骨髓间充质干细胞体外诱导分化为毛囊的研究开题报告
体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究的开题报告
体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究的开题报告一、研究背景软骨是一种具有特殊功能的结缔组织，在维持人体的正常生理功能中起着举足轻重的作用。
软骨缺损、软骨疾病等引起的软骨损伤已成为一个严重的健康问题。
之前的研究发现，骨髓间充质干细胞（BMSCs）可以分化为软骨细胞，并具有很好的修复软骨缺损的效果。
但是，传统的BMSCs骨髓移植受到很多限制，如手术风险、供体来源等。
因此，如何提高BMSCs分化为软骨细胞的效率和稳定性是目前研究的热点之一。
二、研究目的本研究旨在探究体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的方法。
通过研究不同的生化因子诱导条件、细胞培养基组成等因素对BMSCs向软骨细胞分化的影响，进一步提高其分化效率和稳定性，为治疗软骨缺损提供更为可靠的细胞治疗方法。
三、研究内容和方法1. 研究内容：（1）BMSCs分离与培养：采用骨髓抽取法，得到BMSCs，经过培养并筛选后，筛选出具有较高增殖能力、稳定性较好的BMSCs。
（2）体外诱导BMSCs向软骨细胞分化：通过控制诱导条件、添加生化因子、调节营养物质及培养基组成等影响BMSCs向软骨细胞分化的因素，采用RT-PCR、Western blot和细胞化学方法检测BMSCs分化为软骨细胞的相关表达水平，评价分化效果和稳定性。
2. 研究方法：（1）体外培养：BMSCs将在体外继续培养，诱导加入可溶性生化因子，包括TGF-β1、BMP-2、IGF-1等。
（2）细胞培养与检测：采用RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法鉴定生长因子处理后BMSCs向软骨细胞分化的效果，评价其效益和稳定性。
四、研究意义本研究通过探索不同的BMSCs分化诱导条件，旨在提高BMSCs向软骨细胞分化的效率和稳定性，为软骨缺损的治疗提供更为可靠的细胞治疗方法。
同时，研究对于深入理解BMSCs分化分子机制，有利于发掘BMSCs在其他组织修复中的应用。
五、论文结构安排第一章绪论1.1 研究目的和意义1.2 国内外研究现状1.3 研究内容和方法1.4 论文结构安排第二章材料与方法2.1 细胞分离与培养2.2 BMSCs向软骨细胞分化诱导方法2.3 检测方法第三章实验结果3.1 BMSCs分离与培养3.2 BMSCs向软骨细胞分化评价3.3 分化效率和稳定性检测第四章讨论4.1 BMSCs向软骨细胞的分化机制4.2 BMSCs在软骨缺损的治疗中的应用4.3 研究不足及展望第五章结论5.1 研究结论5.2 研究贡献参考文献。
骨髓间充质干细胞体外定向分化为多巴胺能神经元的实验研究的开题报告
骨髓间充质干细胞体外定向分化为多巴胺能神经元的实验
研究的开题报告
一、研究背景
多巴胺能神经元是一种重要的神经元类型，负责调控身体的运动、情绪和认知功能。
它的死亡和损伤会导致多种神经系统疾病，如帕金森病等。
因此，体外定向分化骨髓间充质干细胞为多巴胺能神经元已成为一种新的治疗策略。
二、研究目的
本研究旨在通过体外培养和定向分化骨髓间充质干细胞，获得高质量的多巴胺能神经元，探究其分化机制，为细胞治疗多种神经系统疾病提供实验依据。
三、研究内容
1. 通过多种细胞培养方法，获得高质量的骨髓间充质干细胞；
2. 优化体外培养和定向分化骨髓间充质干细胞为多巴胺能神经元的条件，比如细胞培养液组成、生长因子的添加、培养时间等；
3. 对分化后的多巴胺能神经元进行免疫荧光染色、流式细胞分析等，验证其表型和功能特征；
4. 探究多巴胺能神经元的分化机制，如RNA测序和微阵列芯片等。
四、研究意义
本研究有望为多种神经系统疾病细胞治疗提供新的途径，同时也能够深入探究多巴胺能神经元的分化机制，为未来研究提供重要实验依据。
骨髓间充质干细胞体外诱导分化为毛囊的研究开题报告
及答辩
预期研究成果
