一、常用灭菌消毒方法
医疗机构常用的消毒与灭菌方法
（1）墙面消毒：医院墙面在一般 情况下污染情况轻于地面，通常不 需要进行常规消毒。当受到病原菌 污染时。可采用化学消毒剂喷雾或 擦洗，墙面消毒一般为 2.0—2.5 米 高即可。喷雾量根据墙面结构不同， 以湿润不向下流水为度，一般 50— 200ml/m2
（2）地面消毒：医院地面经常受 到病人排泄物、呕吐物、分泌物的 污染，由于人员的流动量大，如果 不能及时清除地面污染，极易造成 病原菌的扩散。 当地面无明显污染情况下，通常 采用湿拭清扫，用清水或清洁剂拖 地每日 1 次 —2 次。当地面受到病原 菌污染时，通常采用含氯消毒剂 200-500mg/L 消毒，作用 30 分钟。致 病性芽孢菌污染时消毒剂浓度加大
（5）物品捆扎不宜过紧，外用 化学指示胶带贴封，灭菌包每大 包内和难消毒部位的包内放置化 学指示物。
3、装载 ⑴下排气灭菌器的装载量不 得超过柜室内容量的 80% ；预真 空灭菌器的装载量不得超过柜室 容积的 90% ，同时预真空和脉动 真空压力蒸汽灭菌器的装载量又 分别不得小于柜室容积的 10% 和 5%，以防止“小装量效应”。
循环风紫外线空气消毒器： 该消毒器是依靠风扇或风机，将 室内的空气吸入消毒器内，经紫 外线通道内紫外线灯照射后再将 空气经出口排出，这样循环消毒 室内空气。开机30min后即可达 到消毒要求，以后每过15min开 机1次，消毒15min，一直毒灯的安装位置和照射 距离对杀菌效果至关重要，用于 空气消毒的紫外线灯可以采用垂 直正向照射、反向照射和侧向照 射。吊装即将紫外线灯吊装在天 花板距离地面2．0±0．2m的高 度，进行垂直正向照射；
悬吊紫外线灯对室内空气消 毒可用“直接照射法”，适合于 无人条件下，一般从开灯计算， 连续照射不少于30min，可使静 态空气达到消毒要求。
实验室六大常用消毒灭菌方法
实验室六大常用消毒灭菌方法实验室六大常用消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、湿热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
分为三种:（1）流通蒸气灭菌法：是指在常压条件下，采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
（2）间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
（3）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。
2、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120oC～150oC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
3、射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
一、常用灭菌消毒方法
一、常用灭菌消毒方法
1. 蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽的热效应消灭微生物，主要应用在医疗用品和实验室器械的灭菌。
2. 热空气灭菌：利用高温热空气的灭菌效应，通常需要较长的时间，主要应用在器械、玻璃器皿等物品的灭菌。
3. 紫外线消毒：利用紫外线的辐射杀灭细菌，要求环境干燥，通常应用在医院、实验室等场所的空气消毒。
4. 化学消毒：通过化学灭菌剂的作用杀死细菌，消毒剂不同种类、浓度、用途不同所得的效果也不同。
5. 过滤消毒：通过过滤方法将细菌过滤掉，常用于饮用水的消毒。
6. 电离辐射灭菌：利用高能电子束、γ射线等电离辐射对细菌进行杀死，主要应用于医疗器械、食品、药品等领域的消毒。
7. 臭氧消毒：利用臭氧气体的氧化反应杀死细菌，通常应用于污染严重的空气和水体消毒。
常用物品消毒灭菌方法
2、不耐高温、不耐湿热如电子仪器、光
学仪器等物品低温灭菌
3、耐热不耐湿的采用干热灭菌
4、对不耐热、耐湿的首选低温灭菌，无条件的医疗机构可采用灭菌剂浸泡灭菌
一用一灭菌
应取消在手术室清洗，由供应室集中清洗
锐利器械（含刀片、剪刀、穿刺针等）
1、机械清洗或手工清洗
2、穿刺针内腔用高压（气）水枪冲洗、超声波清洗
1、压力蒸汽灭菌
2、环氧乙烷、低温等离子等灭菌
3、2%戊二醛溶液浸泡10小时
一用一灭菌
其它：口圈、注水瓶、连接管、吸引管、吸引瓶等
