综合讲解纤维素酶
纤维素酶的作用
纤维素酶的作用纤维素酶是一种广泛存在于自然界中的酶类，它在生物体内发挥着重要的作用。
纤维素酶主要作用于纤维素，这是一种存在于植物细胞壁中的多糖物质。
纤维素是地球上最丰富的有机化合物之一，它在植物细胞壁中起到了结构支持和保护细胞的作用。
然而，纤维素对于大多数动物和微生物来说是难以降解和利用的。
纤维素酶能够降解纤维素，将其分解为可溶性的低聚糖和葡萄糖单体。
这些降解产物可以被动物和微生物吸收和利用，从而提供能量和营养物质。
纤维素酶可以在多种生物体中找到，包括动物、植物和微生物。
在动物体内，纤维素酶主要存在于一些特殊的微生物中，如细胞外产生的蛇胆酶，它能够帮助动物消化纤维素。
蛇胆酶是一种能够分解纤维素的纤维素酶，它存在于蛇的唾液中。
蛇在进食时，会释放唾液来润湿和分解捕获的猎物，其中的纤维素酶能够帮助蛇消化纤维素。
在植物体内，纤维素酶主要存在于植物细胞壁中的细胞酶体中。
当植物受到外界环境的刺激时，植物细胞会释放纤维素酶来分解细胞壁中的纤维素，以适应外界条件的变化。
例如，在植物生长过程中，纤维素酶能够帮助植物调节细胞壁的构成，以适应不同的环境条件。
在微生物体内，纤维素酶是一种常见的酶类。
许多微生物，如细菌和真菌，具有纤维素酶的产生能力。
这些微生物通过分泌纤维素酶来分解环境中的纤维素，从而释放出能量和营养物质。
这对于地球上的生态系统是非常重要的，因为纤维素是植物细胞壁中最主要的组成部分，纤维素酶能够促进植物细胞壁的降解和再生。
除了在生物体内发挥重要作用外，纤维素酶还在工业上具有广泛的应用价值。
纤维素酶可以用于生物质降解，例如在制备生物柴油和纸浆工业中。
通过添加纤维素酶，可以有效地分解生物质中的纤维素，从而提高生物质的可转化性和利用效率。
此外，纤维素酶还可以用于制备食品添加剂和生物医药产品等。
总之，纤维素酶在生物体内具有重要的作用。
它能够降解纤维素，提供能量和营养物质，并在生物体生长和发育过程中发挥调节作用。
此外，纤维素酶在工业上也具有广泛的应用前景。
【文献综述】纤维素酶的概述
文献综述生物工程纤维素酶的概述【摘要】纤维素作为地球上分布广，含量丰富的碳水化合物，它的降解是自然界碳素循环的中心环节。
纤维素的利用和转化对于解决目前世界能源危机，粮食短缺、环境污染等问题具有十分重要的意义。
本文就纤维素酶的应用进行一个简要的概述。
【关键词】纤维素酶；纤维素酶的实际应用：应用前景1. 纤维素的概况1.2 纤维素酶的分类纤维素酶的组成比较复杂,通常所说的碱性纤维素酶是具有3～10 种或更多组分构成的多组分酶。
根据其作用方式一般又可将纤维素酶分为3 类: 外切β- 1, 4-葡聚糖苷酶( 简称CBH) 、内切β-1, 4- 葡聚糖苷酶( 简称EG)和β- 1, 4- 葡萄糖苷酶( 简称BG) [1]。
在这3 种酶的协同作用下,纤维素最终被分解成葡萄糖。
到目前为止, 还没有能够在碱性条件下分解天然纤维素的纤维素酶。
碱性纤维素酶是一种单组分或多组分的酶, 只具有内切β- 1, 4- 葡聚糖苷酶( 又称CMC酶) 的活性, 有的还与中性CMC 酶组分共存[2]。
1.3 纤维素酶的作用机理纤维素酶在提高纤维素、半纤维素分解的同时, 可促进植物细胞壁的溶解使更多的植物细胞内溶物溶解出来并能将不易消化的大分子多糖、蛋白质和脂类降解成小分子物质, 有利于动物胃肠道的消化吸收[3]。
