实验一 有丝分裂染色体标本制片技术讲课讲稿
有丝分裂实验讲解
观察
先用低倍镜观察
使染色体着色，便于显 微镜下观察
使细胞分散开
在低倍镜下找到分升区细胞； 正方形、排列紧密
再用高倍镜观察
依次观察分裂中期、前期、 后期、末期、的细胞间期紫
醋酸洋红
被染成分 DNA RNA 线粒体
染色体
呈现颜色 绿色
红色
蓝绿色 紫色 红色
1、先在低倍镜下观察，找到分生区细胞： 正方形，排列紧密。
2、再换成高倍镜仔细观察。 先找到中期细胞，然后找出分裂中期、前期、后期、末
期、间期的细胞，观察各时期内染色体形态和分布的特点。 3、填写记录表。P116
成 看一看植物细胞的
熟 区
分裂（根尖）
伸 长 区
分 生 区 根 冠 根尖纵剖结构示意图
的分布。 （2）人的 口腔上皮细胞可用于观察 线粒体及
DNA和RNA在细胞内的分布情况，而观察 细胞减 数分裂 时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。
（3）观察叶绿体时常选用藓类的叶，因为 藓类 植物的叶片薄而小，常是一层细胞，叶绿体清楚，易
于观察和操作。
C.持续观察，视野中的K细 胞将分裂成两个子细胞
D.视野中，N细胞的染色体 数目是M细胞的一半
7、实验材料的选择 （1）洋葱的根尖可用于观察植物细胞有丝分的裂实验， 这是因为其根尖分生区细胞进行有丝分裂；而 洋葱鳞片叶的外表皮 细胞可用于观察植物细胞的质壁 分离和复原的实验，这是因为其具有 紫色大液泡 ，同时 还可以利用洋葱鳞片叶内表皮观察 DNA和RNA 在细胞中
B. 形态不规则
C. 细胞已经开始分化
D. 无间期细胞
3.（09·江苏）有1位同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜
中观察到的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是
有丝分裂课件
有丝分裂的发现历程
早期观察
19世纪末，科学家首次观察到有 丝分裂现象，揭示了细胞分裂与
遗传的关系。
遗传学发展
20世纪初，遗传学的发展推动了对 有丝分裂的深入研究，阐明了其分 子机制和遗传学意义。
现代研究
随着分子生物学和细胞生物学的发 展，对有丝分裂的研究更加深入， 揭示了其在生物体发育、疾病发生 等方面的重要作用。
在前期开始时，核膜逐渐解体消失，使得核内物质与细胞质混合在一起。
纺锤体形成
由中心体发出的纺锤丝开始形成纺锤体，其作用是将染色体拉向细胞的两极。
中期：染色体排列与纺锤丝连接
染色体排列
在中期，所有的染色体都排列在细胞的中央平面上，形成一 个清晰的赤道板。此时，染色体的形态最为清晰，数目也最 容易观察。
凝集素蛋白
在分裂前期使染色体凝集缩短，便于其在纺锤体微管的牵引下移动。
04
有丝分裂异常及后 果
异常类型及原因
染色体数目异常
由于有丝分裂过程中染色体分离异常，导致 子细胞染色体数目增多或减少。
染色体结构异常
包括染色体断裂、易位、倒位等，主要由 DNA损伤、复制错误或细胞分裂时机械力 作用引起。
异常后果：非整倍体与肿瘤发生
通过大规模遗传筛选，鉴定影响有丝分裂的新基因，并研究其在细 胞增殖中的作用。
生物化学技术
1 2 3
蛋白质组学
利用蛋白质组学技术，鉴定参与有丝分裂的蛋白 质，并研究其在细胞周期进程中的功能和调控机 制。
代谢组学
通过分析有丝分裂过程中的代谢变化，揭示代谢 途径对有丝分裂的调控作用，以及代谢异常对细 胞增殖的影响。
合成生物学与人工细胞
展望利用合成生物学技术构建具有有丝分裂能力的人工细胞的可能 性。
实验一 有丝分裂染色体标本制片技术
（制片——临时装片）