• 成功培养诱导前MSCs，细胞接种后12h可见少数细 胞开始贴壁生长，细胞形态成梭形，悬浮在溶液 中的细胞呈圆形，主要是造血细胞和造血干细胞。 24h后首次换液，去除非贴壁细胞，3天后细胞增 殖加快，呈集落样迅速生长，7天后细胞达到80% 融合，传代采用1﹕2，每3天传1次，随着传代次 数的增加而逐渐达到纯化的目的。
研究目标
1. 观察MSCs与毛囊联合培养后的不同 时期MSCs的形态学变化。
2. 研究MSCs与毛囊联合培养后，MSCs 经诱导以后不同时期细胞表型的变 化及细胞表型的转化率。
3. 研究MSCs与毛囊联合培养后，比较 诱导前后向MSCs毛囊分化过程中相 关表达相关蛋白的变化。
研究内容
1. MSCs的培养、形态学观察以及绘制 生长曲线，MSCs的鉴定及标记
及细胞活力的检测
化及细胞表型转化率 法检测共培养的细胞
12 2-3d 1
37℃ 5%CO2 10%FCS DMEM 2mL DMEM
100gWistar
MSCs的培养、形态学观察以及鉴
定
剪
取
颈
取去
椎 无出 股
冲 出
、 每
脱 菌股 骨培
的
：
臼 条骨 及养
雄 法 件和 胫液
性 处 下胫 骨冲
大死
骨 的洗
MSCs作为首选靶细胞的优点
体外诱导兔骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化的研究的开题报告
体外诱导兔骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化的研究的开题报告一、研究背景和意义随着人口老龄化和生活方式的改变，心血管疾病的发病率不断增加，成为严重威胁人类健康的疾病之一。
平滑肌细胞是心血管系统中的重要组成部分，与血管的收缩和松弛、血压的调节以及血液循环等密切相关。
因此，平滑肌细胞的缺乏或功能异常会导致心血管疾病的发生。
目前，细胞治疗已成为治疗心血管疾病的新途径，其中骨髓间充质干细胞（BMSCs）由于其易得、易扩增、多向分化潜能和免疫调节作用等优点，成为最具潜力的细胞治疗手段之一。
研究表明，BMSCs能够向平滑肌细胞分化，但其分化程度和效果仍有待提高。
因此，本研究旨在探究体外诱导兔BMSCs向平滑肌细胞分化的最佳条件及分化机制，为心血管疾病的治疗提供新的思路和方法。
二、研究内容和方法1. 研究内容（1） BMSCs的提取与鉴定：收集兔骨髓，并通过红细胞溶解液和悬浮培养法提取BMSCs；使用细胞形态学和表面标志物鉴定方法确立BMSCs的特异性。
（2）平滑肌细胞分化条件的筛选：体外诱导BMSCs分化为平滑肌细胞，并通过细胞形态学、分子生物学、蛋白质组学等手段评价分化程度和效果，筛选出最佳的分化条件。
（3）平滑肌细胞分化机制的研究：通过Western blot、Real-time PCR、免疫组化等手段检测与平滑肌分化相关的分子表达变化，探讨平滑肌分化机制。
2. 研究方法（1）实验动物：新西兰白兔。
（2）主要试剂：DMEM/F12基础培养液、FBS、L-Ascorbic Acid、β- glycerophosphate、Dexamethason、Insulin、Fibrinogen、Thrombin等。
（3）实验步骤：BMSCs的提取、平滑肌细胞分化条件的筛选、平滑肌细胞分化机制的研究。
三、研究预期成果（1）筛选出最佳的平滑肌细胞分化条件，提高BMSCs向平滑肌细胞分化的程度和效果。
（2）探究平滑肌细胞分化机制，结合上下游调控因子，探索平滑肌细胞分化的新途径和方法。
不同月龄SD大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖及分化能力的研究的开题报告
不同月龄SD大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖及分化能力的研究的开题报告一、研究背景骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一类重要的多能干细胞，在组织工程、再生医学和疾病治疗等领域具有广泛的应用前景。
然而，BMSCs的体外培养和扩增一直是BMSCs应用瓶颈之一。
