(人)胰蛋白酶
胰蛋白酶的作用
胰蛋白酶的作用胰蛋白酶是一种消化酶，主要存在于人体的胰腺中，它在消化过程中起着非常重要的作用。
胰蛋白酶可以分解蛋白质，将其分解为更小的肽链和氨基酸，以供人体吸收利用。
胰蛋白酶的作用主要发生在小肠中。
当我们进食时，胃中的食物经过胃酸和胃蛋白酶的作用，在胃中被分解成较小的颗粒，称为胃糜。
胃糜进入小肠后，胰腺会分泌胰蛋白酶及其他消化酶，对蛋白质进行进一步的分解。
胰蛋白酶主要分为三类：胰蛋白酶A（trypsin）、胰蛋白酶B （chymotrypsin）和胰蛋白酶C（carboxypeptidase）。
胰蛋白酶A主要负责将蛋白质分解成肽链，它的作用比较特殊，只能在肽链中的精氨酸和组氨酸两种氨基酸的右侧进行切割，因此其作用非常具有特异性。
胰蛋白酶B主要负责将肽链进一步分解为更小的肽链或者独立的氨基酸。
它的特点是能够剪断任意氨基酸，因此其作用较为广泛。
胰蛋白酶C主要负责将肽链的末端氨基酸逐一剪断，直到剪断到只剩一个氨基酸为止。
这种剪断方式使胰蛋白酶C具有消化肽链的能力，并在各类消化酶中扮演者重要的角色。
胰蛋白酶通过将蛋白质分解为更小的分子，使其更容易被人体吸收。
分解出来的小分子，如氨基酸，通过小肠黏膜上的转运蛋白进入肠道细胞，并通过肠道细胞膜内部的进入血液循环。
这样，蛋白质得以被人体吸收和利用，提供能量和维持生命的必要物质。
总结起来，胰蛋白酶在人体内的作用非常重要。
它能将蛋白质分解为更小的分子，方便人体吸收和利用。
胰蛋白酶的特异性和广泛性作用，使其在消化过程中不可或缺。
只有在胰蛋白酶的作用下，蛋白质才能被有效地分解和吸收，为身体提供足够的营养和能量。
因此，保持胰腺的健康和胰蛋白酶的正常分泌，对于人体的消化功能和健康至关重要。
胰蛋白酶
基本信息
物化性质
胰蛋白酶是从牛、猪、羊的胰脏提取，纯化获得的结晶，再制成的冻干制剂。易溶于水，不溶于三氯甲烷、 乙醇、乙醚等有机溶剂。在pH1.8时，短时间煮沸几乎不失活；在碱溶液中加热则变性沉淀，Ca2+有保护和激活 作用，胰蛋白酶的等电点为pH10.1。
牛胰蛋白酶原有229个氨基酸组成，含6对二硫键，其氨基酸排列顺序和晶体结构已被阐明。在肠激酶活自身 催化下，酶原的N末端赖氨酸与异亮氨酸残基之间的肽键被水解，释放出来缬-天-天-天-天-赖6肽，生成有活性 的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分子量23800 ，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨
胰蛋白酶能使痰、血凝块溶化变稀，易于引流排痰，加速创面愈合净化，促进肉芽组织增生，而不损伤正常 组织，临床上有消炎消肿功能。
其他
细胞培养
胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。 胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在 pH为 8.0、温度为 37℃时，胰酶溶液的作用能力最 强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白质可 降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+、 Mg2+的 BSS，如： D-Hanks液。终止消化时，可用 含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
1.用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。 2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。 3.用于治疗毒蛇咬伤，曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例，均获治愈。
1.肝肾出血、出血倾向及结核性脓肿患者禁用。 2.不可用于急性炎症及出血空腔中。
胰蛋白酶 药典标准
胰蛋白酶药典标准胰蛋白酶是一种消化酶，被广泛应用于临床医学中治疗消化系统疾病，如胰腺炎、胰腺癌、胃肠手术后等。
药典标准是评定药品质量的重要参考，下面将详细介绍胰蛋白酶的药典标准。
