常用实验试剂配制
常用试剂配制方法

1、裴林甲液:配制:称取五水合硫酸铜69.278g 加蒸馏水稀释到1000ml ,摇匀,即得。
标定:吸取甲液5.0ml 于250ml 碘量瓶中,加30%醋酸溶液2ml 和1.5g 碘化钾固体,充分混匀并溶解后,加盖避光放置5分钟,用装有蒸馏水的洗瓶将塞子和瓶内壁冲洗干净,之后,先用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色,加2ml0.5%淀粉指示剂,继续滴定至兰色消失出现乳白色沉淀即为终点,同时用5ml 蒸馏水做空白,裴林甲液的比值F 按下式计算:01748.05006357.0V ⨯⨯-=)(空白样品V F 0.5%淀粉指示剂配制:称取0.5000g 淀粉,放入烧杯中,先调成糊状,加入到热的沸水中,并沸腾几分钟,至溶液呈现透明,冷却至室温。
30%醋酸溶液:30ml 冰乙酸用蒸馏水稀释并定容至100ml 。
2、水中总磷的测定:钼酸铵溶液:称量6.0g 分析纯钼酸铵溶于500ml 水中,加入0.2g 酒石酸锑钾和83ml 分析纯浓硫酸,冷却后,稀释至1L 。
充分混匀后,存于棕色试剂瓶中,贮存期6个月。
硫酸溶液(C=0.5mol/L ):取30ml 分析纯浓硫酸缓缓加入适量蒸馏水中,冷却至室温,加蒸馏水稀释至1000ml ,摇匀。
24g/L 过硫酸铵溶液:称取24.0g 过硫酸铵固体,用蒸馏水溶解并稀释定容至1000ml ,充分混匀即可。
17.6g/L 抗坏血酸溶液:称取17.6g 抗坏血酸溶于适量蒸馏水中,加0.2g 乙二胺四乙酸二钠和8ml 甲酸,充分溶解和混匀后,用蒸馏水稀释并定容至1L ,混匀。
贮存于棕色瓶中,有效期为15天。
3、NaOH 标液(0.5mol/L ,0.1mol/L )配制:称取20.00g(4.00g)分析纯氢氧化钠固体,用蒸馏水溶解,并稀释定容至1000ml,混匀放置。
标定:取在105℃下烘干至恒重的邻苯二甲酸氢钾2g(0.4g),精密称定,加新沸过的冷水50ml,完全溶解,加2滴酚酞指示剂,用配好的该0.5mol/L(或0.1mol/L)NaOH标准溶液滴定至溶液显粉红色,其中每1ml的NaOH标液相当于102.1mg(或20.42mg)的邻苯二甲酸氢钾。
20几种常用试剂配置方法

20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。
生物实验常用试剂配制方法

生物实验常用试剂配制方法
1.碘液的配制
取2g碘化钾,溶解在5mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2.斐林试剂
试剂A:将结晶硫酸铜溶于500mL水中,加硫酸,混合均匀。
试剂B:将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3.双缩脲试剂
试剂A:10%氢氧化钠试剂B:1%硫酸铜
4.苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不得超过10分钟。
5.二苯胺试剂:
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中,再加浓硫酸(置冰箱中可保存根6个月,使用前在室温下摇匀)。
6.醋酸洋红染液
冰醋酸45mL+55mL蒸馏水+洋红
先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸 10分钟,待冷却后,即可使用。
7.有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。
8.有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液
9.卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定)
酒精:冰醋酸=3:1(体积比)。
常用试剂配制方法

常用试剂配制方法1、氨试液取浓氨水200ml,置1000ml量杯中,加水稀释至500ml。
2、碱性酒石酸铜试液:配600ml。
(1)取硫酸铜结晶20.8g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml试剂瓶中备用。
(可长期保存)(2)取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml试剂瓶中备用。
(需新鲜配制)临用前将两液等量混合,即得。
3、0.2%酚酞指示液:配500ml。
(可长期保存)粗称酚酞1g,置500ml量杯中,加95%乙醇500ml,使溶解,即得。
4、0.02mol/l氢氧化钠滴定液:配500ml。
(可长期保存)取氢氧化钠0.4g,置500ml量杯中,加水使溶解成500ml。
5、稀硝酸:配4000ml。
(可长期保存)取硝酸(16mol/L)210ml,置3000ml烧杯中,加水稀释至2000ml。
配2次。
6、标准氯化钠溶液(10ug/ml):配1000ml。
(可长期保存)精称氯化钠16.5mg,置100ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液。