此外，BMSCs的来源、分离和培养条件也对其性质产生影响。
因此，进一步探究BMSCs的特性和体外增殖、分化规律，对于推动BMSCs的临床应用具有重要意义。
二、研究目的本研究旨在探究不同月龄SD大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖及分化能力的变化规律，为BMSCs的临床应用提供理论基础和实验依据。
三、研究方法1. 实验动物：选择SD大鼠为实验对象，分别选择1、2、3、4、5和6月龄的SD大鼠。
2. 分离和培养BMSCs：采用骨髓贴壁法分离和培养BMSCs，研究期间定期观察和记录BMSCs的生长情况、形态学特征等。
3. 线粒体DNA拷贝数检测：采用实时荧光定量PCR技术检测BMSCs中线粒体DNA的拷贝数，进一步研究BMSCs增殖和分化能力的变化规律。
4. 分化实验：将BMSCs分别培养于成骨诱导液、成脂诱导液和软骨诱导液中，观察和记录细胞分化情况。
四、预期结果1. BMSCs的体外增殖和分化能力随着SD大鼠月龄增加逐渐下降；2. BMSCs的线粒体DNA拷贝数可能是体外增殖和分化能力下降的一个重要因素；3. BMSCs的分化能力随着环境因素和分化诱导液的不同而有所差异。
五、意义和价值通过探究SD大鼠BMSCs的体外增殖和分化能力变化规律，可以为BMSCs的临床应用提供理论基础和实验依据，为进一步探究肌骨疾病的发生机制、及其治疗和临床康复提供新的思路和方法。
针药结合诱导骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的实验研究的开题报告
针药结合诱导骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的实验研究的开题报告一、研究背景和意义骨关节疾病是一种常见病，严重影响患者的生活质量。
干细胞治疗是一种新型的治疗方案，受到越来越多的关注。
骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）是干细胞的一种，具有多向分化能力，可分化为软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞等。
因此，BMSCs在软骨组织修复中具有潜在的应用价值。
但是，BMSCs的分化受到多种因素的影响，如环境因素、细胞因素等，因此需要寻找一种能够促进其在软骨组织修复中分化为软骨细胞的方法。
近年来，针药结合治疗在临床上应用广泛，其在激活细胞、增强组织修复等方面具有突出的作用。
因此，本研究选择针药结合的方法作为干预因素，探究其在BMSCs分化为软骨细胞方面的作用，旨在为软骨组织修复提供一种新的治疗方案。
二、研究内容和方法本研究将采用体外实验方法，收集人类BMSCs，将其分为实验组和对照组。
实验组将在不同的时间点加入针药结合液，对照组则加入普通培养液，观察两组细胞在不同时间点的形态学变化、染色体结构和分化能力的改变。
同时，采用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫吸附法检测细胞中相关基因和蛋白质的表达水平，以评价不同时间点的分化效果。
三、研究预期结果本研究预期能够验证针药结合对BMSCs分化为软骨细胞的促进作用，并探究其机制。
同时，该研究将为软骨组织修复提供一种新的治疗思路，并为干细胞治疗提供一种新的方法。
四、研究的意义与影响本研究将在理论上探究干细胞分化的相关机制，为干细胞治疗提供新的方法和思路；在实践上为软骨组织修复提供新的治疗思路和方法，有望成为临床上治疗骨关节疾病的重要手段。
同时，本研究可能对针药结合治疗的机理进行深入探究，推动其在临床治疗中的应用和进一步发展。
骨髓间充质干细胞免疫学特性研究的开题报告
骨髓间充质干细胞免疫学特性研究的开题报告
题目：骨髓间充质干细胞免疫学特性研究
1. 研究背景
骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一种原始的间充质细胞，具有多向分化潜能和免疫调节作用。
