植物相关细菌群体感应信号分子的检测
细菌群体感应系统信号分子的分类及检测

细菌群体感应系统信号分子的分类及检测张彩凤【摘要】Quorum-sensing is a regulatory mechanism,with which the bacteria will release a number of specific signaling molecules,which regulate the group behavior of the specie or other species in the same environment.When the signaling molecules density reaches a critical threshold,bacteria can alter the gene expression to suit the change of environment.This review focuses on the classification of Quorum-sensing,and describes the forecast of application.%细菌的群体感应系统(Quorum-sensing,QS)作为一种细胞的信号转导机制,是细菌通过特定的信号分子浓度来监测周围环境中本身或其它细菌的数量变化,当信号分子达到浓度阈值时,能够启动菌体中相关的基因表达来适应环境变化的一种调控机制。
笔者综述了细菌群体感应系统的分类,并对其应用前景进行了展望。
【期刊名称】《生命科学仪器》【年(卷),期】2011(009)005【总页数】2页(P52-53)【关键词】群体感应;信号分子;检测【作者】张彩凤【作者单位】河北省衡水学院生命科学学院,河北衡水053000【正文语种】中文【中图分类】Q26细菌群体感应系统的研究,已成为国内外研究的热点。
革兰氏阳性细菌及阴性细菌都通过群体感应与周围环境进行信息交流,现已知QS系统参与许多细菌重要的生物学功能调节,如生物的发光、抗生素的合成、质粒的结合转移、病原细菌胞外酶与毒素的产生、生物群游现象以及生物膜形成、根瘤菌与植物共生等等[1]。
群体感应信号分子AHLs降解酶研究进展(代)

AHLs信号分子降解酶的研究进展魏金亚摘要:群体感应(Quorum-sensing system, QS)是原核生物和真核生物中与细胞群体密度相关的通讯机制,参与许多生物学功能的调控。
酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine laetone)AHLs)是调控QS系统的关键信号分子。
通过限制AHLs的浓度来调控与QS相关的生物学功能在理论和实践上具有重要意义。
本文从AHLs信号分子的降解为入口,简要概述了AHLs降解酶的种类、特点特性、生物学功能,并对其在生防和药理学上的应用进行了综述和展望。
关键词:群体感应AHLs 抑制AHL-内酯酶AHL-酰化酶AiiA AttM群体效应(Quorum-sensing system,QS)普遍存在原核生物之间和原核生物与真核生物之间,即细菌感知周围环境同种细胞密度调节其基因表达的现象。
AHLs是G-细菌进行群体效应胞间通讯的关键因素,细菌通过感知这种信号分子来感知细胞密度的阈值。
AHLs能够引发大量与细胞密度或生长时期有关的反应,如生物发光,抗生素合成、细胞游动和聚集、质粒接合转移、生物膜维持和分化、胞外酶合成及人和高等植物致病毒力产生等等[1-3]。
目前已经从一些原核生物和真核生物中鉴定出一些群体感应降解酶,这些降解酶可能降解细菌QS系统的信号分子AHLs,干扰细菌QS系统,抑制致病基因的诱导表达,破坏其参与调控的生物学功能。
在农业(防治植物病害)、医学(以QS系统的调控位点作为靶位来筛选抗药性物质)、环保(蓝藻水华)等研究方面具有重要意义。
AHLs降解酶的种类、特点特性、生物学功能、作用机制以及在生防和药理学上的应用前景等几个方面的研究现状进行了综述。
1 AHLs降解酶种类研究结果表明,许多动物(包括人类)和植物中的病原细菌如玉米细菌性枯萎病菌、菊欧文氏菌、嗜线虫致病杆菌、铜绿假单胞菌和欧文氏胡萝卜软腐病菌等都是依赖AHLs信号分子来实现对其致病因子的合成[7-12]。
群体感应.

