2018年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(三)(含答案)

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2018年高考生物:试卷(二十八) “基因工程与克隆技术‘(含答案和解析)

2018年高考生物:试卷(二十八) “基因工程与克隆技术‘(含答案和解析)

检测(二十八)“基因工程与克隆技术”课前诊断卷1.(2018届高三·MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞,最终表达出肺结核疫苗。

请回答下列问题:(1)为获取MPT64基因,可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA,在________________的作用下合成双链cDNA片段,获得的cDNA片段与结核杆菌中该基因碱基序列______________(填“相同”或“不同”)。

(2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成______________,在操作步骤中需要加热至90~95 ℃的目的是________________________________________________________________________。

(3)根据农杆菌的特点,如果将MPT64基因插入到_______________上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入胡萝卜细胞,并将其插入到植物细胞中的______________上。

要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达,应检测胡萝卜植株中是否含有________________________________________________________________________。

(4)研究发现,如果将MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸,其保存时间将大大延长,科学家可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是________________________________。

解析:(1)以mRNA为模板合成cDNA的过程是逆转录,需要逆转录酶的催化。

由于DNA转录形成的mRNA过程中非编码序列不转录,所以形成的cDNA与结核杆菌中该基因碱基序列不同。

(2)在PCR技术中,以已知一段MPT64基因的核苷酸序列为模板,合成引物。

2018届高考生物 第十一单元 专题二十五 基因工程(含转基因生物的安全性与生物武器)(全国通用)

2018届高考生物 第十一单元 专题二十五 基因工程(含转基因生物的安全性与生物武器)(全国通用)

【大高考】(三年模拟精选)2016届高考生物第十一单元专题二十五基因工程(含转基因生物的安全性与生物武器)(全国通用)A组基础巩固1.(2015·天津六校第一次联考)在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。

下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答:(1)A过程需要的酶有________________。

(2)要把重组质粒导入土壤农杆菌,首先必须用________处理土壤农杆菌,使土壤农杆菌转变为________态;将________在缓冲液中混合培养完成转化过程。

(3)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后,将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[D]________和[E]________。

如要确保再生植株中含有抗虫基因,可在C过程的培养基中加入________。

(4)如想利用分子杂交技术检测再生植株中的抗虫基因是否转录,应该用放射性同位素标记的目的基因作为探针与________杂交。

解析(1)图中A为基因表达载体的构建过程,该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒。

(2)将重组质粒导入微生物细胞时,常采用感受态细胞法,即首先用Ca2+处理微生物细胞,使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞;然后将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程。

(3)将离体棉花叶片组织培养成再生植株还需要采用植物组织培养技术,该技术包括脱分化和再分化两个过程。

由图可知,标记基因是卡那霉素抗性基因,因此可用含有卡那霉素的培养基筛选含有抗虫基因的再生植株。

(4)检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术,即以标记的目的基因为探针与mRNA分子杂交。

答案(1)(同一种)限制酶、DNA连接酶(缺一不可)(2)Ca2+感受重组质粒和感受态(农杆菌)细胞(答一个不给分)(3)脱分化再分化卡那霉素(4)mRNA2.(2015·北京海淀期中考试)为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D 基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

高中生物高频考点及答案37 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题

高中生物高频考点及答案37 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题

考点规范练37基因工程及生物技术的安全性与伦理问题一、选择题1.已知限制性内切核酸酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、Eco R Ⅰ(G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓GATC)。

若要利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙),下列分析合理的是()A.用Eco RⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和Eco RⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用Eco RⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体2.(不定项选择题)为使玉米获得抗除草剂性状,需进行下图所示的操作。

报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。

转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化的愈伤组织也可能在选择培养基上生长。

下列叙述正确的是()A.筛选1需要用含抗生素的培养基筛选出成功导入基因表达载体的农杆菌B.筛选2需要用无色物质K处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织C.报告基因在玉米的愈伤组织和农杆菌细胞中均能正确表达D.诱导幼胚脱分化形成愈伤组织的培养基中需添加植物激素二、非选择题3.利用农杆菌转化法可培育转基因植物,请据此回答下列问题。

(1)培育转基因植物过程的核心步骤是,其目的是使目的基因在受体细胞中,并且遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。