按照规范在流动水槽内手工冲洗（酶洗、清洗、干燥）
500mg/L含氯消毒剂浸泡消毒30分钟，清水冲净残留消毒液干燥后备用
口圈一用一消毒；连接管等每日消毒
可以使用一次性口圈
皮肤粘膜
1、压力蒸汽灭菌
2、可选环氧乙烷、过氧化氢等离子体低温灭菌
3、严禁戊二醛浸泡灭菌
一用一灭菌
镀铬器械、眼科精细器械不适宜采用超声波清洗。
腔镜及附件（腹腔镜、膀胱镜、关节镜、胸腔镜、脑室镜、宫腔镜、胆道镜等）
1、所有腔镜都必须拆卸到最小单位进行清洗
2、按照规范使用水枪、气枪
对腔镜进行冲洗、酶洗、
清洗、干燥；
2、邻苯二甲醛浸泡消毒≥5分钟
3、酸性氧化电位水：适用于胃肠内镜
4、内镜消毒器消毒，详见产品说明书。
清洗用具一用一消毒或一次性使用
1、消毒液按时测试浓
度并记录，浓度不符随
时更换；
2、消毒浸泡时必须将
内镜孔道注满消毒液
内镜附件：导丝、网篮、导管、细胞刷、异物钳、圈套等
按照规范在流动水槽内手工冲洗、超声清洗机中加入酶洗液超声清洗5-10分钟、高压水枪冲洗、高压气枪吹干
5种常用的物理消毒灭菌法
5种常用的物理消毒灭菌法
物理消毒灭菌是指使用物理特征（温度、湿度、光照、压力等）
来杀灭病菌，净化环境的方法。
物理消毒手段有很多种，下面介绍五
种常用的物理消毒灭菌法。
1、热消毒灭菌。
热消毒是把适当的温度加以控制，在一定的时
间内杀死病菌的方法。
生活中有很多热消毒方法，如烤、烧、熬、卤、煮等。
热消毒灭菌对对抗病菌效果很好，但温度不能太高，以免损害
物质本身。
2、光线灭菌法。
在室内我们常用的是紫外线灭菌。
紫外线是一
种高能物理波，可以穿透物体表层细胞膜，分解和氧化细菌，从而达
到灭菌的目的。
3、压力消毒灭菌。
压力消毒是把物品放在密闭的容器中，加压
或者是因压缩到较高的压力状态，来得到消毒的作用，从而得到灭菌
的效果。
4、干消毒灭菌。
指的是将物品放在50～60摄氏度、湿度室内，
放置一段时间内杀菌的方法。
干消毒灭菌比较方便，可以消毒木器、
布艺等，广泛用于家具、家电杀菌消毒使用。
5、高压水灭菌法。
是把高压的纯净水分散在物体表面消毒的一
种方法。
高压水灭菌法有温效应，高压水灭菌消毒有杀菌作用，同时
也可以从外面洗去各种污染物，是当前使用最多的一种消毒灭菌方法
之一。
以上就是五种常用的物理消毒灭菌法，各有其特点，又能有效灭菌，因此得到广泛应用。
作为一种比较无害的灭菌方式，物理消毒灭
菌方法被大量使用，极大地减少了有害物质及有毒物质的污染，提高
了社会生活质量。
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总1、热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。
在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。
2、干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20％以下的高热。
干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。
一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160－170℃经2小时方可杀死。
燃烧法：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。
烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。
将器械放在火焰上烧灼1－2分钟。
若为搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1－2分钟。
采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2－3次。
燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。
燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。
锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。
焚烧某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。
3、电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌。