同时, 纤维素酶制剂可激活内源酶的分泌, 补充内源酶的不足, 并对内源酶进行调整, 保证动物正常的消化吸收功能, 起到防病、促生长的作用, 消除抗营养因子,促进生物健康生长。
半纤维素和果胶部分溶于水后会产生粘性溶液, 增加消化物的粘度, 对内源酶造成障碍, 而添加纤维素酶可降低粘度, 增加内源酶的扩散, 提高酶与养分接触面积, 促进饲料的良好消化。
而纤维素酶制剂本身是一种由蛋白酶、淀粉酶、果胶酶和纤维素酶等组成的多酶复合物, 在这种多酶复合体系中一种酶的产物可以成为另一种酶的底物, 从而使消化道内的消化作用得以顺利进行[4]。
纤维素酶
解。因此，纤维素的完全降解有赖于这三类酶的合适的比
例，比例不当时会显著影响它们对纤维素的降解活力。
张晓静 2013.02
一、纤维素酶的特性及来源
纤维素酶来源
纤维素酶来源非常广泛，昆虫、软体动物、微生物(细
菌、放线菌、真菌等)都能产生纤维素酶，如白蚁、小龙
虾等能产生完全不同于其内共生微生物群所产的纤维素 酶，反刍动物的瘤胃微生物也拥有强大的纤维素降解酶
酶解纤维素时，对无定形区仅EG即可使之水解，对于结
晶区则需要有EG和CBH的协同作用，而且在结晶纤维素 糖化过程中CB组分会使这种协同作用大大加强。
张晓静 2013.02
一、纤维素酶的特性及来源
纤维素酶
对于天然结晶纤维素的水解，首先需要EG酶随机水解切
断无定形区的纤维素分子链，使结晶纤维素出现更多的纤 维素分子基端，为CBH酶水解创造条件，然后CBH酶作用 于纤维素末端基释放出纤维二糖，纤维二糖再由CB酶水解 成葡萄糖，在上述三类酶的协同作用下完成对纤维素的降
到细胞外，增加提取纯化难度，在工业上很少应用。而丝
状真菌具有产酶的诸多优点。
张晓静 2013.02
一、纤维素酶的特性及来源
纤维素酶来源 丝状真菌具有产酶的诸多优点：产生的纤维素酶为胞
外酶，便于酶的分离和提取；产酶效率高，且产生纤维 素酶的酶系结构较为合理；同时可产生许多半纤维素酶、 果胶酶、淀粉酶等。从纤维素酶工业化制备及其应用角 度看，研究和采用丝状真菌产酶具有更大意义。
依次切下纤维二糖单位。其单独作用于天然结晶纤维素时
酶活力较低，但在EG酶的协同作用下，可以彻底水解结晶 纤维素。
张晓静 2013.02
一、纤维素酶的特性及来源
淀粉酶 纤维素酶
淀粉酶纤维素酶淀粉酶和纤维素酶是两种常见的酶类，它们在生物体内起着重要的作用。
本文将分别介绍淀粉酶和纤维素酶的定义、功能、应用以及相关领域的研究进展。
一、淀粉酶淀粉酶是一种能够水解淀粉和糖类物质的酶。
它在生物体内起着重要的消化和代谢作用。
淀粉是植物细胞中的主要能量储存形式，而淀粉酶能够将淀粉分解为葡萄糖分子，以供生物体进行能量代谢。
淀粉酶主要存在于口腔和胰腺中，参与食物的消化过程。
在口腔中，淀粉酶主要由唾液腺分泌，通过唾液进入口腔，与食物中的淀粉发生反应，将淀粉分解为可溶性糊精和葡萄糖。
在胰腺中，胰岛细胞分泌淀粉酶进入小肠，进一步分解食物中的淀粉。
淀粉酶的应用十分广泛。
在食品工业中，淀粉酶能够将淀粉分解为糖类物质，用于制作糖浆、酒精等产品。
在纺织工业中，淀粉酶可用于浆料的脱除，提高织物的柔软度和光泽度。
