生物化学 常用试剂配制
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
生化常用试剂配制
生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。
1.0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ；配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2.0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ；配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
3.含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠；配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。
2.准确量取氢氧化钠20g。
3.用去离子水稀释至1L。
注意: 此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.2％葡萄糖标准溶液组份浓度0.2％；配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中, 在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温, 重复干燥, 冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。
5.250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ；配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂.配置方.1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中，加入50g无水碳酸钠，溶解，待用。
2.称取0.5g酒石酸钾钠，溶于80mL去离子水中，加入0.25g硫酸铜?5水，溶解。
3.将1：2：去离子水按20：4：1的比例混合即可.4.4℃保存，可用一周.7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g, 去离子水175mL, 85％磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL, 充分混合。
2.回流10小时, 再加硫酸锂37.5g, 去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min, 以驱除过量的溴, 冷却后定容到250mL。
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具，常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。
在实验室中，通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂，合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性，保证实验结果的准确性和可重复性。
接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。
1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一，常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。
溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积，并将溶质溶解在适量的水中。
以盐酸为例，盐酸的浓度通常以摩尔浓度（M）或质量浓度（%）来表示，假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。
- 取适量的去离子水，加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸质量，并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。
2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液，以得到所需的浓度。
稀释液的浓度计算方法非常简单，只需要使用C1V1=C2V2的公式即可，其中C1为原液的浓度，V1为原液的体积，C2为稀释液的浓度，V2为稀释液的体积。
以盐酸溶液为例，如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据C1V1=C2V2的公式，计算出需要的盐酸的体积。
- 取适量的去离子水，加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸体积，并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。
3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液，常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。
缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量，并按照一定的比例混合制备。
以Tris缓冲液为例，Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间，如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液，则按照下面的步骤进行：- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后参加10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A 液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序参加，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品，最后补足水到总量。
生物化学与分子生物学常用试剂配方
