微生物快速检测方法共33页
一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法如下：
1.制备10倍品匀液。
按上一步操作程序，每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。
2.取样并制备平板。
同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内空白对照。
及时将15mL-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃士1℃恒温水浴锅中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
3.待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃士1℃培养48h+2h。
如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板，按2.1条件进行培养。
4.平板上菌落计数可使用自动化菌落计数仪，也可用肉眼观察（必要时可用放大镜观察）记录培养基上菌落数量和相应的稀释倍数。
选取菌落数在30-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。
以上就是一般生菌数检验方法，希望对解决您的问题有所帮助。
微生物限度检测方法
微生物限度检测方法微生物限度检测是指在药品、食品、化妆品等产品中，对微生物的数量和种类进行检测，以确保产品的质量安全。
微生物限度检测方法的选择和执行对产品的质量控制和安全性评价具有重要意义。
本文将介绍常见的微生物限度检测方法及其应用。
一、培养法。
培养法是一种常见的微生物限度检测方法，它通过将样品接种在适当的培养基上，利用微生物在培养基上生长、分裂和形成可见的典型菌落的特性，来检测微生物的数量和种类。
培养法主要包括菌落计数法、膜过滤法等。
菌落计数法是将样品均匀涂布在含有营养物质的琼脂平板上，经过一定时间的培养后，根据菌落的数量来确定微生物的数量。
膜过滤法是将样品过滤到孔径为0.45μm的膜上，然后将膜放置在含有营养物质的琼脂平板上培养，根据在膜上形成的菌落数量来确定微生物的数量。
二、生物学法。
生物学法是利用微生物的生物学特性，通过培养微生物或者利用生物学试剂来检测微生物的数量和种类。
生物学法主要包括酶标记法、PCR法等。
酶标记法是利用酶标记的抗体或抗原来检测微生物的数量和种类，其原理是将酶标记的抗体或抗原与待检测微生物发生特异性反应，然后通过酶反应产生显色物质或荧光物质来进行检测。
PCR法是利用聚合酶链式反应技术，通过扩增微生物的特异基因序列来检测微生物的数量和种类。
三、物理化学法。
物理化学法是利用微生物的生理生化特性，通过测定微生物的生长代谢产物或者利用特定的物理化学性质来检测微生物的数量和种类。
物理化学法主要包括ATP生物发光法、流式细胞术等。
ATP生物发光法是利用微生物在生长过程中产生的ATP来进行检测，通过测定样品中的ATP含量来确定微生物的数量。
流式细胞术是利用流式细胞仪对微生物进行快速、高效的检测和鉴定，通过测定微生物在流式细胞仪中的光散射和荧光信号来确定微生物的数量和种类。
综上所述，微生物限度检测方法多种多样，每种方法都有其适用的范围和特点。
在实际应用中，需要根据产品的特点和检测的目的选择合适的检测方法，并严格按照相应的标准和规范进行执行，以确保产品的质量安全。
实验四微生物的菌落形态观察平板菌落计数及菌种保藏(张理珉)
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实验内容一
——微生物菌落形态观察及区分
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一、微生物的形态和菌落特征的比较表
单细胞微生物
细菌
酵母菌
菌 主落 要 特 征细
胞
含水状态 外观形态 相互关系 形态特征
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实验内容二
——从分离平板上挑取单菌落
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▪ 挑取细菌单菌落接种于牛肉膏蛋白 胨培养基斜面上——接种环
▪ 挑取放线菌单菌落接种于高氏1号培 养基斜面上——接种环、接种钩
▪ 挑取霉菌单菌落接种于马丁氏培养基 斜面上——接种环、接种钩
比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则 取其中稀释度(倍数)较小的计算菌落总数（见下 表，例2及例3）。
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4、若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度(倍数)最高的平均菌落数乘以稀释 倍数（见下表，例4）。
5、若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则 应按稀释度(倍数)最低的平均菌落数乘以稀释倍 数（见下表，例5）。