4. 解离：取95%乙醇中保存的根尖水洗两次，用 1mol/L HCl 在60℃处理根尖8-10min后，水 洗3~4次。 5. 染色：根尖在有盖的小瓶中加入希夫试剂染色 10~20min。 6. 压片：在干净的载玻片上切下根尖分生区，滴一滴 45%醋酸，加盖玻片，用滤纸吸净多余的液体， 一手压住盖玻片一角，另一手持竹针轻敲盖玻片至 组织呈云雾状。将载玻片在酒精灯上轻烤，迅速在 盖玻片上覆滤纸条，用拇指垂直按压制片。 7. 镜检及观察。
有丝分裂时，染色体呈现连续的、动态的 变化。
细胞周期
分裂期
分裂间期
前期
中期
后期
末期
分裂间期
制作染色体标本的用途：
1. 染色体可作为一个指标进行物种分类并探 索物种之间的亲缘关系，如染色体数目、 大小、随体、形态及特殊染色体（如性染 色体、B染色体、唾腺染色体）等特点。 2. 染色体数目或结构在一定的生理、病理或 外界条件下会发生改变，在临床上对疾病 的早期诊断及产前遗传咨询等十分重要。 3. 新型染色体识别技术的基础：如各种显带 技术、荧光原位杂交等。
将05g碱性品红溶于100ml热蒸馏水中使之充分溶解待溶液冷却至50时过滤再冷却到25时加入1moll盐酸hcl10ml和1g亚硫酸氢钠nahso放置暗处静置24h后加02505g活性炭摇荡1min过滤溶液呈无色装入棕色瓶中塞紧瓶塞保存在冰箱内04用前预先取出使之恢复至室温后再用
实验一 有丝分裂染色体标本制片技术
需要注意的问题：
1. 控制好解离时间，解离不能过度，是实验 成功与否的关键； 2. 每次水洗都要充分； 3. 找准根尖分生区，切片尽量要薄； 4. 烤片时不要过度，不要烤干； 5. 压片时必须用力适当，盖玻片千万不能移 动，不要产生气泡； 6. 希夫试剂如呈粉红色不能使用，须重配。 7. 卡诺固定液要新鲜配制。
《有丝分裂实验》ppt课件
(3)有一位同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜中观察到
C 的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是 ( )
①取材位置不合适 ②取材时间不合适 ③制片时压片
力量不合适 ④解离时间不合适 ⑤视野选择不合适
A．②③
B．②⑤
C．①②⑤
D．①③④
(4)不会影响细胞周期各时期的长短或产生误差，但对整个实验结果产生
B．处于图 3 中 B→C 段的是图 1 所示细胞，完成图 3 中 C→D 段变化的细 胞的分裂时期是后期
C．有丝分裂过程中不会出现图 4 中 d 所示的情况 D．图 4 中 a 可对应图 3 中的 B→C 段，图 4 中 c 可对应图 3 中的 A→B 段
实验十 察看根尖分生组织细胞的有丝分裂
1．实验原理 (1)高等植物的分生组织细胞 有丝分裂 较旺盛。 (2)细胞核内的染色体(质)易被 碱性染料 (龙胆紫溶液)染成深色。 (3)细胞的分裂是 独立 进行的，在同一分生组织中可以通过高倍 显微镜 观察细胞内 染色体 的存在状态，判断处于 不同分裂 时期 的细胞。
(2)细胞分裂过程中 需要利用大量的胸腺嘧啶脱氧核苷酸来完 成
__D_N__A_的__复__制___，此时细胞处于图乙中_B__C____段，若用秋水仙素作用 于图乙中__C__D____段的某一时期，可使染色体数目加倍。 (3)图丙对应图乙中__C__D____段的某一时期，处于此分裂时期动植物细 胞的区别主要是_纺__锤__体___形成的方式不同。
在动物细胞有丝分裂间期能观察到由星射线形成的纺锤体物细胞有丝分裂末期形成了赤道板在动物细胞有丝分裂中期两个中心粒复制形成两组中心粒物细胞有丝分裂末期细胞膜内陷形成两个子细胞如果细胞中染色体数和核dna分子数之比是12它一定不是高度分化的细胞在动物细胞有丝分裂间期能观察到由星射线形成的纺锤体物细胞有丝分裂末期形成了赤道板在动物细胞有丝分裂中期两个中心粒复制形成两组中心粒物细胞有丝分裂末期细胞膜内陷形成两个子细胞如果细胞中染色体数和核dna分子数之比是12它一定不是高度分化的细胞动物细胞有丝分裂过程中纺锤体的形成发生在分裂前期错误
