Puromycin aminonucleoside_抗生素嘌呤霉素的氨基核苷部分_58-60-6_Apexbio
嘌呤霉素说明书
说明：蛋白质合成抑制剂。
抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。
嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。
某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。
作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。
嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶（PAC），赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。
这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。
在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。
使用方法1.建议使用浓度哺乳动物细胞：1-10μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定；大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。
注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。
2.溶解方法用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50mg/ml的母液，经0.22μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存；也可溶于甲醇，配制成10mg/ml的储存液。
3.嘌呤霉素杀灭曲线的确定（以shRNA转染或者慢病毒转导为例）嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。
为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。
建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线（kill curve）。
嘌呤霉素氨基核苷肾病肾脏中RANK-RANKL的表达
嘌呤霉素氨基核苷肾病肾脏中RANK-RANKL的表达冯仲林;章斌;王文健;刘艳辉;梅平;徐丽霞;马建超;夏运风;刘双信;史伟;肖厚勤;梁馨苓;刘晓颖;叶智明;王素霞;梁永正【摘要】Objective To investigate RANK-RANKL expression in the kidneys of a rat model of puromycin aminonucleoside nephropathy (PAN). Methods Thirty-six SD rats were randomly divided into PAN model group and normal control group. PAN was induced by a single intravenous injection of 100 mg/kg puromycin aminonucleoside. Serum creatinine and 24-hour urinary protein were measured on days 3, 7, and 14 after the injection, and renal pathologies were assessed with optical and immune transmission electron microscopy. The expression of RANK and RANKL in the kidneys was examined using reverse transcription-ploymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting. Results The PAN model rats showed massive proteinuria and elevated serum creatinine on day 3, which peaked on day 7. RANK-RANKL protein and mRNA expressions in PAN model group was higher than those in the control group. In the PAN rats, RANK was expressed mainly on the top cell membrane and in the cytoplasm of renal podocytes with a significantly increased expression level compared with that in the control group. Conclusion The PAN rat model shows aberrant RANK and RANKL expressions in the podocytes, indicating their contribution to podocyte injury in PAN.%目的：探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病（PAN）大鼠动物模型肾脏中的表达。