30%聚丙烯酰胺溶液-----30%（w/v）Acrylamide 100mL将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热（37℃左右）的去离子水中，充分搅拌溶解，补加水至终体积为100ml。
0.45µm微孔滤膜过滤除菌和杂质，储于棕色瓶，4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存。
严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。
使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。
如有沉淀，可以过滤。
【保存条件】4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存【注意事项】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具有累积性。
称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能含有少量未聚合材料。
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液----- 5×Tris-Glycine buffer （SDS-PAGE电泳缓冲液）称取15.0gTris，94.0g甘氨酸（glycine），5.0gSDS，用800ml蒸馏水或去离子水溶解，充分搅拌溶解，定容至1000ml，室温保存。
得0.125mol/L Tris-1.25mol/L甘氨酸电极缓冲液。
临用前稀释5倍。
【保存条件】室温保存，两年有效。
【注意事项】配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
电泳缓冲液可以回收，回收后可再使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用新电泳液。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法10%十二烷基硫酸钠SDS溶液-----10%(w/v)SDS 配制20mL【组分浓度】10%(w/v)SDS【配制方法】称取2g高纯度的SDS置于100~200ml烧杯中，加入约16ml的去离子水，68℃加热溶解，滴加浓盐酸调节PH至7.2，定容至20ml后，室温保存【保存条件】室温保存【注意事项】对人体有害，请注意防护。
摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法膜转移缓冲液(Transfer Buffer)配方一：takara称取2.9g甘氨酸（glycine），5.8gTris碱，0.37g SDS溶于约600mL的去离子水，充分搅拌溶解，定容至800mL后，并加入200ml甲醇，摇晃混匀，室温保存。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。
（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。
（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。
乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份，-20℃贮存。
（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。
注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。
（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。
（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。
生物化学实验室常见溶液的配制方法
生物化学实验室常见溶液的配制方法在生物化学实验室中，常见的溶液配制方法包括质量法、体积法和浓度法。
一、质量法配制溶液1.配制质量浓度溶液：质量浓度即溶质质量与溶液体积的比值，通常用“%”表示。
配制质量浓度为C%的溶液的方法是将Cg的溶质溶解在100mL溶剂中，即可得到质量浓度为C%的溶液。
2.配制质量体积比溶液：质量体积比即溶质质量和溶剂体积的比值，常用比值表示。
例如，配制质量体积比为1:100的NaCl溶液的方法是在一个容器中称取1gNaCl，加入100mL溶剂搅拌溶解。
3. 配制稀释溶液：当我们已经有一定浓度的溶液时，需要得到较低浓度的溶液时，可以通过稀释的方法得到。
例如，如果需要从1mol/L的盐酸溶液中得到0.1mol/L的盐酸溶液，先取一定体积的1mol/L盐酸溶液，再用适量的溶剂稀释至目标浓度即可。
二、体积法配制溶液1. 配制体积浓度溶液：体积浓度即溶质体积与溶液体积的比值。
例如，配制体积浓度为C mol/L的盐酸溶液的方法是将浓度为C mol/L的盐酸用适量溶剂稀释，使体积变为1L。
2.配制体积体积比溶液：体积体积比即溶质体积与溶剂体积的比值，常用“v/v”表示。
例如，配制体积体积比为1:100的甲醇溶液的方法是先取1mL甲醇，再加入适量的溶剂，使体积变为100mL。
三、浓度法配制溶液在实验室中，常常需要根据所需浓度和溶液体积配制溶液，这时可以使用浓度法。
浓度法计算公式：C1V1=C2V2其中，C1为原溶液浓度，V1为原溶液体积，C2为目标溶液浓度，V2为目标溶液体积。
根据浓度法，可以灵活地根据实验需求来配制所需浓度的溶液。
需要注意的是，实验室配制溶液时应该遵循以下操作规范：1.所用容器和器皿应为洁净无尘，并用纯水冲洗干净。
2.配制质量浓度溶液时，应严格按照称重量配制，避免误差。
3.配制质量体积比溶液时，溶质应尽量完全溶解，可加热加速溶解过程。
4.配制体积浓度溶液时，使用体积瓶等精确仪器，并注意正确读取体积。
32种常用生化试剂的配制
试剂的配制（1） 2,4—二硝基苯肼溶液Ⅰ．在15 mL浓硫酸中，溶解3g 2,4—二硝基苯肼。
另在70 mL 95%乙醇里加20 mL水。
然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液。
（若有沉淀应过滤）Ⅱ．将1.2g 2,4—二硝基苯肼溶于50 mL 30%高氯酸中。
配好后储于棕色瓶中，不易变质。
I法配制的试剂2,4—二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。
（2）饱和亚硫酸氢钠水溶液先配制40 %亚硫酸氢钠水溶液。
然后在每100 mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25 mL，溶液呈透明清亮状。