BMSCs在临床应用中具有良好的应用前景，但其免疫学特性尚未完全明确，需要深入研究其与免疫系统之间的相互作用。
2. 研究目的
本研究旨在探究BMSCs的免疫学特性，包括表面标志物表达情况、分泌免疫因子的能力、对免疫细胞的调节作用以及对炎症反应的影响等，以期为BMSCs在免疫治疗中的应用提供更为深入细致的认识和理论基础。
3. 研究内容
本研究将采取以下研究内容：
（1） BMSCs表面标志物的检测：采用流式细胞术检测BMSCs表面标志物的表达情况，探究其免疫学特性和细胞类型。
（2）免疫因子的检测：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BMSCs分泌的免疫因子，如IL-6、IL-10、TGF-β等，研究其对免疫细胞的调节作用。
（3） BMSCs对免疫细胞的调节作用：采用共培养系统或转移系统等方法，观察BMSCs对免疫细胞的作用及调节机制，如CD4+T细胞、巨噬细胞等。
（4） BMSCs对炎症反应的影响：采用炎症模型动物，检测BMSCs对炎症反应的影响及机制，如NF-κB通路等。
4. 研究意义
本研究将为深入了解BMSCs的免疫学特性、探索其与免疫系统之间的相互作用提供理论基础，有助于推进BMSCs在免疫治疗中的应用。
此外，本研究也有助于提高人们对于免疫治疗技术的认知和理解。
人骨髓间充质干细胞体外向血管内皮细胞诱导分化的研究的开题报告
人骨髓间充质干细胞体外向血管内皮细胞诱导分化的研究
的开题报告
一、选题背景及意义
干细胞具有自我复制和分化为多种细胞类型的潜能，因此被视为治疗各种疾病的潜在来源。
而骨髓中的间充质干细胞（MSCs）被认为是一种主要来源，因为它们相对易获取并且具有丰富的来源。
将MSCs向特定细胞类型分化的方法越来越被研究，其
中向内皮细胞的分化方法是一种有潜力的方法，因为内皮细胞在许多疾病（如心血管
疾病和炎症性疾病）的治疗中具有重要作用。
因此，这项研究的目的是研究MSCs向
内皮细胞的诱导分化方法，以拓宽治疗疾病的途径。
二、研究问题
本研究旨在回答以下问题：
1.间充质干细胞可否被诱导分化为内皮细胞?
2.在诱导过程中是否存在特定的生物因素或细胞因素对内皮细胞分化的促进作用?
3.经过诱导分化后，MSCs分化到内皮细胞的程度如何评估?
三、研究方法
本研究将使用骨髓MSCs和血管内皮细胞来进行体外实验。
MSCs将通过培养和
特定的生物因子和细胞因子处理来诱导分化为内皮细胞。
分化程度将通过多种实验方
法进行评估，比如免疫荧光染色和电镜检测。
通过比较不同处理组的结果，我们将确
定最佳的诱导方法。
四、预期结果
我们预计最终能够成功将MSCs分化为内皮细胞，并探索出特定的生物因素和细胞因素对内皮细胞分化的促进作用。
以及在MSCs分化到内皮细胞的程度方面找到量
化方法，并为进一步治疗疾病提供基础研究。
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鼠
骨骨
骺髓
端腔
细 胞 悬 液 约
的
培
养
中
箱 培
养
换 液
消 化 传
次代
取第三代MSCs进行鉴定 CD29、CD44、CD105免疫细胞化学染色
MSCs的标记以及标记物的检测
• 取第3代MSCs，待细胞融合为50%-60% 时，向培养液中加入BrdU (终浓度 5μmol／L)，置37℃、5%CO2孵育箱 内培养
• 每两天换一次液，同时加入新的BrdU 直至MSCs融合
• 免疫细胞化学法行BrdU检测。
无 菌 条雄 件性 下大 取鼠 上的 述触 同须 一部 只皮
肤
D-Hanks Wistar
3-5
3
毛囊的器官培养
液 连 续 冲 洗
遍 ， 每 遍
解 剖 显 微 镜 下 用 眼 科 剪 刀 和
显 微 外 科 器 械 分 离 出 毛 囊
• 倒置显微镜下观察毛囊的生长情况和 MSCs的形态学变化，并测定细胞活力。
MSCs经诱导后细胞表型的变化
