实验室常用试剂配制
实验室常规试剂配制
实验室常用试剂、缓冲液的配制1 MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1 MTris-HCI配制量1 L配制方法1.称量121.1 gTris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 咼温咼压火菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 MTris-HCl(pH8.8)组份浓度1.5 MTris-HCl配制量1 L配制方法1.称量181.7 gTris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压火菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10 X TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100 mMTris-HCl,10 mMEDTA配制量1 L配制方法1.量取下列溶液，置于 1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合3. 将溶液定容至1 L后，高温高压火菌。
4. 室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度配制量配制方法PBSBuffer 组份浓度137 mMNaCl,2.73 M琴磁柚IQO ml1. N.1OAC - 3H.OH于100-200 m：疑杯中.加人對40讪的去两子水披扌半渚孵2、加入冰酯敌讷帑pH值至43加去离子庆粕増液證容至20ml.mMKCl,10 mMNa2HPO4,2 mMKH2PO4配制量1 L配制方法1.称量下列试剂，置于 1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl，10mMEDTA（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500mMEDTA（pH8.0）20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定至1L 后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
实验室常用药品试剂的配置与使用
实验室常用药品试剂的制备与使用(一)认识药品规格纯度规格简写标签颜色级别特点(二)染色试剂的配制1.甲基绿（DNA—绿色）和吡罗红（RNA—红色）染色剂配制：a)A液：取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中，取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。
取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中，置于棕色瓶中备用。
b)B液：是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。
先取乙酸钠16.4 g，用蒸馏水溶解至1000 mL备用；再取乙酸12 mL，用蒸馏水稀释至1000 mL备用。
取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50 mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。
c)取A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。
应该注意的是该试剂应现用现配。
2.I2-KI溶液（淀粉—蓝紫色，蛋白质—黄色）配制：将碘化钾3g溶于蒸馏水中，待全部溶解后加入碘1g，振荡使其溶解，将此液保存在棕色玻璃瓶内。
3.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ（木栓化、角质化细胞壁—红色，脂肪、挥发油、树脂等—红色或淡红色）配制：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ干粉0.1g与95%乙醇10 mL混合，过滤后再加入10 mL甘油。
4.1% 醋酸洋红染料（染色体—紫红色）配制：将洋红1 g与45% 醋酸100 mL煮沸2h 左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量。
冷却后过滤，加入4% 铁明矾溶液1~2滴，放入棕色瓶中备用。
5.龙胆紫酸性染料（染色质—紫色）配制：取龙胆紫1 g，溶于少量2% 醋酸溶液中，滴加2% 醋酸溶液，直至溶液不呈深紫色为止。
6.卡宝染色剂（染色体—红色，着色深，保存性好）又名苯酚-品红染色剂配制：a)原液A：将3g碱性品红溶于100 mL 70% 的乙醇中。
b)原液B：取原液A 10 mL 加入到90 mL 5% 苯酸水溶液中。
（两周内有效）c)原液C：取原液B 55 mL，加入6 mL福尔马林和6 mL冰醋酸。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。
实验室常用试剂配制方法
