生物竞赛-生物化学-44重组DNA技术-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》共62页文档
生物竞赛讲义-生物化学-20生物氧化-《生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)》
生物竞赛-生物化学原理（第二版）（代
生物竞赛-生物化学原理（第二版）（代谢生物化学）-南京大学杨荣武
电子传递体在呼吸链中的位置与其E0'之间的关系
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几种呼吸链抑制剂的作用位点
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呼吸链的组分
NAD+及与NAD+偶联的脱氢酶：NAD+是一种流 动的电子传递体。 黄素及与黄素偶联的脱氢酶 辅酶Q：属于一种流动的电子传递体。 铁硫蛋白 细胞色素：细胞色素c是一种流动的电子传递体 氧气
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复合体 IV 即细胞色素c氧化酶
有4个氧还中心 主要成分为细胞色素a和a3 电子来自还原性的细胞色素c，电子的最终 受体为氧气 一对电子可产生2个质子梯度
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电子在复合体IV上的传递
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氧化磷酸化的偶联机制
˟ ˟ √ 化学偶联假说 构象偶联假说 化学渗透学说：该学说由Peter Mitchell于1961年 提出，其核心内容是电子在沿着呼吸链向下游传 递的时候，释放的自由能转化为跨线粒体内膜 （或跨细菌质膜）的质子梯度，质子梯度中蕴藏 的电化学势能直接用来驱动ATP的合成。驱动 ATP合成的质子梯度通常被称为质子驱动力 （pmf），它由化学势能（质子的浓度差）和电 势能（内负外正）两部分组成。
(杨荣武)生物竞赛讲义-生物化学-30胆固醇代谢-《生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)》(33P
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胆固醇合成的四个阶段反应
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HMG-CoA 还原酶
内质网膜整合蛋白 催化的是不可逆反应 胆固醇合成的限速酶
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主要 成分
主要载 脂蛋白
主要功能
脂肪
脂肪
脂肪， 胆固醇
A,B-48, CI,II,III, E
B-100, C-I,II,III, E
B-100, E
运输食物中的脂肪 和胆固醇 运输内源的脂肪
一部分被肝吸收， 一部分转变为LDL
胆固醇 B-100
蛋白质 A, CI,II,III, D, E
将胆固醇转运到外 周组织
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胆固醇合成的第二个阶段的反应
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第三阶段：6个异戊二烯单位→鲨烯
此阶段主要包括三步反应，首先在二甲烯丙基 转移酶的催化下，一个二甲烯丙基与一个异戊 二烯焦磷酸头尾缩合成牻牛儿焦磷酸；随后在 牻牛儿转移酶催化下，牻牛儿焦磷酸与另一个 异戊二烯焦磷酸头尾缩合成法尼焦磷酸；最后， 在法尼转移酶或鲨烯合酶催化下，两个法尼焦 磷酸头头缩合并被NADPH还原为含有30个碳 的碳氢化合物——鲨烯。
的激活剂 参与胆固醇的逆向运输 （好胆固醇） 通过受体介导的内吞被肝细胞吸收
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胆固醇代谢的调节
胆固醇合成的限速酶是HMG-CoA还原酶 调节的方式包括