高中生物 有丝分裂实验教案 新人教版必修1-新人教版高一必修1生物教案
石家庄一中生物学实验教案●实验指导指导学生预习：结合教材的知识结构和实验目标预习该实验内容。
从理论上掌握根的培养方法、装片的制作技术和观察时可视目标的寻找与辨别。
指导学生制片：固定时间取材，通常是上午的1时至下午2时分裂活跃，尤其是上午10时至11时20分最活跃。
解离时间不易过长或过短，否则根尖未充分解离或使根尖过分酥软且染色体成分破坏。
漂洗是为了洗去盐酸，防止解离过度而影响染色。
染色液的浓度和时间一定要掌握好，染色不能过深，否则一片紫色将无法观察。
加盖玻片时应注意防止水泡；压片时复加载玻片的方向与底部载玻片相同。
指导学生观察：巩固显微镜的使用方法，特别是高倍镜的调节要熟练而规范。
提示学生低倍镜下寻找的目标是生长点的细胞；高倍镜下辨识有丝分裂的不同时期。
注意抓住可视目标，即低倍镜下的正方形细胞（生长点细胞）和高倍镜下的染色体特征（有丝分裂的不同时期）。
特别注意：各时期细胞内的染色体行为变化，必需在几个细胞甚至几个视野中才能找全。
●课时安排1课时（也可根据需要安排“实验”与“讨论”2个课时）。
●教学过程［导课］1.细胞增殖是靠什么方式实现的？2.真核细胞的分裂方式有哪几种？3.真核生物进行细胞分裂的主要方式是什么？咱们上节课详细讨论了有丝分裂的全过程，特别是一个完整的细胞周期中，各时期染色体的行为变化。
那么，在实际的生物体细胞中这些变化特征是如何发生的呢？（出题）［教学目标达成］实验三：观察植物细胞的有丝分裂一、装片的制作教师板书：学生操作：依黑板上程序和教材上的具体步骤进行操作。
各种用具、溶液都在实验台上，学生可自行选择。
注意分工合作，一定要把时间控制好。
教师指导：（集体提示）（1）取材：切取洋葱根尖透亮部分2～3mm。
（2）解离：注意时间控制。
时间过短，则细胞不易被压散；时间过长，则细胞容易被压碎，影响染色。
标志是材料呈白色微透明，用解剖针能轻轻压碎为好。
（3）漂洗：用镊子取出根尖，放入盛有清水的玻璃皿中，漂洗10min。
实验一 染色体玻片标本的制作与染色体观察
辽宁师范大学生命科学学院 张剑锋
一、实验原理
植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每 天都有分裂高峰时间(am9, pm3)，此时把 根尖固定，经过染色和压片，再置放在显 微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂 各时期的细胞和染色体。
二、实验目的
根尖染色体压片法是观察植物染色体 最常用的方法，也是研究染色体组型、染 色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交 换的基础。
卡诺固定液的配制：3 份无水酒精，加1 份冰醋酸(现配现 用 )。 酶液的配制：以0.1mol/L 醋酸钠为溶剂，配成纤维素酶(2 ％)和果胶酶(0.5％)的混和液。
染色液的配制： 配方Ⅰ：石碳酸品红(Carbol. fuchsin)染色液，先配母液A和B。 母液A：称取3克碱性品红，溶解于100毫升的70％酒精中(此液可 长期保存)。 母液B：取母液A 10毫升，加入90毫升的5％石碳酸水溶液(2周内 使用)。 石碳酸品红染色液：取母液B 45毫升，加入6毫升冰醋酸和6毫升 37％的甲醛。此染色液含有较多的甲醛，在植物原生质体培养过 程中，观察核分裂比较适宜，后来在此基础上，加以改良的配方 Ⅱ，称改良石碳酸品红，可以普遍应用于植物染色体的压片技术。 配方Ⅱ：改良石碳酸品红 取配方Ⅰ石碳酸品红染色液2-10毫升，加入90-98毫升45％的醋酸 和1.8克山梨醇(sorbitol)。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周 后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。
