实验室常用试剂配制
实验室常规试剂配制
实验室常用试剂、缓冲液的配制1 MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1 MTris-HCI配制量1 L配制方法1.称量121.1 gTris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 咼温咼压火菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 MTris-HCl(pH8.8)组份浓度1.5 MTris-HCl配制量1 L配制方法1.称量181.7 gTris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压火菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10 X TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100 mMTris-HCl,10 mMEDTA配制量1 L配制方法1.量取下列溶液，置于 1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合3. 将溶液定容至1 L后，高温高压火菌。
4. 室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度配制量配制方法PBSBuffer 组份浓度137 mMNaCl,2.73 M琴磁柚IQO ml1. N.1OAC - 3H.OH于100-200 m：疑杯中.加人對40讪的去两子水披扌半渚孵2、加入冰酯敌讷帑pH值至43加去离子庆粕増液證容至20ml.mMKCl,10 mMNa2HPO4,2 mMKH2PO4配制量1 L配制方法1.称量下列试剂，置于 1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl，10mMEDTA（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500mMEDTA（pH8.0）20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定至1L 后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
实验室常用药品试剂的配置与使用
实验室常用药品试剂的制备与使用(一)认识药品规格纯度规格简写标签颜色级别特点(二)染色试剂的配制1.甲基绿（DNA—绿色）和吡罗红（RNA—红色）染色剂配制：a)A液：取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中，取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。
取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中，置于棕色瓶中备用。
b)B液：是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。
先取乙酸钠16.4 g，用蒸馏水溶解至1000 mL备用；再取乙酸12 mL，用蒸馏水稀释至1000 mL备用。
取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50 mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。
c)取A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。
应该注意的是该试剂应现用现配。
2.I2-KI溶液（淀粉—蓝紫色，蛋白质—黄色）配制：将碘化钾3g溶于蒸馏水中，待全部溶解后加入碘1g，振荡使其溶解，将此液保存在棕色玻璃瓶内。
3.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ（木栓化、角质化细胞壁—红色，脂肪、挥发油、树脂等—红色或淡红色）配制：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ干粉0.1g与95%乙醇10 mL混合，过滤后再加入10 mL甘油。
4.1% 醋酸洋红染料（染色体—紫红色）配制：将洋红1 g与45% 醋酸100 mL煮沸2h 左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量。
冷却后过滤，加入4% 铁明矾溶液1~2滴，放入棕色瓶中备用。
5.龙胆紫酸性染料（染色质—紫色）配制：取龙胆紫1 g，溶于少量2% 醋酸溶液中，滴加2% 醋酸溶液，直至溶液不呈深紫色为止。
6.卡宝染色剂（染色体—红色，着色深，保存性好）又名苯酚-品红染色剂配制：a)原液A：将3g碱性品红溶于100 mL 70% 的乙醇中。
b)原液B：取原液A 10 mL 加入到90 mL 5% 苯酸水溶液中。
（两周内有效）c)原液C：取原液B 55 mL，加入6 mL福尔马林和6 mL冰醋酸。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。
实验室常用试剂配制方法
实验室常用试剂配制方法实验室中，常用试剂的配制方法非常重要，准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法：1.缓冲溶液的配制：缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度，常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例，其配制方法如下：1) 称取所需量的Tris氯化物（Tris-HCl）。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中，搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸（如盐酸）或碱（如氢氧化钠）来调节pH值，同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中，用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制：浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例：1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积，计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算：质量（g）=浓度（mol/L）×体积（L）×摩尔质量（g/mol）。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl，搅拌使其溶解。