(2)构建基因表达载体时,可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的键。

基因表达载体的组成部分包括启动子、终止子、目的基因、、复制原点等。

(3)组成基因表达载体的单位是。

基因表达载体中的启动子是识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过(填过程)合成mRNA。

(4)用两种限制酶XbaⅠ和SacⅠ(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,获得含目的基因的片段。

若利用该片段构建基因表达载体,应选用的Ti质粒是下图中的。

注图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点。

4.下图为DNA的粗提取与鉴定实验的相关操作。

2018版高考生物总复习模拟创新题:专题25 基因工程(含转基因生物的安全性与生物武器) 含解析

2018版高考生物总复习模拟创新题:专题25 基因工程(含转基因生物的安全性与生物武器) 含解析

全国新课标区模拟精选题:根据高考命题大数据分析,重点关注基础题2,能力题4。

模拟精选题1.(2016·山东淄博模拟)农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。

图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图作答:(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用________处理DNA以防止DNA片段的自身环化,需用________“缝合”双链DNA片段的平末端。

(2)目的基因是指编码蛋白质的结构基因和一些________。

由过程②形成的载体中,目的基因的首端具有________识别和结合的部位。

(3)过程③常用________处理使农杆菌成为感受态细胞。

在过程⑤⑥前,常采用________技术检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因及转录产物。

(4)过程④需对植物细胞做冲洗和________处理,然后用_________去除细胞壁。

DNA连接酶(2)具调控作用的基因RNA聚合酶答案(1)多种限制酶T4(3)Ca2+(CaCl溶液) 核酸分子杂交(基因探针)2(4)消毒纤维素酶和果胶酶2.(2016·湖北七校联盟)下图是利用牛乳腺生产人生长激素的流程图,回答相关问题。

(1)图中B过程需要________酶。

③是________。

含有启动子的是________(填“目的基因Ⅰ”或“目的基因Ⅱ”)。

(2)大量扩增目的基因可采用的方法是________。

(3)④为牛的________,b过程常用的方法为________。

图示过程中,为使人生长激素基因在牛乳腺细胞中表达,需将该基因与____________等调控组件重组在一起。

(4)检测人生长激素基因在牛的乳腺细胞中是否转录需用____________法。

答案(1)逆转录cDNA文库目的基因Ⅰ(2)PCR技术(3)受精卵显微注射法乳腺蛋白基因的启动子(4)分子杂交1.(2016·武汉期末)下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料。

高考生物第一轮总复习 专题1、4 基因工程、生物技术的

高考生物第一轮总复习 专题1、4 基因工程、生物技术的

专题1、4 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题1.通过转基因技术可使哺乳动物的乳腺细胞分泌人类所需要的各种物质。

下列物质中,不能通过这一途径获得的是( )A.性激素 B.抗体C.胃蛋白酶 D.生长激素2.下列技术中属于基因工程的是( )A.克隆牛 B.固氮小麦的培育C.诱变高产小麦 D.利用酵母菌发面团3.基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的四个必要条件是( )A.目的基因、限制酶、载体、受体细胞B.重组DNA、RNA聚合酶、限制酶、连接酶C.工具酶、目的基因、载体、受体细胞D.模板DNA、mRNA、质粒、受体细胞4.(2011年济南质检)20世纪50年代以来,分子生物学和分子遗传学得到飞速发展,如转基因技术、克隆技术、基因芯片技术。

上述这些技术的理论基础是( ) A.孟德尔遗传规律B.性别决定及伴性遗传C.DNA结构及其功能D.人类基因组计划5.(2011年承德联考)下列有关基因工程相关知识的叙述正确的是( )A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、热稳定的DNA聚合酶B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.目的基因是指重组DNA质粒D.只要检测出受体细胞中含有目的基因,那么,目的基因一定能成功地进行表达6.(2011年浙江)ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。

下列叙述错误的是( )A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD.每个人的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子7.(2011年豫南联考)基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。

已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。

根据图示,判断下列操作正确的是( )A.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割B.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割C.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割D.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割8.(2011年浙江联考)下列关于转基因生物与环境安全的叙述,错误的是( )A.转基因生物所带来的环境安全问题是可以解决的B.重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染C.种植抗虫棉可以减少农药的使用量,对环境没有任何负面影响D.如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白,可能会通过食物链传递到人体内9.(2011年北京统考)以下有关蛋白质工程的叙述,不正确的是( )A.蛋白质工程发展的基础是基因工程B.蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现D.蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质10.中国政府的态度是禁止生殖性克隆人,不接受任何生殖性克隆人的实验,原因是( )A.大多数的人对克隆人的研究持否定态度B.克隆人不是正常的个体C.克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念D.克隆人的技术性问题无法得到解决11.(双选)科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡的受精卵细胞的DNA 中,发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋,在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白,而且用这些鸡蛋孵出的鸡,仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋。

