2食用菌接种室无菌操作及管理细则
无菌接种操作注意事项
无菌接种操作注意事项
嘿，朋友们！今天咱来聊聊无菌接种操作那些事儿，这可太重要啦！就好比你要去一个特别干净的地方，得把自己收拾得干干净净的，不能带一点儿脏东西进去。
无菌接种啊，首先得把环境整得特别干净。
你想想，要是周围脏兮兮的，那细菌不就像小调皮一样到处乱跑啦！所以啊，操作的地方得认真打扫，该消毒的可一点儿都不能马虎。
然后呢，工具也得好好准备。
那些接种的工具就像是战士的武器，可不能有毛病呀！要是工具不干净，那不就相当于给细菌开了大门嘛。
还有啊，自己的手也得洗得干干净净的。
这手就像是细菌的小乐园，要是不洗干净，它们可就跟着你到处捣乱啦！你说你总不能带着一群小捣蛋去干这么精细的活儿吧。
在操作的时候，可得小心再小心。
就像走钢丝一样，得稳稳当当的。
动作不能太粗鲁，不然把什么细菌都给招惹来了。
你得轻手轻脚的，像对待宝贝一样对待那些要接种的东西。
哎呀，你想想，要是不小心把细菌带进去了，那不就像在一锅好汤里掉进了一粒老鼠屎，全完蛋啦！这可不是开玩笑的呀！
而且啊，接种的时候要专注，不能分心。
不能一会儿想着别的事儿，一会儿又来干这个。
就像开车一样，得全神贯注，不然就容易出事儿。
还有哦，做完了接种，也不能就不管啦。
还得看看有没有什么问题，有没有细菌偷偷跑进去了。
这就像是考试完了要检查一遍试卷一样，可不能马马虎虎的。
总之啊，无菌接种操作可不是闹着玩的，这是一件特别严肃认真的事儿。
咱们得像保护宝贝一样保护那些要接种的东西，不能让细菌有一点儿可乘之机。
要是不注意这些，那后果可不堪设想啊！大家可一定要记住啦！。
无菌室操作程序及要求
无菌室操作程序及要求
1、接种检样前要做以下准备工作：
将台面、地面消毒（7 5%酒精），再清洁。
将所有要用的灭菌玻璃器皿、灭菌培养基等摆放好。
要备好酒精灯、酒精棉球（75%、95%）等。
准备完毕打开紫外线灯，消毒30分钟。
2、带检样进入无菌室，换鞋、更衣、戴帽。
进入后不可随便进出。
手用75%酒精消毒后再进行样品的称量、均质、操作等操作。
接种时要用吸耳球吸样，不可用口直接吸。
若无均质器则用灭菌剪刀（擦拭95%酒精后通过灼烧消毒）最大可能的将样品剪碎。
做样时在旁边要放有一条沾有消毒水的毛巾，当样液不当心溅出时可以即时擦拭。
做样时要把标识清楚：测样的编号、稀释倍数，以免发生化验室事故。
工作完毕后对台面、地面进行消毒（7 5%酒精消毒），再清洁。
打扫完毕后打开紫外线灯灭菌30分钟。
接种室操作管理规则
接种室操作管理规则1接种室消毒；接种室在放入经过灭完菌的瓶袋后，先要用消毒液室内空间喷洒消毒，然后打开紫外线灯再用气雾消毒剂双向消毒，服装鞋帽也要放在缓冲间同时消毒。
消毒液要经常更换，不要长时间使用同一种消毒液，消毒时间需要40分钟至1小时。
2接种箱消毒；接种室消毒完毕后，接种工作人员要同时进入缓冲间，不要隔一会进一个，工作人员进入后不得随意外出。
工作人员穿好服装鞋帽，戴上手套口罩，长发的一定要在头上盘好，不要露在帽子外面，然后打开接种箱把待接种的瓶袋、接种用具同时放入接种箱中，接种箱密封后操作人员从接种箱袖口伸进双手把气雾消毒剂点燃，或用紫外线灯光消毒40分钟以上。
3接种操作；接种箱消毒完毕后工作人员用75%酒精擦拭双手和需要用的菌种瓶、管的外壁进行消毒，然后把菌种瓶、管从接种箱的袖口放入接种箱，再次用75%的酒精擦拭双手及菌种瓶、管。
点燃酒精灯灼烧接种用具，再拿掉菌种瓶、管的棉塞，用火焰灼烧菌种瓶管的口部，待接种用具冷却后伸入菌种瓶、管中，轻轻刮下上部的老菌种块和部分菌种扔掉，再次灼烧接种工具冷却后放入菌种瓶、管中待用。