(100μg/ml)临用前,精密量取储备液100.0mL,置1000ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
7、硫酸铜液:称取硫酸铜85g,加水至1000ml。
8.硝酸银试液:配500ml。
(需新鲜配制)取硝酸银8.75g,置500ml量杯中,加水溶解至500ml。
9.稀盐酸:配3000ml。
(可长期保存)取盐酸(12.5mol/L)702ml,置5000ml烧杯中,加水稀释至3000ml。
10.标准硫酸钾溶液(100ug SO4-2/ml):配500ml。
(可长期保存)精称硫酸钾90.5mg,置100ml烧杯中,加水溶解后,转移至500ml量瓶中。
11.25%氯化钡:配3000ml。
(可长期保存,第二年如混浊,过滤)粗称BaCl2750g,置5000ml烧杯中,加水超声溶解并稀释至3000ml(澄清)。
实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法实验室中,常用试剂的配制方法非常重要,准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法:1.缓冲溶液的配制:缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度,常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例,其配制方法如下:1) 称取所需量的Tris氯化物(Tris-HCl)。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中,搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸(如盐酸)或碱(如氢氧化钠)来调节pH值,同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中,用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制:浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例:1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积,计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算:质量(g)=浓度(mol/L)×体积(L)×摩尔质量(g/mol)。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl,搅拌使其溶解。
4)如果需要,通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制:酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例:1)根据酶的活力或浓度,计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶,可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶,并按需添加其他辅助试剂,如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要,将溶液分装至小容器中,如冰盒中保存。
4.染色剂的配制:染色剂常用于细胞培养、组织切片,或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例:1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝(Methylene Blue)。
2)加入足够的去离子水,用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中,并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
常用试剂的配制

1、2,4-二硝基苯肼溶液I.在15mL浓硫酸中,溶解3克2,4-二硝基苯肼。
另在70mL95%乙醇里加20mL水,然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中,搅动混合均匀即成橙红色溶液(若有沉淀应过滤)。
Ⅱ.将1.2克2,4一二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中,配好后储于棕色瓶中,不易变质。
I法配制的试剂,2,4-二硝基苯肼浓度较大,反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大,因此便于检验水中醛且较稳定,长期贮存不易变质。
2、卢卡斯(Lucas)试剂将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融,稍冷后放在干燥器中冷至室温。
取出捣碎,溶于23mL浓盐酸中(比重1.187)。