分别在诱导后3、7、10、15d用免疫细胞化 学双染色法检测共培养的细胞，观察“毛 囊组”与“对照组”BrdU与K15、BrdU与 K19和BrdU与β1整合素分别共表达的情况， 以PBS代替一抗作阴性对照，DAB显色，在 200倍光学显微镜下观察,细胞膜β1整合素 和细胞质K15、K19免疫组化染色后呈棕黄 色BrdU染核为蓝黑色。“毛囊组”与“对 照组”BrdU与K15、BrdU与K19和BrdU与β1 整合素双染色细胞计数，结果以双染色阳 性细胞百分率表示，比较不同时相细胞 BrdU与K15、BrdU与K19和BrdU与β1整合素 双染色细胞中阳性表达情况。
• 通过比较诱导前后MSCs向毛囊分化过 程中蛋白质表达的变化，国内外未见 报道。
研究计划
• 2005.09—2006.04 综述 • 2006.05—2006.11 开题报告、预
实验 • 2006.12—2007. 7 细胞培养以及相
关指标的检测 • 2007.8-2008.6 总结资料、写论文
MSCs作为首选靶细胞的优点
1. 取材方便，分离培养技术简单。 2. 具有高度增殖的特性，并且体外培
养时，保持了生物学特性的稳定。 3. 体外扩增以及导入外源性基因相对
方便。 4. 可以通过骨髓穿刺取自自体，因而
由它诱导来的组织在进行移植时不 存在组织配型及免疫排斥的问题。
• 已有研究证实MSCs经自体移植作用于 创面局部后，在皮肤微环境中分化为 血管内皮细胞、表皮细胞和皮脂腺导 管细胞。
• 诱导后MSCs的形态。诱导前MSCs呈成纤维 细胞样，诱导后形态发生变化，3天可见细 胞趋向于多角形，随着时间的延长呈现卵 圆形或梭形，到15d时开始出现圆形细胞以 及梭形的集落形成，有一定的增殖分化能 力。
• 4、诱导前、后MSCs免疫细胞化学比较， “毛囊组” MSCsβ1整合素，K15、K19 表 达明显高于“对照组”，统计学处理数据， P<0.01，有显著的统计学意义。
3. 本实验室具备完备的组织培养和显微解剖 的设备，可以完成此项工作。
4. 经费预算: 文献检索:100元 实验动 物:300元 实验药品:2600元 装订论 文:500元 其它:200元 合计:3900元
立题新意
• 通过研究MSCs与毛囊联合培养后的不 同时期MSCs的形态学变化，探讨MSCs 经诱导以后不同时期细胞表型的变化 以及细胞表型转化率如何，国内外未 见报道。
研究目标
1. 观察MSCs与毛囊联合培养后的不同 时期MSCs的形态学变化。
2. 研究MSCs与毛囊联合培养后，MSCs 经诱导以后不同时期细胞表型的变 化及细胞表型的转化率。
3. 研究MSCs与毛囊联合培养后，比较 诱导前后向MSCs毛囊分化过程中相 关表达相关蛋白的变化。
研究内容
1. MSCs的培养、形态学观察以及绘制 生长曲线，MSCs的鉴定及标记
MSCs—组织工程皮肤功能重建的希望
• MSCs体外培养时保持干细胞的特性自 身不断的增殖，在不同的诱导条件下 能够向不同的谱系分化，为重建皮肤 的解剖结构和生理功能带来了希望。
• 因此，研究利用MSCs与毛囊共培养来 诱导MSCs分化来重建毛囊、汗腺、皮 脂腺的生理功能，从而完整重建皮肤 的解剖结构和生理功能，探讨MSCs在 皮肤组织损伤修复过程中的作用及其 机理，为皮肤组织的修复重建开辟新 的思路。
2. 毛囊的器官培养、形态学以及组织 学观察
3. MSCs与毛囊联合培养后，观察MSCs 经诱导后的细胞形态学的变化以及 测定细胞活力
4. 观察MSCs经诱导后细胞表型的变化 及计算细胞转化率
5. 研究MSCs经诱导后向毛囊分化过程 中蛋白质表达的变化
拟解决的关键问题
1. 成功完成MSCs与毛囊联合培养 2. 确定向毛囊、汗腺、皮脂腺定向转
• 因此，MSCs在将来皮肤创伤修复的实 际应用中具有潜在的优势，特别是跨 胚层的分化潜能促使人们探讨能否利 用骨髓间充质干细胞的诱导分化来完 整重建皮肤的解剖结构和生理功能。
MSCs分化的机理和诱导条件
• 大多数人的观点认为MSCs的分化与其所处 的微环境“壁龛”密切相关，不同的组织 细胞微环境有着不同的细胞因子，可能是 诱导MSCs获得靶组织的表型，并向不同细 胞谱系分化的主要原因之一。
目前组织工程皮肤研究的现状
