酯酶同工酶
5种家蚕不同龄期酯酶同工酶的比较研究
安徽农业科学 ，ｏｒａ ｏ Ａ ｈｉ ． ｃ．Ｏ６ ３ （１ ：５０ ５ １ Ｊｕｎｌ ｆ ｎｕ Ａ Ｓｉ Ｏ ，４ ２ ）５７ —５７ ２
责任编辑
罗芸
责任校对 罗芸
５种 家蚕 不 同龄 期 酯 酶 同工 酶 的 比较研 究
吴三桥， 锐 （西 资 生 重 实 室陕 汉 ２０ 丁 陕 省 源 物 点 验 ，西 中７０） ３０
同工酶分析是研究昆虫遗传变异 、 物种进化及种属鉴定 的重要手段。它的合成主要受遗传基因控制， 具有一定的遗 传稳定性 ， 可作为遗传特性的生化标记； 亲缘关系越近的种
类， 其酶谱相似性 越大ｌ 。国内外许 多研 究者 在利用 同工酶 １ Ｊ 研 究生 物的地 理分 布及起 源 、 种属 间 的亲缘 关 系 、 品种群 的 分类 、 传变异 、 遗 远缘 杂 交 、 杂种 优势 利用 等 方 面 ， 获得 了一
定 的进 展。Ｍｌｓ ｉ
于一０ ２ ℃冰箱 中预 冷 ３ 后 迅速取 出于冰浴 下加 样 品提 取液 ｈ ２ ， 浆 ， 浆 液 移 入 １５ｍ 高 速 离 心 管 中 ， 滴 匀 匀 ． ｌ ４℃ １ ０ ００ ２
ｒ ｉ ／ ｎ ａ ｒ 离心 ８ ｉ， ｎ所得上清液于 一 ０ ｍ ２ ℃冰箱中冷冻保存备用。
１２３ ＥＴ同工酶 电泳 。采用 聚丙 烯 酰胺 凝胶 垂 直夹 芯 式 ．． Ｓ
电泳法 ， 不连续电泳。凝胶的制备参照文献［ ］略有修改 。 ９，
实验采用 Ｔ＝６ 、Ｈ＝８９的分 离 胶 和 Ｔ＝２ ５ 、Ｈ＝６ ８ ％ ｐ ． ．％ ｐ ．
的浓缩胶 ， 加样 ２ ｌ ０ 。恒流 加 ｍ ， ｍ Ａ 电泳 ５ ６ ， ～ 溴酚 蓝 为指 ｈ
检索表 。Ｂｒｃｅ Ｔ ｈ ｔａ 利 用 同工酶 电泳 编 制 了实蝇 科 ｅｏ ｒ ｅ ｒ ｄ ｌｈ ｐ ｉ ｅ ｉ Ｔｐｒｉ ｅ ９ 绕实蝇 Ｒａ ｌｉ的幼虫 和蛹的 同工酶 电泳 ｅｈｔａ 的 种 ｉ ｄ ｈｇｅｓ ｏｔ 检索表 ｌ。邓 晓峰 等利用 酶 电泳探 讨 了斑 潜蝇 分类 鉴 定技 ２ 术 。李静 等利用 同种 方法 研究 了酯 酶 同工 酶在 半翅 目昆 ３ Ｊ 虫 中的分类 学 价值 。。杨 贵 军等也 对 不 同发育 阶段 的多 毛 ４ Ｊ 宽 漠甲体内的酯酶 同工酶进行 了比较 研究 ＿。 ５ Ｊ 家蚕 （ ６ ｏ Ｌ ｎｅｓ作 为分 类 学上 的一 个 物种 ， １ ｒ ｉ ａｕ） ｍ ／ ｎ 地 理上分 中国系统 、 本 系统 、 洲 系统和 亚热 带及 热带 系 日 欧 统等４ 大系 统 ， ５０多个 品 种 ， 有 ０ 其生 态 和 经济 性状 各 具 特 征 。 目 有关家蚕 的同工酶研 究未见 报道 。因此 ， ６ Ｊ 前 笔者 采 用垂直板 聚丙烯酰 胺凝 胶 电泳 技术 对 ５ 种家 蚕 不同 发育 阶 段 的酯 酶同工酶谱进行 了 比较分析 ， 以期探讨 家蚕不 同龄 期 酯 酶同工酶的变化规律 ， 及其在 家蚕分 类学 上的研究 利用 价 值， 为家蚕的进一 步研究提供一 定的理论依 据 。
磷酸二酯酶的同工酶