4)如果需要，通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制：酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例：1)根据酶的活力或浓度，计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶，可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶，并按需添加其他辅助试剂，如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要，将溶液分装至小容器中，如冰盒中保存。
4.染色剂的配制：染色剂常用于细胞培养、组织切片，或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例：1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝（Methylene Blue）。
2)加入足够的去离子水，用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中，并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
实验室试剂配制
实验室试剂配制1、0.083M KOH：0.1M KOH稀释12倍（PH必须大于12）2、酸性半饱和硫酸铵：取硫酸铵（（NH3）2SO4）400g加蒸馏水500mL.置于37℃水浴24h不时搅拌，使达饱和，再冷至25℃，搅拌一次，使过量的（NH3）2SO4析出，上清液为饱和液，取上清夜400mL加1M HCL20mL。
蒸馏水加至800mL，混匀室温保存（PH必须大于3）3、17%异丙醇溶液：17mL异丙醇加0.1mol/L Tris 缓冲液（7.4）至100mL。
PH〉7.2方可。
4、10g/L（1%）联苯胺：1.0g联苯胺溶于90mL 冰醋酸内，然后加蒸馏水至100mL，贮于棕色瓶，置冰箱内可使用数周。
5、1%H2O2：30%H2O2新鲜配制（稀释30倍）6、100g/L（10%）醋酸溶液：取10mL冰醋酸，加蒸馏水至100mL7、标准Hb溶液：取以生理盐水洗涤过三次的压积红细胞与等体积蒸馏水，0.5倍体积四氯化碳混合，剧烈振荡5min后，离心20min（2,500r/min），吸取上层Hb液，用氰化高铁Hb法准确测定其浓度，稀释成100g/L（10%）Hb浓度，于低温冰箱保存，用时取0.01mL，加生理盐水至10g/L。
即为100mg/L（10mg%）应用标准液。
8、12.5g/L亚硝酸钠—葡萄糖溶液：亚硝酸钠：1.25葡萄糖：5加蒸馏水至100mL，用棕色瓶，4℃保存一个月。
9、0.0004mol/L美蓝溶液：美蓝（次甲基蓝，亚甲基蓝）15mg，加蒸馏水100mL，室温1～2个月。
10、0.02mol/L磷酸盐缓冲液（PH7.4）：Na2HPO4·12H2O：229.5mg（1.1475g）KH2PO4：52.2mg（0.261g）加蒸馏水100mL（500mL）11、PH8.5 TEB缓冲液：Tris：10.2g（5.1g）EDTA：0.6g（0.3g）硼酸：3.2g（2.6g）加蒸馏水至1000mL（500mL）12、PH8.5硼酸缓冲液：硼酸5.56g硼砂（四硼酸钠）6.87g加蒸馏水至1000mL13、0.09%丽春红：丽春红S或G:1.8g三氯醋酸：26.8g磺柳酸：26.8g加蒸馏水至100mL用前将上液以蒸馏水稀释20倍使用14、氨基黑：氨基黑10B: 0.5g甲醇50mL冰醋酸：10mL蒸馏水：40mL溶解而成贮棕色瓶内15、漂洗液：甲醇（乙醇）45mL冰醋酸：5mL蒸馏水：50mL溶解而成16、透明液：无水乙醇：70mL冰醋酸：30mL混合而成17、PH6.5磷酸盐缓冲液：KH2PO4：3.11g Na2HPO4: 1.49g（Na2HPO4·2H2O 1.87g）蒸馏水900mL校正PH后稀释至1,000mL18、0.4NaOH：1M →稀释19、0.1Tris缓冲液（PH7.4）：Tris: 1.21g 0.1N HCL 40mL加蒸馏水至100mL20、1.0mol/L盐酸标准液：浓盐酸MW=36.465，比重1.18，含HCL 36%～38%。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
实验室常用试剂配方
1.常用PBS：称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可，高压灭菌。
2.常用PBS(不含K盐)：8.5g NaCl、0.8736g NaH2PO4•2H2O、5.531g Na2HPO4•12H2O，800ml三蒸水搅拌，无需调PH，1L定容。
3.DMEM培养基：DMEM干粉溶入800ml三蒸水中，加入3.7g NaHCO3，搅拌后调PH至7.2~7.4，最终用1000ml容量瓶定容，无菌层流间中过滤分装。
4.1640培养基：1640干粉溶入800ml三蒸水中，加入2.0g NaHCO3，搅拌后调PH至7.2~7.4，最终用1000ml容量瓶定容，无菌层流间中过滤分装。
5.胰酶：浓度为0.25%~0.4%，通常是用生理盐水或PBS等平衡盐溶液作为溶剂。
6.胰酶（含EDTA）：普通胰酶中额外加入0.01%~0.02%的EDTA7.细胞冻存液：多数细胞配方为10%DMSO+20%血清+70%细胞培养基，也有介绍直接10%DMSO加90%含血清培养液，部分细胞需10%DMSO+90%血清。
理论上血清越多冻存效果越好。