由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。
然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。
配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。
（3）Schiff（希弗）试剂在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐（也有叫碱性品红或盐基品红），放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释到200 mL。
或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加人0．2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200 mL。
此外，也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加人0.5 g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500 mL。
本试剂所用的品红是para-rossaniline（或称para-fuchsin,又称假红）。
此物与另一类似物rossaniline（或称fuchsin,称洋红）不同，现以它们的盐酸盐为例，对比结构式如下：C NH2 NH2NH2CH2IH-CNH2NH2CI-++3NH2品红溶液原是桃红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂，其变化过程如下：C NH2 NH2NH2C NH2NH2+3NH2CI-+H2SO4SO3H+HCI NH2NH2 CSO3H +NHNHHC2SO2HSO2H 2SO2NH2Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。
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常用试剂配制-生物、化学．常规试剂配制和测定方法一、溶液的配制1000 mL）1. Mandels营养盐溶液（g）称重量（名14 ）)硫酸铵（(NHSO42420 ）磷酸二氢钾（KHPO423 尿素）HNCONH （223 ）MgSO·7HO硫酸镁（244O）氯化钙（CaCl·2H22注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
微量元素溶液（1000 mL）2. Mandels）量（g称重名3.7 氯化钴（CoCl·O）6H221.4 ）·ZnSO7HO硫酸锌（241.6 O）MnSO硫酸锰（·H245.0）硫酸亚铁（FeSO·7HO24后的蒸馏水配制。
注：用煮沸10 min3. DNS试剂的配制（1000 mL）（1）取：3,5-二硝基水杨酸（CHNO）7.5 g7472氢氧化钠（NaOH ）14.0 g充分溶解于1000 mL 水中（水预先煮沸10 min）（2）加入：酒石酸钾钠（CHOKNa·4HO）216.0 g 24465.5 mL℃水浴中融化）50 苯酚（在6.0 g偏重亚硫酸钠（NaSO）522使5天后便可使用，平时盛一小瓶(250 mL)（3）充分溶解后盛于棕色瓶中，放置用，要放在冰箱中冷藏。
此溶液每月配制一次。
注意：倒入瓶中时要尽量装满！！的配制（1000 mL）4. 考马斯亮蓝G-250mL 乙醇中，加入100 mL 即0.1g溶于50 95%称考马斯亮蓝G-250 100 mg）（w/v85 %磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL ，滤纸过滤。
最终试剂中含0.01 % w/v）磷酸。
（w/v）乙醇，8.5 %（，考马斯亮蓝G-2504.7 %1000 mL）5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制（(g) 量量Mn重分名称子210 210 O）H柠檬酸（CHO·2678 74.5 40NaOH准确称取柠檬酸210 g，溶于约750 mL煮沸（10 min）蒸馏水中，待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g，完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中，冷却后将容量瓶定容到1000 mL（原始pH4.45）。
（检验方法：取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍，测定稀释液的pH值，pH值应为4.8）6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定（1）标准糖溶液的配制准确称取2.000 g葡萄糖/木糖（葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h），蒸馏水溶解，全部转移至1 L容量瓶内，摇匀，配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。
取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶，蒸馏水定容，摇匀。
即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/ 木糖标准溶液。
取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶，每瓶再加入1.5 mL柠檬酸缓冲液，蒸馏水定容，摇匀。
即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g 酶解葡萄糖。
（2）标准方程的测定：①葡萄糖/木糖标准方程的测定取10支25mL刻度管，10支1mL刻度吸管，分别加入0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液1 mL，DNS溶液3 mL。
100 ℃煮沸5 min，水浴冷却后定容至25 mL，摇匀。
以蒸馏水作为空白对照，550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标，C为横坐标，制定标准曲线。
（7230型分光光度计输出方程为：A = MC + N，723型分光光度计输出方程为：C = KA + B）②酶解木糖标准方程测定（测定木聚糖酶活力）取6支25 mL刻度管，6支2 mL刻度吸管，分别加入1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解木糖标准溶液1.5 mL，DNS溶液3 mL，100 ℃煮沸5 min，水浴冷却后定容至25 mL，摇匀。
