病理组织切片制作
病理切片的制作方法,流程
病理切片的制作方法,流程
病理切片的制作过程简单来说，就是将有病变的组织经过各种化学物理方法处理，使之固定硬化，然后在切片机上切成薄片，放在玻片上的过程。
病理切片中，最常见的石蜡切片，它的具体制作步骤包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡包埋和切片。
常用的固定液有10%的甲醛或者95%的酒精固定液。
脱水是用梯度酒精将组织块内的水分置换出来，可以用脱水机自动完成。
脱水以后进入石蜡包埋，石蜡凝固后，组织就被包在其中，制成蜡块。
然后将蜡块放在切片机上切成4-6微米薄片展开放在玻片上。
接下来，就是烤片和染色，最后盖上盖玻片，贴好病理标签。
病理切片就制作完成了。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤1. 采集组织样本在进行组织病理切片前，首先需要采集患者的组织样本。
通常，医生会通过手术或活检等方式获得组织样本。
为了确保样本的准确性和完整性，医生会根据患者的情况进行选择。
2. 固定组织样本采集到的组织样本需要进行固定处理，以保持其形态结构和细胞组织的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林等。
固定处理的时间和方法要根据不同的组织类型和病理分析的需要进行调整。
3. 预处理组织样本在进行切片之前，需要对固定的组织样本进行预处理。
这包括去除固定剂、脱水、清洗和浸泡等步骤。
通过这些预处理，可以将组织样本从固定剂中解除，并使其逐渐适应后续处理的要求。
4. 切片制备切片制备是组织病理学中非常重要的步骤。
在这一步骤中，医生会将预处理的组织样本切割成非常薄的切片。
常用的切片工具是显微切片机。
切片的厚度一般在4-6微米之间，以确保组织结构的清晰可见。
5. 染色切片制备完成后，需要对切片进行染色，以突显组织结构和细胞组分。
常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色和免疫组织化学染色等。
不同的染色方法可以提供不同的信息，有助于医生做出准确的病理诊断。
6. 镜检染色完成后，医生会使用显微镜对染色的切片进行观察和分析。
通过观察组织结构、细胞形态和染色结果，医生可以了解组织的病理变化，并做出相应的诊断。
镜检是组织病理学中最核心的步骤之一。
7. 病理报告根据对切片的镜检结果，医生会撰写病理报告。
病理报告中包括对组织病变的描述、病变类型的确定以及可能的诊断建议等内容。
病理报告是医生向临床医生提供病理诊断的重要依据，也是指导治疗和预后评估的重要参考。
通过以上的步骤，组织病理切片可以提供丰富的病理学信息，为医生做出准确的诊断和治疗决策提供重要依据。
这一过程需要医生的精确操作和细致观察，以确保结果的准确性和可靠性。
对于患者来说，组织病理切片是了解疾病发展和制定个体化治疗方案的重要工具。
组织病理切片的制作过程
组织病理切片的制作过程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
病理组织切片制作技术
------------------------------------------ 最新资料推荐------------------------------------病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材固定冲洗脱水透明浸蜡组织包埋组织切片展片附贴切片脱蜡染色脱水染片透明封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24小时。
应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。
带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以1.51.50.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2至IJ 3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。
组织病理切片制备
组织病理切片制备
组织病理切片的制作，首先医生取下组织病理标本，放在10%的中性福尔马林里进行固定，固定完之后标本送到病理科。
小标本需要固定4-6个小时，大标本需要固定6-12个小时，固定完之后由病理医生进行取材。