磷酸二酯酶的同工酶磷酸二酯酶（phosphodiesterase，简称PDE）是一类酶，它能够催化磷酸二酯键的水解反应。
磷酸二酯酶在细胞中起着重要的调节作用，参与多种生物过程的调控，如细胞信号转导、代谢调节等。
由于磷酸二酯酶的同工酶在结构和功能上存在差异，因此研究其同工酶对于深入理解细胞调控机制具有重要意义。
磷酸二酯酶的同工酶可以根据其底物的特异性进行分类。
常见的有cAMP特异性磷酸二酯酶（PDE4、PDE7等）和cGMP特异性磷酸二酯酶（PDE5、PDE6等）。
这些同工酶在底物特异性上存在差异，因此对细胞内信号分子cAMP和cGMP的水解具有特异性，从而对细胞信号转导通路产生不同的调控效应。
以cAMP特异性磷酸二酯酶（PDE4）为例，它是一类重要的同工酶，在细胞信号转导中起着关键的调节作用。
PDE4能够水解细胞内的cAMP，降低其浓度，从而影响cAMP介导的信号传递。
cAMP是一种重要的第二信使，参与多种生理过程的调控，如细胞增殖、分化、凋亡等。
PDE4的活性调节了细胞内cAMP水平的动态平衡，从而影响细胞功能的调节。
PDE4在多种细胞类型中广泛表达，包括神经元、肌肉细胞、免疫细胞等。
研究发现，PDE4的异常活性与多种疾病的发生和发展密切相关。
例如，PDE4在中枢神经系统中的高表达与精神类疾病（如抑郁症、焦虑症等）的发生有关。
因此，研究PDE4的调节机制和开发PDE4选择性抑制剂，对于治疗这些疾病具有重要的临床意义。
除了cAMP特异性磷酸二酯酶，cGMP特异性磷酸二酯酶也是研究的热点之一。
cGMP特异性磷酸二酯酶能够水解细胞内的cGMP，从而调节细胞信号转导通路。
cGMP作为重要的第二信使，参与多种生理过程的调控，如血管舒张、细胞增殖、神经传导等。
因此，cGMP特异性磷酸二酯酶的调节对于维持细胞内cGMP水平的平衡具有重要作用。
磷酸二酯酶的同工酶不仅在底物特异性上存在差异，其结构和功能上也有所不同。
荞麦酯酶同工酶研究
Ａ ｓ ａ ｔＴ ｅｅｔ ａｅｉ ｚｍ ｆｗ ｎｙｆｕ ｏｌ ｔ ｎ ｆ ｕｔ ａ ｄｂ ｃｗ ｅｔ Ｆ ｅ ｕｅｔｍ ａ ｄＦ ｔｔｒ ｂ ｔ ｃ ：ｈ ｓ ｒｓ ｏｙ ｅｏ ｅｔ－ ｒ ｌ ｃｉ ｓ ｌｖｔ ｕ ｋ ｈ ａ（ ．ｓ ｌ ｕ ｎ ．ａａｉ ｒ ｅ ｓ ｔ ｏ ｃ ｅ ｏ ｏｃ ｉ ｅ ｃ ｎ —
第３ ０卷
第 ６期
２ １ 年 ６月 ０１
种
子
（ ｅｄ Ｓｅ ）
荞 麦 酯 酶 同 工酶 研 究
张 以忠 张 ， 云 邓 琳琼 蹇 ， ， 黎 游 ， 萍 胥献 宇 ， （． 节学 院环 境与 生命 科学 系 ， 贵州 毕 节 ５ １０ ； １毕 ５ ７０ ２ 毕节 学 院岩溶 山区生态 建设 研究 所 ， 贵 州 毕 节 ５ １０ ） ． ５ ７０
（ ． ｅ ａ ｍ ｎ ｏ ｎ ｉ ｎ ｅ ｔ ｎ ｉ ｃｅ ｃ ，ｉｅＵ ｉｅｓｙ Ｂｊ ｕｚｏ ５ ７ ０，ｈｎ ； １ Ｄ ｐ ｒ ｅ ｔ ｆ ｖ ｏ ｍ ｎ ａ ｄＬｆ Ｓ ｉ ｅ Ｂｊ ｎｖｒ ｔ， ｉｅＧ ｉ ｕ５ ０ Ｃ ｉａ ｔ Ｅ ｒ ｅ ｎ ｉ ｉ ｉ ｈ １