配制时须加以搅动,并把容器放在冰水浴中冷却,以防氯化氢逸出。
此试剂—般是临用时配制。
3、托伦(Tollens)试剂I.取0.5mL10%硝酸银溶液于试管里,滴加氨水,开始出现黑色沉淀,再继续滴加氨水,边滴边摇动试管,滴到沉淀刚好溶解为止,得澄清的硝酸银氨水溶液,即托伦试剂。
Ⅱ.取一支干净试管.加入1mL5%硝酸银,滴加5%氢氧化钠2滴,产生沉淀,然后滴加5%氨水,边摇边滴加,直到沉淀消失为止,此为托伦试剂。
无论I法或Ⅱ法,氨的量不宜多,否则合影响试剂的灵敏度。
I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱,在进行糖类实验时,用I法配制的试剂较好。
4、谢里瓦诺夫(Seliwanoff)试剂将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100mL。
5、希夫(Schiff)试剂在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐,放置冷却后,加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸,再用蒸馏水稀释至200mL。
或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液,冷却后加入0.2g品红盐酸盐,溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色,用蒸馏水稀释至200mL。
此外,也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中,冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失,加入0.5g活性炭,振荡过滤,再用蒸馏水稀释至500mL。
常用化学试剂的配制方法

常用试剂配制的具体操作1.HCL(1+1):在1000ml棕色瓶或白色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢加入盐酸,摇匀,密封备用。
(打开盐酸时,需要用纸,盖在瓶盖上再打开。
因为里面可能存在压力,若是直接打开,可能会因为压力过大,造成液体冲出,伤害到眼睛)也可以放置少量在白色滴瓶中待用。
2.抗坏血酸(5%):用一次性塑料杯,称取抗坏血酸1g,硫脲0.1g,加入20ml纯净水,在超声器中用玻璃棒搅匀,再倒入30ml小棕色瓶中保存。
(在实验前需要看颜色变化,如果颜色变深,则代表试剂过期)。
3.盐酸—硼酸混合酸:用一次性塑料杯称取硼酸25g,500ml量杯分2次量取900ml纯净水,清洗塑料杯,并倒入1000ml烧杯中,再加入HCL(1+1)70ml,放置在超声器中,用玻璃棒搅匀溶解,再倒入1000ml的棕色瓶中保存(也可以用500ml白色塑料瓶,插10ml刻度移液管)4.钼酸钠(6%):用一次性塑料杯称取钼酸钠30g,500ml量杯量取500ml纯净水,边清洗塑料杯边倒入500ml烧杯中,然后放置在超声器中,用玻璃棒搅匀,再倒入至500ml白色塑料瓶中,密封保存。
(插5ml刻度移液管)5.H₂O₂(1+20):全名为过氧化氢或者双氧水。
用1ml刻度移液管,吸取1ml过氧化氢至一次性塑料杯中,20ml量杯量取20ml纯净水,倒入塑料杯中,摇匀,再倒入至30ml的小棕色瓶中。
(容易失效,所以做溶液和检测时都需要速度快)6.三乙醇胺(TEA)(1+1):在1000ml棕色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢倒入500ml三乙醇胺,摇匀备用。
(也可以用白色塑料瓶,加黑色外袋保存,插5ml刻度移液管)7.H2SO4(1+1):带橡胶手套及口罩。
用500ml量杯先量取300ml纯净水,在1000ml烧杯内,先倒入300ml纯净水。
用脸盆装半脸盆自来水,将烧杯先放入脸盆中,再用500ml量杯量取300ml浓硫酸,缓缓倒入浓硫酸,并用玻璃棒不停搅拌。
常用试剂配制方法

常用试剂配制方法
1、酚酞指示液(10g/L)
称取1.0g 酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100 ml 。
2、溴甲酚绿指示液(1g/L)
称取0.1g 溴甲酚绿,溶于乙醇,用乙醇稀释至100 ml 。
3、百里香酚酞( 1g/L )
称取0.1g 百里香酚酞,溶于无水乙醇,用无水乙醇稀释至100ml 刻度线。
4、氢氧化钠标准溶液0.5N :准确称取20.01-20.02gNaOH固体置于
250ml 烧杯中,加入100ml 纯水溶解,并定容于1000ml 容量瓶中摇匀,保存在聚乙烯瓶容器中。
5、硝酸银溶液(17g/L)
称取1.7g 硝酸银,溶于水,稀释至100ml。
6、0.1N硝酸银试剂:
称取17.0 g 硝酸银试剂溶于1 000毫升纯水中,溶解后装入1000毫升的棕色试剂瓶中。
7、1:1 硝酸溶液:
用量筒量取500ml 浓硝酸于1000 毫升的棕色瓶中,加500 毫升纯水摇匀即可。
8、1:1 甲醛溶液