• 虽然组织工程化皮肤是世界上第一种获得 批准的组织工程产品，并在治疗顽固性溃 疡和严重烧伤患者方面取得很好的疗效， 但是迄今未能合成还有皮肤附属器（毛囊、 汗腺、皮脂腺等）的皮肤。
• 目前尚无一种人工皮肤能完全满足创面修 复在功能上的需要，存在一个共同问题是 均不能重建毛囊、汗腺、皮脂腺等皮肤附 属器，降低了皮肤对环境的适应能力，如 何实现皮肤的功能重建成为当前创伤修复 的研究热点。
实验仪器、药品试剂及动物等
• 实验仪器：CO2培养箱、倒置相差显微镜、 超净工作台、显微手术器械和体式显微镜、 压力蒸汽灭菌锅、照相机等。
• 药品以及试剂：DMEM培养基、PBS缓冲液、 D-Hanks液、胎牛血清、胰岛素、氢化可的 松、BrdU以及BrdU抗体、β1整合素和K15、 K19抗体、免疫组化试剂盒、DAB显色剂等。
• 但是近来有人认为以前有关MSCs转化为不 同胚层细胞的现象可能是由于干细胞与所 处的环境中细胞发生融合所致，但是这种 质疑一方面不能解释在体外比较单一的条 件下，诱导MSCs向骨、软骨以及神经等细 胞分化的现象，同时质疑者本身也认为融 合现象发生率比细胞发生转化的发生率更 低，因而不能完全用细胞融合来解释。
骨髓间充质干细胞体外诱导 分化为毛囊的研究
姓名： 导师：* * * 专业：* * *
2006.10.21
立题依据
• 皮肤是人体最大的器官，在抵御微生物入 侵，紫外线辐射以及防止水分的丢失、调 节体温方面起重要作用，同时也是免疫系 统的组成部分之一
• 大面积Ⅲ度烧伤、广泛瘢痕切除、外伤性 皮肤缺损以及皮肤溃疡等导致的严重皮肤 缺损，特别是大面积Ⅲ度烧伤，伤及皮肤 全层及其附属器，因而仅靠创面自身难以 实现皮肤的再生，需要足够的皮肤替代物 进行修复。
• 成功培养毛囊，通过倒置显微镜下观察可发现培 养第1天大部分毛囊开始生长，表现为毛囊逐渐延 长，毛干及内、外根鞘的共同生长，毛囊的生长 延长主要集中在前4天，到第7天后部分毛囊开始 贴壁，可见真皮鞘成纤维样细胞和上皮样细胞从 毛囊的上端或中下端长出，逐渐向周围扩散，呈 铺路石样外观；到第10天以后毛囊大部分贴壁， 生长缓慢，基本无变化。
及细胞活力的检测
化及细胞表型转化率 法检测共培养的细胞
12 2-3d 1
37℃ 5%CO2 10%FCS DMEM 2mL DMEM
100gWistar
MSCs的培养、形态学观察以及鉴
定
剪
取
颈
取去
椎 无出 股
冲 出
、 每
脱 菌股 骨培
的
：
臼 条骨 及养
雄 法 件和 胫液
性 处 下胫 骨冲
大死
骨 的洗
选小 取心 完移 整入 无 损孔 伤培 的养 生板 长中 期， 毛每 囊孔
24
1
分
根
钟
37℃ 5%CO2 0.5ml
在
每
孔 加Βιβλιοθήκη 、入培养
液
孵
育
箱
内
培
养
MSCs与毛囊的联合培养
• 将标记好的MSCs细胞悬液移入24孔培 养板中，每孔0.5ml，然后选取培养 24h后生长明显的毛囊（≥0.1mm）移 入此培养板中，共移入12根，每孔一 根，分成“毛囊组”和“对照组”， （共培养6组，“毛囊组”和“对照 组”各3组），每2-3天换液一次
• 实验动物：Wister雄性大鼠（北京医科大 学实验动物部提供）
本研究的工作基础
本实验室多年从事细胞培养 的研究，并且有研究皮肤组织工 程的基础，具备先进的细胞培养 设备和显微解剖设备，能够顺利 完成相关指标的检测。
化的干细胞类别。 3. 探讨分别将其移植于人造皮肤上构
建含有皮肤附属器（毛囊、汗腺、 皮脂腺等）的人工皮肤。
采取的研究方法、技术路线和实验方案
MSCs的培养、形态学观察以及鉴定
毛囊的器官培养
MSCs的标记以及标记物的检测 选取生长明显的毛囊（24h≥0.1mm）
MSCs与毛囊的联合培养
MSCs细胞形态学的变化 MSCs细胞表型的变 免疫细胞化学双染色
组织工程皮肤功能修复的希望
• 随着干细胞理论技术的发展，给重建皮肤 创伤组织解剖结构的同时恢复其生理功能 带来希望。
• 干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚 胎干细胞由于涉及伦理学的问题，目前大 规模的基础研究和临床应用受到一定限制， 因此成体干细胞的研究备受重视。