２ Ｉｓ ｔｔ ｏ ｃｌｇ ａ Ｃ ｎｔ ｃｉ ｆ ａｓ Ｍｏ ｎａ ｒａ Ｂｊ ｎ ｅ ｉ ， ｉｅＧ ｉ ｏ ５ ７ ０， ｈｎ ） ．ｎｔｕｅ ｆ ｏ ｉ ｌ ｏ ｓ ｕｔ ｎｏ ｒ ｕ ｔ ｎＡ ｅ ， ｉｅＵ ｉ ｒ ｔ Ｂｊ ｕｚ ｕ５ ０ Ｃ ｉａ ｉ Ｅ ｏｃ ｒ ｏ Ｋ ｔ ｉ ｉ ｖｓ意（ ２ ｉ） ， 自 约 ０ ｎ 后 用 来 ａ ｒ 水冲洗 ， 拍照后放人 ７ 的乙酸中保存 。 ％
１ ３ 数 据分 析方 法 ．
本研究采用系统聚类法 ， 首先将各样本看成一类 ， 有酶带数计为 １无酶带计为 ０ 使用 ｓ Ｓ １ １ ， ， Ｐ ｓ１． 分析 软件 ， 利用欧氏距离计算样品间距离 ， 用最短距离法计 算类群间距离， 按系统 聚类分析方法对 收集 系进行聚
过氧化物酶和酯酶同工酶
过氧化物酶和酯酶同工酶过氧化物酶和酯酶同工酶是两种常见的酶类，它们之所以被称为“同工酶”，是因为它们在酶学特性上相似，并且具有相同的催化能力。
然而，这两种酶在生化学结构、生理生化功能、催化机理等方面也存在着一些区别。
了解它们的区别和联系有助于我们更深入地研究其在生命活动中的作用和应用。
过氧化物酶是一种广泛存在于生物体内的酶类，它可以催化过氧化物的分解，同时将有害的氧自由基转化为无害的水和氧气。
过氧化物酶的分子结构主要由四个亚基组成，每个亚基都包含一个五配位的铁原子和一个蛋白质分子，其中铁原子是过氧化物酶催化作用的关键所在。
过氧化物酶在生物体中具有重要的生理生化功能，在人类身体中可以清除有害氧自由基，促进身体健康。
酯酶同工酶是另一种常见的酶类，它能够催化酯水解反应，将酯分子水解成酸和醇。
酯酶同工酶广泛存在于细胞质和细胞膜上，其分子量一般在30-100kDa之间，结构复杂。
酯酶同工酶在生物体中具有重要的生理生化功能，例如参与食物消化、维持神经递质平衡、调节胆固醇代谢等。
虽然过氧化物酶和酯酶同工酶在催化方式上有所不同，但是它们都具有类似的酶学特征，如对温度、酸碱度等条件的敏感性，对催化剂和底物的选择性等，这些都是由酶分子的结构和催化机理所决定的。
此外，过氧化物酶和酯酶同工酶在实际应用中也有很多相似之处，例如用于环境监测、药物化学和生物工程等领域。
总之，过氧化物酶和酯酶同工酶是两种重要的酶类，它们在生物体内分别发挥着不同的生理生化功能，同时具有相似的酶学特征和应用价值。
我们需要加强对这两种酶的研究和应用，探索它们在生命科学、医药和环境保护等领域中的新型应用前景。
酯酶同工酶标记鉴定加拿大披碱草和老芒麦的杂种后代纯度研究
收稿 日期 ：ｏ ７ －０ ２０ ７３
基金项 目： 绿色农业发展关键技术 集成研究与产 业化示 范（ 目编号 ： 项 ２０ ０ ０ ） 加拿大披碱草与老芒 麦的杂种 Ｆ 代 的遗 传特性 ０６２１ ； ２ 研究（ 目编号 ： Ｎ０ ５２ ） 项 Ｑ ００ ２ 。 作者简介 ： 李景环 （ ９２一） 女 ， １７ ， 在读博 士研究 生 ， 讲师 ， 主要从事分 子 生物学 ， 遗传学等 的教学与科研工作 。
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问题探讨