嘌呤霉素溶液(Puromycin,1mgml)
北京雷根生物技术有限公司
嘌呤霉素溶液(Puromycin,1mg/ml)
简介：
嘌呤霉素(Puromycin，PM )是一种蛋白质合成抑制剂，它具有与tRNA 分子末端类似的结构，能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA 同核糖体的A 位点结合，并掺入到生长的肽链中。
虽然嘌呤霉素能够同A 位点结合，但是不能参与随后的任何反应，因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
嘌呤霉素分子量为544.43，CAS 号为53-79-2。
Leagene Puromycin solution 经过滤除菌，可用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。
2、Puromycin solution(1mg/ml)其摩尔数为1.84mmol/L，而Puromycin 工作浓度一般为10～100μmol/L。
3、以工作浓度为100μmol/L 为例，即1mg/ml 稀释18.4倍，即每10ml 培养基中加入Puromycin solution(1mg/ml)544μl。
注意事项：
1、注意无菌操作，避免污染。
2、避免反复冻融，以免失效。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：编号
名称CA0069Storage
Puromycin solution(1mg/ml)
1ml -20℃避光使用说明书1份编号
名称CA0075
青霉素-链霉素混合溶液(100×双抗)TE0002碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP 微板法)。
嘌呤霉素说明书
精选文档说明：蛋白质合成抑制剂。
抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。
嘌呤霉素( Puromycin )是由白黑链霉菌( Streptomyces alboniger )发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。
某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。
作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3'末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。
嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger 内发现的pac 基因编码嘌呤霉素N- 乙酰转移酶(PAC，赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。
这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac 基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac 基因。
在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac 基因质粒的大肠杆菌菌株。
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。
使用方法1.建议使用浓度哺乳动物细胞：1-10卩g/mL最佳浓度需要杀灭曲线来确定；大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125卩g/mL。
注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。
2.溶解方法用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 叩滤膜过滤除菌后分装于-20C冻存；也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的储存液。
3.嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。
为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。
慢性肾炎实验动物模型研究进展