（四）压片：把染色后的根尖放在清洁的载玻片上，用解剖针 把根冠及延长区部分截去，加上少量染色液，并盖上盖玻片。 一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片，分生 组织细胞就可铺展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液 吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞 附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分 裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点： 1. 压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，细胞和染色体没有伸 展的余地。 2. 用镊子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留意， 使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。 （五）封片：把压好的玻片标本，放在干冰或冰箱结冰器里冻 结。然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开，用电吹风把玻片 吹干后，滴上油派胶加上盖玻片封片，或经二甲苯透明后，滴 中性树胶，加盖玻片封片，做成永久封片。
植物有丝分裂PPT
实验一植物有丝分裂染色体标本制备与观察一、实验目的通过对植物组织的取材、预处理、解离、染色、压片等制片步骤的学习，掌握植物染色体制片技术，奠定细胞遗传学的研究技术；通过对植物根尖细胞的观察，掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。
二、实验原理有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去，使子细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的一致。
各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等，常进行着剧烈的细胞有丝分裂。
在细胞分裂的适当（分裂旺盛期）时候取材，进行预处理，固定、解离、染色和涂抹压片等方法，使细胞、染色体分散，便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。
三、实验材料蚕豆（Vicia faba, 2n=12）干种子四、实验仪器及用具多媒体显微演示系统、显微镜、培养箱、分析天平、水浴锅、酒精灯、剪刀（或刀片）、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、标签纸、胶水、棕色瓶等。
五、药品和试剂秋水仙碱、8－羟基喹啉、苏木精、水合三氯乙醛、铁矾［铁钾矾KFe(SO4)2•12H2O 或铁铵矾NH4Fe(SO4)2·12H2O］、无水酒精、冰醋酸、1N盐酸、50％丙酸。
六、实验步骤1．材料准备选取新鲜无病斑的蚕豆干种子，经日晒后，放在烧杯内，室温下清水浸泡一昼夜。