培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。
一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160－170℃经2小时方可杀死。
热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。
灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。
4、微波消毒微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。
目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。
灭菌方法
灭菌方法灭菌是一种常见的消毒方法，用于杀灭病菌、病毒和其他微生物，以保证环境的卫生和人体的健康。
在日常生活中，灭菌方法被广泛应用于医疗卫生、食品加工、实验室等领域。
下面将为大家介绍几种常用的灭菌方法。
一、物理灭菌物理灭菌是通过热力、辐射或过滤等物理手段杀灭病菌的方法。
其中，常用的物理灭菌方法包括高温灭菌、紫外线灭菌和过滤灭菌。
高温灭菌是最常见的物理灭菌方法之一，其原理是利用高温破坏病菌的细胞结构，进而杀死病菌。
常见的高温灭菌设备包括高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱等。
在医疗卫生领域，高压蒸汽灭菌器被广泛应用于灭菌手术器械和医疗用品。
紫外线灭菌利用紫外线的辐射杀灭病菌，其原理是紫外线破坏病菌的核酸和蛋白质结构。
紫外线灭菌常用于空气、水和表面的消毒，如医院手术室、实验室等空间的空气消毒。
过滤灭菌是通过过滤器将病菌截留下来，从而达到杀灭病菌的目的。
常见的过滤灭菌方法包括微孔过滤和纤维过滤。
微孔过滤主要适用于液体的灭菌，可以有效去除大部分细菌和病毒。
纤维过滤主要适用于空气的灭菌，可以将空气中的微生物截留下来。
二、化学灭菌化学灭菌是利用化学物质对病菌进行杀灭的方法。
化学灭菌常用于表面的消毒和器械的消毒。
常见的化学灭菌方法包括酒精消毒、氧化剂消毒和酶消毒。
酒精消毒是一种常见而简便的化学灭菌方法，常用的酒精消毒剂包括乙醇和异丙醇。
酒精消毒具有广谱杀菌作用，对大部分病菌具有良好的灭菌效果。
然而，酒精对芽孢和病毒的杀灭作用较差，因此不能替代高温灭菌。
氧化剂消毒利用氧化剂对病菌进行氧化还原反应，破坏病菌的细胞结构。
常用的氧化剂消毒剂包括过氧化氢、高锰酸钾等。
氧化剂消毒具有广谱杀菌作用，可以有效杀灭病菌。
酶消毒是一种较为温和的化学灭菌方法，其原理是利用酶对病菌的细胞壁进行降解。
酶消毒常用于器械和医疗用品的清洗和消毒，能够有效去除附着在表面的病菌。
三、生物灭菌生物灭菌是利用某些微生物对病菌进行杀灭的方法。
常见的生物灭菌方法包括发酵灭菌和放线菌灭菌。
实验室常用消毒灭菌方法
实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等，每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、湿热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
分为三种:（1）流通蒸气灭菌法：是指在常压条件下，采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
（2）间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
（3）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。
2、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC～150ºC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
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一、常用灭菌消毒方法
一、常用灭菌消毒方法
1、干热灭菌法
火焰灭菌（灼烧灭菌）、干热灭菌
2、湿热灭菌
巴氏消毒、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、间歇加热灭菌、实罐灭菌
3、过滤除菌