此外，淀粉酶还被广泛应用于生物化学研究、医药领域以及环境保护等领域。
二、纤维素酶纤维素酶是一类能够降解纤维素的酶。
纤维素是植物细胞壁的主要成分，但由于其结构复杂，常常难以被生物体直接利用。
纤维素酶能够将纤维素水解为可溶性纤维素和糖类物质，为生物体提供能量。
纤维素酶主要存在于微生物和真菌中。
微生物如细菌和真菌是纤维素分解的主要产生者，它们能够分泌纤维素酶来降解纤维素。
纤维素酶可分为纤维素酶I和纤维素酶II两类，它们具有不同的水解机制和酶活性。
纤维素酶的应用也非常广泛。
在生物质能源领域，纤维素酶被广泛用于生物质转化过程中的纤维素降解，以提高生物质能源的利用效率。
此外，纤维素酶还在纸浆工业、饲料工业、纺织工业等领域有着重要的应用。
近年来，淀粉酶和纤维素酶的研究取得了一些重要进展。
科学家们通过对淀粉酶和纤维素酶的结构和功能进行深入研究，不断挖掘其潜在的应用价值。
例如，通过基因工程技术改造淀粉酶和纤维素酶的基因，可以获得更高效的酶制剂。
同时，研究人员还通过筛选和优化酶制剂，提高了淀粉酶和纤维素酶的催化效率和稳定性。
纤维素酶
酱油酿造
在酱油的酿造过程中添加纤维素酶, 可使大豆类 原料的细胞膜膨胀软化破坏, 使包藏在细胞中的 蛋白质和碳水化合物释放, 这样既可提高酱油浓 度, 改善酱油质量, 又可缩短生产周期, 提高生 产率, 并且使其各项主要指标均提高3%。采用固 体制曲、固态酒精发酵和固态醋酸发酵生产工艺 对纤维素酶在食醋酿造方面的应用进行了系统研 究, 结果表明纤维素酶添加量为10～50umol/min, 产酒精量比CK 提高7.5%～23.8%, 食醋产量提高 0.25～1.36kg, 主料出品率提高5.1%～27.2%。
纤维素酶已经广泛应用于食品工业，用纤维 素酶预处理啤酒糟可提高啤酒糟蛋白酶解率10％ 以上；应用于清香型优质白酒生产中，出酒率可 提高13％，而且不影响酒的感官品质；在日本清 酒生产中浸米时加入0．02％-0．1％的纤维素酶， 糖化发酵顺利，出酒率高；在酒精发酵时添加纤 维素酶可显著提高酒精产率并缩短发酵时间。目 前纤维素酶的应用存在的问题主要是生产菌种的 优化和应用的成本。
纤维素酶的组成与功能
纤维素酶根据其催化反应功能的不 同可分为内切葡聚糖酶来自真菌菌的简称CBH,来自细菌的 简称Cex) 和β-葡聚糖苷酶简称BG。 内切葡聚糖酶随机切割纤维素多糖链 内部的无定型区,产生不同长度的寡糖 和新链的末端。 外切葡聚糖酶作用于这些还原性和非还原性的纤维素多糖链的 末端,释放葡萄糖或纤维二糖。β-葡萄糖苷酶水解纤维二糖产 生两分子的葡萄糖。真菌纤维素酶产量高、活性大，在畜牧业 和饲料工作中主要应用真菌来源的纤维素酶。
纤维素酶在食品方面的应用
酿酒 在进行酒精发酵时添加纤维素酶可显著提高酒精和白酒的 出酒率及原料的利用率, 降低溶液的黏度, 缩短发酵时间, 而且酒的口感醇香, 杂醇油含量低。纤维素酶提高出酒率 的原因可能有两方面: 一是原料中部分纤维素分解成葡萄 糖供酵母使用; 另外, 由于纤维素酶对植物细胞壁的分解, 有利于淀粉的释放和被利用。将纤维素酶应用于啤酒工业 的麦芽生产中可增加麦粒溶解性, 加快发芽, 减少糖化液 中单一葡萄糖含量, 改进过滤性能, 有利于酒精蒸馏。用 纤维素酶预处理啤酒糟, 可提高啤酒糟蛋白酶解率10%以上; 纤维素酶在清香型优质白酒中的应用, 出酒率可提高13%, 而且不影响酒的感官品质; 在日本清酒生产中, 浸米时加 入0.02%～0.1%的纤维素酶浸泡17h,米的溶解性好, 糖化发 酵顺利, 酒渣少, 出酒率高。