8.谷氨酰胺：标准的谷氨酰胺100×液为200mmol/L(29.22g/L)。
通常培养液中浓度为1~4mmol/L （0.146~0.5844g/L），4o C下半衰期为7天，两周以上需要重新加入。
9.双抗：青霉素—100IU/ml（通常培养液中终浓度为20~100IU/ml均可），链霉素—100ug/ml（通常培养液中浓度为50ug/ml）。
多数体外培养都是使用青霉素和链霉素，上述的工作浓度可在37o C长时间控制轻度污染而对细胞无毒性作用。
10.MTT：0.5克MTT，溶于无酚红的培养基中（就用培养细胞的培养基），浓度为5mg/ml，过滤除菌，4℃避光保存。
实验室常规试剂配制
实验室常用试剂、缓冲液的配制1 MTris-HCl,,组份浓度1 MTris-HCl配制量1 L配制方法1.称量121.1 gTris置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值;4.将溶液定容至1 L;5.高温高压灭菌后,室温保存;注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位;1.5 MTris-HCl组份浓度1.5 MTris-HCl配制量1 L配制方法1.称量181.7 gTris置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.用浓盐酸调节pH值至;4.将溶液定容至1 L;5.高温高压灭菌后,室温保存;注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位;10×TEBuffer,,组份浓度100 mMTris-HCl,10 mMEDTA配制量1 L配制方法1.量取下列溶液,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合;3.将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌;4.室温保存;3 M醋酸钠组份浓度配制量配制方法PBSBuffer组份浓度137mMNaCl,2.7mMKCl,10 mMNa2HPO4,2 mMKH2PO4配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.滴加浓盐酸将pH值调节至,然后加入去离子水将溶液定容至1 L;4.高温高压灭菌后,室温保存;注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mMCaCl2和0.5 mMMgCl2; 10 M醋酸铵组份浓度10 M醋酸铵配制量100ml配制方法1.称量77.1 g醋酸铵置于100～200ml烧杯中,加入约30ml的去离子水搅拌溶解;2.加去离子水将溶液定容至100ml;3.使用mm滤膜过滤除菌;4.密封瓶口于室温保存;注意：醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌;Tris-HCl平衡苯酚配制方法1.使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验;但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用;同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等;因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验;2.操作注意：苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等;所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇;3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到以上,苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈结晶状态;从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解;②加入羟基喹啉8-Quinolinol至终浓度%;该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色,有助于方便识别有机相;③加入等体积的1 MTris-HCl,使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相;④重复操作步骤③;⑤加入等体积的0.1 MTris-HCl,使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相;⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相;⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于;⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存;苯酚/氯仿/异戊醇25:24:11.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇25:24:1;氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡;2.配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇24:1混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存;10%W/VSDS2NNaOH组份浓度2NNaOH配制量100ml配制方法1.量取80ml去离子水置于100～200ml塑料烧杯中NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂;2.称取8 gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌;3.待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液定容至100ml;4.