用量筒量取10ml甲醛溶液至试剂瓶中,加入10ml纯水摇匀即可,必须当天配当天用,不可过夜(此操作需在带有抽风设备内进行)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1DEPC水(1‰) 1000ml 水1ml DEPC根据需要确定要配的体积,泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用,泡24小时。
配液体的DEPC水37℃过夜,送至高压,然后配相关溶液。
20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris1000ml DEPC水用HCL调ph至7.5,高压备用。
3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)将溶液持续加热至60℃左右,搅拌之至完全溶解,注意温度不要超过65℃,否则PFA降解失效。
30.2% 甘油/0.1M tris20ml 甘油980ml 0.1Mtris4 20XSSC Nacl 175.3g(ph 7.0)柠檬酸钠88.2gDEPC水1000ml分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用5 HEPES 溶液HEPES 23.8g(ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml6 50X Denhaldt′s 液聚蔗糖(Ficoll 400)0.2g聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g牛血清蛋白(BSA)0.2gDEPC 水20ml7 预杂交bufferDeinoized formanmid 5ml20X SSC 1.5ml1M HEPES 0.5ml50X Denhanldt′s液1ml龟精DNA 0.6ml(4ug/ul)DEPC水 1.4ml龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性,随即冰浴。
杂交buffer分装后-20℃保存。
8Washing buffer(ph7.5) maleic acid 5.8gNACL 4.4gTween(吐温) 1.5ml定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween9Maleic acid buffer(ph7.5) Maleic acid 5.8gNacl 4.4g定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl10Detection buffer(ph 9.5)0.1M Tris-Hcl 7.9g (9.0g)0.1M Nacl 2.9g定容至500ml.使溶质的终浓度为0.1M Tris-Hcl ,0.1M nacl.11blocking reagent(封闭液)(2-8℃保存)(bottle 5) 5gmaleic acid buffer 50ml12blocking solution封闭液(新鲜配制)1mlMaleic acid buffer 10ml13抗体(AP)10000rpm离心5min,吸上清,1:5000稀释,考虑先稀释100倍,用时再稀释。
✧LB培养基加去离子水950ml搅拌使之完全溶解,用5mol/L的NaOH调PH值至7.0,定容至1L,高压蒸汽灭菌(15磅,1.034×105Pa)30min,4℃保存。
✧LB高压蒸汽灭菌(15磅,1.034×105 Pa) 30 min,冷却至60℃,加入500 L 100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),分铺20个平板。
✧100 mg/mL用0.2um✧用0.2um滤器过滤,-20℃储存。
琼脂糖凝胶电泳所用试剂✧50×TAE(电泳缓冲液)Tris碱242g冰乙酸57.1 mL0.5M EDTA(pH 8.0)100 mL溶于终体积1000 mL去离子水中,使用时1:50稀释。
✧10×加样缓冲液0.25% 溴酚兰0.25% 二甲苯青30% 甘油保存于4℃。
✧10mg/mL EB 溶液取溴化乙锭(EB)0.2g溶解于20mL去离子水中,混匀。
4℃避光保存。
使用时终浓度为0.5μg/mL。
✧1%琼脂糖凝胶琼脂糖1g1×TAE 100 mL微波炉加热至完全溶解,摇匀,当温度降至60℃时,即可铺制平板。
✓0.1mol CaCl2溶液:1.1g无水氯化钙,溶于90ml三蒸水中,定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌置于灭菌试剂瓶中,4℃保✓氨苄青霉素(Amp)选择性培养基LB培养基中加入1.5%的琼脂(15g/L),高压灭菌20min,取出,在无菌条件下,冷却至50℃左右时(烧手但尚可忍受)加入抗生素或其他必需成分,如为氨苄青霉素(Amp)选择性培养基,则以50mg/ml的氨苄青霉素贮存液按50μg/ml的量加入,即每ml培养基加入1μl氨基苄。
✓氨苄贮存液将氨苄青霉素钠溶于三蒸水,配成50mg/ml溶液,以0.22μm滤纸过滤,1ml一份分装,存于-20℃。