生物竞赛参考书目
生物竞赛参考书目第一篇：生物竞赛参考书目大学教材类：普通生物学：普通生物学：普通生物学有很多种版本，但是一般推荐陈阅增版的，对整个生物学有着提纲挈领的作用，能够形成一个总体印象，内容也不难理解，可以作为初学的入门教材，也可后期作为复习的线索使用。
植物学：1.植物学（上册）：植物学教材中的经典之作，上册对植物形态解剖有着较完整而深入的叙述，而且书中几乎处处可以作为考点，为必读之作。
2.植物学（下册）：对植物各个们的分类有着系统的阐述，几乎是一章对应一个门，每一章前面都对这个门的特征等有着充分的讲解，后面讲代表植物等，被子植物门之前的内容都比较简练，但是被子植物门的分类太过于丰富，建议重点掌握要求的分科。
3.植物学（彩图版马伟梁著）：可以算是植物学上下册的合集，彩图不容易让人产生厌倦之情，尤其是分类部分选的科不如下册那么冗杂，而且配有插图，宜用来学习分类。
4.植物学（周云龙著）：整体写的比较简洁明了，也是形态解剖和分类兼而有之，分类部分有一些表格非常实用，而且语言简洁，适宜初学和最后复习使用。
植物生理学：植物生理学（潘瑞炽著）：植物生理学的最经典教材，对植物生理学各方面的内容阐述清晰，每一个要点都有必要好好掌握。
动物学：1．普通动物学（3版）：动物学中的首选学习用书，第3版较之第4版可能更能对应于现有的题目，每个门的形态解剖和分类都有必要好好掌握，可适当弱化一下过于小的门类，如腕足动物门等。
2．普通动物学（4版）：印刷更加细致，排版也更美观，提出了一些新的观点，可能就某些问题的阐述与第3版有少许冲突，建议两本书可一本用来学习，一本用来复习。
3．无脊椎动物学：对无脊椎动物有着于普通动物学更加详尽的叙述，同时也有些许观点于普通动物学有分歧，可以作为无脊椎部分的补充阅读。
4．脊椎动物比较解剖学：相对于普通动物学，比较解剖的观点更有利于记忆，考题也多涉及这方面的内容，为必读书籍。
动物生理学：1.人体及动物生理学：无论是第二版还是第三版都有其可读之处，生理学的经典教材。
生物竞赛-生物化学-43真核生物的基因表达调控-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
DNA甲基化与印记
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
多个启动子的选择性使用
某些真核生物的基因不止一个启动子，例如，抗肌营
养不良蛋白有8个启动子，通过使用不同的启动子可转 录出不同长度的mRNA，它们经过翻译可产生不同性 质或功能的蛋白质产物。 人谷胱甘肽还原酶的基因具有两个启动子，这两个启 动子分别指导定位于细胞质和线粒体的谷胱甘肽还原 酶的合成。指导线粒体谷胱甘肽还原酶的启动子在指 导细胞质谷胱甘肽还原酶启动子的上游。显然，上游 启动子转录出来的mRNA要比下游启动子转录出来的 mRNA要长。分析它们的核苷酸序列以后发现，长 mRNA的起始密码子位置前移，因而会多翻译一段指 导进入线粒体的信号肽序列。
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
DNA重排
B淋巴细胞在成熟过程Ig基因经历的重排 锥体虫主要的表面抗原基因发生的重排 酿酒酵母在交配类型转换过程中发生的基因 重排
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抗体基因多样性产生的分子机制
1. 2.
3. 4. 5.
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在染色质水平上的基因调控
组蛋白的共价修饰； 染色质重塑因子对染色质的作用； 组蛋白变体取代标准组蛋白。
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组蛋白不同化学修饰对基因表达的影响以及其他功能
修饰形式
乙酰化 单甲基化
修饰位点
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生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