将溶液转移至塑料容器中后,室温保存;组份浓度配制量100ml配制方法1.在的去离子水中加入的浓盐酸,均匀混合;2.室温保存;5 MNaCl组份浓度5 MNaCl配制量1 L配制方法1.称取292.2 gNaCl置于1 L烧杯中,加入约800ml的去离子水后搅拌溶解;2.加去离子水将溶液定容至1 L后,适量分成小份;3.高温高压灭菌后,4℃保存;20%W/VGlucose组份浓度20%W/VGlucose配制量100ml配制方法1.称取20 gGlucose置于100～200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水后,搅拌溶解;2.加去离子水将溶液定容至100ml;3.高温高压灭菌后,4℃保存;Solution I质粒提取用组份浓度25 mMTris-HCl,10 mMEDTA,50 mMGlucose配制量1 L配制方法1.量取下列溶液,置于1 L烧杯中;2.高温高压灭菌后,4℃保存;3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA20mg/ml;Solution II质粒提取用组份浓度配制量配制方法Solution III质粒提取用3 MKOAc,5 MCH3COOH组份浓度500ml配制量1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中;配制方法2.加入300ml去离子水后搅拌溶解;3.加去离子水将溶液定容至500ml;4.高温高压灭菌后,4℃保存;0.5 MEDTA组份浓度0.5 MEDTA配制量1 L配制方法1.称取186.1 gNa2EDTA·2H2O,置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌;3.用NaOH调节pH值至约20 gNaOH;注意：pH值至时,EDTA才能完全溶解;4.加去离子水将溶液定容至1 L;5.适量分成小份后,高温高压灭菌;6.室温保存;1 MDTT组份浓度1 MDTT配制方法1.称取3.09 gDTT,加入到50ml塑料离心管内;2.加20ml的0.01 MNaOAc,溶解后使用0.22 mm滤膜过滤除菌;3.适量分成小份后,-20℃保存;10 mMATP组份浓度10 mMATP配制量20ml配制方法1.称取121mgNa2ATP·3H2O,加入到50ml塑料离心管内;2.加20ml的25 mMTris-HCl,搅拌溶解;3.适量分成小份后,-20℃保存;组份浓度10 mMATP配制量20ml配制方法1.称取121mgNa2ATP·3H2O,加入到50ml塑料离心管内;2.加20ml的25 mMTris-HCl,搅拌溶解;3.适量分成小份后,-20℃保存;蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法30%W/VAcrylamide组份浓度30%W/VAcrylamide配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.加去离子水将溶液定容至1 L,用mm滤膜滤去杂质;4.于棕色瓶中4℃保存;注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等;聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份;40%W/VAcrylamide组份浓度40%W/VAcrylamide配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.加去离子水将溶液定容至1 L,用0.45 mm滤膜滤去杂质;4.于棕色瓶中4℃保存;注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等;聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份;10%W/V过硫酸铵组份浓度配制量配制方法5×Tris-GlycineBufferSDS-PAGE电泳缓冲液组份浓度0.125 MTris,1.25 MGlycine,%W/VSDS2.加入约800ml的去离子水,搅拌溶解;3.加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存;5×SDS-PAGELoadingBuffer组份浓度配制量5ml配制方法 1.量取下列试剂,置于10ml塑料离心管中;2.加去离子水溶解后定容至5ml;3.小份500ml/份分装后,于室温保存;4.使用前将25ml的2-ME加到每小份中;5.加入2-ME的LoadingBuffer可在室温下保存一个月左右;考马斯亮蓝R-250染液组份浓度%W/V考马斯亮蓝R-250,25%V/V异丙醇,10%V/V冰醋酸配制量1 L配制方法1.称取1 g考马斯亮蓝R-250,置于1 L烧杯中;2.量取250ml的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解;3.加入100ml的冰醋酸,搅拌均匀;4.加入650ml的去离子水,搅拌均匀;5.用滤纸除去颗粒物质后,室温保存;考马斯亮蓝染色脱色液组份浓度10%V/V醋酸,5%V/V乙醇配制量1 L配制方法1.量取下列溶液,置于1 L烧杯中;2.充分混合后使用;凝胶固定液SDS-PAGE银氨染色用组份浓度50%V/V甲醇,10%V/V醋酸配制量1 L配制方法1.量取下列溶液,置于1 L烧杯中;2.均匀混合后室温保存;凝胶处理液SDS-PAGE银氨染色用组份浓度配制量配制方法凝胶染色液SDS-PAGE银氨染色用度%W/VAgNO3,1%V/V浓组份浓NH3·H2O,%W/VNaOH配制量100ml配制方法 1.量取下列试剂,加入100～200ml的试剂瓶中;2.均匀混合;该溶液应为无色透明状;如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状,此时应补加浓氨水,直至透明;3.本染色液应现用现配,不宜保存;显影液SDS-PAGE银氨染色用组份浓度%W/V柠檬酸,%V/V甲醛2.加入1 L去离子水后,摇动混合溶解;3.室温保存;核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAEBuffer组份浓度2 MTris-醋酸,100 mMEDTA配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.