胰蛋白酶的药典标准主要包括国际药典（比如美国药典、欧洲药典）和中国药典两个方面。
这些药典标准规定了胰蛋白酶的质量要求、生产工艺以及检测方法等方面。
以下是对其中几个重要药典标准的介绍：1.国际药典：美国药典和欧洲药典规定了胰蛋白酶的质量要求。
例如，美国药典规定了胰蛋白酶的单位活性应满足特定标准，比如1 USP单位相当于3.6微克胰蛋白酶，并规定了对其它微生物污染的限制。
2.中国药典：中国药典对胰蛋白酶的质量要求与国际药典接近，但有些细节的要求有所不同。
例如，中国药典规定了胰蛋白酶的酶活力不得低于10,000 USP单位/g，并规定了胰蛋白酶的酶活性测定方法。
药典标准还要求生产工艺和质量控制方面的要求。
生产工艺包括胰蛋白酶的提取、纯化、浓缩和干燥等，要求按照良好的制造规范进行操作。
质量控制方面要求对原辅材料进行严格检测，确保其质量符合标准，并要求对成品进行全面检测，确保其有效成分含量符合规定。
胰蛋白酶的标准化是确保其质量和疗效的关键。
通过遵循药典标准，可以保证不同厂家生产的胰蛋白酶具有相同的活性，并且可以使医生和患者更容易比较不同品牌或批次的胰蛋白酶的治疗效果。
总结起来，胰蛋白酶作为一种重要的消化酶，其药典标准规定了胰蛋白酶的质量要求、生产工艺和检测方法等方面。
通过遵循这些标准，可以确保胰蛋白酶在临床应用中的质量和疗效，促进患者的康复。
医生和患者可以放心使用符合药典标准的胰蛋白酶，获得更好的治疗效果。
人胰蛋白酶原料
人胰蛋白酶的主要原料来自于牛、猪、羊的胰脏。
通过多重结晶方式纯化，并进一步采取层析及超滤技术制备而得。
该酶易溶于水，不溶于三氯甲烷、乙醇、乙醚等有机溶剂。
在pH1.8时，酶短时间煮沸几乎不失活，在碱溶液中加热则会变性沉淀。
Ca2+对酶有影响，可增强其活性。
此外，还有一种由重组大肠杆菌表达的重组人胰蛋白酶，其氨基酸序列与人胰蛋白酶完全一致。
这种重组胰蛋白酶也具有与动物源性猪胰蛋白酶相同的酶学性质，可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中。
值得注意的是，胰蛋白酶易受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF，抑肽酶等抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。
所以在使用胰蛋白酶时，需要选择合适的抑制剂和反应条件。
胰蛋白酶活性测定
实验一胰蛋白酶活性测定实验目的：掌握测定胰蛋白酶浓度、活性、比活的原理与方法。
实验原理：胰蛋白酶相对分子量23.7 KD，主要水解肽链中碱性氨基酸与其它氨基酸相连接的肽键，此外还能水解碱性氨基酸形成的酯键，如把人工合成的N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（N-benzuyl-L-argine ethyl ester, BAEE）水解为H-苯甲酰-L-精氨酸（BA）。
胰蛋白酶所催化的上述反应中，产物BA对253 nm 的光吸收远大于BAEE，因此可以在实验起始点把253 nm 的消光值调为零，然后记录反应体系对253 nm 的消光值的增量，并把这个增量作为测定胰蛋白酶的活性指标。
酶活单位定义：在底物BAEE浓度1m mol/L，光程1 cm，波长253nm，温度25 0C，测量体积3mL,.条件下吸光值每分钟递增0.001（ A/min=0.001）为1个BAEE酶活单位。
胰蛋白酶制剂中蛋白质浓度含义：胰蛋白酶含量一般E1%表达。
这个值的含义是：浓度为1% 酶蛋白，在1cm光径下，对紫外280nm 的消光值。
不同厂家、不同产品的E1%值有很大差别。
E1% 值越高，表明酶制剂中酶蛋白含量越高。
由于酶制剂中蛋白质含量各不相同，所以用酶制剂配制E1%的蛋白质溶液时，按照厂家对产品的E1% 的测定值配制溶液。
在本实验中，胰蛋白酶酶蛋白样品采用SIGMA 公司生产的产品,生产公司对展品的描述是对280nm紫外吸收值15.3，配制胰蛋白酶标准溶液可根据厂家的这个说明。
器材以试剂：器材，电子天平，紫外分光光度计，微量加样器。
试剂：标准胰蛋白酶，N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯，HCI, Tris。