打开待接种的瓶袋，拔掉棉塞后瓶子也要在火焰上灼烧消毒，然后用接种工具取出一些菌种在火焰的上方快速的放到待接的瓶袋中，接完种后把棉塞放在火焰上灼烧后重新塞好，再次重新灼烧接种工具放入菌种瓶中，以待下次使用，这样一次接种程序工作完成。
需要注意的是，接种操作一定要在火焰的上方的2----5公分内，不得超出规定范围。
接种期间接种工具不得碰到瓶、管外壁和任何地方，如不小心碰到需要认真用酒精擦拭接种工具后用火焰灼烧。
4 卫生管理；接种完毕后把接完种的瓶袋摆放在培养室中培养，接种箱和接种室的废弃物都要清理干净，接种箱的底部、顶部和四周要用。
无菌室管理使用规程
无菌室管理使用规程
1 目的建立无菌室管理使用规程，保证操作者正确使用。
2 范围适用于无菌室操作。
3 责任者操作人员、无菌室管理人员。
4 内容
4．1无菌室应严禁放置杂物，无关人员严禁入内。
4．2 无菌室应严格保持整洁，防止污染，定期用甲醛熏蒸消毒（每月一次），使用前用0.1%新洁尔灭控式消毒净化工作台。
4．3 实验人员进入无菌室，必须更换无菌衣、帽、鞋等，操作前用0.1%新洁尔灭菌或75%酒精进行手消毒。
4．4 使用前开启紫外灯照射60分钟，同时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理，再开紫外灯照射30分钟。
4．5检验过程严格按照无菌操作规程操作，爱惜室内用具，使用完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。
4．6 接种环在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可接种培养物。
4．7 所有带菌实验用品，须经有效的消毒灭菌处理后再洗刷。
严禁污染下水道。
4．8 无菌室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开肉汤琼脂平皿30分钟，经37℃培养48h），100级平均菌落数不得过1个/皿，如超过应进行清洁消毒。
4．9 无菌室进出程序如下：
无菌室进出程序
虚线为出室程序。
接种室操作管理规则
接种室操作管理规则
接种室是指在无菌的环境下进行植物材料转接、培养物转移、试管苗继代的房间。
接种环节要求：
1.非工作人员禁止进入接种室。
2.接种工作人员进入接种室工作前，需用肥皂将手仔细清
洗干净，并及时剪除指甲，进入接种室必须更换鞋子和
工作服。
3.接种室每天使用前，提前打开紫外灯和臭氧消毒机进行
消毒灭菌半小时，接种操作员进入前提前半小时关闭紫
外灯和臭氧消毒机并打开室内日光灯，待臭氧气味散尽
后方可进入。
4.超净工作台风机和紫外灯使用前需提前半小时打开才能
使用，接种操作工作员坐好位置后需用75%的酒精擦拭
双手和超净工作台面以及内部四壁。
5.接种操作工作人员在接种室内禁止随意进出走动、聊天
喧哗、玩手机。
6.接种室每天使用后，必须及时清理接种过程中产生的垃
圾和废弃物，地面清扫后用消毒液拖地，扫把、拖把等
清洁工具必须接种室专用，使用后及时清洗干净并用消
毒液消毒。
7.定期用消毒液擦拭超净工作台外部四壁、接种小推车等
设备，接种室的空间需定期用臭氧消毒机消毒1～2小时。
食用菌接种室如何消毒灭菌
食用菌接种室如何消毒灭菌食用菌接种室如何消毒灭菌食用菌的接种室需要消毒灭菌才能更好地保证食用菌的成长环境。
以下是小编给大家介绍的食用菌接种室的消毒灭菌的方法，一起来看看吧。