加入的醋酸,充分搅拌;4.加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存;10×TBEBuffer组份浓度配制量配制方法10×MOPSBuffer200 mMMOPS,20 mMNaOAc,10 组份浓度mMEDTA配制量1 L配制方法1.称量41.8 gMOPS,置于1 L烧杯中;2.加约700mlDEPC处理水,搅拌溶解;3.使用2NNaOH调节pH值至;4.再向溶液中加入下列试剂;5.用DEPC处理水将溶液定容至1 L;6.用滤膜过滤除去杂质;7.室温避光保存;注：溶液见光或高温灭菌后会变黄;变黄时也可使用,但变黑时不要使用;溴乙锭10mg/ml组份浓度10mg/ml溴乙锭配制量100ml配制方法1.称量1 g溴乙锭,加入到100ml容器中;2.加入去离子水100ml,充分搅拌数小时完全溶解溴乙锭;3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存;4.溴乙锭的工作浓度为m g/ml;注意：溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作;Agarose凝胶1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液通常是×TBE或1×TAE;2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中;3.加入一定量的电泳缓冲液总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量;注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一;4.在锥形瓶的瓶口封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热熔化琼脂糖;加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套,小心摇动锥形瓶,使琼脂糖充分均匀熔化;此操作重复数次,直至琼脂糖完全熔化;必须注意,在微波炉中加热时间不宜过长,每次当溶液起泡沸腾时停止加热,否则会引起溶液过热暴沸,造成琼脂糖凝胶浓度不准,也会损坏微波炉;熔化琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完全熔化,否则,会造成电泳图像模糊不清;5.使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴乙锭溶液终浓度ml,并充分混匀;注：溴乙锭是一种致癌物质;使用含有溴乙锭的溶液时,请戴好手套;6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子;凝胶厚度一般在3~5 mm之间;7.在室温下使胶凝固大约30分钟~1小时,然后放置于电泳槽中进行电泳;注：凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存2～5天;琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围6×LoadingBufferDNA电泳用组份浓度配制量配制方法10×LoadingBufferRNA电泳用组份浓度配制量10ml配制方法 1.称量下列试剂,置于10ml离心管中;2.向离心管中加入约4ml的DEPC处理水后,充分搅拌溶解;3.加入5ml的甘油Glycerol后,充分混匀;4.用DEPC处理水定容至10ml后,室温保存;核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC组份浓度3.0 MNaCl,0.3 M柠檬酸钠配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.滴加14NHCl,调节pH值至后,加去离子水将溶液定容至1 L;4.高温高压灭菌后,室温保存;20×SSPEBuffer组份浓度3.0 MNaCl,0.2 MNaH2PO4,0.02 MEDTA配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.加NaOH调节pH值至约的10NNaOH;4.加去离子水将溶液定容至1 L;5.高温高压灭菌后,室温保存;50×Denhardt's溶液组份浓度配制量500ml配制方法1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中;2.加去离子水约400ml,充分搅拌溶解3.加去离子水将溶液定容至500ml;4.用0.45 m m滤膜过滤后,分装成每份25ml;5.-20℃保存;0.5M磷酸盐Buffer组份浓度0.5 MNa2HPO4配制量1 L配制方法1.称量134 gNa2HPO4·7H2O置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水充分搅拌溶解;3.加入85%的H3PO4浓磷酸调节溶液pH值至;4.加去离子水定容至1 L;5.高温高压灭菌后,室温保存;组份浓度10mg/mlSalmonDNA配制量约100ml配制方法1.称取鲑鱼精DNA2 g置于500ml烧杯中,加入约200ml的TEBuffer;2.用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时,溶解后加入4ml的5 MNaCl,使其终浓度为0.1 M;3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次;4.回收水相溶液后,使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次,以切断DNA;5.加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀;6.离心回收DNA后,溶解于100ml的去离子水中,测定溶液的OD260值;7.计算溶液的DNA浓度后,稀释DNA溶液至10mg/ml;8.煮沸10分钟后,分装成小份1ml/份;-20℃保存;9.