2.另外,群体感应系统也在于真菌中,比如白色 念珠菌、新生隐球菌等,但人们是对真菌中的群体 感应系统研究还比较浅,尤其是对真菌群体感应系 统的效应分子、效应分子受体、靶蛋白、相关信号 转导通路以及靶基因的调控等方面的研究有待进一 步深入。
3.最近,一种被称为LED209的分子被发现能够抑制 QseC介导的致病基因激活及诸如EHEC、鼠伤寒沙门 菌和土拉弗朗西斯菌等细菌在活体哺乳动物体内所产 生的不良反应,而且其对哺乳动物的不良反应很小, 对这种分子的研究也许会有一个很好的前景。总之, 不久的将来,随着研究人员的不断探索,人们将可能 通过各种渠道来抑制群体感应系统中的各个环节,从 而达到治疗一些细菌性疾病的目的。
感谢您的关注
3. QS系统的特点 多样性
(1)信号分子的多样性 (2)分布的多样性
细菌种内、 种间,细菌与植物、 动物间
(3)信号分子产生机制的多样性
G-菌——信号分子合成酶,G+菌——前体,经蛋白酶切割
(4)信号分子运输的多样性
G+菌——ABC转运系统,G-菌——直接透过细胞膜
(5)信号响应的多样性
G+菌——双组分信号转导系统; G-菌——受体蛋白
群体感应概述
目录
1 群体感应的发现及其概念
2
群体感应的分类及机制
3
群体反应的特点
4 群体反应的应用与研究前景
1.1 发现
20世纪70年代
海洋细菌费氏弧菌(Vibrio fiscberi)和哈氏弧菌(V . harveyi) 生物发光现象
与海生动物共生,宿主利用其发出的光捕获食物、 躲避天敌以及寻觅配偶,而 V. fiscberi也获得了一个 营养丰富的生存环境
(3)不同 QS系统之间关系的复杂性
群体感应系统

细菌能自发产生、释放一些特定的信号分子,并能感知其浓度变化,调节微生物的群体行为,这一调控系统称为群体感应。
细茵群体感应参与包括人类、动植物病原茵致病力在内的多种生物学功能的调节。
简介群体感应(Quorum-Sensing):近年来的研究证明细菌之间存在信息交流,许多细菌都能合成并释放一种被称为自诱导物质(autoinducer,AI)的信号分子,胞外的AI 浓度能随细菌密度的增加而增加,达到一个临界浓度时,AI能启动菌体中相关基因的表达,调控细菌的生物行为。
如产生毒素、形成生物膜、产生抗生素、生成孢子、产生荧光等,以适应环境的变化,我们将这一现象称为群体感应调节(quorum sensing.QS)。
这一感应现象只有在细菌密度达到一定阈值后才会发生,所以也有人将这一现象称为细胞密度依赖的基因表达(cell density de- pendent control of gene expression)。
[1]自身诱导物质AI细菌可以合成一种被称为自身诱导物质( auto-inducer .AI ) 的信号分子,细菌根据特定的信号分子的浓度可以监测周围环境中自身或其它细菌的数量变化,当信号达到一定的浓度阈值时,能启动菌体中相关基因的表达来适应环境的变化,如芽胞杆菌中感受态与芽胞形成、病原细菌胞外酶与毒素产生、生物膜形成、菌体发光、色素产生、抗生素形成等等。
根据细菌合成的信号分子和感应机制不同,QS系统基本可分为三个代表性的类型:革兰氏阴性细菌一般利用酰基高丝氨酸内酯( AHL) 类分子作为AI ,革兰氏阳性细菌—般利用寡肽类分子(Al P) 作为信号因子,另外许多革兰氏阴性和阳性细菌都可以产生一种AI - 2的信号因子,一般认为AI - 2是种间细胞交流的通用信号分子,另外最近研究发现,有些细菌利用两种甚至三种不同信号分子调节自身群体行为,这说明群体感应机制是极为复杂的。
细菌信息素的特点1,分子量小:细菌信息素都是一些小分子物质,如酰基-高丝氨酸内酯(AHL)衍生物、寡肽、伽马一丁内酯等,能自由进出细胞或通过寡肽通透酶分泌到环境中,在环境中积累。
植物病原菌的检测原理

植物病原菌的检测原理植物病原菌的检测原理主要分为传统检测方法和分子检测方法两大类。
传统检测方法包括病斑观察、显微镜检测、分离培养、生化、免疫学和生物学检测方法等;分子检测方法主要包括PCR、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、荧光定量PCR、内参PCR、两步PCR、多重PCR、血清学检测、微阵列分析、测序等。
下面将详细介绍传统检测和分子检测方法的原理和应用。
传统检测方法1. 病斑观察法病斑观察是一种最简单、最常用的检测方法。
通过观察植物叶面、茎部等组织上的病斑症状特征,如色素改变、溃疡、软腐、凋萎等症状,判断植物是否感染了病原菌。
该方法通常用于狭义上的病原菌检测,即只能推断出可能存在病原菌,但不具备进一步鉴定病原菌的能力。