慢性肾炎实验动物模型研究进展尼日特;杨巧芳【摘要】慢性肾小球肾炎是临床常见的难治性多发性疾病,是导致慢性肾衰竭的重要原因之一,几种常见的慢性肾炎也随着相关研究的深入总结形成了相应的实验用动物模型:微小病变型肾小球肾炎(MCD)和局灶节段性肾小球硬化(FSGS)常用阿霉素肾炎模型和嘌呤霉素氨基核苷肾炎模型;系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)常选用BSA肾炎模型和Thy-1抗血清肾炎模型;膜性肾病(MN)常用Heymann肾炎模型和C-BSA肾病模型等.根据实验需要造模动物常选用家兔、大鼠、小鼠等.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2014(043)001【总页数】4页(P145-148)【关键词】慢性肾炎;动物模型;综述【作者】尼日特;杨巧芳【作者单位】010050 呼和浩特,内蒙古医科大学;010050 呼和浩特,内蒙古医科大学【正文语种】中文【中图分类】R692慢性肾炎 (chronic nephritic)是指以蛋白尿、血尿、水肿等为基本临床表现，可有不同程度的肾功能减退，起病方式各有不同，病情迁延，病变缓慢进展，最终将发展为慢性肾衰竭的一组肾小球疾病。
常见的慢性肾小球肾炎可分为微小病变性肾病、局灶节段性肾小球硬化、膜性肾病、系膜增生性肾病等。
本病病因和发病机制复杂，经过近百年的发展，随着人们对本病的研究的不断深入，学者们更多地认识到机体免疫系统在本病发病过程中的重要作用，研究发现免疫复合物(IC)在肾小球中沉积是肾小球肾炎致病的重要环节，肾小球基膜原位的免疫复合物形成，导致肾小球病变，导致肾病综合征。
围绕对肾小球疾病的不断的研究发现，发展产生了不同的动物实验模型，本文旨在围绕慢性肾炎实验研究中几种常用的动物模型近年来的实验发展进行综述。
一、常见的慢性肾炎及其实验模型1．微小病变型肾炎和局灶性节段性肾小球硬化:微小病变性肾病(minimal change disease，MCD)为常见的肾小球疾病。
puromycin作用原理
puromycin作用原理Puromycin is an antibiotic that has been widely used in molecular biology and biochemistry research. It exerts its function by inhibiting protein synthesis in both prokaryotic and eukaryotic cells.puromycin是一种广泛应用于分子生物学和生物化学研究中的抗生素，它通过抑制原核和真核细胞中的蛋白质合成来发挥作用。
The mechanism of action of puromycin involves its ability to mimic the 3' end of aminoacyl-tRNA and thus enter the A-site of the ribosome during protein synthesis. Once incorporated into the growing polypeptide chain, puromycin leads to the premature termination of translation, resulting in the release of incomplete polypeptides.Puromycin的作用机制涉及其模拟氨酰-tRNA的3'末端，并因此在蛋白质合成过程中进入核糖体的A位点。
一旦融入正在增长的多肽链中，puromycin会导致翻译的过早终止，从而释放不完整的多肽。
In addition to its role in inhibiting protein synthesis, puromycin has also been utilized as a selective agent in cell culture experiments. Due to its ability to induce cell death by inhibiting protein synthesis, puromycin is often used to select for cells that express a specific gene of interest, as only those cells that carry the resistance gene for puromycin will survive in the presence of the antibiotic.除了抑制蛋白质合成外，puromycin还被用作细胞培养实验中的一种选择性试剂。
嘌呤霉素(Puromycin)筛选稳定细胞株的步骤及方法
嘌呤霉素（Puromycin）筛选稳定细胞株的步骤及方法Puromycin 是来源于Streptomyces alboniger 的一种氨基核苷类抗生素，中文名为嘌呤霉素，常用于筛选能够表达pac 基因（puror）的细胞。
pac 基因表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase)，如果该基因表达，就会对嘌呤霉素产生抗性，这一特性目前普遍应用于筛选表达pac 基因的哺乳动物稳定细胞株。
目前，很多商业化的慢病毒载体都携带pac 基因(一般在质粒图谱上标记为puror)，可以利用嘌呤霉素的筛选，得到特定基因稳定表达的细胞株。
嘌呤霉素也可以用来筛选表达pac 基因的大肠杆菌菌株、酵母菌株等。