使用前在沸水浴中加热5分钟后,迅速冰浴冷却;组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量约100ml配制方法1.称量下列试剂,置于200ml烧杯中;组份浓度配制量100ml配制方法1.称量下列试剂,置于200ml烧杯中;2.充分混匀后,使用滤膜滤去杂质后使用;组份浓度39 mMGlycine,48 mMTris,%W/VSDS,20%V/V甲醇配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.加去离子水将溶液定容至800ml后,加入200ml的甲醇;4.室温保存;组份浓度20 mMTris-HCl,150 mMNaCl,%V/VTween20配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.加入后充分混匀;4.加去离子水将溶液定容至1 L后,4℃保存;组份浓度5%W/V脱脂奶粉/TBSTBuffer配制量100ml配制方法1.称量5 g脱脂奶粉加入到100ml的TBSTBuffer中,充分搅拌溶解;1.4℃保存待用本封闭液应该现配现用;实验室常用培养基的配制方法Ampicillin100mg/ml组份浓度100mg/mlAmpicillin配制量50ml配制方法1.称量5 gAmpicillin置于50ml离心管中;2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50ml;3.用0.22 mm过滤膜过滤除菌;4.小份分装1ml/份后,-20℃保存;IPTG24mg/ml组份浓度24mg/mlIPTG配制量50ml配制方法1.称量1.2 gIPTG置于50ml离心管中;2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50ml;3.用0.22 mm过滤膜过滤除菌;4.小份分装1ml/份后,-20℃保存;X-Gal20mg/ml组份浓度配制量配制方法-20℃避光保存;组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量1L配制方法1.称取下列试剂,置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.滴加5NNaOH约,调节pH值至;4.加去离子水将培养基定容至1 L;5.高温高压灭菌后,冷却至室温;6.加入1mlAmpicillin100mg/ml后均匀混合;7.4℃保存;组份浓度配制量1L配制方法1.配制磷酸盐缓冲液0.17 MKH2PO4,0.72 MK2HPO4100ml;溶解2.31 gKH2PO4和12.54 gK2HPO4于90ml的去离子水中,搅拌溶解后,加去离子水定容至100ml,高温高压灭菌;2.称取下列试剂,置于1 L烧杯中;3.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;4.加去离子水将培养基定容至1 L后,高温高压灭菌;5.待溶液冷却至60℃以下时,加入100ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液;6.4℃保存;组份浓度配制量1L配制方法组份浓度配制量1L配制方法1.配制250 mMKCl溶液;在90ml的去离子水中溶解1.86 gKCl后,定容至100ml;2.配制2 MMgCl2溶液;在90ml去离子水中溶解19 gMgCl2后,定容至100ml,高温高压灭菌;3.称取下列试剂,置于1 L烧杯中;4.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;5.量取10ml250 mMKCl溶液,加入到烧杯中;6.滴加5NNaOH溶液约,调节pH值至;7.加入去离子水将培养基定容至1 L;8.高温高压灭菌后,4℃保存;9.使用前加入5ml灭菌的2 MMgCl2溶液;组份浓度配制量100ml配制方法1.配制1 M葡萄糖溶液;将18g葡萄糖溶于90ml去离子水中,充分溶解后定容至100ml,用0.22 mm滤膜过滤除菌;2.向100mlSOB培养基中加入除菌的1 M葡萄糖溶液2ml,均匀混合;3.4℃保存;组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量1 L配制方法 1.称取下列试剂,置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.滴加5NNaOH约,调节pH值至;4.加去离子水将培养基定容至1 L;5.高温高压灭菌后,4℃保存;组份浓度配制方法NZYM培养基除不含CasaminoAcid酪蛋白氨基酸外,其他成份与NZCYM培养基相同;组份浓度配制方法NZM培养基除不含YeastExtract酵母提取物外,其他成份与NZYM培养基相同;1.按照液体培养基配方准备好液体培养基,在高温高压灭菌前,加入下列试剂中的一种;2.高温高压灭菌后,戴上手套取出培养基,摇动容器使琼脂或琼脂糖充分混匀此时培养基温度很高,小心烫伤;3.待培养基冷却至50～60℃时,加入热不稳定物质如抗生素等,摇动容器充分混匀;组份浓度配制量1 L配制方法1.称取下列试剂,置于1 L烧杯中;2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;3.滴加5NNaOH约,调节pH值至;4.加去离子水将培养基定容至1 L后,加入15 gAgar;5.高温高压灭菌后,冷却至60℃左右;6.加入1mlAmpicillin100mg/ml、1mlIPTG24mg/ml、2mlX-Gal20mg/ml后均匀混合;8.4℃避光保存;组份浓度配制量1 L配制方法1.配制磷酸盐缓冲液0.17 MKH2PO4,0.72 MK2HPO4100ml;溶解2.31 gKH2PO4和12.54 gK2HPO4于90ml的去离子水中,搅拌溶解后,加去离子水定容至100ml,高温高压灭菌;2.称取下列试剂,置于1 L烧杯中;3.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;4.加去离子水将培养基定容至1 L后,加入15 gAgar;5.高温高压灭菌后,冷却至60℃左右;6.加入100ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液、1mlAmpicillin100mg/ml、1mlIPTG24mg/ml、2mlX-Gal20mg/ml后均匀混合;8.4℃避光保存;。