所谓的取材指把标本取出放在标本盒里，置于全自动脱水机中脱水16个小时处理标本。
处理过程包括组织进行固定、透明、脱水、浸蜡，处理完16个小时之后，病理技师把标本拿到包埋机上进行包埋，把病变组织放在蜡里，包埋成病理蜡块。
蜡块包埋完之后，病理技师把蜡块放在切片机上进行切片，切片大约需要切3-4μm的切片。
切完片子需要捞在病理玻片上，玻片再进行脱蜡，放在二甲苯中需要透明，之后放在全自动染色机中进行染色，再放在封片机里进行封片，这样才能制成病理切片，这个过程一般需要2-3天的时间。
法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作
法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作答案：法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作是通过将采集的组织样本固定、包埋、切片、染色等步骤，通过显微镜观察细胞结构，从而帮助法医学鉴定案件中的病理变化和死因。
在法医学病理标本处理中的组织切片制作过程中，首先需要采集病理标本，通常是通过活检或尸检获得。
随后，对标本进行固定处理，以保持组织结构的完整性。
然后，将固定后的组织样本进行包埋，即将组织置于蜡块中，使其易于切割。
接下来，使用组织切片机将标本切割成薄片，通常为几微米至几十微米的厚度。
随后，切片进行染色处理，以突出不同的细胞结构和病变特征，便于观察和分析。
通过法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作，法医学家可以通过观察组织切片的细胞结构、细胞核形态、染色质分布等特征，辅助判断病变类型、病理变化和死亡原因。
这对于破解案件真相、保护公共安全、维护司法公正等具有重要的意义。
深入讨论：在法医学病理标本处理中，组织切片制作是法医学鉴定的重要一环。
通过对组织切片的制作，可以帮助法医学家观察病理变化、病变类型、细胞结构等信息，从而为案件的司法鉴定提供客观依据。
不同的染色方法可以突出组织中不同的结构和物质，使得细胞和细胞器在显微镜下更清晰可见。
在实际操作中，法医学家需要严格遵循标本处理的规范和步骤，确保所得到的组织切片质量符合鉴定需求。
特别是在病理判断和诊断方面，组织切片的质量直接影响到法医学鉴定结果的准确性和可靠性。
因此，精细制备和准确染色是关键步骤，需要具备丰富的经验和专业知识。
总的来说，法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作是一项具有挑战性且重要的工作。
通过对病理组织样本的精细处理和观察，可以为法医学鉴定提供关键支持，促进案件的准确处理和司法公正。
病理切片 制作优质HE病理组织切片的要素
病理切片制作优质HE病理组织切片的要素摘要】目的制作一张优质的病理组织切片。
方法对病理组织制片过程中出现的问题加以留意及改进。
结果病理组织固定、脱水效果好，制作的组织切片薄，HE染色胞浆分明。
关键词】病理组织；取材；脱水；切片；HE染色病理组织石蜡制片技术是病理诊断的基础，制片质量的好坏是指导医师作出精确诊断的重要保证。
常规石蜡制片一般经过取材、固定、脱水、透亮、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等一系列的步骤，一个步骤做不好都会影响组织切片的质量。
本文就我们科在日常工作中各步骤可出现的问题总结出一些阅历和体会，现介绍如下。
1 材料1.1 各类病理组织标本1.2 仪器SHNDON-Thermo全封闭式组织处理机、包埋机、切片机。
1.3 试剂10%福尔马林、F固定液、梯度酒精、二甲苯、石蜡(58~60℃)、XX木素、伊红2 方法2.1 取材临床医师切取标本后，应尽快将标本置于10%福尔马林液内固定，固定液量为4~5倍于标本体积，也可到达15~20倍。
对较大的标本应切开固定，切开厚度为1 cm左右，为保存标本的原有大体形态，切开时最好不要完全断开。
固定时间应视标本大小而定，小标本应不少于4 h，大标本应不少于8 h。
取材组织面积为2 cm×1.5 cm，厚度不超过0.3 cm，骨组织或钙化组织需先经10%硝酸水溶液脱钙至针刺入无阻力感后再取材。
2.2 脱水标本放入全封闭式组织处理机后，F固定液1 h→80%酒精30 min→90%酒精30 min→95%酒精Ⅰ1 h→95%酒精Ⅱ1 h→无水乙醇Ⅰ1 h→无水乙醇Ⅱ1 h→无水乙醇Ⅲ1.5 h→二甲苯Ⅰ30 min→二甲苯Ⅱ1 h→石蜡Ⅰ30 min→石蜡Ⅱ30 min→石蜡Ⅲ1 h→石蜡Ⅳ1.5 h。