纤维素酶的最适ph-概述说明以及解释
纤维素酶的最适ph-概述说明以及解释1.引言1.1 概述纤维素酶是一类重要的酶，在许多生物体的生理过程中扮演着关键的角色。
这些酶能够催化纤维素降解的反应，将纤维素分解为可被利用的简单糖分子。
由于纤维素是植物细胞壁的主要组成部分，它们的降解在许多领域都具有巨大的潜力和应用前景，如生物质能源转化、生物质废物处理和生物医药等。
因此，研究纤维素酶的特性与最适条件对于提高降解效率和开发新型应用具有重要意义。
本文将着重探讨纤维素酶的最适pH，即最适反应酸碱环境。
pH是指溶液酸碱性的指标，反映了氢离子的浓度。
纤维素酶的最适pH是指酶在具有最高催化活性的酸碱条件。
了解纤维素酶最适pH的特点和调控因素，可以为纤维素酶的生产、应用和工程改造提供重要的理论指导和科学依据。
在接下来的章节中，我们将介绍纤维素酶的定义和作用，深入了解纤维素酶的工作机制以及纤维素酶最适pH的研究进展。
随后，我们将讨论纤维素酶最适pH的重要性、影响因素以及应用前景。
通过对纤维素酶最适pH的研究和应用展望，我们可以更好地理解纤维素酶的功能和应用潜力，为相关领域的研究和应用提供有益的启示和指导。
文章结构部分的内容应该包括对整篇文章的组织和各个章节内容的简要介绍。
下面是对文章结构的一种可能描述：1.2 文章结构本文共分为三个主要部分：引言、正文和结论。
引言部分将提供对纤维素酶的背景和重要性的概述，以及本文撰写的目的。
正文部分将分为三个小节，分别讨论纤维素酶的定义和作用、纤维素酶的工作机制，以及本文的重点——纤维素酶的最适pH。
每个小节将深入探讨相关的研究成果、理论模型和实验数据，为读者提供详尽的了解。
结论部分将总结纤维素酶最适pH的重要性，并探讨影响纤维素酶最适pH的因素。
此外，该部分还将探讨应用纤维素酶最适pH的未来展望，以期为相关领域的研究和应用提供一些建议。
通过以上的文章结构，读者将能够清晰地了解整个文章的组织和各个章节的内容安排。
接下来的正文部分将进一步展开对纤维素酶最适pH的讨论，以满足读者对这一话题的兴趣和需求。
纤维素酶的结构与功能综述
纤维素酶的结构与功能综述纤维素酶是一类能够降解纤维素的酶，由微生物、真菌和一些动物体内产生，并广泛应用于生物质转化和生物能源生产等领域。
纤维素是植物细胞壁的主要成分之一，由纤维素链通过3-1,4-β-葡聚糖键连接而成，其高度结晶和抗酶解性质使其难以被降解。
纤维素酶通过裂解纤维素链将其转化为可利用的小分子糖类，具有重要的经济和环境意义。
纤维素酶主要包括纤维素酶和β-葡聚糖酶两类酶。
纤维素酶主要作用于纤维素链的内部连接键，将其裂解为较短的纤维素链和纤维素微颗粒，如内切酵素和聚合酶等。
β-葡聚糖酶主要作用于纤维素链的末端葡糖单元，将其裂解为终末葡糖和低聚糖，如终端酶和糖苷水解酶等。
两类酶在纤维素降解中协同作用，形成纤维素降解的完整酶系统。
纤维素酶的结构与功能密切相关。