4、放射线灭菌
二、常用的消毒剂
理想的消毒剂：杀菌力强，使用方便；价廉；对人、畜无害；能长期保存；溶解度大；无腐蚀性等。
消毒剂种类：氧化剂、重金属盐、有机化合物
相对药效：
三、影响灭菌与消毒因素
1、微生物种类
2、培养基
3、消毒剂
4、环境因素
5节：化学疗剂对微生物作用
能直接干扰病原微生物的生长繁殖并可用于治疗感染性疾病的化学药物。
化学疗剂能选择性地作用于病原微生物新陈代谢的某个环节，使其生长受到抑制或致死。
一、抗代谢物
结构上类似，竞争性地与酶结合，只有当正常代谢物量少或不存在时才起作用。
最常用的是磺胺类药物。
是氨苯磺胺衍生物，其结构与对氨基苯甲酸（PABA）类似，而PABA是叶酸分子组成。
叶酸是辅酶，在氨基酸、维生素合成中起重要作用，许多细菌需自己合成叶酸，而人和动物利用现成叶酸，因此不受磺胺干扰。
还有异烟肼rimifon，是吡哆醇对抗物。
二、抗生素
作用范围：抗菌谱
作用位点：
1、抑制细胞壁合成：青霉素，多氧霉素
2、影响细胞膜功能：多肽类，多烯类
3、干扰蛋白合成：抑制而非杀死
4、阻碍核酸合成：对细胞有毒
三、微生物抗药性
对药物的适应性即是抗药性。
抗药性主要表现（产生机制）
1、菌体内产生钝化或分解药物的酶
2、改变膜的透性而导致抗药性产生
3、被药物作用的部位发生改变
4、形成救护途径。
五章：微生物遗传
遗传heredity—亲代将其特有的生物学特性传递给子代。
遗传性—子代总保持与亲代相同的生物学特性。
遗传型genotype—生物体所具有的全套遗传物质总称。
又称基因型。
表型phenotype—特定环境中生物体表现出的种种形态与生理特征。
变异variation—遗传型的改变。
适应或饰变modification—表型的改变。
基因—指带有足以决定一个蛋白质全部组成所需信息的最短DNA片段。
菌株&克隆—指一组遗传型相同的细胞群。
微生物在遗传上特点：
1、微生物细胞结构简单，营养体一般为单倍体，方便建立纯系。
2、很多常见微生物都易于人工培养，快速、大量生长繁殖。
3、对环境因素的作用敏感，易于获得各类突变株，操作性强。
大多是无性生殖，变异易保留。
1节：遗传变异的物质基础
一、证明经典实验
（一）转化实验
1928，Griffith首次发现Streptococcus pneumoniae的转化现象。
1944，Avery等在离体条件下重复这一实验，并对转化本质进行了研究。
终于证明了DNA是遗传物质。
Griffith转化实验：
Avery转化实验
（二）噬菌体T2的感染实验
1952，Hershey & Chase 用E. coli, phage T2做材料，利用同位素示踪法进行实验。
蛋白质只含S不含P，DNA只含P不含S，分别用35S、32P 标记E. coli, 用T2感染，得到35ST2、32PT2。
实验过程（插入）
（三）病毒拆开与重建实验
1956，Fraenkel & Conrat 用TMV（烟草花叶病毒）和HRV （霍氏车前病毒）进行实验，说明遗传信息在RNA中。
（插入）
二、遗传物质在细胞中存在方式
（一）细胞水平
（二）核水平（plasmid）
（三）染色体水平
（四）核酸水平
（五）基因水平（遗传功能单位）
（六）密码子水平（遗传信息单位）
（七）核苷酸水平（最低突变或交换单位）
染色体外遗传物质—质粒
染色体外，独立存在的，能自主复制的遗传物质。
双股环状DNA，可游离存在，也可整合到宿主DNA上。
吖啶类染料、高温、某些离子作用可消除质粒。
附加体episome：质粒插入到染色体上和染色体一起复制。
质粒种类
1、F因子（致育因子）：大肠杆菌中发现，含质粒为F+（♂）；无质粒为F-（♀）；质粒DNA整合到染色体上为Hfr.
2、R因子（耐药性）：痢疾杆菌，多价耐药性，耐药信息携带在质粒上。
3、Col因子（大肠杆菌素产生因子）
4、青霉素酶质粒
5、Ti质粒（诱癌质粒）：植物根癌，植物基因工程重要载体。
6、降解质粒：Pseudomonas
隐蔽质粒、表达质粒、分泌质粒等。
←
2节：基因突变
突变mutation—遗传物质核酸中的核苷酸顺序突然发生了可遗传的变化。
包括基因突变（点突变）—由于DNA链上的一对或少数几对碱基发生改变而引起。
染色体畸变—DNA的大段变化现象，表现为插入、缺失、重复、易位、倒位。
由于重组或附加体等外源遗传物质的整合而引起的DNA改变，不属突变范围
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教学教案录入：admin 责任编辑：admin。