1．胰蛋白酶活性测定：1）配制E1%的胰蛋白酶溶液每组取E1%=15.3的胰蛋白酶样品10mg 放到1ml去离子水中，充分溶解后，放入冰中保存。
2)按照表1 的要求配制试验体系所需其它各种溶液.3)按照表1的顺序进行测定标准胰蛋白酶的活性。
食品级胰蛋白酶用途_概述及解释说明
食品级胰蛋白酶用途概述及解释说明1. 引言1.1 概述胰蛋白酶作为一种重要的酶类物质，在食品工业中具有广泛的应用价值。
它是由胰腺分泌的消化酶，主要用于食物蛋白质的分解和消化吸收。
随着人们对食品健康与营养需求的不断提高，对于食品加工过程中使用安全有效的酶类辅助剂的需求也越来越大。
食品级胰蛋白酶就是针对这一需求而设计开发出来的一种优良产品。
本文将对胰蛋白酶进行基础概念介绍，包括定义、分类和作用机制等方面内容。
同时，还将重点讨论食品级胰蛋白酶在食品工业中的应用情况，并详细说明其在面团加工中的使用要点和方法。
最后，我们将分析食品级胰蛋白酶在改善食品质量和特性方面所带来的提升效果，并展望未来研究方向和可持续发展前景。
1.2 文章结构本文共分为五个部分: 引言、胰蛋白酶的基本概念、食品级胰蛋白酶的用途概述、食品级胰蛋白酶在面团加工中的应用要点说明以及结论。
在引言部分，我们将简要介绍胰蛋白酶的用途，并概述了文章的目录结构。
1.3 目的本文旨在全面阐述食品级胰蛋白酶的用途和作用机制，重点讨论其在食品加工中特别是面团加工过程中的应用。
通过对食品级胰蛋白酶使用方法和效果进行解释和说明，旨在为相关从业人员提供科学准确的指导，并为未来研究和开发提供方向和建议。
2. 胰蛋白酶的基本概念2.1 胰蛋白酶的定义胰蛋白酶是指由胰腺分泌的一类消化酶，在肠道中起到分解食物中蛋白质的作用。
胰蛋白酶主要包括胰高脂酶、胰低糖酶和胰肽酶等。
它们能够将复杂的蛋白质分子水解成较小的多肽、低级别氨基酸以及少量游离氨基酸，从而帮助身体吸收和利用食物中的营养物质。
2.2 胰蛋白酶的分类与特点根据其活性位置和特定底物或基团，胰蛋白酶可分为几种不同类型，包括内切粒溶(endo-peptidases)、外切粒溶(exo-peptidases)以及内外都有活性者。
内切粒溶是指能够在胺基端或羧基端发生水解反应的胰蛋白酶，如胱液肽酞裂解大分子肝再生紫外线X-pro蛋白等。
胰蛋白酶活性测定
胰蛋白酶活性测定在动物胰脏中，胰蛋白酶是以无活性的酶原状态存在的。
在生理条件下，胰蛋白酶原随胰液分泌至十二指肠后，在小肠上腔有Ca2+的环境中，为肠激酶或胰蛋白酶所激活，其肽链 N -端的赖氨酸与异亮氨酸之间的一个肽键被水解，失去一个酸性6肽，其分子构象发生一定的改变后转变为具有催化蛋白质水解活性的胰蛋白酶。
胰蛋白酶原分子量约为24 000，其等电点为pH8.9；胰蛋白酶的分子量约为23 400，其等电点为pH 10.8。
胰蛋白酶在pH3.0时最稳定，其浓溶液可贮存于冰箱（0℃以下）数周而活性无显著丧失。
pH＜3时，胰蛋白酶易变性。
PH＞５时，胰蛋白酶易自溶。
胰蛋白酶催化活性的最适pH为7.6～7.8。
重金属离子、有机磷化合物和反应产物都能抑制胰蛋白酶的活性。
胰脏、卵清和大豆中也含有一些蛋白质对胰蛋白酶活性具有抑制作用。
[原理]胰蛋白酶能催化蛋白质的水解，对于由碱性氨基酸（如精氨酸、赖氨酸）的羧基与其他氨基酸的氨基所形成的肽键具有高度的专一性。
此外，胰蛋白酶也能催化由碱性氨基酸的羧基所形成的酰胺键和酯键，有高度的专一性仍表现为对碱性氨基酸羧基一侧的选择对此等化学键的催化水解活性的敏感度为：酯键＞酰胺键＞肽键。
因此，可以利用含有这些化学键中任一种键型的底物来研究胰蛋白酶的专一催化活性。
本实验方法一采用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯[（BAEE），N-benzoyl-L-arginine ethyl ester]作为底物.N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）在波长253nm下的紫外光吸收远远弱于N-苯甲酰-L-精氨酸[（BA），benzoyl-L-arginine]的紫外光吸收。
在胰蛋白酶的催化下，BAEE随着酯键的水解，水解产物 BA逐渐增多，反应体系的紫外光吸收亦随之相应增加，以△A253nm计算胰蛋白酶的活性。
胰蛋白酶的BAEE单位定义为：以BAEE为底物，在一定反应条件下，每分钟使△A253nm增加0.001的酶量为一个BAEE单位。