纤维素酶具有复杂而多样的结构，通常由一个或多个结构域组成，包括纤维素结合结构域、催化结构域和辅助结构域等。
纤维素结合结构域具有特定的结构和纤维素结合能力，使酶能够与纤维素进行特异性的结合。
催化结构域则可将纤维素链裂解为较短的纤维素链。
辅助结构域可与其他酶或辅酶相互作用，增强纤维素酶的活性和稳定性。
此外，纤维素酶还可以通过基因工程技术进行改造和优化，以提高其酶活和抗抑制物能力。
纤维素酶的功能主要体现在纤维素的降解和生物能源生产中。
纤维素酶通过裂解纤维素链，将其转化为可利用的糖类供能源和化学品生产，如生物乙醇、生物丁醇和生物丙酮等。
纤维素酶广泛应用于生物质转化、生物酿造、纸浆生产和饲料添加等领域，可提高资源利用效率和环境可持续性。
此外，纤维素酶还具有重要的应用前景，如抗抑制物能力的改进、多种纤维素酶混合体系的构建和高效纤维素酶的发现等。
综上所述，纤维素酶是一类重要的酶，具有复杂而多样的结构和功能。
纤维素酶通过裂解纤维素链，将其转化为可利用的糖类供能源和化学品生产，具有重要的经济和环境意义。
纤维素酶的结构与功能研究为其改造和优化提供了理论和实践基础，具有重要的应用前景。
纤维素酶
纤维素酶班级：10生工一班学号：20100801132 姓名：张羽一．纤维素酶的简介：hengno-CA型系列中性纤维素酶(粉剂)纤维素酶（英文：cellulase）是酶的一种，在分解纤维素时起生物催化作用。
是可以将纤维素分解成多糖或单糖的蛋白质或RNA。
由多种水解酶组成的一个复杂酶系，自然界中很多真菌都能分泌纤维素酶。
习惯上，将纤维素酶分成三类：C1酶、Cx酶和β葡糖苷酶。
C1酶是对纤维素最初起作用的酶，破坏纤维素链的结晶结构。
Cx酶是作用于经C1酶活化的纤维素、分解β-1，4-糖苷键的纤维素酶。
β葡糖苷酶可以将纤维二糖、纤维三糖及其他低分子纤维糊精分解为葡萄糖。
纤维素酶种类繁多，来源很广。
不同来源的纤维素酶其结构和功能相差很大。
由于真菌纤维素酶产量高、活性大，故在畜牧业和饲料工业中应用的纤维素酶主要是真菌纤维素酶。
二．所用微生物菌种：木霉。
木霉属于半知菌门，丝孢目，木霉属，常见的木霉有绿色木霉、康宁木霉等。
木霉菌落开始时为白色，致密，圆形，向四周扩展，后从菌落中央产生绿色孢子，中央变成绿色。
菌落周围有白色菌丝的生长带。
最后整个菌落全部变成绿色。
绿色木霉菌丝白色，纤细，宽度为1.5～2.4微米。
产生分生孢子。
分生孢子梗垂直对称分歧，分生孢子单生或簇生，圆形，绿色。
绿色木霉菌落外观深绿或蓝绿色；康氏木霉菌落外观浅绿、黄绿或绿色。
木霉具有较强分解纤维素能力，绿色木霉通常能够产生高度活性的纤维素酶，对纤维素的分解能力很强。
在木质素、纤维素丰富的基质上生长快，传播蔓延迅速。
棉籽壳。
木屑、段木都是其良好的营养物。
培养基配方（保藏、活化、种子扩大、发酵生产）纤维素酶菌种易退化，退化后其产酶力明显降低，其原因可能有三个方面：①经诱变筛选的菌种发生回复突变。
②自然负突变。
③菌种长时间低温斜面保藏，会在分生孢子上长出次生菌丝，而次生菌丝所形成的分生孢子生命力弱，这可能是菌种退化的主要原因。
为了避免纤维素酶菌种退化，可采用砂土管保藏菌种。
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绿色木霉生长在膨化纤维素平板上形成产酶透明圈