食用菌接种室的消毒灭菌：超净工作台无菌操作规程(1)保持清洁超净工作台应放在干燥清洁的房间内,经常保持清洁。
每次使用前将接种材料和接种工具有序地放在工作台上,并检查是否齐全,然后进行紫外线照射30分,杀菌消毒。
(2)净化操作接种前先开动机器,以净化操区的空区空气气环境,待机器正常运转20分,操作区空气净化后,再进行接种。
(3)规范操作接种人员穿无菌工作服和鞋,戴好口罩和帽子,接种用具放在台面两侧,操作人员的手置于接种材料的下风侧。
工作时严禁搔头,接种时力求敏捷,尽量减少污染的机会,用过的火柴杆、棉球和掏出的老菌皮放入容器内,不得乱放。
(4)接种接种完毕,将已接种的试管或瓶(袋)贴好后处理标签,放进培养室(箱)进行培养,用杀菌药液擦净台面及地面。
(5)甲醛定期熏蒸该管理程序同接种室、(箱)处理。
食用菌接种室的消毒灭菌：接种室(箱)无菌操作规程(1)保持清洁经常打扫卫生,保持接种室(箱)内外清洁。
(2)严格消毒使用前将试管或料瓶(袋)和接种工具有序地放在室(箱)内和工作台上,并检查是否齐全,衣帽和口罩挂在缓冲室衣帽钩上,然后进行紫外线照射或药物熏蒸消毒。
1小时后,操作人员进入缓冲室,用肥皂水洗手后进行更衣、换鞋,戴上口罩、帽子,进接种室或把手伸进接种箱后再用消毒大王喷雾降尘除菌,准备接种。
(3)规范操作工作人员接种前用75%的酒精棉球擦手、擦接种工具和瓶袋,防止交叉感染。
接种时用酒精灯灼烧接种工具,棉塞、试管口、瓶(袋)口不离开火焰区,如棉塞不慎着火,用湿布盖住让其缺氧熄灭。
接种时动作要敏捷,配合要默契,工作时严禁搔头和其他人在室内快步走动,以降低发尘量。
用毕的火柴杆、棉球及掏出的老菌皮应放入容器内,不得乱放。
(4)接种后处理接种完毕,将已接种的试管或瓶(袋)贴好标签,放进培养室(箱),进行培养,将废弃物拿出室(箱)外焚烧或埋掉,将室(箱)内打扫干净。
无菌技术操作规程及评分细则
无菌技术操作规程及评分细则一、无菌技术操作原则1.操作环境清洁且宽敞①操作室应清洁、宽敞、定期消毒；无菌操作前半小时停止清扫、减少走动，避免尘埃飞扬。
②操作台清洁、干燥、平坦，物品布局合理。
2.工作人员仪表符合要求无菌操作前，工作人员应着装整洁、修剪指甲、洗手、戴口罩，必要时穿无菌衣、戴无菌手套。
3.无菌物品管理有序规范①存放环境:适宜的室内环境要求温度低于24C，相对湿度＜70%，机械通风换气4～10次/小时；无菌物品应存放于无菌包或无菌容器内，并置于高出地面20m、距离天花板超过50cm、离墙远于5cm处的物品存放柜或架上，以减少来自地面、屋顶和墙壁的污染。
②标识清楚:无菌包或无菌容器外需标明物品名称、灭菌日期；无菌物品必须与非无菌物品分开放置，并且有明显标志。
③使用有序:无菌物品通常按失效期先后顺序摆放取用。
必须在有效期内使用，可疑污染、污染或过期应重新灭菌。
④储存有效期:使用纺织品材料包装的无菌物品如存放环境符合要求，有效期宜为14天，否则一般为7天；医用一次性纸袋包装的无菌物品，有效期宜为30天；使用一次性医用皱纹纸、一次性纸塑袋、医用无纺布或硬质密封容器包装的无菌物品，有效期宜为180天；由医疗器械生产厂家提供的一次性使用无菌物品遵循包装上标识的有效期。
4.操作过程中加强无菌观念进行无菌操作时，应培养并加强无菌观念:①明确无菌区非无菌区、无菌物品、非无菌物品，非无菌物品应远离无菌区。
②操作者身体应与无菌区保持定距离。
③取、放无菌物品时，应面向无菌区。
④取用无菌物品时应使用无菌持物钳。