实验室常用试剂配制方法实验室中，常用试剂的配制方法非常重要，准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法：1.缓冲溶液的配制：缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度，常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例，其配制方法如下：1) 称取所需量的Tris氯化物（Tris-HCl）。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中，搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸（如盐酸）或碱（如氢氧化钠）来调节pH值，同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中，用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制：浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例：1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积，计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算：质量（g）=浓度（mol/L）×体积（L）×摩尔质量（g/mol）。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl，搅拌使其溶解。
4)如果需要，通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制：酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例：1)根据酶的活力或浓度，计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶，可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶，并按需添加其他辅助试剂，如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要，将溶液分装至小容器中，如冰盒中保存。
4.染色剂的配制：染色剂常用于细胞培养、组织切片，或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例：1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝（Methylene Blue）。
2)加入足够的去离子水，用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中，并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
实验室试剂配制
实验室试剂配制1、0.083M KOH：0.1M KOH稀释12倍（PH必须大于12）2、酸性半饱和硫酸铵：取硫酸铵（（NH3）2SO4）400g加蒸馏水500mL.置于37℃水浴24h不时搅拌，使达饱和，再冷至25℃，搅拌一次，使过量的（NH3）2SO4析出，上清液为饱和液，取上清夜400mL加1M HCL20mL。
蒸馏水加至800mL，混匀室温保存（PH必须大于3）3、17%异丙醇溶液：17mL异丙醇加0.1mol/L Tris 缓冲液（7.4）至100mL。
PH〉7.2方可。
4、10g/L（1%）联苯胺：1.0g联苯胺溶于90mL 冰醋酸内，然后加蒸馏水至100mL，贮于棕色瓶，置冰箱内可使用数周。
5、1%H2O2：30%H2O2新鲜配制（稀释30倍）6、100g/L（10%）醋酸溶液：取10mL冰醋酸，加蒸馏水至100mL7、标准Hb溶液：取以生理盐水洗涤过三次的压积红细胞与等体积蒸馏水，0.5倍体积四氯化碳混合，剧烈振荡5min后，离心20min（2,500r/min），吸取上层Hb液，用氰化高铁Hb法准确测定其浓度，稀释成100g/L（10%）Hb浓度，于低温冰箱保存，用时取0.01mL，加生理盐水至10g/L。
即为100mg/L（10mg%）应用标准液。
8、12.5g/L亚硝酸钠—葡萄糖溶液：亚硝酸钠：1.25葡萄糖：5加蒸馏水至100mL，用棕色瓶，4℃保存一个月。
9、0.0004mol/L美蓝溶液：美蓝（次甲基蓝，亚甲基蓝）15mg，加蒸馏水100mL，室温1～2个月。
10、0.02mol/L磷酸盐缓冲液（PH7.4）：Na2HPO4·12H2O：229.5mg（1.1475g）KH2PO4：52.2mg（0.261g）加蒸馏水100mL（500mL）11、PH8.5 TEB缓冲液：Tris：10.2g（5.1g）EDTA：0.6g（0.3g）硼酸：3.2g（2.6g）加蒸馏水至1000mL（500mL）12、PH8.5硼酸缓冲液：硼酸5.56g硼砂（四硼酸钠）6.87g加蒸馏水至1000mL13、0.09%丽春红：丽春红S或G:1.8g三氯醋酸：26.8g磺柳酸：26.8g加蒸馏水至100mL用前将上液以蒸馏水稀释20倍使用14、氨基黑：氨基黑10B: 0.5g甲醇50mL冰醋酸：10mL蒸馏水：40mL溶解而成贮棕色瓶内15、漂洗液：甲醇（乙醇）45mL冰醋酸：5mL蒸馏水：50mL溶解而成16、透明液：无水乙醇：70mL冰醋酸：30mL混合而成17、PH6.5磷酸盐缓冲液：KH2PO4：3.11g Na2HPO4: 1.49g（Na2HPO4·2H2O 1.87g）蒸馏水900mL校正PH后稀释至1,000mL18、0.4NaOH：1M →稀释19、0.1Tris缓冲液（PH7.4）：Tris: 1.21g 0.1N HCL 40mL加蒸馏水至100mL20、1.0mol/L盐酸标准液：浓盐酸MW=36.465，比重1.18，含HCL 36%～38%。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