胰腺疾病的检查
胰腺疾病的检查一、胰腺的外分泌功能胰腺的外分泌物总称为胰液，pH7.4～8.4。
主要成分为水、消化酶和碳酸氢盐等。
碳酸氢盐：中和胃酸和激活消化酶。
消化酶：包括淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等；蛋白酶又包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶等。
正常时，胰液只有很少一部分进入血液。
某些胰腺疾病可以使这些酶进入血液循环，导致血液中酶活性升高。
二、胰腺疾病的检查及其临床意义（一）淀粉酶：1.概述：属于α-淀粉酶，可通过肾小球滤过，是唯一能在正常时于尿中出现的血浆酶。
血液中淀粉酶主要来自胰腺、唾液腺，尿液中淀粉酶来自于血液。
同工酶：P-同工酶（胰型同工酶）S-同工酶（唾液型同工酶）2.测定方法：限定性底物法。
基本原理：把病人的标本（含淀粉酶）和作为底物的多糖一起进行反应后，测定反应后的剩余底物或产物来计算淀粉酶的活性。
现用限定性底物法，即用小分子低聚糖（如对硝基苯麦芽庚糖苷）作为底物，产生稳定的限定性产物，然后测定反应产物（发色团或葡萄糖）量来计算淀粉酶活性。
影响因素：①很多阴离子有激活淀粉酶的作用，其中以Cl-，Br-为最强；②血清甘油三酯浓度高时，可以抑制淀粉酶活性，应将标本加以稀释，以降低其影响；③肝素抗凝：由于Ca2+是淀粉酶分子组成的部分，一般抗凝剂如草酸盐，枸橼酸盐等因能与Ca2+结合，抑制淀粉酶活性而不宜应用。
同工酶测定：琼脂糖凝胶和醋纤膜电泳法。
3.参考值：限定性底物法。
血清淀粉酶≤220U/L（37℃）尿淀粉酶≤1200U/L（37℃）P-同工酶：血清115U/L；尿800U/L4.临床意义：（1）血清淀粉酶升高最多见于急性胰腺炎。
发病后2～12h活性开始升高，12～24h达峰值，2～5d后恢复正常。
急性胰腺炎时尿淀粉酶升高可早于血淀粉酶，而下降晚于血淀粉酶。
（2）监测急性胰腺炎的并发症：如胰腺假性囊肿，胰腺脓肿，血淀粉酶活性多持续升高。
（3）胰腺癌早期淀粉酶活性可见升高。
（4）腮腺炎、消化性溃疡穿孔、机械性肠梗阻等非胰腺疾病淀粉酶活性可中度或轻度升高。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
重组人胰蛋白酶
Cat.No.:RHT03
CAS:9002-07-7
EC:3.4.21.4
来源：人胰蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达
1.重组生产，无动物源性
重组人胰蛋白酶，氨基酸序列及性质与人胰蛋白酶完全相同。
无动物源性，无病毒污染。
可用于干细胞治疗、肿瘤的细胞治疗等过程中，无抗原性。
2.优势
安全性高
重组生产，无动物源性的病毒污染，如猪流感病毒、猪细小病毒等；
特殊工艺，无内源性病毒污染，无细菌、真菌、支原体污染；
冻干粉，运输及储存安全，活性不易损失；
不含任何蛋白酶抑制剂，如PMSF等。
上海雅心生物技术有限公司
✧纯度高
HPLC纯化；
活性特异，无其它蛋白酶活性。
✧活性高
比活性不低于2500USP u/mg。
3.用途范围
胰蛋白酶是一种内肽酶，可用于赖氨酸及精氨酸C末端剪切肽键，从而将大分子蛋白裂解为小肽。
胰蛋白酶广泛用于各种生物技术过程中，如：细胞培养各种组织的细胞分离；变性蛋白质的降解；蛋白质的酶解、测序；干细胞、肿瘤的细胞治疗等。
4.特性
纯化HPLC
产品性状白色或类白色冻干粉
纯度（HPLC）≥95%
比活不低于2500USP u/mg
其他酶含量无糜蛋白酶、羧肽酶A等污染及活性
不含任何蛋白酶抑制剂无PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制剂
上海雅心生物技术有限公司
5.信息
产品名称比活包装产地
重组人胰蛋白酶≥2500USP u/mg10mg,100mg,1g上海雅心
活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.0ml(1cm光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个USP单位。
6.相关产品
重组猪胰蛋白酶；
重组胰蛋白酶细胞消化液。
上海雅心生物技术有限公司。