纤维素酶酶活表示方法
1、滤纸酶活（FPA，FPase）
以滤纸为酶反应底物，该酶活反映综合酶活力，更主要 反映外切酶活
2、羧甲基纤维素钠酶（CMCase)
以CMC为酶反应底物，主要测定内切酶活性
3、 Avicelase 酶活
以微晶纤维素Avicel为酶反应底物，主要测定外切酶活 性
• 张苓花等采用康氏木霉W-925经过硫酸二乙酯和紫外线复 合诱变，筛选得到产酶活性高的菌种Wu-932 ，该菌种CMC 糖化力达到2975 u/g，滤纸糖酶活性为531U/g，比出发菌 W-925分别提高了100%和81%。
• 化工部饲料添加剂技术服务中心采用里氏木霉A3进行紫外 线和亚硝基胍复合诱变后，将处理过的孢子接种于纤维双 层平板上，30℃培养5-8天，15℃放置7-10天，挑选透明 圈直径和菌落直径比较大的单菌落进行三角瓶固态发酵再 筛选，得到了产纤维素酶活力很高的里氏木霉91-3菌株。
β-葡萄糖苷酶（也称纤维二糖水解酶）
（2）以PNPG（对-硝基苯-β-D-葡糖苷）为底物测定 • 取适当稀释的酶液0.1ml于10ml试管中，放入50℃
水浴中预热2-3min，加入0.9 ml 0.1%PNPG溶液 （用pH4.8 0.1M Hac-NaAc缓冲液配制），立即计 时，50℃反应30min后，加入1ml 2%Na2CO3溶液终 止反应，摇匀后，用721分光光度计测定对-硝基苯 在410nm波长下的吸光度。以去离子水代替酶液， 同上操作，为参比（OD=0）
纤维素酶基因工程菌构建
• 20世纪80年代以后一直至今，以纤维素酶过 量生产为主要目的，构建高产纤维素酶基因工 程菌的研究十分活跃。
• 目前里氏木霉(T reesei)纤维素酶中的 • 内切酶：EGI、EGIII和EGV基因 • 外切酶：CBH I , CBH II， • β-葡萄糖苷酶：βGI，βGII • 等纤维素酶中各组分蛋白分子量，氨基酸残基
产纤维素酶的主要微生物
纤维素酶的来源非常广泛，昆虫、软体 动物、原生动物、细菌、放线菌和真菌等都能产 生纤维素酶。其中微生物主要的有： 霉菌类：
康氏木霉(Trichoderma koningii) 绿色木霉（ Trichoderma viride) 里氏木霉（ Trichoderma reesei ） 腐殖菌（Humicola insolens） 黑曲霉(Aspergillus niger) 斜卧青霉(Penicillium decumbens)、 解纤维顶孢霉(Acremonium cellulolyticus)等。
• （以Avicel为酶反应底物，主要测定外切酶活性）
• Avicel为微晶纤维素，由于Avicel本身有少量还原 糖干扰测定，所以需用去离子水洗涤Avicel 2-3次， 去除还原糖，洗涤烘干后的Avicel作为酶活测定的 底物。
• 称取50mg Avicel，放入20毫升试管底部，加入2ml pH4.8 0.1M Hac-NaAc 缓冲液，放入50℃水浴中预 热2-3min，加入适当稀释酶液0.5ml，立即计时， 50℃振荡反应1h，加入3ml DNS溶液终止反应，沸 水浴煮5min，冷却至室温后，加入10ml去离子水， 摇匀后，4000-5000rpm离心5min,上清夜用721分光 光度计于535nm波长下，测定吸光度。以去离子水 代替酶液，同上操作，为参比（OD=0）。
