实验室常用生化试剂配方
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
生化常用试剂配制
生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。
1.0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ；配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2.0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ；配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
3.含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠；配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。
2.准确量取氢氧化钠20g。
3.用去离子水稀释至1L。
注意: 此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.2％葡萄糖标准溶液组份浓度0.2％；配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中, 在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温, 重复干燥, 冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。
5.250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ；配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂.配置方.1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中，加入50g无水碳酸钠，溶解，待用。
2.称取0.5g酒石酸钾钠，溶于80mL去离子水中，加入0.25g硫酸铜?5水，溶解。
3.将1：2：去离子水按20：4：1的比例混合即可.4.4℃保存，可用一周.7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g, 去离子水175mL, 85％磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL, 充分混合。
2.回流10小时, 再加硫酸锂37.5g, 去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min, 以驱除过量的溴, 冷却后定容到250mL。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多，根据实验需求，可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方，以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液（Phosphate buffer）磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中，用于控制溶液的pH值，适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液（Sodium chloride solution）氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一，通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液，常见的配方为0.9%氯化钠溶液（生理盐水）。
3. 碳酸氢盐缓冲液（Bicarbonate buffer）碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中，用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液（Tris buffer）Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液，可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液（pH 7.4），需要用Tris（三氯甲烷磺酸，Tris-HCl）和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液（Phosphate-buffered saline）PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液，具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液（pH7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液（Glycine buffer）甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中，用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液（pH8.3），需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液（Bovine serum albumin solution）BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质，用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
超全实验室试剂配制资料
一、实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1、1 M Tris-HCl(pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
医学实验技术用到的试剂配制方法
医学实验技术用到的试剂配制方法
实验中用到的试剂配方
一、WB实验
1.电转液（PH=8.3）
甘氨酸 14.5g
Tris 2.9g
甲醇 200ml
蒸馏水至 1000ml
先用蒸馏水溶甘氨酸，最后加甲醇，室温保存，2-3次可用，最好4度保存，可配制成2x转移缓冲液，稀释后可用。
2.TBS缓冲液
1mol/L Tris-HCL （PH=7.5） 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
可配制成10x转移缓冲液，稀释后可用。
3.TBST缓冲液
20%Tween 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用，最好现用现配。
二、免疫染色相关实验
5.多聚甲醛溶液（4%）
多聚甲醛 40g
1×PBS 定容至1L
6.柠檬酸盐抗原修复液（1×）
柠檬酸三钠 3g
柠檬酸 0.4g
dH2O 定容至1L
PH调至6.0
7.盐酸酒精（1%）
浓盐酸 2.5ml
75%乙醇定容至250ml
8.氨水（1%）
氢氧化铵 2.5ml
dH2O 定容至250ml
三、其他
4.红细胞裂解液
NH4CL 2g
KHCO3 0.25g
ddH2O 250ml
0.5M EDTA 250ul
最后用除菌过滤器过滤，待用。
32种常用生化试剂的配制
试剂的配制（1） 2,4—二硝基苯肼溶液Ⅰ．在15 mL浓硫酸中，溶解3g 2,4—二硝基苯肼。
另在70 mL 95%乙醇里加20 mL水。
然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液。
（若有沉淀应过滤）Ⅱ．将1.2g 2,4—二硝基苯肼溶于50 mL 30%高氯酸中。
配好后储于棕色瓶中，不易变质。
I法配制的试剂2,4—二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。
（2）饱和亚硫酸氢钠水溶液先配制40 %亚硫酸氢钠水溶液。
然后在每100 mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25 mL，溶液呈透明清亮状。
由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。
然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。
配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。
（3）Schiff（希弗）试剂在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐（也有叫碱性品红或盐基品红），放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释到200 mL。
或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加人0．2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200 mL。
此外，也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加人0.5 g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500 mL。
本试剂所用的品红是para-rossaniline（或称para-fuchsin,又称假红）。
此物与另一类似物rossaniline（或称fuchsin,称洋红）不同，现以它们的盐酸盐为例，对比结构式如下：C NH2 NH2NH2CH2IH-CNH2NH2CI-++3NH2品红溶液原是桃红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂，其变化过程如下：C NH2 NH2NH2C NH2NH2+3NH2CI-+H2SO4SO3H+HCI NH2NH2 CSO3H +NHNHHC2SO2HSO2H 2SO2NH2Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中加入lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后加入10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反应试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中，加0.5mL硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
0.1g苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加2.75mL浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋0.5g洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
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实验室常用生化试剂配方
1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版）
抗生素
英文名称及缩写
抗性基因
贮藏液浓度(mg/ml) 100
25(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 35
25(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)
50 50
MM
使用终浓度（μg/ml）链霉菌
2CM
YEME
大肠杆菌
LA或LB
氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMP
Ampicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprim
cat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph
－* 10 10 2 5 10 5 100 10
－－ 25 25 20 25 10 － 50
－－－－－－ 2.5 － 5
50-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30
注意事项：
(1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请
确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装；
（2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并
设置阴性对照；
（3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio
（4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并
分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确
保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水
乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易
挥发，有剧毒；
（5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存；
（6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整；
(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次
性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂
对自身的损伤及对工作环境的污染。
注意事项：
(1)表中所列酶均可以用无菌水配制，也可以用相应的缓冲液配制，缓冲液配制方法
参考《分子克隆实验指南（第3版）》：
蛋白酶 K缓冲液：50 mM Tris（pH 8.0），1.5 mM 乙酸钙； RNase A缓冲液：TE （pH 7.6）：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA；溶菌酶缓冲液：10 mM Tris-HCl（pH
8.0）；
(2) RNase A配制好后沸水浴处理5 min，取出贮存RNase A后首次使用时也需沸水
浴处理5 min后再使用；
（3）制备原生质体时使用的溶菌酶配制时需过滤除菌，其他情况一般无需过滤除菌；
（4）所有酶均应在-20℃保存，使用过程中避免反复冻融，配制过程中尽量避免外界
污染。
（1）IPTG用无菌水配制，0.22μm一次性滤膜过滤除菌，分装保存于-20℃；
,
（2）X-Gal用N-N-二甲基甲酰胺（DMF）配制，无需过滤除菌，X-Gal易见光分解，配制过
,
程中尽量避开强光，分装到离心管后用锡箔纸包好，避光保存于-20℃；N-N-二甲基甲酰胺有剧毒，挥发性较强，应在通风良好的台面操作，配制时请穿工作服，戴一次性橡胶手套及
,
口罩，及时清理配制时使用的台面及器具，以避免N-N-二甲基甲酰胺对自身的损伤及对工作环境的污染。