⑤无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内；⑥手臂应保持在腰部或治疗台面以上，不可跨越无菌区，手不可接触无菌物品。
⑦避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。
⑧如无菌物品疑有污染或已被污染，即不可使用，应予以更换。
⑨一套无菌物品供一位病人使用。
二、无菌技术操作评分细则。
2.食用菌接种室无菌操作及管理细则
食用菌接种室无菌操作及管理细则为规范接操作，提高接种成活率，特制定此细则，本细则适用于接种室接种操作人员，菌种室及相关人员参照执行。
1、接种室接种操作人员应有强的无菌操作意识，任何不规范或无意识的操作及行为都有可能给接种带来污染隐患，因此所有接种室操作及行为都应此细则为标准执行，细则之外的操作及行为经咨询主管人员并经同意后方可用于接种作业，同时我们将根据实际情况对本细则进行补充和完善。
2、接种室、缓冲间的消毒接种室为高度无菌区，每天接种前2.5~3小时时段必须对接种室进行较为严格的消毒处理，消毒之前所有接种所需物件、菌种等必须一次性准备到位。
2.1菌种消毒挑选好的菌种在接种室开始消毒之前应对菌袋表面进行药浴消毒，消毒所用药品为0.1%高锰酸钾溶液，消毒时将菌袋浸入溶液中，并用抹布进行擦试，袋壁、袋颈、袋口及棉塞露于空气中的部位都应擦到，将擦洗完毕的菌种马上放到接种室即可以进行接种室的空间消毒作业。
2.2接种消毒方法接种室消毒时臭氧机开机时间为2小时，同时点3大包菇保一号辅导清毒；缓冲间5小包菇一号进行薰蒸。
接种室消毒开始时间为每天早上的5：00~5：15，下午为11：15~11:30,接种时间上午不晚于8：10，下午不晚于14：10。
臭氧机关时间将由时控开关自动控制，消毒人员不再进入缓种间手动关闭。
3、接种前准备接种室、缓冲间均采用统进统出方式，严禁分批及无序进出，进入前所有操作人员必须将个人事情处理好，一旦进入直至接种完毕中途不得出入，进入缓种间后必须更换工作服、戴工作帽、穿专用鞋，换好后蘸取消毒液将双手洗净，然后同时进入接种室开始接种作业，进入缓冲间和接种室均应注意随手把门关好不留空隙。
4、接种操作进入接种间先用75%酒精把手、接种铲、剪刀及工作台面、垫板擦拭一遍并将接种铲、剪刀在酒精灯火焰上进行灼烧，然后可进行以下操作。
4.1将菌种袋棉花塞、套环拔掉用灼烧后的接种铲将料上表面0.5cm左右的菌种刨掉弃之不用，所弃之菌种集中剩放于小桶内，做好后将菌袋倒置，并将袋口上折放于塑料筐内，注意袋口的密封，菌种不可暴露于空气中。
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食用菌接种室无菌操作及管理细则
为规范接操作,提高接种成活率，特制定此细则,本细则适用于接种室接种操作人员,菌种室及相关人员参照执行。
1、接种室接种操作人员应有强的无菌操作意识,任何不规范
或无意识的操作及行为都有可能给接种带来污染隐患，因此所有接种室操作及行为都应此细则为标准执行,细则之外的操作及行为经咨询主管人员并经同意后方可用于接种作业,同时我们将根据实际情况对本细则进行补充和完善。
2、接种室、缓冲间的消毒
接种室为高度无菌区，每天接种前2．５~３小时时段必须对接种室进行较为严格的消毒处理，消毒之前所有接种所需物件、菌种等必须一次性准备到位。
2．１菌种消毒
挑选好的菌种在接种室开始消毒之前应对菌袋表面进行药浴消毒,消毒所用药品为0．1％高锰酸钾溶液，消毒时将菌袋浸入溶液中,并用抹布进行擦试，袋壁、袋颈、袋口及棉塞露于空气中的部位都应擦到,将擦洗完毕的菌种马上放到接种室即可以进行接种室的空间消毒作业。