(杨荣武)生物竞赛讲义-生物化学-24磷酸戊糖途径-《生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)》(23
生物竞赛-生物化学原理（第二版）（代谢生物化学）-南京大学杨荣武
葡萄糖在胞内分解的两条途径
生物竞赛-生物化学原理（第二版）（代谢生物化学）-南京大学杨荣武
氧化相
反应1：不可逆反应——受到调控（受到 NADPH抑制），由6-磷酸葡糖脱氢酶催化
反应2：葡糖酸内酯的水解，由葡糖酸内酯酶催 化。没有酶催化，也能发生
糖途径可以四种不同的模式存在：快速分裂的细胞需 要更多的核糖-5-磷酸以第一种模式存在，需要等量的 核糖-5-磷酸和NADPH的细胞以第二种模式存在，需要 更多的NADPH以进行生物合成的细胞以第三种模式存 在，只需要NADPH和ATP而不需要核糖-5-磷酸的细胞 以第四种模式存在； 调节机制相对简单
范 了 教 师 的 行为。 2.加 强 纪 律 教 育。 通过《 党章》 及党的 规章制 度的学 习,学校 规章制 度的制 定,加强 对 党 员 干 部 政治纪 律,组织 纪律的 教育与 规范,增 强了全 体教职 员工的纪律意识。以
教 育 部 、 教 育厅、 教育局 的各项 规定为 依据,规 范
杨荣武 生物化 学原理 第二版
磷酸戊糖途径的调节
6-磷酸葡糖脱氢酶是磷酸戊糖途径的酶， NADPH既是它的产物，又是它的强竞争 性抑制剂，因此，磷酸戊糖途径完全受 NADPH/NADP＋的相对比例控制，如果细 胞内的NADPH浓度高，磷酸戊糖途径就 会受到抑制，反之则被激活。
生物竞赛-生物化学原理（第二版）（代谢生物化学）-南京大学杨荣武
2018年 中 学 工 作 总 结报告 (2)学工 作总结 学 2018年 度 工 作 总 结
XX年 实 验 三 依 据 (筑 教 党 【XX】 10号 )和 【 筑 教发XX】 5号 文 件 精 神,深入 贯彻党 的 十 八 届 三 全会精 神,以党 的群众 路线教 育实践 活动为 主线,全 面落实 xx市教育发展 大 会 和 教 育 改革和 发展规 划纲要 确定的 目标任 务,深化 综合改 革,深入实施素质教育 ,推 进 课 堂 模 式和人 才培养 模式改 革,提升 知识创 新和知 识服务 能力,促 进学 校协调
杨荣武生物化学原理
杨荣武生物化学原理
杨荣武生物化学原理是一部由杨荣武教授从事生物化学研究多年，综合了生物学、物理化学和生物物理学等诸多学科知识而编写的综合性专著。
该书以生物化学为研究对象，系统而全面地阐述了生物化学的领域知识，讨论了各种分子的构成、特性及所引起的生物学效应及其机理，揭示了现代生物化学研究的最新进展。
杨荣武生物化学原理综合性强，内容丰富，可以帮助学习者掌握关于生物化学各种分子的基本概念、基础知识，以及生物化学实验技术。
书中深入浅出地介绍了细胞生物学、分子生物学、蛋白质化学、糖代谢及其调控、代谢调控、脂质及脂质代谢、细胞内盐基平衡、激素代谢及调控、酶学及调控、羧基化学及酸碱平衡等，并给出了生物技术方面的详细讨论及实验技术，为学习者深入地了解生物化学提供了参考。
杨荣武生物化学原理全面、系统地介绍了生物化学相关领域的知识，除了知识类细节介绍外，书中还收集了大量实例，使学习者能够更加直观的理解、掌握和熟练运用生物化学知识。
同时，书中还通过详细的实验示例，介绍了生物化学实验技术，为学习者提供了实践性的指导。
总的来说，杨荣武生物化学原理是一部系统而全面的生物化学专著，有助于大学生和从事生物化学研究的相关专业人士深入理解、掌握和熟练运用生物化学知识，可以说是学习生物化学知识不可缺少的参考书。
生物竞赛-生物化学-44重组DNA技术-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
将重组DNA引入到宿主细胞的途径
1. 转化 2. 转染 3. 电穿孔 4. 脂质体介导 5. 弹道基因转移
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
重组体的选择和筛选
直接筛选
① ② ③ ④ ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ 根据抗生素敏感性和抗性变化进行筛选 根据营养需要进行筛选 根据噬菌斑类型进行筛选 蓝白斑选择 核酸杂交法 PCR法 免疫化学 受体/配体的结合性质 Southwestern/Northwestern DNA限制性内切酶图谱分析 DNA序列分析