李景环 等 ： 酯酶同工酶标记鉴定加拿大披碱草和老芒麦 杂种后代 的纯度研究
酯 酶 同工 酶 标 记 鉴定 加 拿 大 披 碱 草 和 老 芒 麦 的 杂 种后 代 纯 度研 究
李 景环 。 云锦凤 王树彦 郭利 军 高晓波 孟 庆 臣 － 一 ， ， ， ， （． １ 内蒙 古农 业 大学生 态环 境学 院 ， 呼和 浩特 ００ １ ； １０９
表 １ 供 试材料及 其基本情 况
蛋 白质和酶都是生物体遗传物质染色体结构基因 Ｄ Ａ的初级 或次 级产物 ， 以看 作 是结 构基 因 的一种 Ｎ 可
外 部标记 物 。不 同种 及不 同变 种 的生 物不但 外部 形态 有 差异 ， 由于其 结构基 因的差 别 ， 表 达产物 酶和 蛋 白 其
和 目标 性 状 植 物 的检 测 。
关键词 ： 加拿大披碱草 ； 老芒麦 ；杂种 Ｆ 、Ｆ ； 。 酯酶 同工酶
中图 分 类 号 ： ￥ １ ５２ 文 献标 志码 ： Ａ 文 章 编 号 ： １０ －７ ５ ２ ０ ） １ ）５ｏ ０ １ ０ （０ ７ １ ７ ＿２ ４
供试材料为选 自内蒙古农业大学牧草试验站的加 拿 大 披 碱 草 （ ｌ ｕ ａ ｄｎｉ 和 老 芒 麦 Ｅｙ ｓ ｎ ｅｓ ） ｍ ｃ ｓ （ ．ｉｉｃｓ Ｅ ｓ ｒ ｕ）及其 杂种 Ｆ 、２具 体表 １ ｂｉ １Ｆ ， 。
青岛市19个樱花品种的酯酶同工酶鉴定
ｒｔ ｍ ｅｉ ｅａ ｅ ｉｈ ｔ Ａｖ ｒ ｇ ）ｍ ｅｈ ｄ １ ｅ ａ ｕ ｕｔｖ ｒ ｒ ｉｉｅ ｔ ＷＯ ｇ ｏ ｐ ａ ｅ ｎ ｔ ｅｃ ａ ｉｔ ｒｓｉｓ ｃ ｔ ｏ ． Ｃ ｒ ｓ ｓｃ ｌｉａ ｓｗｅ ｅｄ ｖｄ ｄｉ ｏ ｔ ｒ ｕ ｓｂ ｓ ｄ ｏ ｈ ｈ ｒｃｅ ｉｔ ９ ｎ ｃ
Ａｂ ｔａ ｔＰｈ ｌ ｇ ｎ ｔ ｅａ ｉｎ ｈ ｐｉ ｅ ｔ ｉａｉ ｎ ａ ｄ ｃａ ｓｆ ａｉｎ ｏ ９ Ｃ ｒ ｓ ｓｃ ｌ ｖ ｒ ｎ Ｑｉｇ ａ ｒ ｓｒ ｃ ： ｙｏ ｅ ｅ ｉ ｒｌｔｏ ｓ ｉ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔ ｎ ｌｓ ｉｉ ｔｏ ｆ１ ｅ ａ ｕ ｕ ｔ ａ ｓｉ ｎ ｄ ｏｗｅ ｅ ｃ ｆ ｏ ｃ ｉ
２ Ｄｅ ａｔ ｎ ｆＭａ ａ ｅ ｎ ， ｎ ｄ ｏＺ ｏｇ ｈ ｎＰ ｒ ． ｐ ｒｍｅｔ ｎ ｇ ｍｅｔ Ｑｉｇ ａ ｈ ｎ ｓａ ａｋ，Ｑ ｎ ｄ ｏ Ｓ ａ ｄ ｎ ６ １ ９ Ｃ ｉａ｝ ｏ ｉｇ ａ ， ｈ ｎ ｏ ｇ２ ６ ０ ， ｈｎ ３ Ｃ ｌｅｅｏ ｓｏｙａ ｄ Ｃ ｌ ｒ ， ａ ｃｅ ｇＵ ｉｅｓ ｙ， ａ ｃｅｇ， ｈ ｎ ｏｇ ２ ２ ５ ， ｈｎ ） ． ｏｌｇ ｆ Ｈｉ ｒ ｎ ｕｔ ｅ Ｌｉｏｈ ｎ ｎｖｒｉ Ｌｉｏｈｎ Ｓ ａ ｄ ｎ ５０ ９Ｃ ｉａ ｔ ｕ ｔ
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西＝ 林 学 院 学 报 ２ ０ ， ３ ３ ： ０ ４ Ｉ Ｅ ０ ８ ２ （） ４ ￣ ３