适用具有特殊生理功能的类群——存在但不 能人工培养形成单菌落，可以利用生化手段检 测出；利用统计学原理计算，结果粗放，只能 得到数量级（近似数）。
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（3）菌体浊度的测定（只针对单细胞微生 物）； 利用分光光度计在600nm测定吸光度值。
（4）细胞干重和湿重的测定（有时湿重以 体积计量）；
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微生物化验方法
微生物化验方法
微生物化验的方法有很多，以下为您推荐：
１．琼脂平板培养法：因培养基不同，琼脂平板法分为选择性培养基检测法和显色培养基检测法。
选择性培养基是在培养基中加入选择性抑制剂来抑制非目标微生物生长；显色培养基是在培养基中加入细菌特异性酶的显色底物，以菌落颜色区分目的菌落与非目的菌落。
２．显微镜镜检法：将待测样品中的微生物富集后，于油镜下直接计数。
显微镜镜检法通常与琼脂平板培养法结合使用，通过琼脂平板培养法对菌落进行定性分析，再用显微镜进行定量计数。
３．微生物测试片检测技术：一般情况下，微生物测试片由印有网格的聚丙烯薄膜和覆盖有培养基和显色物质的聚乙烯薄膜组成。
待测样品经过处理后可直接接种在微生物测试片上，然后放置在适宜的温度下培养——使固定在测试片上的显色物质与待检微生物生长产生的特异性酶发生显色反应，形成有颜色的菌落，通过对这些菌落进行计数便可实现检测。
微生物快速检测方法3篇
微生物快速检测方法第一篇：微生物快速检测方法是一种用于检测微生物数量和类型的技术，它排除了传统方法中需要多日甚至数周才能得到结果的限制。
目前，有多种不同的微生物快速检测方法可供选择，以下是其中几种。
1. PCR检测法聚合酶链式反应（PCR）是一种广泛使用的微生物检测方法。
该技术依赖于单个微生物细胞中的DNA模板，通过重复循环DNA引物扩增模板DNA，从而在富集的样品中检测出微生物DNA。
相比于传统方法，PCR不需要等待微生物生长，因此它可以极大地减少样品准备和数据分析的时间。
2. 荧光定量PCR检测法荧光定量PCR（qPCR）是PCR技术的一种变体，它使用荧光探针来实现DNA扩增的实时监测。
具体地，qPCR将荧光探针引入PCR反应体系中，当扩增过程中的DNA与荧光探针结合时，就会放出荧光信号。
这种方法在微生物检测中广泛应用，因为它可以定量检测微生物数量，同时还可以消除污染的干扰。
3. 基因测序技术基因测序技术是一种高通量的检测方法，它可以快速测定微生物所携带的基因序列。
基于DNA序列的比对和解码，可以对微生物进行鉴定和分类。
整个测序过程可以在几个小时内完成，可以检测出样品中的潜在病原微生物，并发现抗药性和毒力相关基因。
基因测序技术可以通过揭示微生物的全基因组，来理解微生物的生长和感染机制。
上述方法都可以提供快速并准确的微生物检测结果，可以用于食品、环境、医疗设备等领域。
但是，所有这些方法都需要具备高质量的DNA和RNA作为输入，否则检测结果可能会出现假阳性或假阴性。
第二篇：微生物快速检测方法在农业和食品安全领域中非常重要。
传统的分离和培养方法需要数天才能得到微生物检测结果，且很难检测到低浓度菌群。
为了更快速、准确地检测微生物，出现了一些新的技术，以下是几种常用的方法。
1. 生物传感器生物传感器技术利用大肠杆菌与质粒间的交互作用来检测特定代谢产物。
这种方法可以用于检测细菌、真菌和病毒等微生物。
生物传感器不仅可以检测单一代谢产物，还可以监测多种种类，可以在几分钟内获得结果。
9.6.186.食品微生物快速检测大肠菌群快速检测
食品中大肠菌群的测定依据
检样 无菌称取25g（mL）样品于225mL稀释液中，均质
10倍系列稀释
GB 4789.3-2016 食品微生物学检验
大肠菌群MPN计数法
适用于大肠菌群含量较低的食品中 大肠菌群的计数
选择适宜3个连续稀释度h
演示完毕，感谢您的聆听
不产气
产气
BGLB肉汤
36℃±1℃
48h±2h
不产气
产气
大肠菌群阴性
大肠菌群阳性
查MPN表 结果报告
结果判读
1 大肠菌群在测试片上生长后产酸。 2 pH指示剂使培养基颜色变深，在红色
菌落周围有气泡者为大肠菌群。 3 记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数。 4 根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。
是微生物检验诸多快速方法中比较成熟的方法之一。
已被广大卫生检验者所接受。目前已广泛应用于食品、 餐饮业、卫生、环保、水质检验等。
总结
思考题
1.大肠菌群快速检测方法与国标检测方法的异同？ 2.大肠菌群快速检测的测试片为什么会使产生使纸片颜 色加深周围并有气泡的菌落？ 3.如何对测试片的生长结果进行计数？ 4.大肠菌群快速检测适合在那些领域使用？
测试片结果解读
测试片可能会出现如下现象
1）没有任何菌落生长，不要计算圆形培养基外的菌落。因为泡棉上 已不含选择性培养基。
测试片结果解读
测试片可能会出现如下现象
2）当菌落数超过220时，可选择其中一个或几个有代表性的小方格，计算 平均菌落数，再乘以20得到整个测试片的菌落数。当有许多气泡，培养基 颜色变深暗，有很多小菌落时，记为多不可计。
测试片结果解读
测试片可能会出现如下现象
真菌【33页】
假菌丝和厚膜孢子