以蒸馏水作为空白对照，550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标，C为横坐标，制定标准曲线。
（7230型分光光度计输出方程为：A =MC + N，723型分光光度计输出方程为：C = KA + B）③酶解葡萄糖标准方程测定（测定滤纸酶活力、CMC酶活力）取6支小试管，6支2 mL刻度吸管，分别加入1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖标准溶液1.5 mL，DNS溶液3 mL，100 ℃煮沸5 min，水浴冷却后，量筒定容至50 mL（定容至25 mL，测定CMC酶活力），摇匀。
以蒸馏水作为空白对照，550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标，C为横坐标，制定标准曲线。
（7230型分光光度计输出方程为：A = MC + N，723型分光光度计输出方程为：C = KA + B）7. 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制0.1 mol/L0.2 mol/L磷酸氢二/mL柠檬/mL10.729.2811.158.8511.608.4012.097.9112.637.3713.226.7813.856.1514.555.4515.454.5516.473.5317.392.6118.171.8318.731.2719.150.8519.450.55注：NaHPO，Mr =141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L42NaHPO·2HO，Mr =178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L 224CHO·HO，Mr =210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L2768酶活力的测定二、—纤维素酶的总体酶活力1. 滤纸酶活力的测定et ）推荐的标准方法测定[Ghose,T.K., 采用国际理论和应用化学协会（IUPAC 等于）（，一个滤纸酶活力的国际单位FPIU al,Pure & Appl.Chem.,1987,59,257-268]葡萄糖量的酶量。
测定方法如下：在标准反应条件下每分钟生成1 μmol##，）卷成筒状的滤纸条（1 ×-5 6cm支小试管中加入50 mg取7支试管在其中1##有底物无酶，67支试管按下表操作。
（5为有酶无底物空白对照）适当稀释酶液，取####### 7 目项45 3 61 2稀释酶液（mL）酶解葡萄糖0.5 0.5 0.3 0.4 0.21.5mL标样mL）0.05 M柠檬酸缓冲液（1.3 1.11.51.21.0180将上述试管盖上塑料布，用橡皮筋扎紧后置于恒温水浴器中，保持在振幅，5 min3 mL DNS试剂，在沸水中反应50 和温度℃下保温60 min后立即取出加入波长550 nm冷却后加水至50 mL并充分摇匀，待滤纸完全沉淀后，取上层清液于值。
反应生成的葡萄糖的量根据葡萄糖标准曲线求得。
下测定吸光度A酶量所生成葡萄糖的毫克数为横坐标，酶量的对数为0.5mL0.4、以0.2、0.3、葡萄糖的酶量，按下式计算样品的滤纸酶活力mg纵坐标作图，从图中找出生成2 ）：FPA（葡萄糖 2 mg =滤纸酶活力mL）60min×0.18(mg/μmol)×生成2mg葡萄糖的酶量（。
1μmol一个滤纸酶活力单位定义为每分钟生成葡萄糖所需的酶量，单位：IU/mL葡萄糖）仍无法生成酶液（指酶液没有被稀释的时候！2 mg备注：当加入0.5 mL 时，按下式计算：数）（葡萄糖滤纸酶活= 0.185 ×mg葡萄糖苷酶活力的测定β-2. 方法一：葡萄糖氧化酶测定法一。
按国际标准方法测定[Ghose,T.K.,etal,Pure & Appl.Chem.,1987,59,257-268]底物即生等于标准条件下每分钟转化1 μmol葡萄糖苷酶活力国际单位个β-(IU/mL) 2 μmol葡萄糖的酶量来表示。
成纤维15 mmol/L的纤维二糖溶液（0.513 g预先用0.05 M的柠檬酸缓冲液配制的柠檬酸缓冲液，现配现用）二糖/100 mL0.05 M 每个样品应做三个不同酶量（1）葡萄糖苷酶活力β-估计0.1 <0.3 0.2 0.1 （IU/mL）0.1/0.2/0.30.2/0.3/0.50.3/0.5/0.80.5/0.8/1.0取酶液量（mL）加料：试管中加入酶液、缓冲液和纤维二糖溶液如下：（2纤维二糖溶液mL ）mL）（（（mL）1 1－酶液适量样品0 1 1 酶液空白11纤维二糖空白每个试管共2mL，用塑料纸包扎好。
注意：纤维二糖溶液必须用0.05M柠檬酸配制。
（3）酶解反应：试管置于50 ℃水浴中，保温30分钟，取出，沸水中放置5分钟使酶失活，冷却至室温。
（4）加显色剂（葡萄糖氧化酶测定试剂）：取试管中冷却液30 μL，加入显色剂3.0 mL，混匀；同时做一个葡萄糖标样：取1 g/L葡萄糖标样30 μL，加显色剂3.0 mL，混匀；置于37 ℃水浴中，保温15分钟，取出。
（5）测吸光度：505 nm，用蒸馏水调零，测各试管溶液吸光度A值。
1g/L葡萄左右。
0.7糖标样的吸光度为mg数：（6）计算产生的葡萄糖吸光度品样）（m 测得酶空白所含葡萄糖= 2 ×1g/L葡萄糖标样吸光度纤维二糖空白mg]－[纤维二糖空白葡萄糖= [测得葡萄糖mg]样品实际产生的葡萄糖mg）（－[酶空白葡萄糖mg] ×[酶液量mL]注：纤维二糖空白所产生的响应值，当纤维二糖溶液为新鲜配制时，一般很低。
为横坐标作图，为纵坐标，实际产生的葡萄糖mg作图：以log(酶液量mL)7（）mL。
求出生成1 mg葡萄糖时对应的酶液量葡萄糖苷酶活力：计算β-（8）0.0926IU/mL）葡萄糖苷酶活力β- =mL）生成1mg葡萄糖对应的酶液量（葡萄糖时，注：当加入1mL酶液仍不能生成1mg 数）0.0926×（葡萄糖mg葡萄糖苷酶活力β- =补充：葡萄糖含量测定☆过氧化物酶终点比色法测定。
葡萄糖测定试剂盒由上海荣采用葡萄糖氧化酶-R和，使用时将R（缓冲液）和R（酶试剂）R盛生物技术有限公司生产，内含2112等量混合。
葡萄糖经葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶氨基安替比林与苯酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合4的作用下，将-物。