种子吸水膨胀后，放在搪瓷盘上20℃左右保湿培养（双层纱布覆盖），待根长1~2cm 时，于上午9:00~10:30或下午14:00~16:00进剪下根尖备用。
2. 预处理为了获得较多中期分裂相的细胞，同时使染色体缩短和分散，可对根尖进行预处理，处理方法有：（1）0.05％~0.2％的秋水仙碱水溶液处理2~4小时。
（2）0.002M的8~羟基喹啉溶液处理3~4小时。
（3）根尖浸在蒸馏水中于在1~4℃低温下处理24小时。
有丝分裂说课稿）
《有丝分裂》说课稿各位领导、老师们，大家好。
我今天说课的内容是：苏教版高中生物必修一第五章第一节《细胞增殖》------《有丝分裂》。
我从以下几个方面来说课：一、教材分析：1、《有丝分裂》在整个高中教材中的地位和作用《有丝分裂》是必修一《分子与细胞》这一模块的第五章第一节的内容，是学生在认识了细胞，学习了细胞的物质组成，结构特点、代谢后，从细胞生命历程发展变化的角度。
对细胞的更高层次的认识。
它讲述了细胞的一种生命现象，即细胞的自我繁衍过程。
只有了解这一生命现象，我们才能让学生逐步认识生命体恰生命现象。
例如：细胞分化、细胞的全能性、生命体的生殖和法语、生物体的遗传和变异等。
只有了解了这一现象，才能更好的学习选修一、三中各种生物前沿科技知识，如动植物细胞工程，胚胎工程等。
所以本节是我们学习生物学知识，了解生物体各种生命现象的细胞学基础，是教学的重点也是难点。
二、细化课标，确定教学目标。
有关《有丝分裂》的课程标准是：1、说出细胞的生长和增值具有周期性2、观察细胞的有丝分裂，说出细胞各个时期的主要特征这样的课程标准是比较笼统的，缺乏具体的学习指向，故对其进行研究，分解细化。
用拆解式策略，将笼统的大标准拆解为具体的可操作的小课标。
围绕关键词从过程特点、类型、过程异同、规律变化、结果意义等方面细化，确定教学目标。
如下：知识与技能：1、通过阅读教材辨别细胞周期2、描述细胞有丝分裂各期特征3、构建动物细胞有丝分裂过程模型图4、阐明染色体数量、DNA分子数的变化规律5、说出有丝分裂的意义过程与方法：通过对细胞分裂图像的观察，培养学生分析图像、解读图像、建立模型、寻找规律的能力。
情感态度与价值观目标：通过对细胞周期以及细胞有丝分裂过程中DNA和染色体的规律性变化的学习，使学生树立唯物主义世界观、对生命的运动性、事物发展中的量变到质变等问题有正确认识。
教学重点：细胞有丝分裂各期特征教学难点：细胞有丝分裂过程模型图的建立三、教法分析采用直观法、讲授法、比较法教学。
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有丝分裂时，染色体呈现连续的、动态的 变化。
细胞周期
分裂期
分裂间期
前期
中期
后期
末期
分裂间期
制作染色体标本的用途：
1. 染色体可作为一个指标进行物种分类并探 索物种之间的亲缘关系，如染色体数目、 大小、随体、形态及特殊染色体（如性染 色体、B染色体、唾腺染色体）等特点。
2. 染色体数目或结构在一定的生理、病理或 外界条件下会发生改变，在临床上对疾病 的早期诊断及产前遗传咨询等十分重要。
3. 新型染色体识别技术的基础：如各种显带 技术、荧光原位杂交等。
染色体标本的制作方法：
1. 滴片法：用于动物细胞，如人 体外周血淋巴细胞和小白鼠骨 髓细胞染色体标本的制备等；
2. 压片法：用于植物细胞，如洋 葱、玉米、小麦等根尖分生区 细胞染色体标本的制备。
实验目的：
1. 了解有丝分裂过程在遗传学中的意义和重要 性；
2. 由于有丝分裂的中期染色体具有典型的形 态特征，并易于计数，因此为了获得更多 的中期染色体图像，可以采用药物处理或 冰冻处理(预处理)的方法，阻止染色体缩短，易于分散，便于 进行观察研究。