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实验室常用试剂、缓冲液的配制方法蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法SDS-PAGE分离胶配方表PAGE凝胶配方表（核酸电泳用）各种缓冲液的性质对照表离心机转子的转速与相对离心力RCF(g)间的换算关系相对离心力RCF值（g值）取决于转子的转速（rpm）和旋转半径（r，以mm计算)，可用如下公式表示：此外，根据RCF值（g值)、rpm值、r值之间的关系，可从图A、图B中大致读出各种数值。
图A高速转子的相对离心力列线图要确定某一列上的未知值时，用尺子排列其他两列的已知值，所需值落在尺子与第三列的交切处。
如：转子速度为80,000 rpm，旋转半径为20 mm时，相对离心力RCF值约为150,000 g。
图B低速转子的相对离心力列线图要确定某一列上的未知值时，用尺子排列其他两列的已知值，所需值落在尺子与第三列的交切处。
如：转子速度为5,000 rpm，旋转半径为40 mm时，相对离心力RCF值约为1,100 g。
密码子表色素在聚丙烯酰胺凝胶中的移动速度*大肠杆菌的基因型野生的大肠杆菌（E.coli）的基因组DNA中有470万个碱基对（bp)，内含4288个基因。
E.coli基因组中还包含有许多插入序列，如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段，这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的，由此表明了基因组具有它的可塑造性。
利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造，使其中的某些基因发生突变或缺失，从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化，这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型 (Phenotype)，把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型（Genotype)。
具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。
这些不同基因型特性的菌株在基因工程的研究和生产中具有广泛的应用价值。
大肠杆菌基因型的表示方法有如下几种：1．根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成三个斜体字母来表示。
例如：DNA Adenine Methylase→dam。
2．变异基因不同，导致的结果相同时，用其作用结果的英文名称的前三个字母斜体后加上一个大写字母来表示区别。
例如：Recombination→recA、recB、recC。
3．某个基因或某个领域缺失时，在其基因型前面加上“∆”表示。
例如：lac-proAB基因缺失时它的基因型表示为∆(lac-proAB)。
4．野生的大肠杆菌具有F因子（质粒）和噬菌体插入片段，当这些质粒或噬菌体片段变异或缺失时，用“()”或“/”等以区别。
例如：/F' [traD36、proAB、lac I q、lacZ∆M15]。
5．由于某种基因的变异导致大肠杆菌可以明显观察到特征变化，有时也用其表现型代替基因型进行表示。
例如：某些抗药性的获得或丧失，用如下方式表示：Streptomycin抗性→Str +或Str r，Ampicillin敏感性→Amp-。
(第一个字母要大写,“+”或“r”表示有抗性,“-”表示无抗性或敏感)。
6．根据某些特异性蛋白的变异及其导致的结果变化进行表示。
例如：TH2菌株上有一种基因型表示如下：hsdS20 (rB-、mB-)，其中S20代表特异性识别蛋白发生变异，()中的rB-、mB-表示由于S20的变异而导致B株来源的hsdR和hsdM的功能缺失。
使用时注意：基因工程中，经常使用的大肠杆菌几乎都来自于K-12菌株，最近也经常使用由B株及C株来源的大肠杆菌。
大肠杆菌B株原来就为lon-，另外MV1184株不具有琥珀抑制基因(Amber supperssor free)，由于这些都是原始菌株所不具备的基因，因此不在基因型中加以表示，要注意。
主要的基因型说明基因重组相关的基因型recA (Recombination)Map position: 58 min功能：recA基因表达ATP依赖型DNA重组酶，它在λ-噬菌体与基因组DNA的溶原重组时起作用，同时具有对DNA放射性损伤的修复功能。
由recA基因的变异所产生的基因型使同源或异源DNA的重组不能进行，保持插入DNA的稳定性，对DNA的转化有利。
recB (Recombination)Map position: 61 min功能：recB基因表达ATP依赖型DNase和核酸外切酶V的一个亚基，对recA的DNA重组酶起辅助和促进作用。
DNase 催化双链DNA的解旋和解链，核酸外切酶V催化单链DNA的裂解，在DNA的重组和损伤修复中发挥重要作用。
recB基因的变异导致其DNA重组和修复功能丧失，保证了外源DNA的稳定，有利于DNA转化。
recC (Recombination)Map position: 61 min功能：recC基因表达四种酶，即核酸外切酶V，ATP依赖型的核酸内切酶，解旋酶及ATP酶，它们和recA, recB所表达的酶相互协调作用，在DNA的重组及放射性损伤的修复中发挥作用。