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2、致病性
（1）入侵原因 ➢ 机体抵抗力下降（AIDS） ➢ 大量、长期使用抗菌药物，激素和免疫抑制剂。 （2）入侵部位 ➢ 皮肤粘膜感染：以鹅口疮、阴道炎最多见。 ➢ 内脏感染：有肺炎、肠胃炎、心内膜炎等，偶
而也可发生败血症。 ➢ 中枢神经感染：脑膜炎、脑炎。
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霉菌性口腔炎
真 菌 学 mycology
1
概念
❖ 真菌（fungi）是一类真核细胞型微生物。有典 型的细胞核和完善的细胞器。
❖ 真菌广泛分布于自然界，种类繁多，有10余万种。 大多对人无害，只有少数可引起人类疾病。
2
一、生物学性状
1. 形态与结构
（1） 单细胞真菌 形态呈圆形或椭圆形，常见于酵母菌或类酵母 菌。它们以芽生方式繁殖产生子代。
主引起的超敏反应。
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5、 致病性
➢特点：一种皮肤癣菌可在不同部位引起病 变，相同部位的病变也可由不同的皮肤 癣菌引起。
➢临床疾病：各种癣症。
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6、 微生物学检查法
1.标本：根据病变部位取材 2.直接镜检：观察菌丝和孢子结构
浅部感染真菌的病变标本如毛发、皮屑、甲屑置玻片 上，滴加10%KOH，加盖玻片微热熔化角质层，再将玻片 压紧，用吸水纸吸去周围多余碱液，在显微镜下观察，见 皮屑、甲屑中有菌丝，或毛发内部或外部有成串孢子，即 可初步诊断为癣菌感染，但不能确定菌种。
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多细胞真菌菌落
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有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现 两种形态，称二相性真菌(dimorphic fungi)，即 在机体内或含血培养中37℃孵育，呈现酵母型菌 落，而在沙保培养基上室温孵育，则形成丝状菌 落。如荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。
微生物生长
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生长曲线可分： 停滞期 对数期 静止期 衰亡期
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1、停滞期（迟滞期或适应期）（lag phase）: 将细菌接种到某一培养基后，细菌并不立即繁
以生物量为指标测定微生物的生长
比浊法
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即 O.D.) 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与 光密度 成正比的线性范围内，否则不 准确。
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5.比浊法
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（二） 测定活菌数
1、液体稀释培养基计数： 将待测样品作连续10倍稀释，一直稀释到稀释液的少量接种到
10-4
10 -5
与温热液态固体培养基
混合冷却。
第三步：培养
每一个细菌会生成一个 菌落
稀 释 度 可以计数 过 低 ， ，但数量 菌 落 密 过多，费 集 无 法 时费力 计数
数量合 数 量 太 少 适，统 ， 误 差 因 计计算， 素 太 大 ， 作为结 不做计数 果
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一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为 宜。 平
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2、薄膜计数法：如果测定量大而含菌浓度很低的样品 （如空气、水）中的活菌数，可将样品用微孔薄膜 （硝化纤维素薄膜）过滤，再与膜一起放到培养基或 浸透培养液支持物表面培养。
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膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。
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微生物快以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候，留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
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