纤维素酶高产菌株
70-80年代国外主要采用诱变育种方法获得筛 选高产菌，包括随机诱变和有目标诱变，其主要 策略是： 1、解除分解代谢阻遏，解除葡萄糖、甘油等易分解 代谢碳源对产酶阻遏，或筛选2-deoxyglucose抗 性。 2、提高酶的胞外分泌性，如筛选对细胞壁合成抑制 作用的化学物质抗性菌株 3、筛选β -葡萄糖苷酶高产菌株，设计βglucosidase作用的有色底物，获得解除分解代谢 阻遏高产突变株。
代表性菌株高产菌株
国外代表性菌株有 Trichoderma reesei QM9414, Rut C-30, MCG-77, MCG-80, CL-287, 41G
KDR-11,KDG-12,KDD-10等。
国内菌种诱变选育情况
• 王家林等对康氏木霉NT-15进行紫外线、电 磁波辐射、线性加速器，亚硝基胍等物理、 化学的诱变方法，获得了高产菌株NT15-H, 固体培养滤纸活力为3670u/g, Cx酶活力 1800U/g，此菌种在工厂化生产中性能稳定。
组成，基因长度与序列均已被调查清楚。
纤维素酶基因工程菌构建策略
• 由于纤维素酶是一个多酶体系，要得到一个有实 际应用价值的纤维素酶，大多采用产纤维素酶菌 种Trichoderma reesei为外源基因的表达宿主，采 用基因工程手段改造里氏木霉，提高产酶活力。
果汁加工、功能性成分提取
中草药成分提取
纤维素酶水洗牛仔裤
秸秆酒精流程
影响纤维乙醇产业化的主要因素
（1）木质纤维素预处理技术有待进一步优化和提高。由于天然 纤维素原料的结构复杂的特性，使得其纤维素、半纤维素和 木质素三者不能有效分离；另外伴随产生一些中间副产物， 实验表明，这些物质抑制酵母的生长和代谢，最终影响乙醇 产率。
维素链开裂，长链分子的末端部分游离，从而使 纤维素链易于水化。内切酶Cx酶随机水解非结 晶纤维素、可溶性纤维素衍生物和纤维寡糖、纤 维糊精， β-葡萄糖苷酶将纤维二糖和纤维三糖水 解成葡萄糖。
纺织
棉布后整理、生物抛光
饲料工业
饲料酶、秸秆青贮
酒
啤 酒
应用
精 发
工 业
酵
玉米酒精
食品及
红薯酒精
发酵工业
秸秆酒精
羧甲基纤维素钠酶活（CMCase）的测 定
（以CMC为酶反应底物，主要测定内切酶活性）
• 取适当稀释的酶液0.5ml于20ml试管中，放入 50℃水浴中预热2-3，加入2 ml 1%CMC溶液（用 pH4.8 0.1M Hac-NaAc缓冲液配制），立即计时， 50℃反应30min后，加入3ml DNS溶液终止反应， 沸水浴煮5min，冷却至室温后，加入10ml去离子 水，摇匀后，用721分光光度计于535nm波长下， 测定吸光度。以去离子水代替酶液，同上操作， 为参比（OD=0）
酸性纤维素酶是一种具有3—10个或更多个组分构成的多 组分酶。依其作用可分为: β-1，4-内切葡聚糖酶（Endo-β-Glucanase ，简称 EG,Cx）,主要作用于无定形纤维素,水解产生纤维糊精,纤 维寡糖. β-1,4-外切葡聚糖（纤维二糖水解）酶（Cellobiohydrolase， CBH,C1 ）,主要作用于结晶纤维素,产生纤维二糖. β-葡萄糖苷酶（β-Glucosidase，βG）,水解纤维二糖为葡 萄糖。