2018年高三生物一轮复习 配套试题汇编 专题21 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题

2018年高三生物一轮复习 配套试题汇编 专题21 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题

专题21 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题基因工程的原理及工具(2017年全国理综卷Ⅱ)下列叙述符合基因工程概念的是( )A.B 淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B 淋巴细胞中的抗体基因B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA 发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA 整合到细菌DNA 上解析:A 项B 淋巴细胞与肿瘤细胞融合,属于细胞工程;C 项用紫外线照射青霉菌,使其DNA 发生改变,进而筛选出青霉素高产菌株,属于人工诱变;D 项自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA 整合到细菌DNA 上,并没有进行人为的加工,属于自然状态下的基因重组。

答案:B 。

基因工程的操作步骤及应用1.(2017年四川理综卷,2,6分)将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后,重新置入大肠杆菌的细胞内,通过发酵就能大量生产人生长激素。

下列叙述正确的是( )A.发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B.大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C.大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等D.生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA 连接酶解析:本题考查基因工程的有关知识。

大肠杆菌发酵产生的生长激素属于次级代谢产物;生长激素基因可以伴随质粒的复制而复制,伴随质粒传递给后代,故B 正确;质粒是小型环状DNA 分子,不存在尿嘧啶;DNA转录需要RNA聚合酶,不需要解旋酶和DNA连接酶。

答案:B。

2.(2017年浙江理综卷,6,6分)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。

现用基因工程技术培育蓝玫瑰。

下列操作正确的是( )A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞解析:本题考查的是基因工程的工具及步骤等知识。

2018届高考生物专题训练26基因工程

2018届高考生物专题训练26基因工程

专题训练26 基因工程一、选择题1.应用基因工程方式,可将酵母菌制造成“工程菌”,用于生产乙肝疫苗。

在制造该“工程菌”时,应向酵母菌导入( )A.乙肝病毒的表面抗原B.抗乙肝病毒抗体的基因C.抗乙肝病毒的抗体D.乙肝病毒的表面抗原的基因2.以下关于DNA连接酶的明白得,正确的选项是( )A.其化学本质是蛋白质B.DNA连接酶能够恢复DNA分子中的氢键C.它不能被反复利用D.在基因工程操作中能够用DNA聚合酶代替DNA连接酶3.获取目的基因时要用到限制性核酸内切酶。

限制性核酸内切酶起作用的位置是( )A.aB.bC.cD.d4.对以下图所示粘性结尾的说法错误的选项是( )A.DNA连接酶作用位点在b处,催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键B.甲、乙具有相同的粘性结尾,可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能C.甲、乙、丙粘性结尾是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的D.切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子5.如图表示一项重要的生物技术,对图中物质d的描述,正确的选项是( )A.a通常存在于细菌体内,目前尚未发觉真核生物体内有类似的结构B.b识别特定的核苷酸序列,并将A与T之间的氢键切开C.c连接双链间的A和T,使粘性结尾处碱基互补配对D.假设d的基因序列未知,可从基因文库获取6.以下图是利用基因工程培育抗虫植物的示用意。

以下相关表达,正确的选项是( )A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上C.④的染色体上假设含抗虫基因,那么⑤就表现出抗虫性状D.⑤只要表现出抗虫性状就说明植株发生了可遗传变异7.采纳基因工程的方式培育抗虫棉,以下导入目的基因的做法正确的选项是( )①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA 序列与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培育④将编码毒素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵A.①②B.②③C.③④D.④①二、非选择题8.为了更好地分解石油,通过基因工程产生超级细菌。