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＮｏ ｔ ｗｅ ｔ ｒ ｓｒ ｉｅｓｔ ｏ ｒ ａ ｒｈ ｓ ｅｔｙ Ｕｎｖ ｒｉ ｏ Ｆｏ ｙ
青 岛市 ９个樱 花 品种 的 酯酶 同工 酶 鉴 定
析 ， 出反 映 各品 种 问亲缘 关 系的树 状聚 类 图。聚 类结果 以花 的重瓣 性将 １ 得 ９个樱 花 品种 分为 两 大
几种小麦雄性不育系及其保持系、恢复系的酯酶同工酶比较
几种小麦雄性不育系及其保持系、恢复系的酯酶同工酶比较的
报告，600字
本报告旨在比较不同雄性不育系、保持系和恢复系小麦的酯酶同工酶。
小麦雄性不育系是一种植物受到基因突变影响，使它们表现出雄性不育的现象。
小麦雄性不育系的保持系和恢复系对于改良小麦多样性及改善稳产量具有重要作用。
这些不同系分别具有不同的酶活性，有利于小麦栽培区获得较高的产量。
要比较上述不同系的酯酶同工酶活性，需首先收集不同系的小麦组织样品，然后通过诱导技术，将它们的酶体提取到单个溶质中，以提高其可分离的效率。
所提取的酶体需要连续打液体中离心，以分离出酵母质酶，蛋白质酶和核酸酶，然后再用到酯酶同工酶的实验中。
最后，可以通过检测实验中生成的产物，以及参照物的比较，来准确地测定不同系小麦中酯酶同工酶的活性。
综上所述，通过分析不同小麦雄性不育系、保持系和恢复系的酯酶同工酶活性，可以便于更好地应用这些类型的小麦来改良栽培区的小麦多样性及改善其稳定性。
酯酶同工酶的一种新染色法的初步研究
Ｚ ０ Ｇａ Ｉ Ｎ Ｆ ｎ２ Ｃ Ｏ Ｙ ｎ ＨＡ ｎ ，Ｑ Ａ ａ ｇ ， Ａ ｏ ｇ—ｃ ａ ｇ ｈ ｎ
ＪＡＮＧ Ｄ ａ Ｉ ｉｎ—ｆｎ ｅ ｇ ．Ｃ ＨＥＮＧ Ｇ ｏ—ｄ ｎ ＩＭｉ ｇ—ｚ ｕ ，Ｌ ａ ｕ ｏ ｇ ，Ｌ ｎ ｈ ＩＸｉｏ—ｙ ｕ
ｎ ｐ ｔ 。 Ｔｈ ｎ ｔ ｅ ｎ ｐ ｔ 。 ｃ ｎ ｒａ ｔｗｉｈ ＫＭ ｎ ｅ ｕ ｔｎ ｎ ｔ ｅ ｃ ｌｒ ｄ ｕ ｓａｎ ｅ ｗｈ ｃ ａ ｓａ ｎ 小ｅ ｈｈ １ ｅ ｈ ｈ １ ａ ｅ ｅ ｔ ｈ Ｏ４ ｒｓ ｌｉｇ ｉ ｈ 。ｏ ｅ ｓ ｂ ｔ ｃ ｉｈ ｃ ｎ ｔ ｉ
摘要 ： 酯酶可将 一 醋酸萘 酯和 １一 ３ 醋酸萘酯水解 生成醋酸和萘 酚， 利用 Ｋ ｔ Ｍｔ 可与 萘酚反应生成有色物 Ｏ
质 的性 质 可 对 醇 酶 同工 酶 进 行 染 色 。
关 键 词 ： 酶同工酶 ； 酸萘醢 ； Ｍｎ ．染 色法 醢 醋 Ｋ Ｏ；
中 图分 类 号 ：９６５ Ｑ４．
第 ３期
赵 赣等 ： 酯酶 同工 酶 的一 种 新 染 色 法 的 初 步 研究
・３ ｌ・ ８
１２ 仪 器 设 备 ．
研钵 ， 电泳仪 与 电泳槽 ， 冰箱 ， 离心机 ， 量加样 器 。 微
１ ３ 实 验 试 剂 ．
Ａ ｒ Ｂｓ 上海化 学试剂公 司产 品 ，Ｅ Ｅ 为上海前 进 试剂 厂 产 品， 一醋 酸荼 酯 为上海 青 浦合 ｃ 与 ｉ为 ＴＭ Ｄ
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第２ ４卷 第 ３期
２０ ０ ２年 ６月