2. 显微镜检测法显微镜检测是通过放大被检测样品的细菌菌落、孢子、分生孢子等微观结构,借助显微镜观察和鉴定病原菌的一种方法。
该方法通过观察病原菌的形态、大小、染色性质、分离和生长特征等,与已知的病原菌进行比对,确定植物感染的病原菌种类。
3. 分离培养法分离培养法是通过将被检测的植物组织样品分离培养于富含营养物的培养基上,利用病原菌的生长特性和营养需求进行分离纯化。
通过培养基的选择、温度、湿度、pH值、光照等条件的控制,使病原菌表现出明显的生理与形态特征,便于进一步鉴定和定量检测。
4. 生化检测法生化检测法主要是通过检测病原菌体内的一些特有的生化成分和活性,如酶活性、甘油分解酸生成、酸碱生成、氨氧化等,根据其特异性判断病原菌的类型和数量。
5. 免疫学检测法免疫学检测法主要是利用免疫学原理,通过检测样品中的病原菌抗原或抗体来判断其存在与否。
免疫学检测方法可分为免疫电镜检测、免疫荧光检测、ELISA等。
6. 生物学检测法生物学检测法是利用宿主植物对某一种病原菌的特异性反应来检测病原菌。
常用的生物学检测方法包括种子法、接种法、淫种法、耐病品种鉴定法等。
分子检测方法1. PCR检测法PCR(Polymerase Chain Reaction)是一种分子生物学技术,能在短时间内通过特异引物和聚合酶对DNA模板进行扩增。
植物病原细菌群体感应机制及其应用

, 向阳 卢
( . 江 师 范 学 院 生命 科 学 与 技 术 学 院 , 东 湛 江 54 4 ; . 南农 业 大 学 生物 科 学 与技 术 学 院 , 南 长 沙 4 0 2 ) i湛 广 208 2 湖 湖 1 18 要 : 体 感 应 是 细 菌群 体 行 为 的 一 种 调 控 机 制 . 群 自然界 中的 很 多细 茵 都 有 这 种 能 力 , 即分 泌 一 种 或 多 种 信
号 分 子 , 过 这 些 信 号 分 子 的 密度 来 感 知 茵群 密 度 , 控 一 系列 相 应 靶 基 因 的表 达.目前 ,已在 许 多革 兰 氏 阳性 茵 通 调 和 阴性 茵 中发 现 了群 体 感 应 系统 , 控 基 因 的表 达 . 文 综 述 了细 菌群 体 感 应 系统 的 研 究 进 展 及 其 应 用 . 调 该
t e 简称 AI ) 为信号 分子 感知 种 内 自身种 群数 量 , 调 多种基 因的表达 . i , d P作 协 还有 一类 信号 分子 是一 种 呋喃 硼酸 二 聚酯 ( 自体诱导 子 一2 a tid cr 2 简称 A 一2 , 种信 号 分 子 属 于吲 哚 及其 衍 生物 的高级 结 构 ,uon u e- , I )这
收 稿 日期 :O 0 I —0 2l一 1 2
基 金 项 目 : 东省 自然 科 学 基金 资 助 项 目(1 1 2 0 8 10 0 5) 广 东省 科 技 攻 关 项 目(0 6 2 1 11 ) 湛 江 师 范 学 院 科 研 广 0 5 4 4 0 0 00 ; 20B000 1;
形成 [ 菌体 发光 、 1 引、 细菌 运动等 多种 功能 都受 到细 菌群体 感应 的调 节. 目前 为止 , 体 感应 主要 有 两类 : 到 群 种
细菌群体感应在微生物生态系统中的作用研究

细菌群体感应在微生物生态系统中的作用研究细菌群体感应是一种自协调的细菌行为,细菌通过分泌信号分子来与它们周围的同种细菌进行通信,并协同地做出响应。
这种协作行为有助于建立细菌社区,并有助于它们在复杂的微生物生态系统中生存和繁殖。
本文将讨论细菌群体感应在微生物生态系统中的作用,并探讨该领域目前的研究进展。
1. 细菌群体感应的基本原理细菌群体感应是一种通过细菌间分泌的信号分子进行交流的行为,这些分子可以传递不同的信息,例如细胞密度、群体方向、环境变化等。
在感应过程中,当一定数量的信号分子被积累到足够数量时,细菌将协调做出共同的行为。
例如,一些细菌会通过群体感应来形成生物膜,从而形成细菌社区,或者来协同合成一些生物活性物质,如光合色素、激素、抗生素等。
这些共同的行为有助于细菌在微生物生态系统中生存和繁殖。
2. 细菌群体感应在微生物生态系统中的作用细菌群体感应在微生物生态系统中起着至关重要的作用。
首先,它有助于细菌建立稳定的细菌社区,并与其他细菌、微生物甚至宿主紧密相连。
这些细菌社区有时会形成生物膜,从而能够更好地抵御环境压力。
其次,它有助于细菌在微生物生态系统中发挥“分工协作”的作用,不同种类的细菌能够通过群体感应来分布不同的环境和角色,以最大化资源利用率并优化生态系统。
另外,细菌群体感应还发挥着各种生态学角色。
例如,在土壤微生物系统中,细菌群体感应可以促进植物生长和根际土壤释放养分。
一些细菌群体感应所产生的代谢产物还被发现对宿主免疫反应和免疫功能具有重要意义。