• 中科院微生物研究所董志扬等用康宁木霉通过γ射 线照射和亚硝基胍交替处理，诱变出一株纤维素 酶高产菌株T801，其产酶能力提高1.77倍。
• 青岛海洋大学管斌等对里氏木霉进行低剂量、反 复多次紫外线、亚硝基胍复合诱变处理方法，用 “以2-脱氧葡萄糖作为降解产物阻遏物”高效筛 选方法，选育得到一株抗分解代谢阻遏的突变株， 纤维素酶活力提高三倍。
植物纤 维素的高聚 合度、毛细 管结构、本 质素和半纤
维素所形成 的保护层及 其超分子结
构中具有高 结晶度 (crystallin ity index) 的结晶区存
纤维素的显微结构
纤维素酶 组成成份及其特征
纤维素酶是生物炼制中的一种重要关键酶。
是水解纤维素β-1，4-葡萄糖苷键，使纤维素变成纤维二糖 和葡萄糖的一组酶的总称，它不是单一酶，而是起协同作 用的多组分酶系。
纤维素的利用前景诱人，但难度不小。
地球每年陆生植物可产纤维素约5×1011吨 (5000
亿吨), 我国每年秸秆6-7亿吨
合成速率相当于全人类每人每天70千克 是地球上最丰富的再生资源,约占地球生物总量的 60% 。 80％纤维素未被开发利用
纤维素生物质
纤维素分子 是由许多吡喃型 D-葡萄糖残基通 过β-1,4-糖苷键 连接起来的线形 高分子聚合物， 分子量约 600000——15000 00，聚合度从几 百至1500左右。 其链呈带状，链 内与链间都有氢 键。其中，链内 氢键通过葡萄糖 上6位的OH和相邻
4、β-葡萄糖苷酶
以水扬素为底物测定；以PNPG（对-硝基苯-β-D-葡糖 苷）为底物测定。
纤维素被纤维素酶水解所产生的还原糖一般用DNS试剂 检测。
纤维素酶活力的定义
• 在pH4.8，50℃ 条件下测来自,酶活单位定义 为水解底物每分钟产生1μmol葡萄糖（或产 物）为1个活力单位。
Avicelase 酶活的测定
天然纤维素酶解过程可分三个阶段：
首先是纤维素对纤维素酶的可及性 其次是纤维素酶的被吸附与扩散过程 最后是由EG、CBH和βG自组织复合 体协同作用降解纤维素的结晶区，同时 由EG、CBH和βG随机作用纤维素的无 定形区。
结晶纤维素 葡萄糖
C1 无定形
纤维素 Cx
βG
纤维
二糖
外切酶C1酶作用于不溶性的固体表面,疏松纤维 素结晶结构并起水化作用，使形成结晶结构的纤
纤维素刚果红培养基法： 纤维素能同刚果红染料形成红色，而纤维素酶的 水解产物纤维糊精、纤维二糖和葡萄糖不能同刚 果红染料形成红色沉淀，为浅黄色，所以在纤维 素刚果红培养基上，凡能形成浅黄色水解圈的菌 落即是能产纤维素酶的菌株，还可以根据水解圈 的大小（产酶能力强水解圈大），估计菌株产酶 的情况，筛选高产菌株。
β-葡萄糖苷酶（也称纤维二糖水解酶）
（1）以水扬素为底物测定
取适当稀释的酶液0.5ml于20ml试管中，放 入50℃水浴中预热2-3min，加入2 ml 1% 水杨素溶液（用pH4.8 0.1M Hac-NaAc缓 冲液配制），立即计时，50℃反应30min 后，加入3ml DNS溶液终止反应，沸水浴 煮5min，冷却至室温后，加入10ml去离子 水，摇匀后，用721分光光度计于535nm波 长下，测定吸光度。以去离子水代替酶液， 同上操作，为参比（OD=0）