2.3 包埋将脱水后的组织按不同要求用石蜡(58℃~60℃)进行包埋。
2.4 切片将冷却的蜡块放于切片机上切片，厚度一般为3~4 μm。
2.5 染色石蜡切片脱蜡至水→放入XX木素工作液内染色1~5 min→自来水洗1 min→1%盐酸酒精分化10 s→自来水洗1 min→稀氨水(1%)反蓝20 s→自来水洗1 min→95%酒精10 s→乙醇性伊红液1~3 min→85%酒精1 min→90%酒精1 min →95%酒精Ⅰ1 min→95%酒精Ⅱ1 min→100%酒精Ⅰ1 min →100%酒精Ⅱ1 min→二甲苯透亮，电风筒吹干后，用中性树胶封片。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：组织病理学是一门研究疾病的科学，通过对组织和细胞的形态结构进行分析，可以帮助医生做出正确的诊断和治疗方案。
而组织病理切片是组织病理学的重要步骤之一，通过切割组织标本并染色，可以观察组织和细胞的形态结构，进而帮助医生做出诊断。
组织病理切片的步骤是一个繁琐而精细的过程，需要经过多个环节的处理才能得到准确的结果。
下面我们就来了解一下组织病理切片的具体步骤。
1. 标本获取：组织病理学的切片首先需要获得病理标本，这通常通过组织活检或手术取材来完成。
医生会根据患者的病情和需要进行相应的标本获取。
2. 组织固定：标本获取后，需要立即将组织标本放入10%的甲醛或其他固定剂中进行固定，以保持组织形态的完整性。
固定后的组织标本可以长期保存，并且能够在病理切片的过程中保持组织的形态结构。
3. 组织处理：固定后的组织标本需要进行脱水、清洁和浸蜡等处理，以使组织标本透明并且易于切割。
这一步通常需要用到甲醇和乙醇等有机溶剂，以及蜡浸渍处理。
4. 组织包埋：处理完的组织标本需要放入蜡液中进行包埋，以便于切割。
在包埋过程中，需要正确定位组织标本，并使其固定在蜡块中。
5. 组织切割：包埋后的组织标本需要用微切片机切成薄片，厚度通常在3-5微米左右。
切片时需要保持切割的准确性和统一性，以便后续的染色和观察。
6. 组织染色：切割后的组织标本需要进行染色，以显示组织和细胞的形态结构。
常用的染色方法包括赖氏染色、简单染色和特异性染色等。
7. 组织固定：染色后的组织切片需要进行固定，以保持染色的效果。
通常用乙醇和甲醇进行脱水和抗褪色处理。
8. 组织观察：固定后的组织切片可以放入显微镜下进行观察，医生可以通过观察组织和细胞的形态结构来做出诊断。
组织病理切片是一项非常重要的组织病理学技术，通过对组织标本的切割和染色，可以帮助医生做出准确的诊断，并为治疗提供参考。
希望通过以上介绍，您对组织病理切片的步骤有更深入的了解。
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实验四病理组织切片制作一、实验目的组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。
通过实验，能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一，即石蜡包埋的组织切片法。
二、实验原理根据病变及检查的要求，合理采集病料，经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片，在进行染色得到结果。
固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来，以便观察。
脱水是除去组织中的水分，以利于透明和浸蜡。
组织的透明是便于透蜡包埋。
包埋的是使石蜡透入组织内部，把软组织变为适当硬度的包埋块，以便切成薄片。
最后使用切片机，将包埋块中组织切成薄片。
三、主要仪器及试材已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，记号笔或铅笔。
四、实验方法与步骤。
（一）固定采取的病理材料必须立即放入10％福尔马林固定液中。
（二）脱水组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。
必须先把组织中的水分除去。
但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。
最常用的脱水剂为酒精、丙酮等。
1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。
脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。