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
重组DNA技术的基本步骤
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
基因克隆的载体
载体的作用是容纳被克隆的目标基因，以便将它们 带入到特定的宿主细胞中进行扩增或表达。 一种理想的载体至少包括：
① 大多数载体含有原核细胞DNA复制起始区，以便于在原核 系统中的扩增； ② 某些载体还含有真核细胞DNA复制起始区，以方便在真核 细胞内的自主复制； ③ 含有集中了多种常用的限制性内切酶切点的多克隆位点记，有利于克隆的筛 选和鉴别； ⑤ 某些载体含有可诱导的或组织特异性的启动子或增强子序 列，有利于控制被插入的基因在转染细胞或转基因动物内 的表达； ⑥ 现代的载体一般含有多功能的结构元件，同时兼顾到克隆、 DNA测序、体外突变、转录和自主复制。
生物竞赛—生物化学原理（分子生物学）—南京大学杨荣武
克隆基因在宿主细胞中的表达
要使克隆基因在宿主细胞中表达，首先需要将目的基
因亚克隆到带有基因表达所必需的各种元件的载体之 中，这些载体通称为表达载体。目的基因可以放在不 同的宿主细胞中表达。针对不同的表达系统，需要构 建不同的表达载体。 表达载体可分为融合载体和非融合载体两类，前者在 插入位点上“预装”了另外一个蛋白质或多肽的基因， 因此，插入的外源基因将会与它发生融合，表达出来 的是一种融合蛋白。使用融合载体的主要好处是方便 了目的蛋白的纯化。 理想的表达系统应该满足以下条件：（1）表达载体具 有合适的MCS，以便使外源基因能够插入到正确的表 达位置，或者至少是含有3个以上阅读框架的系列； （2）能够形成正确的翻译后修饰和三维结构，以形成 有活性的或有功能的分子；（3）为可诱导的表达系统， 允许细胞生长和诱导表达，防止毒性蛋白质的积累； （4）易于分离和纯化；（5）最好能分泌到胞外。
生物化学原理教学(杨荣武)生化-期末复习
考试题型：一、填空；二、是非题；三、选择题；四、名词解释；五、问答题每章简要：一、生物氧化基本概念，与非生物氧化比较呼吸链；概念、组成、类型、传递顺序、抑制剂。
氧化磷酸化; 概念、机制、解偶联剂二、代谢总论基本概念; 代谢、代谢途径、代谢物,分解代谢、合成代谢、代谢组、代谢组学三、糖酵解糖的消化; 淀粉的酶水解糖酵解全部反应、三步限速步骤、特异性抑制剂、两步底物磷酸化反应。
能量产生、生理意义、丙酮酸去向。
四、TCA 循环乙酰CoA 的形成, TCA 循环化学途径、能量产生，功能和调节。
乙醛酸循环五、磷酸戊糖途径发生部位、氧化相反应、功能六、糖异生概念、发生部位、与糖酵解比较、底物、几步重要反应、生理意义七、光合作用概念，总反应式光反应；两大光系统的组成（中心色素，电子受体与供体，功能），光合磷酸化以及与氧化磷酸化的比较。
暗反应；光反应与暗反应的比较, C3 途径重要的反应, 酶和中间物八、糖原代谢糖原降解；相关酶；糖原磷酸化酶………糖原合成；相关酶，糖原合成酶,UDP-Glc, 需要引物, 糖原素……调节九、脂肪酸代谢脂肪酸的分解代谢；β-氧化, α-氧化，ω-氧化酮体脂肪酸的合成代谢十、胆固醇代谢胆固醇合成；前体、部位、重要的中间物、HMG-CoA 还原酶运输; 血浆脂蛋白、LDL 、HDL十一、磷脂和糖脂代谢甘油磷脂的酶水解十二、蛋白质降解及氨基酸代谢胞内蛋白质的降解；依赖于ATP 的降解途径氨基酸的分解代谢；氨基的去除，铵离子的命运，尿素循环生物固氮十三、核苷酸代谢核苷酸的合成；嘌呤核苷酸、嘧啶核苷酸的合成，从头合成和补救途径。
脱氧核苷酸的合成调节核苷酸的分解；嘌呤和嘧啶的分解主要相关疾病第一章：生物氧化一、概念1、生物氧化：糖类、脂肪、蛋白质等有机物质在细胞中进行氧化分解生成CO2和H2O 并释放出能量的过程称为生物氧化。
其实质是需氧细胞在呼吸代谢过程中所进行的一系列氧化还原反应过程。
2、呼吸链：由一系列传递体构成的链状复合体称为电子传递体系（ETS），因为其功能和呼吸作用直接相关，亦称为呼吸链。