此外,细菌群体感应还被认为是生态系统中细菌和其他生物之间相互作用的重要媒介,它能够帮助生物维持相互联系并参与生态系统的稳定性。
3. 细菌群体感应的研究进展目前,细菌群体感应的研究进展日新月异。
这是因为细菌群体感应在医学、环境保护、农业等领域都有重要应用价值。
例如,在医学中,对细菌群体感应的深入研究能够有助于探索新型抗生素的生产和应用;环境保护中,它可以帮助减少有毒物质的生产和释放,改善微生物生态环境;在农业中,它能够协助控制农业害虫和植物病害。
几种常用植物病原细菌分子检测方法

种黄单胞菌 的 1S2S间隔 区进行序列 比较分析 , 6- 3
设计出的引物可以特异地、 灵敏地 检测出谷类种子
力一般 只能 达 到种 或 属 的水 平。许 多 r N 的 D A
通过质粒 D A 致病基 因和未 知 D A 序列来进行 N 、 N
检测 。利用质粒 D A 时需考 虑其稳定性 , N 除非此
质粒是编码适应性或致病性的基因。由于细菌的质
粒在某些环境 中易丢失 , 导致检测结果 的可靠性降
低, 因此质粒只适合对某些特殊病原菌的检测 。于
扩增核糖体 D A限制性酶切 分析 ( R R ) N A D A ,
t ig o i a d p e ito f ie s s n l maema a e n f ie s s s O da n ss n r dcino sa e ,a dut t n g me t s a er k .Th eh oo y d ie d a c si d i od i etc n lg -rv na v n e n
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第3 2卷第 6 (0 6 期 20 )
P ANT P OT C I Vo. 2N . 20 ) L R E T ON 13 o 6(0 6
几 冲常 用植 物病 原 细菌 分
尹燕妮, 黄艳霞, 葛芸英, 郭坚华
( 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室 , 南京
Ag iutr,Na jn rcl rlU ies y, nig 20 9 ,C ia rcl e u nigAg iut a nvri Na jn 10 5 hn ) u t
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植物相关细菌群体感应信号分子的检测*刘晓光1, 2, 高克祥2, 高吉刚31江苏大学生命科学研究院镇江(212013)2山东农业大学植保学院泰安(271018)3 山东农业大学化学与材料科学学院泰安(271018)E-mail:xgliu66@摘要:许多革蓝氏阴性细菌以种群密度依赖的方式调控基因的表达,这种称为群体感应的调控机制主要基于细菌产生的可扩散的小分子信号物质——酰基高丝氨酸内酯(AHLs)。
通过组合使用灵敏度不同的系列报告菌株,基于琼脂平板的生物检测及反相C18薄层层析(TLC)分析,比较研究了3株植物固氮内生菌Herbaspirillum spp.和2株植物根际促生菌Serratia plymuthica产生AHLs的模式。
结果显示了植物细菌AHLs的多样性。
3株固氮内生菌Herbaspirillum spp.和S. plymuthica菌株IC1270都与小麦根际生防细菌Pseudomonas fluorescens 2-79具有相似的模式,产生OH-取代基的AHLs。
而2个S. plymuthica 菌株,从葡萄根际分离的IC1270和从油菜根际分离的菌株HRO-C48则产生完全不同类型的AHLs。
菌株IC1270主要产生OH-取代基的HHHL,HOHL, HRO-C48却产生无取代基的BHL , HHL 和优势种O-取代基的OHHL。
由此说明不同属的植物细菌可能具有相似的AHLs模式;相反,即使生态位相似的同种植物根际细菌S. plymuthica的不同菌株间,却可能产生完全不同类型的AHLs,似乎与亲缘关系无关。
关键词:Serratia plymuthica;Herbaspirillum spp.; 群体感应系统;酰基高丝氨酸内酯中图分类号:Q9331.引言在革蓝氏阴性细菌中,有3个重要的基因表达的全局调控系统,即GacA/GacS双因子信号转导系统(GacA/GacS two-component system),胁迫和稳定期的δ因子RpoS,以及细胞种群密度依赖的Quorum-sensing(QS)系统。
它们控制植物相关细菌的许多表型,如植物生长促进能力、致病性、次生代谢物的产生、生物膜形成以及蛋白和酶的分泌等[1]。