最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。
脱水的程序为70％一80％一95％一100％。
各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。
100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。
脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。
2．丙酮沸点为56℃。
脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。
脱水时间l一3小时左右。
（三）透明透明对组织有脱酒精及透明两种作用。
当组织中全部为透明剂占有时，光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。
常用的透明剂有：1．二甲苯是最常用的良好透明剂，不影响各种染色。
二甲苯易溶于酒精，能溶解石蜡，也是封固剂，不吸收水，透明能力强，易使组织收缩、变脆，故组织块在二甲苯中不宜久留，特别对小动物组织材料必须严格控制好(各种器官的透明差异很大)，通常为半小时到1小时左右。
当二甲苯透明时必须持组织放在专用二甲苯皿器中，这样可减少透明时间，有利于组织透明彻底，在换组织块透明时候，所用的镊子等器具必须干燥，不得将水滴混入二甲苯中，因水滴易被组织吸收而影响透明程度，潮湿天气更应引起注意。
2．冬青油（水杨酸甲酯）为无色油样液体，易溶于醇、醚及冰醋酸，难溶于水。
透明速度较慢，数小时或数天。
一般经无水乙醇脱水后再入冬青油。
（四）浸蜡（透蜡）组织经脱水透明后要用石蜡等支持剂透入内部，并除去组织中的透明剂，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成切片。
浸蜡的要点有二：①石蜡要完全渗入细胞的每个部分：②石蜡要紧密而均匀的贴在细胞内外两面，使组织与石蜡成为不可分离的状态。
为了减少组织的收缩和提高浸蜡的效果，浸蜡用的石蜡依据熔点不同，先经低熔点石蜡再经高熔点石蜡。
一般设置熔点50—52℃为第一缸蜡，52—54℃为第二缸蜡；54—56℃为第三缸蜡，第三缸石蜡的熔点根据季节可进行调节，夏天使用熔点56—58℃或58—60℃石蜡，盛夏使用熔点60—62℃石蜡。
浸蜡的时间根据不同组织类型及其大小而定：组织1—2cm大小，浸蜡2—3小时，2—3cm浸蜡3—5小时，对细胞密集，纤维成分少，如肝、肾应减少时间，含脂肪和纤维成分较多的组织需增加时间。
浸蜡时石蜡在温箱内的温度应与石蜡的熔点相配合，温度不可过高过低，过高会使组织高度收缩变脆，无法切片，过低石蜡将凝固达不到浸蜡的作用。
常规的作法是调节至略高于石蜡熔点2—3℃。
控制温度是浸蜡极其重要的关键。
（五）包埋将液态的石蜡倒入金属包埋框或包埋的纸盒中，再将浸好蜡的组织块平放底部，注意切面方向朝下放置，待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却变硬后再修整蜡块，要求组织外围的石蜡保留适中以便切片。
（六）切片前的准备工作1．修整蜡块石蜡切片是以石蜡作为组织的支持媒介。
应先将包埋的每块组织周围过多的石蜡切去，四周留约2mm的石蜡边。
留得过少，使连续切片分片困难且易破坏组织；留得过多，徒占地方，同时使标本之间的距离过远而镜检不便。
蜡块两边必须切成平行的直线，否则切下的蜡条弯曲，也不可修成圆角，致蜡带容易分开不能成条。
2．玻片处理一般玻片用76X26mm载片，厚度l一1．5mm，厚于1．5mm的玻片不宜用于高倍镜及油镜的观察，选购玻片应注意：从侧面看白色的为优品，带蓝或绿色的为劣品，平面光滑不带波纹者为上品，稍有波纹者为次品，边缘光滑己加工磨边者为上品，边缘粗糙未经磨边者为次品。
载玻片上面如有云雾斑点，系受霉菌侵蚀不能使用。
新的玻片也必须擦洗干净，否则染色时引起切片脱落，方法有①煮沸洗涤法、②洗液浸泡法。
最后经95％酒精浸泡脱脂、烘干。
将洗净的载玻片上均匀涂抹薄薄的一层蛋白甘油(防止组织脱片)，放置冰箱备用。
（七）切片制作过程1．将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上，使蜡块的切面与刀口成平行方向，刀的倾斜度通常为15℃，转动轮转推进器，调节切片厚度为6μm，切成厚度均匀的切片。
2．左手持毛笔，右手旋动切片机转把，切片带出来之后，用毛笔轻轻托起，再用眼科镊轻镊蜡片，以正面放入展片箱中，其水温40—43℃左右。