江 西农业 大学学 报 （ 自然科学版 ）
Ａｅａ Ａｇ ｉｕｔ ｒｅ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｔ ｉｎ ｘｅ ｓ ｔ ｒ Ｘ ａ ｉ ｓ ａ ｉ Ｊａ ｇ ｉｎ ｉ ｃ ｕ ｅ ｔ ｓ ｓ
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酯酶同工酶的醋酸萘酯-铁氰化钾染色法的研究
摘要：酯酶可将＠-醋酸萘酯和ß-醋酸萘酯水解生成醋酸和萘酚，利用萘酚能与铁氰化钾反应生成有色物质萘醌的性质可对电泳凝胶上的酯酶同工酶进行染色。
关键词：酯酶同工酶；醋酸萘酯；铁氰化钾；染色法
经典的酯酶同工酶的染色方法的原理是，酯酶催化醋酸萘酯水解产生萘酚，而萘酚可与坚牢蓝反应生成蓝紫色物质，因而在电泳后的凝胶上含有酯酶同工酶的地方可以染出蓝紫色的酶带。
经过摸索，本文介绍一种新的酯酶同工酶的染色方法———醋酸萘酯N 铁氰化钾染色法，其原理是酯酶催化醋酸萘酯水解产生萘酚，而萘酚可被铁氰化钾氧化成萘醌，因而在电泳后的凝胶上含有酯酶同工酶的地方可以染出酶带。
一 材料与方法
1.1实验材料
以新鲜的肉鸡肝脏为材料。
1.2试剂
Acr 为广东省汕头化学试剂厂产品，Bis 、坚牢蓝RR 盐为上海化学试剂公司产品，TEMED 为上海前进试剂厂产品，溴酚蓝为上海试剂三厂产品，＠-醋酸萘酯为上海青浦合成试剂厂产品，ß-醋酸萘酯为上海试剂一厂产品， Tris,HCL,NaCL,2Na HP 4o ,磷酸二氢钠，三氯醋酸，乙醇，甘油，丙酮，丙酮、铁氰化钾、过硫酸铵等均为国产分析纯。
1.3仪器设备
研钵、电泳仪与电泳槽、冰箱、离心机、微量加样器、恒温水浴锅、染色盒、67$紫外光栅分光光度计等。
1.4实验方法
（1）样品制备：取一定量的新鲜鸡肝，按一定比例加入8*9:1的磷酸缓冲液后进行研磨，经4000r/min,15min 离心后取上清液，置于1?冰箱中保存备用。
（2）酯酶活力的测定：参照禹邦超等人的方法进行。
（3）聚丙烯酰胺凝胶电泳：参照赵永芳的方法进行。
（4）酯酶同工酶的染色方法有：
经典法：（即醋酸萘酯-固蓝RR 盐染色法）染色液：称取ß-醋酸萘酯与＠-醋酸萘酯、坚牢蓝RR 各200mg ，分别用10mL 丙酮溶解后，混合，再用磷酸缓冲液定容至200mL 。
电泳后，将凝胶条浸入染色液中，于37摄氏度保温直至酶带出现。
染色新法（即醋酸萘酯B 铁氰化钾染色法）染色液G ：仅将经典法染色液中的坚牢蓝RR 除去；染色液B ：4%的铁氰化钾溶液。
电泳后将凝胶条浸入染色液A 中，于37摄氏度保温2min 后弃去染色液A ，用蒸馏水稍加漂洗，再用染色液B 染色，直至显出酶带。
二 结果与讨论
电泳前，将完整的一块凝胶按计划等分为$部份，每部份都按相同的酶活力梯度进行点样。
电泳结束后，将该凝胶按计划等分切为2块凝胶。
1块用经典法进行染色，1块用染色新法进行染色
通过观察实验现象，我们发现这2种染色方法所得的酶谱是相同的。
前文已再次证实鸡
肝中所含蛋白质的种类是很丰富的，这表明酯酶同工酶的这2种染色方法具有相同的专一性。