recC基因的变异导致DNA重组功能缺失，保证外源DNA的稳定性。
甲基化相关的基因型dam (DNA adenine methylase)Map position: 74 min功能：dam基因表达DNA腺嘌呤甲基化酶，它能催化特异序列GATC中A的甲基化，保证DNA免受限制性核酸内切酶Mbo I的切断，同时在DNA复制时也起一定的辅助作用。
dam基因的变异导致腺嘌呤（A）甲基化酶活性的缺失，使腺嘌呤(A) 不被甲基化，易于获得非甲基化质粒。
dcm (DNA cytosine methylase)Map position: 43 min功能：dcm基因表达胞嘧啶甲基化酶，它能特异性识别DNA双链上的CCWGG序列，并使第二个C甲基化，即C m CWGG，避免DNA受到相关限制酶的切断。
dcm基因的变异导致胞嘧啶甲基化酶活性缺失，使外源DNA上的C不被甲基化，易于获得非甲基化质粒。
mcrA (Modified cytosine restriction protein a)Map position: 26 min功能：mcrA基因表达大肠杆菌防御体系中起重要作用的mcrA酶，这种酶能特异性地作用于外来DNA上的被甲基化的胞嘧啶序列，即C5m CGG特异序列，使之分解，对大肠杆菌本身起保护作用。
mcr A基因的变异，导致上述功能缺失，对外来DNA 中被甲基化的胞嘧啶特异序列（C5m CGG）失去作用，有利于限制酶及甲基化酶的克隆体的稳定。
mcrB, C (Methyl cytosine-specific restriction)Map position: 98 min功能：mcrB, C基因表达两种特异性蛋白，即mcrB蛋白和mcrC蛋白，它们在大肠杆菌的防御系统中起重要作用。
一般情况下，只有这两种蛋白同时存在时才表现出活性，mcrC具有识别和调节功能，它能特异性的结合到外源DNA上被甲基化的胞嘧啶（C）的特异序列G5m C上，然后由mcrB蛋白切断（mcrB蛋白是特异性切断外来DNA中G5m C序列的限制性核酸内切酶)，防御外来DNA的侵入。
mcrB, C基因的变异，使上述的对外来DNA的防御作用缺失，对质粒的转化有利。
mrr (Methylation requiring restriction)Map position: 98 min功能：mrr基因是大肠杆菌细胞防御系统中重要的基因之一，它能严格限制被甲基化的外源DNA的介入。
另外，它对限制酶Acc I，Cvi R I，Hin f I (Hha II)，Nla II，Pst I以及N6-腺嘌呤甲基化酶和C5-胞嘧啶甲基化酶活性有明显的抑制作用。
mrr欠损株（基因型）可用于含有N6-m A和C5-m C的DNA的转化。
另外，含有此基因型的菌株也可用于限制酶和甲基化酶的克隆体。
hsdM(Host specificitive defective)Map position: 99 min功能：hsdM基因所表达的DNA甲基化酶是I型限制酶复合体（具有对DNA切断和修补的双重功能）的一部分，它能使DNA 双链上的AA (双腺嘌呤) 甲基化，保护宿主DNA不被分解。
hsdM的变异使细胞内的DNA不被甲基化，易于获得非甲基化质粒。
点突变相关的基因型mutS (Mutator)Map position: 59 min功能：mutS基因表达的蛋白具有识别DNA上错配序列的功能，并能修复其错配序列（GC→AT)，防止基因突变。
mutS基因的变异导致DNA的错配序列不能得到修复，容易发生基因突变，这对于利用点突变进行基因改造是有利的。
mutT（Mutator）Map position: 3 min功能：野生大肠杆菌在进行DNA复制时，细胞中的8-OXO-dGTP插入模板DNA中的DA位点的效率几乎与插入DC位点的效率相同，导致A-T转换成G-C，使DNA产生变异。
而mutT蛋白就是特异性地降解8-OXO-dGTP成为单磷酸盐（8-OXO-dGMP)，这种单磷酸盐状态的G (鸟嘌呤) 不能作为底物进行DNA合成，从而防止了上述的基因突变。
mutT基因的变异使细胞中8-OXO-dGTP浓度增高，A→C的突变几率增大，有利于利用点突变进行基因改造。
dut (dUTPase)Map position: 82 min功能：dut基因表达脱氧尿嘧啶三磷酸核苷酸水解酶（dUTPase)，它能水解dUTP成为dUMP，使细胞体内dUTP的浓度维持在较低的水平，尿嘧啶（U）就不易掺入到DNA中，避免了基因发生A→U的突变。
dut基因发生突变使dUTPase活性缺失，导致dUTP浓度升高，碱基U（尿嘧啶）极易掺入到DNA中，使其发生A→U的基因突变，有利于利用点突变进行基因改造。
ung (Uracil DNA glycosylase)Map position: 56 min功能：ung基因表达尿嘧啶-N-糖苷酶，这种酶能特异性识别DNA单链或双链上发生突变的尿嘧啶残基，并从DNA上水解去除尿嘧啶残基，防止DNA发生突变。
ung基因的变异导致上述功能缺失，有利于点突变。
uvrB (Ultraviolet)Map position: 18 min功能：uvrB基因表达核酸外切酶中的b亚基，这种核酸外切酶具有DNA的切补功能，对紫外线损伤的DNA有修补作用。
uvrB基因的变异使细胞中核酸外切酶切除变异碱基的活性缺失，有利于点突变。
核酸内切酶相关的基因型hsdR (Host specificity defective)Map position: 99 min功能：hsdR基因表达I型限制酶Eco K (K12株) 或Eco B (B株)，在大肠杆菌细胞中起到一种“抗体”的作用，对外来的各种DNA有严格的限制。