2018版高考(全国)生物大一轮复习现代生物科技专题

2018版高考(全国)生物大一轮复习现代生物科技专题

A.①②③④ C.①④②③
B.①②④③ D.①④③②
[技巧点拨] 确定限制酶的种类
(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类。 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择 PstⅠ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择 SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制 酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择用 PstⅠ和 EcoRⅠ两种限制酶(但要 确保质粒上也有这两种酶的切点)。
2.DNA 重组技术的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(简称: 限制酶 ) ①来源:主要是从 原核 生物中分离纯化出来的。 的 ②作用:识别特定的 核苷酸序列 并切开特定部位的两个核苷酸之间 磷酸二酯键 。 ③结果:产生 黏性末端 或平末端。 (2)DNA 连接酶 ①种类:按来源可分为 E· coli DNA 连接酶和 酸之间的
3.如图是表达新基因用的质粒的示意图,若要将目的基因插入到质粒 上的 A 处,则切割基因时可用的是( )
A.HindⅢ C.EcoB
B.EcoRⅠ D.PstⅠ
解ClaⅠ限制酶的切点,使用 A~D 中的 C
EcoB 切割时,才能让目的基因插入到 A 处。
[整合提升] 载体上标记基因的标记原理 载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。 目的基因要转入的 受体细胞没有抵抗相关抗生素的能力。 当含有抗生素抗性基因的载体进入受 体细胞后,抗性基因在受体细胞内表达,使受体细胞能够抵抗相应抗生素, 所以在受体细胞的培养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入载体的受 体细胞,原理如下图所示:
解析
本题主要考查 PCR 扩增技术的相关知识, 意在考查考生的识记
能力和理解能力。扩增过程需要两种引物 (分别与两条模板链相结合 );扩 增至第三轮时,共合成 8 个 DNA 分子片段,同时含 2 段引物的 DNA 分子 有 6 条,占 3/4。 答案 B
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2019年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(三) 1.(2019年北京卷,5)为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1),拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是()
A.用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒
B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
【答案】C
2.图9为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图。

下列叙述正确的是()
A.过程①所用的人β-酪蛋白基因可从人cDNA文库中获得
B.过程①可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植
C.过程①可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体
D.过程①人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译
【答案】AC
3.2019年2月3日,英国议会下院通过一项历史性法案,允许以医学手段培育“三亲婴儿”。

三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。

据图分析,下列叙述错误的是()
A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代
B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿
C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
D.三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术
【答案】C
4.在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中,不需要的是()A.用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞
B.用选择培养基筛法导入目的基因的细胞
C.用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合
D.用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
【答案】C
5.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()
A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得
B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点
C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
【答案】C
6.(2019年新课标①卷,38)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。

已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。

回答下列问题:
(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是_____________________。

(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用__________作为载体,其原因是_____________________。

(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。

因为与家蚕相比,大肠杆菌具有_________________(答出两点即可)等优点。

(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是___________________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。

(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以
说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是__________________。

【答案】(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A
(2)噬菌体噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕
(3)繁殖快、容易培养
(4)蛋白A的抗体
(5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体
7.(2019年新课标①卷,38)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。

通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。

回答下列问题:
(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是__________________________。

提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是__________________________。

(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是__________________________。

(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是__________________________(答出两点即可)。

(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是_____________。

(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是__________________________。

【答案】(1)嫩叶组织细胞易破碎防止RNA降解
(2)在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA
(3)目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子
(4)磷酸二酯键
(5)目的基因的转录或翻译异常
8.图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体示意图(载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的)。

根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接,理由是____________。

(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。

这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_________,不能表达的原因是____________。

(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有____________和____________,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________。

【答案】(1)Sau3A① 两种梅切割后产生的片段具有相同的黏性末端
(2)甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,两者目的基因均不能转录
(3)E•coliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶
9.某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr 表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。

有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。

被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。

回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有______________(答出两点即可)。

而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。

(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是______________;并且
______________和______________的细胞也是不能区分的,其原因是_____________。

在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有是_____________的固体培养基。

(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自于_____________
【答案】(1)能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点(答出两点即可)
(2)二者均不含氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上都不能生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者都含氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长四环素
(3)受体细胞
10.人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从血浆中制备。

下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

(1)获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____________合成总cDNA,然后以cDNA 为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。

下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。

(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是_____________(填写字母,单选)。

A.人血细胞启动子
B.水稻胚乳细胞启动子
C.大肠杆菌启动子
D.农杆菌启动子
(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是_________________。

(4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。

与途径II相比,选择途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。

(5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

【答案】(1)总RNA(或mRNA)
(2)B
(3)吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化
(4)水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始rHSA多肽进行高效加工(5)HAS。

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