从图中可以看到，经典法染色易导致背景太暗，给观察酶谱易带来不便，而染色新法的染色背景则较清晰，对酶带的观察不易受到干扰。
从我们所做的实验来看，如果点样量太小，样品的酶活力太低，则染色新法中的快带不易被染出（资料未列出）。
前人在用荧光素双乙酸为底物新建立的灵敏度很高的酯酶同工酶的染色法中也证明，只有在一定的点样量范围内，快带才能被观察到。
所以，我们建议在使用染色新法时要注意样品中酯酶的总活力不能太低，可以在本文图示的酶活力范围内选择使用。
染色新法显带要慢些，在按方法所述加入铁氰化钾溶液后，4min时即染出慢带，至6min 时慢带即较明显，而快带则在8min时可显出，并随时间延长而更加明显。
而经典法显带要快些。
经典法所显酶带可在蒸馏水中于室温下保存达8个月之久而不褪色，染色新法所显酶带在铁氰化钾溶液中于室温下可保存8个月而不褪色，且带不扩散。
由此可见，染色新法可以用价廉易得的铁氰化钾代替较贵的坚牢蓝，并且在一定条件下可以得出与经典法同样的酶谱，故可以在教学与科研工作中发挥其一定的作用。
前人曾就经典法中＠-醋酸萘酯与ß-醋酸萘酯的单独使用及混合使用的效果进行过比较性研究，认为将这2种醋酸萘酯混合使用的效果更好。
我们在用经典法进行实验时也发现混合使用这2种醋酸萘酯染出的酶带更便于观察，故我们采用混合使用这&种醋酸萘酯来进行实验。
目前普遍研究的酯酶其实属于酶组织化学家所称之非特异性酯酶，亦即广义上的酯酶，包括羧酸酯酶（即B-酯酶）、芳基酯酶（即A-酯酶）、乙酰酯酶（即-酯酶）、乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶以及酯酶等。
这类酶对＠-醋酸萘酯和ß-醋酸萘酯都有相同强度的作用，广泛存在于各种生物之中。
前人在研究亚洲玉米螟的酯酶同工酶谱带时发现，当分别用胆碱酯酶的专一性抑制剂毒扁豆碱或羧酸酯酶的专一性抑制剂TPP（磷酸三苯酯）处理电泳后的凝胶板后，再进行染色，所得酶谱均较不使用这些抑制剂时所得酶谱要少了一些酶带。
类似的现象在油菜的酯酶同工酶中也观察到了。
这些资料说明，前人用催化水解＠-醋酸萘酯与ß-醋酸萘酯这一共性来定义广义的酯酶有其合理性，但同时也表明不同的酯酶同工酶也会有其特殊性质。
o染色法，但其染色效果要逊于本文的染前面曾经摸索过酯酶同工酶的醋酸萘酯-KMn
4
色新法。
酯酶同工酶的染色方法运用较广，在生物的抗药性机理研究、遗传育种、致毒机理研究、致病机理研究、物种起源关系探索、杂种优势预测等研究工作中均发挥着重要作用。
可见，在基因表达产生的生命状态的直接体现者———蛋白质的结构与功能逐渐成为当前研究阶段中的重点与热的时候，同工酶染色方法的研究在有关酶的功能研究方面仍将发挥其独特的积极作用。
故作者做此摸索。
参考文献：
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[4] 赵永芳.生物化学技术原理与应用[M]. 武汉：武汉大学出版社,1994
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