3实验灭菌程序灭菌程序重复实验次数铝盒下层指示剂的放置铝盒上层指示剂的放置图卜7贮物铝盒中试管及指示剂的放置方式图l一8试管包C的组成—姆实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究●●一._-1.2.2.2实验前物品的灭菌情况(液体负载)下排气式压力蒸汽灭菌器内装入70%的液体负载,靠近排气口处竖放一个装有十支中试管的试管包,每支试管底部有3ml水,内含两支装入化学指示卡和生物指示剂的试管(其中一支有试管帽另一支没有),化学指示卡紧贴水面但未沾水(图卜9),生物指示剂2/3浸入水中(图i-10),并放置温度压力探头。
设定液体灭菌程序(表卜4),开启灭菌器。
灭菌循环结束后,取出化学指示卡、生物指示剂及温度压力探头,结果判断同上。
图卜9试管包中化学指示卡图I-10试管包中生物指示剂表卜4下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌液体的实验灭菌程序灭菌程序重复实验次数;,‘≯;实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究≮・[i§谚.Z苎竺兰竺2苎翌查竺兰兰!兰竺竺竺苎’、…一,平),再进行两两比较。
两两比较时,采用多个样本率比较的X2分割法,为保证检验假设中I型错误a的概率不变,需重新规定检验水准,本章节中资料三组间的两两比较,有公式得新检验水准a’=O.0125;五组间的两两比较,有公式得新检验水准Ⅱ’=O.0045。
1.3结果1.3.1灭菌温度、压力和时间的测定结果实验中,两台灭菌器在不同的灭菌程序下,温度、时间的实测值均与设定值一致,下面分别列举不同灭菌程序的温度压力变化图。
1)HVE一50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为115"C25min,实测灭菌温度范围为115~115.2。
C,实测灭菌时间为25.1min,其温度压力曲线图如下(图1-11)。
图卜11下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为115。
C25min的温度压力曲线图—j、鲤L——————!型塑坚塑竺塑●●●_一●●2)HVE一50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为115"C30rain,实测灭菌温度范围为115~115.212,实测灭菌时间为30rain,其温度压力曲线图如下(图1-12)。
图卜12下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为115。
C30min的温度压力曲线图3)HVE一50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为121℃lOmin,实测灭菌温度范围为121~121.3。
C,实测灭菌时间为10.1min,其温度压力曲线图如下(图1-13)。
图卜13下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为1214ClOmin的温度压力曲线图实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究4)HVE一50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为121℃15min,实测灭菌温度范围为121~121.4。
C,实测灭菌时间为15.1min,其温度压力曲线图如下(图1-14)。
图卜14下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为121℃15min的温度压力曲线图5)HVE-50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为121℃20lllin,实测灭菌温度范围为121~121.4。
C,实测灭菌时间为19.9min,其温度压力曲线图如下(图卜15)。
图卜15下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为121℃20min的温度压力曲线图●●●●~●●—j鲤j实验室压力蒸汽灭菌器生物安全性研究6)HVE一50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为126"C5min,实测灭菌温度范围为126~126.3"C,实测灭菌时间为5min,其温度压力曲线图如下(图卜16)。
图1-16下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为126℃5min的温度压力曲线图7)fiVE一50下排气式压力蒸汽灭菌器,灭菌程序为126℃lOmin,实测灭菌温度范围为126~126.4"C,实测灭菌时间为10.1min,其温度压力曲线图如下(图卜17)。
图1-17下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌程序为126℃lOmin的温度压力曲线图—jgL——————』型塑堕塑竺塑●●●。
一●-8)BD抗力综合测试仪,灭菌程序为132"C4min,脉动三次,实测灭菌温度范围为132~132.1℃,实测灭菌时间为4min,其温度压力曲线图如下(图1-18)。
图卜18BD抗力综合检测器灭菌程序为132℃4min的温度压力曲线图1.3.2实验前物品的灭菌情况结果(固体负载)1.3.2.1下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌固体负载时(表1-5),同一负载在相同灭菌温度下,延长灭菌时间可增加灭菌合格数;不同放置方式的固体负载,经相同的灭菌程序后得到的灭菌结果也不同。
图2一lAGI一10采样图2—2Andersen采样使用真空泵图2—3Andersen采样器不使用真空泵2.2.2.1制备菌悬液将已有粘质沙雷氏菌肉汤培养物分纯,25"C培养48小时,选择单个典型菌落普通斜面培养基传代,培养24小时后取少量新鲜培养物放入肉汤,恒温摇床37。
C培养24小时备用。
(计数1.2~3.6X108cfu/m1)现存枯黑芽孢为1.5~1.58x10”cfu/ml———j国j竺竺皇垩塑鲞塑圣堕兰竺竺窒竺竺!查、~_,’抽真空结束后(50s)取下采样器,25℃培养48h(重复5遍)。
步骤同上,但不使用真空泵(重复5遍)。
步骤同上,但每层载体染30ral的粘质沙雷氏菌,使用真空泵的实验重复5遍,不使用真空泵的实验重复5遍。
2)Andersen六级采样器采灭菌器B排出的气体所有步骤同灭菌器A的采集方法。
2.2.2.5统计学方法有关数据用SAS9.1软件包分析,数据进行两样本的t检验,取p<O.05作为显著性差异水平。
2.3结果粘质沙雷氏菌在25℃培养时形成粉红色菌落(图2-4),枯草杆菌黑色变种芽孢培养后形成表面粗糙不透明的微黄色菌落,菌落中央有一黑点(图2-5)。
培养皿培养后有上述菌落即可计数。
图2-4粘质沙雷氏菌ATCCl4756图2-5枯草黑色变种芽孢ATCC9372。