3. 通过对细胞组织进行酸性水解或酶处理除 去细胞之间的果胶层，并软化细胞壁，使 细胞容易彼此散开，有利于压片和染色。
4. 45%醋酸： 45ml醋酸和55ml水混合。
实验步骤： 根尖的培养
预处理 固定 解离 染色 压片 镜检及观察
实验材料 准备
临时装片 制片
（实验材料准备）
1. 根尖的培养：挑选当地种植的未经发芽抑制剂 处理且已过收获后2~3个月休眠期的毛葱鳞茎， 剥除鳞茎外干枯的表皮，将其置于盛清水的沙 盘中，让清水没过鳞茎根部，每天换水。
需要注意的问题：
1. 控制好解离时间，解离不能过度，是实验 成功与否的关键；
2. 每次水洗都要充分； 3. 找准根尖分生区，切片尽量要薄； 4. 烤片时不要过度，不要烤干； 5. 压片时必须用力适当，盖玻片千万不能移
动，不要产生气泡； 6. 希夫试剂如呈粉红色不能使用，须重配。 7. 卡诺固定液要新鲜配制。
3. 希夫（Schiff‘s）试剂：将0.5g碱性品红溶于100ml热蒸馏 水中，使之充分溶解，待溶液冷却至50℃时过滤，再冷却到 25℃时加入1 mol/L盐酸（HCl）10mL和1g亚硫酸氢钠 （NaHSO3）或1.5g偏重亚硫酸钠（Na2S2O5），放置暗处， 静置24h后，加0.25～0.5g活性炭摇荡1min，过滤，溶液呈 无色，装入棕色瓶中塞紧瓶塞，保存在冰箱内（0～4℃），用 前预先取出，使之恢复至室温后再用。
根尖分生区：
染色体与染色单体
着丝点
染色体
姐妹染色单体
观察结果：
洋葱根尖细胞有丝分裂不同时期的细胞学特征：
间期 前期
中期
极面观
后期
末期
侧面观
作业：
1. 绘图说明观察到的有丝分裂中期的 特征。
2. 预处理和解离的目的是什么？固定 液的作用是什么？
预习：实验二 染色体核型及其分析 准备：竹签，细线，毫米尺。
实验材料：
毛葱（Allium fistulosum） 根尖（2n=16）。
实验器材：
显微镜，冰箱，水浴锅，分析天平，剪刀，镊子， 刀片，载玻片，盖玻片，滤纸，量筒，滴瓶，酒精 灯，指管等。
试剂及配制：
1. 0.02%秋水仙素：称取0.02g秋水仙素溶于100ml水中，在 棕色瓶中保存。
2. 卡诺（Carnoy‘s）固定液：酒精:冰醋酸=3:1（体积比），即 30ml酒精与10ml冰醋酸混合。
实验一 有丝分裂染色体标本制片技术
哈尔滨师范大学 生命科学与技术学院 遗传教研室
背景知识
细胞周期：通过
细胞分裂产生新
细胞的生长开始
G2
到下一次细胞分
裂形成子细胞结
束为止所经历的
过程。
有丝分裂的意义:
有丝分裂促进细胞数目增加，核内各染色体 准确复制为二，子母细胞具有同样质量和数 量的染色体，保证物种的连续性和稳定性。
2. 掌握制作有丝分裂染色体标本的压片方法； 3. 观察有丝分裂过程中染色体的动态变化。
实验原理：
1. 各种生长旺盛的植物组织中，如根尖、茎 尖、居间分生、愈伤组织等，细胞常进行 着旺盛的有丝分裂。在细胞分裂的适当时 期取材，并进行一定的处理，就可以在显 微镜下观察染色体的变化特点和染色体的 形态特征，并进行染色体计数。
2. 预处理：培养至根长1~2cm时，切取根尖， 用0.02%秋水仙素暗处理3~5h。
3. 固定：水洗后用卡诺固定液固定24小时，水洗， 转入95%乙醇或70%乙醇中保存。
（制片——临时装片）
4. 解离：取95%乙醇中保存的根尖水洗两次，用 1mol/L HCl 在60℃处理根尖8-10min后，水 洗3~4次。
5. 染色：根尖在有盖的小瓶中加入希夫试剂染色 10~20min。
6. 压片：在干净的载玻片上切下根尖分生区，滴一滴 45%醋酸，加盖玻片，用滤纸吸净多余的液体， 一手压住盖玻片一角，另一手持竹针轻敲盖玻片至 组织呈云雾状。将载玻片在酒精灯上轻烤，迅速在 盖玻片上覆滤纸条，用拇指垂直按压制片。
7. 镜检及观察。