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实验室常用溶液及试剂配制实验室常用溶液、试剂的配制表一普通酸碱溶液的配制表二常用酸碱指示剂表三混合酸碱指示剂表四容量分析基准物质的干燥表五缓冲溶液的配制1、氯化钾-盐酸缓冲溶液2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液7、氨水-氯化铵缓冲溶液8、常用缓冲溶液的配制实验室常用试验方法2九、柠檬酸（C6H8O7·H2O）称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三角瓶内，加入水50ml溶解，加酚酞指示剂3滴，用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点，同时做空白试验。
计算：X%（一水）= （V1-V0）×C×0.06404 m×（1-0.08566）×100X%（无水）= （V1-V0）×C×0.06404 m×100V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；V0-----空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；C------氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L；m---样品质量。
十、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等）称取2g（精确到0.0002g）样品，用10ml盐酸（1+1）溶解，转移至100ml容量瓶中定溶，用移液管吸取10ml于250ml 锥形瓶中，加50ml水，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三乙酸胺（1+1），1ml乙二胺（1+1），1滴孔雀绿指示液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L）至无色，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。
Ca%= C×V×0.4008 m ×100C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L；V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；m----样品质量。
（二）氟（Fˉ）含量的测定：1、标准曲线的绘制；2、试样含量的测定：称取0.5g（精确到0.0002g）置于50ml纳氏比色管中，加1mol/L盐酸10ml，密闭提取1h（不时摇动），避免粘于管壁，提取后加总离子强度缓冲液25ml，加水至刻度，以滤纸过滤。
以氟电极测平衡电位值。
结果计算：X= C×50×1000 m×1000 = 50C mX-----试样中氟含量，m---试样质量，g；C-----据电位值查得的浓度，总离子强度缓冲液：现配现用，3mol/L乙酸钠；0.75mol/L柠檬酸钠，配成（1+1）。
测定时，用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。
（三）磷（P）的测定磷标准曲线的绘制：准确移取磷标准溶液（分析纯的磷酸二氢钾，在105℃干燥1h，冷却后称取0.2195g，溶于1L 的容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻度，得到50ug/ml溶液），分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入磷显色液（钒-钼酸铵显色液：偏钒酸铵1.25g，加250ml硝酸于1000ml容量瓶中；钼酸铵25g于烧杯中，加400ml水溶解，冷却下，将此液倒入容量瓶中，定容）10ml，用蒸馏水定容，摇匀放置10min以上，以0.0为参比，在400nm波长测定各溶液的吸光度。
以横坐标为磷含量，纵坐标为吸光度，作标准曲线。
样品的测定（磷酸氢钙）：移取测钙时所用的试样溶液5ml于100ml容量瓶中，用水定容，摇匀，准确移取2ml于50ml容量瓶中，加磷显色液10ml，用水定容，测其吸光度。
P%= W×稀释倍数 m×106 ×100W----以吸光度算出的浓度，m----试样质量，g。
十一、硫酸铜（CuSO4·5H2O）鉴别：1、Cu2+，取试样溶液，加0.5ml乙二胺四乙酸二钠溶液（15%，m/v），0.5ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L），1ml乙酸乙酯，振摇，有机层显黄棕色。
2、SO42-，取试样溶液，置于白色瓷板上，加BaCl2溶液（5%，m/v），即有白色沉淀生成，在盐酸和硝酸中不溶。
测定：称取0.35g左右（精确到0.0002g）置于碘量瓶中，加50ml水溶解，40ml冰乙酸，2g碘化钾（10mlKI溶液），摇匀，于暗处放置10min，用Na2S2O3标准溶液滴定至淡蓝色，加2ml淀粉，继续滴定至无蓝色（或蓝色刚刚消失为终点）。
硫酸铜%= C×V×0.06355 m ×100C------Na2S2O3标准溶液的浓度，mol/L；V-----消耗Na2S2O3标准溶液体积，ml；m-----样品质量，g。
十二、硫酸锌（ZnSO4·H2O）称取0.2g试样，加50ml水溶解，加3g酒石酸钾钠，2ml浓氨水，50mg络黑体，用EDTA标准溶液（0.05mol/L）滴定至紫色变为纯蓝色。
ZnSO4%= C×V×0.06537 m ×100%C-----EDTA标准溶液的浓度，mol/L；V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；m----样品质量。
十三、硫酸亚铁（FeSO4·H2O）称取0.35g试样于250ml三角瓶中，加50ml水，5ml浓硫酸（缓慢加入），2ml浓磷酸，冷却至室温，用0.1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至粉红色即为终点。