Puromycin 不仅能用于稳定细胞株的筛选，也用于稳定细胞株的维持。
Puromycin 的作用特点是快速作用于细胞，一般2 天内可以杀死99%的不表达pac 基因的细胞。
本产品浓度为10mg/ml，已过滤除菌，可以直接用于细胞培养。
使用说明：一、推荐工作浓度：推荐的作用于哺乳动物细胞的嘌呤霉素浓度一般为1-10μg/ml，但最佳工作浓度需要通过剂量反应曲线来确定。
二、嘌呤霉素剂量反应曲线的确定( 以shRNA ）转染或者慢病毒感染为例）：：嘌呤霉素的有效筛选浓度与细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢及细胞所处细胞周期等因素相关。
为了筛选到稳定表达的shRNA或感染病毒的细胞株，确定杀死未转染/感染细胞的最低浓度嘌呤霉素非常重要。
对于初次使用的细胞，一般需要通过实验来确定适合自身实验体系的剂量反应曲线(dose-response curve or kill curve)。
1、第一天：24 孔板中以5~8×10 4 cells/孔的密度接种细胞，接种够量的孔以便进行后续的剂量梯度实验。
细胞培养箱内培养过夜。
2、第二天：在培养过夜后的细胞中更换新鲜配制的筛选培养基，该筛选培养基为含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0、1、2.5、5、7.5、10μg/ml 等)，更换培养基后在细胞培养箱中继续培养。
氨基苷类和多粘菌素类
临床应用 1、其他抗生素治疗无效的局部绿脓杆菌感染 2、 肠道感染
不良反应 肾毒性 神经系统毒性 神经肌肉阻滞
四环素类然四环素类 四环素 土霉素婴儿湿疹金霉素 地 美环素 半人工合成四环素类 多西环素 米诺环素 美他环素
天然四环素类
抗菌谱与抗菌作用
G+菌 广谱
二、 氯霉素类抗生素
抗 菌 谱 广谱 G+ 、G-、厌氧 菌、立克次氏 伤寒杆菌 流感杆菌 副流感杆菌 作用机制 与50S亚基结合，抑制蛋白质合成
体、支原体、衣原体
氯霉素的不良反应
① 抑制骨髓造血系统
a. 可逆性血细胞减少
b. 不可逆性再生障碍性贫血
甲砜霉素(thiamphenicol)
抗菌谱和作用机制同氯霉素
氨基苷类和多粘菌素类
第一节 氨基苷类抗生素 aminoglycosides
天然氨基苷类
链霉素(streptomycin) 庆大霉素(gentamicin)
卡那霉素(kanamycin)
西索米星(sisomicin)
妥布霉素(tobramycin)
新霉素(neomycin)
小诺米星(micronomicin) 大观霉素(spectinomycin)
用于消化道（沙门氏菌引起的伤寒、副伤寒，
大肠杆菌引起的仔猪黄、白痢；鱼类肠炎等）呼 与氯霉素相比 吸系统（鸭浆膜炎等）、泌尿生殖、乳腺炎等的 交叉耐药、疗效不优、造血系统反应相同 感染。
氟甲砜霉素
是一种化学合成的氯霉素类动物专用抗生素。 其抗菌谱与甲砜霉素类似，抗菌活性优于甲砜 霉素。 本品内服和肌注均吸收良好，体内呈全身性分 布，但各组织器官药物浓度有差异。血液和肌 肉中药物浓度相近，脑中药物浓度较低。以原 型从尿中排出。细菌对氟苯尼考的耐药性产生 缓慢。 临床常用于治疗传染性胸膜肺炎、喘 气病、附红细胞体病、仔猪黄白痢等。 不引起再生障碍性贫血，但有胚胎毒性。
嘌呤霉素筛选原理
嘌呤霉素筛选原理嘌呤霉素（puromycin）是一种广泛应用于生物学实验室的抗生素，主要用于筛选高效表达外源基因的细胞。
嘌呤霉素通过其独特的机制选择性杀死转染外源基因的细胞，从而筛选出成功表达目标基因的细胞。
下面将详细介绍嘌呤霉素筛选原理。
嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素，由Streptomyces alboniger产生。
其结构与核苷酸有一定的相似性，因此可以与核酸结合。
嘌呤霉素的分子结构中包含有嘌呤环和氨基糖苷环两个部分。
嘌呤环可以与核酸中的同源嘌呤碱基形成氢键，而氨基糖苷环则可以与RNA中的A位点形成酯键。
嘌呤霉素的筛选原理主要利用了细胞中的转运机制以及它对细胞翻译的作用。
当目标基因通过适当载体引入到细胞中后，该载体通常带有一个与嘌呤霉素敏感基因连在一起的表达序列。
这个敏感基因通常是某种转录因子，其缺失将导致细胞死亡。
当细胞中成功表达目标基因时，其编码的蛋白质与嘌呤霉素的作用机制相互配合，从而导致细胞的死亡。
具体来说，目标基因的编码蛋白质与细胞内的核糖体结合时，嘌呤霉素的氨基糖苷环与目标基因的A位点形成酯键，导致核糖体解聚，细胞翻译过程终止，从而导致细胞死亡。
然而，嘌呤霉素对细菌、真核生物和原核生物都具有一定的毒性。
为了更好地筛选出真正成功表达目标基因的细胞，通常在培养基中添加一定浓度的嘌呤霉素。
这样一来，只有那些真正成功表达目标基因的细胞才能够在相对高浓度的嘌呤霉素下存活，而其他未表达目标基因的细胞则会因为对嘌呤霉素的敏感性而死亡。
通过嘌呤霉素的筛选原理，可以有效地检测和筛选出成功表达目标基因的细胞，为进一步的实验和研究提供了基础。
另外，嘌呤霉素还可以作为选择性筛选工具，用于分离和培养特定表达基因的细胞系，为生物医学研究和基因工程领域提供了有力的支持。
总结起来，嘌呤霉素筛选原理是通过其结构与核酸的结合，干扰细胞翻译过程，从而选择性杀死未成功表达目标基因的细胞。
该筛选方法提供了一种快速、简便、有效的方法，可以帮助科研人员筛选出成功表达目标基因的细胞，为生命科学研究提供了重要的手段。