2.２接种消毒方法
接种室消毒时臭氧机开机时间为2小时,同时点3大包菇保一号辅导清毒;缓冲间5小包菇一号进行薰蒸。
接种室消毒开始时间为每天早上的5:00~5:１5,下午为1１:１５~1１:30,接种时间上午不晚于8：
10,下午不晚于14:1０。
臭氧机关时间将由时控开关自动控制，消毒人员不再进入缓种间手动关闭。
3、接种前准备
接种室、缓冲间均采用统进统出方式，严禁分批及无序进出，进入前所有操作人员必须将个人事情处理好,一旦进入直至接种完毕中途不得出入，进入缓种间后必须更换工作服、戴工作帽、穿专用鞋,换好后蘸取消毒液将双手洗净，然后同时进入接种室开始接种作业，进入缓冲间和接种室均应注意随手把门关好不留空隙。
4、接种操作
进入接种间先用75%酒精把手、接种铲、剪刀及工作台面、垫板擦拭一遍并将接种铲、剪刀在酒精灯火焰上进行灼烧,然后可进行以下操作。
4.1将菌种袋棉花塞、套环拔掉用灼烧后的接种铲将料上表面0.5ｃm左右的菌种刨掉弃之不用,所弃之菌种集中剩放于小桶内，做好后将菌袋倒置，并将袋口上折放于塑料筐内,注意袋口的密封,菌种不可暴露于空气中。
4.2碎化碎化操作推荐用完一袋处理一袋,也可以一次性将所有菌种碎化，但需注意碎化后的菌种必须密封好。
碎化时可采用揉搓等手法,但注意不要弄破袋壁或揉搓过度造成菌丝损伤严重,影响后续发菌。
菌种碎化粒度要求其直径不大于０.5cm。
４.3每接完一袋菌种，接种铲必须重新在火焰上进行灼一次,特别是接触菌种的部位，灼烧时间应不短于2０秒,并有相应的冷却时间,
防止接种铲过热烫死菌种。
4.4在菌种使用过种中，袋内菌种少不利挑取时,可用灼烧后的剪刀将菌袋上部剪掉，不可将剩余菌种倒入下一袋。
菌种若生有菇芽挑出弃除。
4．５接种中若发现菌种被污染，应立即将染菌菌种袋口拧紧放于小桶内，并重新对手及接种工具进行清毒。
4.6接种时菌包上的棉花塞要用右手小指和手掌夹住,不可放在操作台上，每个菌包接入三小铲菌种,接种时应一手扶菌包颈部，一手用接种铲挑取菌种接入，菌种应均匀铺满菌包下吕整个料面,并有不少于一铲的菌种落入接种孔中，接好后将棉花塞在酒精灯火焰上过一遍后塞入菌包。
5、清洁工作
５.1每次接种完毕后均应清理垃圾及接种工具、台面、垫板、小桶、子等物件,其上不得留有料屑残渣等物,并用抹布蘸取２%来苏儿溶液擦拭一遍。
5.2地面料屑先用扫帚打扫干净，特别是角落及轨道槽。
打扫干净后再用2％浓度漂白粉或苏来尔溶液拖洗地面,洗净后将明水收干即可。
地面拖洗在每天下等接种完毕后进行,上午不进行拖洗,但要将料屑等垃圾清扫干净。
6、注意事项
6．1接种室、缓冲间均为无菌区,消毒期间至操作完毕其门不可随意打开,工作人员进出必须统一行动，不可把缓冲间当休息室、聊
天室。
6.2进入接种室严禁接打手机、听音乐、大声聊天等做与工作无关的事情，手机在进入接种室前一律关机。
6.3接种室地面必须每天拖洗，墙面每天应擦拭一次。
6.４接种铲应保持干净、光滑，不允许绑扎纤维质或杂菌易牺息的胶布等物。
6.５接种室消毒人员在消毒前应在菌袋之间插入温度计，接种人员进入接种室后由组长负责查看料温,若料温高于25 应停止接种。
6.6工作服、鞋、帽每星期至少洗涤一次，保持干净整洁。
每天接种完毕鞋底的料渣必须刮除干净。
6．7接种室电器设备要定期进行维护保养,电子净化机过滤网及电场每月必须清洗一次，臭氧机过滤海绵每月更换一次，并每天观察电器运行状态，如有故障及时进行修理和更换。
并定期进行空间无菌度的检测,确保生产平稳进行。