FeSO4%= C×V×0.05585 m×100%C-----高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L；V-----消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml；m----试样的质量。
十四、砷1、原理：在酸性介质中，金属锌将砷化物还原为砷化氢，砷化氢在溴化汞试纸上形成棕黄色砷斑与标准砷进行比较。
2、试剂：盐酸（HCl），碘化钾（KI），氧化亚锡盐酸溶液（40%、m/v），无砷金属锌，乙酸铅棉花·溴化汞试纸，砷标准溶液（1ug/ml）。
3、测定：称取1g试样（精确到0.01g）置于广口瓶中，用水稀释至70ml，加6ml盐酸，摇匀，加1g碘化钾（5mlKI 溶液、200g/L），再滴加氯化亚锡，直到溶液由黄色变成无色或白色，摇匀，放置10min，加2.5g无砷金属锌，装好置于暗处25-30℃放置1-1.5h，溴化汞试纸所呈棕黄色不得深于标准。
十五、硫酸镁（MgSO4）无色结晶或白色粉末。
称取试样1g（精确到0.0002g），用水溶解，转移至100ml容量瓶中，定容，准确吸取25ml溶液至250ml锥形瓶中，加30ml水，10ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH=10），及5滴铬黑体指示剂（0.5%），用EDTA滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点。
X%= C×V×0.02431 m×100C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L；V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；m----样品质量，g。
另：沸石粉、滑石粉、石膏粉和膨润土，只测Pb、Cd和As。
三、维生素一、甜菜碱盐酸盐1、原理，采用非水滴定法，用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。
2、试剂，①冰乙酸；②乙酸汞溶液，将50g乙酸汞研细，加1000ml冰乙酸溶解，置棕色瓶中，密闭保存。
③结晶紫指示剂；2g/L，取2g结晶紫，加100ml冰乙酸；④高氯酸标准滴定液，0.1mol/L的溶液。
3、测定取试样预先在105℃烘箱中干燥至恒重，称取干燥试样0.4g（精确到0.0002g），加50ml冰乙酸加热溶解，加25ml 乙酸汞溶液，冷却，加结晶紫指示剂2滴，用0.1mol/L的高氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色，同时作空白试验。
X%= （V-V0）×C×0.01536 M×100C----高氯酸标准溶液的浓度mol/LV---试验组消耗高氯酸标准溶液的体积mlV0---空白组消耗高氯酸标准溶液的体积mlm---试样质量。
二、氯化胆碱称取经105℃干燥至恒重的试样1g（精确到0.0002g），置于100ml容量瓶中，加水70ml混匀，在约80℃水浴上加热15min，取出，在电动振荡器振荡20min，用水定容至100ml，过滤，吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中，在冰箱内冷却到5℃以下，加10ml雷氏盐溶液（2%），不时搅拌反应30min（再令沉淀静置陈化15min），然后将沉淀定量到转移到事先在105℃烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中，减压抽滤，在用水洗涤沉淀3-4次，每次10ml，将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱，105℃烘2h称重。
氯化胆碱%= 沉淀重×3.3045 样品重量×100%雷氏盐甲醇溶液（2%）：2g雷氏盐，溶于100ml甲醇中，放置于低温下保存。
胺盐定性分析：称取3-4g试样，煮50ml水至70-80℃，在加样品，摇匀充分溶解，过滤于150ml三角瓶中，加入1ml浓硫酸，摇匀，将滤液煮沸，用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测其气，观察试纸颜色是否发黑，继续煮1-2min，从电炉上取下放冷，加40%氢氧化钠5ml再煮沸，用PH湿润试纸测其蒸气的PH值，PH在7-8为合格。
氨制硝酸银溶液：取硝酸银1g，加水20ml，滴加氨试剂（取浓氨水400ml，加水至1000ml），边加边搅拌，至棕色沉淀将近全溶，过滤，置于棕色瓶中，在暗处保存。
（二）仲裁法（非水滴定法）：原理：采用非水滴定法，用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中，以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定。
试剂：5%乙酸汞溶液、50g/L（称取5g乙酸汞研细，用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml，在棕色瓶中密封保存；0.2%结晶紫、2g/L（称取0.2g，加100ml冰乙酸）测定步骤：称取试样0.3g（精确到0.0002g）置于100ml锥形瓶中，加20ml冰乙酸，2ml乙酸酐，10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂，摇匀，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈纯蓝色。
即为终点。
同时做空白试验。
X%= C×（V1-V0）×139.63 m×1000 ×100C-----高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；V1----试验组消耗高氯酸溶液的体积，ml；V0----空白组消耗高氯酸溶液的体积，ml；m----样品的质量，g。
139.63-----氯化胆碱的分子量。
三、维生素B6称0.15g样品（精确到0.0002g），加冰乙酸20ml，乙酸汞溶液5ml，温热溶解，放冷，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白校正。