酰基高丝氨酸内脂N-acyl homoserine lactones(AHLs/acyl-HSLs)是许多革兰氏阴性细菌都产生的群体感应信号分子,它作为自身诱导物(autoinducer)在革蓝氏阴性细菌中介导以种群密度依赖和生长发育阶段(指数生长后期和稳定期)依赖方式的基因表达调控。
植物相关细菌的QS系统调控微生物种群之间以及与寄主植物之间的相互作用,包括共生、致病性、抗生素及胞外酶的产生等特性,因此在农业、医学、环境保护等领域具有广阔的应用前景。
而且AHLs在自然界中作为全局调控的信号分子,通常是在GacA/GacS两组分信号转导系统的控制之下。
许多研究已证实这3个全局调控系统之间存在着密切联系,交互作用(cross-talk)。
尽管有些结果相互矛盾,依然可以推测这种调控的级联反应在细菌中可能是一个普遍的现象[2, 3]。
本文通过组合使用多种系列灵敏度不同的AHLs信号分子的报告菌株或质粒,以植物根基金项目:本课题受国家自然科学基金(项目编号:30370954,30670030)资助际生防细菌Serratia plymuthica 菌株IC1270[4]和HRO-C48[5],以及3种具有固氮作用的禾本科植物内生细菌Herbaspirillum spp.[6-9]为供试菌株,初步研究并比较分析了不同类型的植物相关细菌产生AHLs信号分子的模式,为进一步阐明QS系统全局调控细菌和寄主植物互作的机制奠定基础,可为通过遗传操纵QS信号通路改善植物与生防或固氮细菌菌株的有益互作开辟新途径。
2.材料和方法2.1 材料2.1.1 菌株和培养条件本研究所使用的细菌菌株和质粒见表1。
液体或固体的LB/LA (Luria-Bertani broth and agar) 用于细菌的培养。
报告菌株和供试菌株分别于30℃或37℃振荡培养(140 rpm)至对数生长后期。
2.1.2抗生素本实验所用抗生素的工作浓度:氨苄青霉素(Amp), 100µg/ml;利福平(Rif),40µg/ml ;庆大霉素(Gm),30µg/ml;四环素(Tc),20µg/ml。
购于Sigma公司。
表1 供试菌株和质粒Tab1. Strains and plasmids used in this studyStrain or plamid Relevant characteristics* Reference or sourceAgrobacterium tumefaciens NTL4/pZLR4 Gm r Cb r; β-galactosidase induction-based acyl-HSL bioreporter 11 Chromobacterium violaceum CV026 Violacein production-based acyl-HSL bioreporter 12 Escherichia coli F-endA1 hsdR17 (rK _ mK +) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1DH5αΦ80d lacZ∆M15 λ- 13S17-1(λ-pir) thi pro hsdR hsdM recA rpsL RP4-2 (Tc r::Mu) (Km r::Tn7) 13 Pseudomonas fluorescens 2-79 phenazine+ production of 3-hydroxy acyl-HSLs 14 Serratia plymuthicaIC1270 Rif r, isolated from rhizosphere of grape in Uzbekistan 4 HRO-C48 Rif r, isolated from rhizosphere of oil rape in Germany 5 Herbaspirillum seropedicae 7 Herbaspirillum frisingense 8 Herbaspirillum rubrisubalbicans 9 PlasmidspSB401 Tc r, lux-based acyl-HSL bioreporter 15 pSB536 Amp r, lux-based acyl-HSL bioreporter 15 pSB1075 Amp r, lux-based acyl-HSL bioreporter 15* Amp r, ampicillin resistance; Gm r, gentamicin resistance; Tc r, tetracycline resistance; Rif r, rifampicin resistance.2.2 方法2.2.1 培养上清液中萃取AHLs信号分子:50 ml待测菌株的过夜培养物,通过离心除去细菌菌体,上清液用等体积的乙酸乙酯萃取2次,合并有机相,加入无水硫酸钠,过滤后通过旋转蒸发干燥, 回溶于1.5ml乙酸乙酯中。