Puromycin(嘌呤霉素)产品使用说明书
嘌呤霉素（Puromycin）使用说明书◼产品包装和保存条件注：a. 建议分装保存，避免反复冻融，否则活性受到影响。
b. 嘌呤霉素为了达到最理想的稳定状态和最长的保质期，最好存放于-20°C，保质期为1年。
◼产品简介嘌呤霉素（Puromycin）—pac基因筛选抗生素Puromycin是由Streptomycesalboniger（白黑链霉菌）产生的一种肽基核苷抗生素，可抑制原核细胞和真核细胞的肽基转移。
Puromycin可抑制革兰氏阳性菌和多种动物细胞和昆虫细胞的增殖，但是真菌和革兰氏阴性菌对Puromycin具有抗性，在一些特殊的情况下，Puromycin也可用于大肠杆菌。
目前，Puromycin最重要的应用是用于选择携带pac 抗性基因的转染细胞。
不同细胞对Puromycin的敏感度不同，在筛选之前，要通过预实验确定Puromycin的最佳筛选浓度，推荐用1~10 μg/mL的范围筛选合适的浓度，Puromycin最常用的工作浓度为1~3 μg/mL，Puromycin的作用时间是3-10天之间，可参考文献并进行预实验摸索。
◼产品使用使用步骤：（哺乳动物细胞筛选）►嘌呤霉素杀灭曲线的确定（目的稳定转染细胞株，仅作参考）为了筛选到稳定表达待研究目的的细胞株，确定杀死未转染细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。
所以初次做实验的客户需要建立适合自己实验体系的杀死曲线（kill curve）。
（1）24孔板内以5~8x104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。
细胞孵育过夜；（2）准备筛选培养基-含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基（如：0~15 μg/mL，至少5个梯度）；（3）细胞孵育过夜后加入筛选培养基，孵育细胞；（4）约2-3天更换新鲜的筛选培养基；（5）每日监测细胞观察存活细胞比例。
嘌呤霉素的最佳作用时间一般在1-4天之间。
（6）最小的抗生素使用浓度就是指从抗生素筛选开始1-4天内杀死所用细胞的最低筛选浓度。
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参考文献: [1] Grond J,μMuller EW,van Goor H,Weening JJ,Elema JD. Differences in puromycin aminonucleoside nephrosis in two rat strains. Kidney Int.1988 Feb;33(2):524-9. [2] Bertram JF,μMessina A,Ryan GB. In vitro effects of puromycin aminonucleoside on the ultrastructure of rat glomerular podocytes. Cell Tissue Res.1990 May;260(3):555-63.
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C12H18N6O3
3'-Amino-3'-deoxy-N6,N6-dim ethyladenosine
4-amino-2-[6-(dimethylamino)purin-9-yl]-5-(hydroxymethyl)oxolan3-ol CN(C)C1=NC=NC2=C1N=CN2C3C(C(C(O3)CO)N)O Soluble in DMSO
生物活性
靶点 :
Others
信号通路:
Others
产品描述:
IC50: N/A Puromycin aminonucleoside，3'-氨基-3'-脱氧-N6,N6-二甲基腺苷，是抗生素嘌呤霉素的氨基核 苷部分。Puromycin aminonucleoside（PAN）诱导的大鼠肾病为调查严重蛋白尿病情的发病
产品说明书
化学性质
产品名: Puromycin aminonucleoside 修订日期: 6/30/2016
产品名: Cas No.: 分子量: 分子式: 别名:
化学名:
SMILES: 溶解性: 储存条件: 一般建议:
运输条件:
Puromycin aminonucleoside
58-60-6 294.31
机制提供了模型。 体外：一项前期研究使用扫描（SEM）和透射（TEM）电子显微镜检验 PAN 对大鼠肾小球足 细胞的体外作用。大鼠肾脏切片与 PAN 孵育，肾脏切片上肾小球的 SEM 分析表明，PAN 孵 育降低足细胞细胞体上微绒毛的数目并增加肾小球的数量。TEM 形态显示，PAN 孵育显著延 缓对照组观察到的足细胞足突的损失[1]。 体内：在 Wistar 大鼠中，多次注射 PAN 导致持续重度蛋白尿和肾小球 FSGHS 病变。在 PVG/c 大鼠中，诱导慢性蛋白尿需要更高剂量的 PAN。在单次静脉注射 PAN 引起的急性 PAN 肾病 的 Wistar 大鼠中，系膜出现大量脂质，而肾病 PVG/c 大鼠仅出现较小的系膜脂滴。此外， 与无蛋白尿对照组相比，肾病 PVG/c 大鼠注射胶体炭后，系膜未发现炭累积增加[2]。 临床试验：N/A