待摊平整后捞片。
3．贴附切片左手持载玻片之一端，垂直入水去附贴切片，右手用毛笔辅助推动，附贴至玻片上的三分之二处。
4．切片贴附后，放在空气中稍晾干，即可进行烤片。
血块组织、皮肤组织须及时烤片。
但对脑组织、脂肪组织待完全晾干后才能进行，这样可防止产生气泡而影响染色。
烤片的温度以蜡溶解为准。
也可以放置60℃烘箱内烘烤过夜。
五、实验注意事项1．固定组织所用的固定液要充足，至少相当于标本总体积的5倍以上，标本容器及其口径有适当大小，使标本能原形进行固定，避免使标本遭受挤压。
2．组织块透明在制片中是很重要的环节，如果组织不能透明，其原因可能有脱水未尽、组织太厚、透明时间不够以及与某些组织本身性质有关等。
所以应从多方面考虑，尽可能使组织达到透明目的。
通常根据透明时间与眼观相结合判断透明程度。
3．凡是陈旧、腐败或干枯的组织不易制成好切片。
4．固定失时或固定不当的组织，染色时常出现核染色质着色浅、轮廓不清，出现程度不等的片状发白区。
5．组织脱水、透明和浸蜡过度，会造成组织过硬过脆，特别是小动物组织应严格控制。
6．切片刀不锋利，切片时会自行卷起或皱起，不能顺利连成长蜡带。
切片刀有缺口，易造成切片断裂、破碎、不完整及刀痕等现象，不利于切片和观察。
7．组织切片机各个零件和螺丝应旋紧，切片刀应固定牢固，否则将会产生震动，以致出现切片厚薄不匀和横皱纹等现象。
六、实验结果处理每人切出4-5张良好的切片。
一、实验目的任何切片，不经过染色，在显微镜下只能看到细胞和组织的轮廓，远不能满足观察和诊断的目的。
染色是将染料配制成溶液，将组织切片浸入染色剂内，经过一定时间，使组织和细胞的成分被染上不同的颜色，产生不同的折射率，便于在光学显微镜下进行观察。
因此，染色在组织形态学、病理学诊断、研究工作中，具有非常重要的实用价值。
二、实验原理染色是染色剂和组织细胞的结合过程。
使用不同的染色方法，其原理有差别。
苏木素伊红染色法为病理组织切片最常用的染色方法。
由于它对组织细胞的各种成分都可染出，便于对组织成分的全面观察，且以任何固定液固定的材料，各种切片法都可适用。
用H．E染色的标本，不易褪色可以长期保存。
在常规的苏木素伊红染色中，苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，而苏木红和铝结合形成一种带正电荷的蓝色色精，带正电荷的蓝色色精和带负电荷的脱氧核糖核酸酸根，通过正、负电荷的极性吸着来完成结合，使细胞核染成蓝紫色。
伊红是一种酸性红色胞浆性染料，它们的染色可能是通过渗透作用或弥散作用而完成的，使细胞浆染成红色。
三、主要仪器及试材HE染色全套试剂，染色缸（卧式），摊片盘，搪瓷缸，盖玻片，中性树胶，牙签，显微镜。
四、实验方法与步骤常规石蜡切片H．E染色程序(一)脱蜡至水1．二甲苯Ⅰ 5-15分钟2．二甲苯Ⅱ 5-15分钟3．无水乙醇 3分钟4．95％酒精 3分钟5．80％酒精 3分钟6．70％酒精 3分钟7．自来水洗(二)染色1．Harris苏木素液 5-7分钟2．自来水洗 5分钟3．1％盐酸溶液分化 30秒4．自来水洗 5分钟5．1％氨水返蓝 10秒6．自来水洗 15-20分钟7．95％酒精 3分钟8．1％伊红酒精溶液 1-2分钟(三)脱水、透明和封固l．95％酒精 2分钟2．无水酒精Ⅰ 2分钟3．无水酒精Ⅱ 2分钟4．二甲苯Ⅰ 5分钟5．二甲苯Ⅱ 5分钟6．中性树胶封固结果：细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色。
五、实验注意事项1．任何石蜡切片必须经过二甲苯进行脱蜡后才能染色，石蜡切片要求平板烘干，以便组织与玻片粘贴牢固。
组织切片脱蜡的好坏，与二甲苯的温度及时间有关，二甲苯使用时间过长，应及时更换。
2．在H．E染色过程中，其成败的关键在于分化，如果分化不当致使应该分化脱色的部分末予脱去，或分化不足致染色不均匀，复染对也不能得到对比鲜明的色彩，另外流水冲洗时间的长短对组织返蓝色彩鲜艳与否也有一定的关系。
须要提及的是，染色的成败除染色技术以外，组织材料的过分陈旧或长期固定在甲醛中的组织，由于过度酸化都会影响染色；或组织固定不当，固定不足组织发生自溶等均会使染色模糊。
3．伊红染色后必须经梯度酒精脱水，特别需要经过无水乙醇，脱水一定要彻底，否则，影响透明。
4．脱水后，经二甲苯进行透明，才能封固。
透明应注意时间充足，才能达到良好效果。
封片时，中性树胶不能滴加太多或太少。
封固好的切片应平放在摊片盘上，及时放置于恒温箱中40-50℃烘烤15小时左右，有利于切片的保存。