进一步通过真空旋转蒸发浓缩,最终残余物溶解于50µl 乙腈中,于-20℃冰箱中保存,用于基于琼脂平板的生物检测和TLC分析。
2.2.2 基于琼脂平板的AHLs生物检测:不同的报告质粒或菌株对检测不同类型取代基以及碳链长度的AHLs 信号分子的灵敏度不同[2],本实验组合使用以下系列的报告质粒和菌株几乎可检测所有侧链长度和不同取代基的AHLs 信号分子。
参照文献[10]的方法,在已制备好的琼脂平板上,铺一层与不同报告菌株混合的0.6%的软琼脂,凝固后打孔(5mm ),孔内注入待测样品,并以合成的多种AHLs 标准样品(Sigma )为对照。
30℃恒温箱中孵育数小时或过夜培养,观察结果并拍摄照片。
应用报告质粒(pSB401, pSB536, pSB1075)分析检测上述AHLs 提取物的生物发光(lux -based )能力,发射的光线通过CL-BIS 发光仪 (DNR Imaging Systems Ltd.)监测。
报告菌株Chromobacterium violaceum CV026产紫色素分析由样品孔周围细菌菌苔产生的深篮紫色的色素指示AHLs 信号分子的产生;报告菌株Agrobacterium tumefaciens NTL4/pZLR4在X-Gal (40µg/ml) 存在时诱导β-半乳糖苷酶的产色分析参考文献[7]的方法,样品孔周围扩散的蓝色区带指示AHLs 信号分子的产生。
2.2.3 AHLs 信号分子的TLC 分析[11]:通常取5µl 的乙酸乙酯提取液点样于RP18,F 254S 反相TLC 平板(德国Merck ),展开剂为甲醇:水(60:40,vol/vol )。
约4h 充分展开后,溶剂被蒸发,干燥的TLC 平板用混有不同报告菌株的软琼脂(0.6% agar )覆盖。
琼脂凝固后,至于密闭的塑料容器中30℃恒温箱中孵育数小时或过夜培养,观察结果并拍摄照片。
以合成的AHLs 标样作对照。
3. 结果与分析3.1 S . plymuthica IC1270 和Herbaspirillum spp. 菌株AHLs 的检测分析3.1.1琼脂平板检测结果:使用产生蓝色斑点的报告菌株A. tumefaciens NTL4/pZLR4(图1A )和生物发光的报告质粒pSB401(图1B )时,菌株IC1270都表现阳性反应;而产紫色素的报告菌株Chromobacterium violaceum CV026和报告质粒pSB536, pSB1075都不能检测到菌株IC1270 AHLs 信号分子的产生,表现阴性反应。
也说明菌株IC1270不产生长链的信号分子(≥C 10-HSLs )和短链的BHL(N-butanoyl-L-HSL)。
而使用报告菌株 A. tumefaciens NTL4/pZLR4时,3个Herbaspirillum spp. 菌株样品孔周围都产生蓝色区带,表现阳性反应(图1A ),产生AHLs 。
图1 在琼脂平板上检测S. plymuthica IC1270 和Herbaspirillum spp.产生的AHLs 信号分子Fig 1 Detection of AHLs produced by S. plymuthica IC1270 and Herbaspirillum spp. on agar-plates with A.tumefaciens NTL4/pZLR4 reporter (A) and pSB401 lux reporter (B)OHHL: standard; IC1270: S. plymuthica IC1270; H1: H.seropedicae ; H2: H. frisingense ; H3: H. rubrisubalbicans3.1.2 AHLs 信号分子的TLC 分析:经TLC 分离后,使用混有报告菌株A. tumefaciens NTL4/pZLR4和x-gal 的软琼脂铺平板,与标准样品比较,并以生防菌P. fluorescens 2-79的AHLs (Lane 6)为参照[14],结果显示S. plymuthica 菌株IC1270产生至少3种可检测水平的羟基取代基的HHHL(N-3-hydroxy-hexanoyl-L-HSL)和HOHL(N-3-hydroxy-octanoyl-L-HSL)及1种未知的信号分子; 而3个Herbaspirillum spp. 菌株产生2种可检测水平的羟基取代基的HHHL (R f =0.56)和HOHL( R f =0.30)。