质粒的少量提取【试剂及配制】1.溶液Ⅰ葡萄糖(C6H12O6·H2O)1.982g三蒸水160ml0.5mol EDTA pH8.0 4ml1mol Tris-Cl pH8.0 5ml以三蒸水定容至200ml,高压灭菌,4℃保存0.5 mol EDTA pH8.0 的配制:Na2EDTA·H2O 186.1g (如无水,则为175g)三蒸水700ml边磁力搅拌边加入固体NaOH,缓慢少量加入,待充分溶解,pH接近8.0,用酸度计调节pH8.0 (HCl/NaOH);1mol Tris-Cl pH8.0 的配制:Tris 碱121g三蒸水800ml充分搅拌,用浓盐酸将pH调节至8.0,酸度计测量;2.溶液Ⅱ配制50ml的量,现用现配。
10 mol NaOH 1ml三蒸水40ml10% SDS 5ml用三蒸水定容至50ml10mol NaOH 的配制:40g NaOH晶体加三蒸水至100ml;10% SDS 的配制:戴口罩,称10g SDS,溶于80ml三蒸水中,68℃助溶,加数滴1mol HCl,调pH7.2,定容至100ml;1mol HCl 的配制:于通风橱中,三蒸水91.4ml,浓盐酸8.6ml,混匀;3.溶液Ⅲ5mol 乙酸钾60ml冰乙酸11.5ml三蒸水28.5ml高压灭菌,4℃保存;5mol 乙酸钾配制:200ml乙酸钾98.14g三蒸水160ml搅拌溶解,定容至200ml;4.3ml 乙酸钠(NaAc)pH5.2配制:500ml乙酸钠(CH3COONa·H2O)201.1g三蒸水200ml用冰乙酸调节pH为5.2,三蒸水定容至500ml,高压灭菌,4℃保存。
5.平衡酚在粗酚中加入0.1% 8-巯基喹啉,然后倒入0.1mol Tris-Cl pH8.0,避光磁力搅拌4h,静置后移去水相,再加0.1mol Tris-Cl pH8.0,搅拌、去除水相,反复进行,直到水相pH>7.8时为止,装棕色瓶,4℃保存。
6.TE 缓冲液pH8.0配制最终使:10mmol Tris-Cl pH8.01mmol EDTA pH8.07.其它试剂:氯仿:乙戊醇(V/V=24:1)、无水乙醇、70%乙醇✓2× SSC先配制20× SSC贮存液,用时稀释。
NaCl 175g 3mol枸椽酸三钠·2H2O 88g 0.3mol三蒸水加至1000ml,用1mol HCl 调pH7.0✓4× SSC/50%去离子甲酰胺(V/V)去离子甲酰胺的配制:500ml 甲酰胺与25g Bio-Rad AG 501-X8(20~50目) 混合,室温避光搅拌4h,过滤,分装为50ml ,-20℃存放;✓100× Denhardt液聚蔗糖10g聚乙烯吡咯烷酮10g牛血清白蛋白10g消毒三蒸水定容至100ml✓预杂交液去离子甲酰胺5ml20× SSC 2.5ml加温至50℃,加入硫酸葡聚糖1g聚合物溶解后,加入100× Denhardt 500μl10%SDS 500μl10mg/ml变性鲱鱼精子DNA 100μl消毒三蒸水400μl充分混合;杂交液将标记好的探针用沸水浴10min,立即冰酒精冷轧,用预杂交液将探针稀释至0.5~5ng/μl 。
原位杂交缓冲液的配制:3%柠檬酸:100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7.H2O)3g,PH2.0左右2×SSC---1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g,柠檬酸三钠(C6H5O7Na3.2H2O,分子量294)8.8g0.5×SSC---300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可(1:3)0.2×SSC---270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可(1:9)20%甘油---20ml甘油加80ml蒸馏水即可0.5M TBS---1000ml蒸馏水加氯化钠30g,TRIS 1.2g 纯乙酸0.4-0.5ml,PH7.2-7.60.01M TBS(PH9.0-9.5)配法:1000ml蒸馏水中加NaCL9g, Tris 1.2g免疫组化缓冲液的配制:10.2M PB①0.2M NaH2PO4:NaH2PO4.2H2O 31.2g(或NaH2PO4.H2O 27.6g)加重蒸水1000ml②0.2M Na2HPO4:Na2HPO4.12H2O71.632g(或NaH2PO4.7H2O 53.6g或NaH2PO4.2H2O 35.6g)加重蒸水1000ml③0.2M PB:19ml①+81ml②混合即可,pH值约为7.4-7.520.01M PBSNaCl8.5-9g, 0.2M PB 50ml,加重蒸水1000ml混匀即可30.5M TBS①0.5M Tris-HCl缓冲液:Tris(三羟甲基氨基甲烷) 60.57g1N HCl 约420ml重蒸水至1000ml先用少量重蒸水300-500ml溶解Tris(三羟甲基氨基甲烷),加入HCl后,用1N NaOH 或HCl 将pH调至7.6,最后加重蒸水至1000ml,此液为储备液,于4℃冰箱中保存,免疫细胞化学中常用的Tris-HCl缓冲液浓度为0.05M,用时取储备液稀释10倍即可。
主要用于配制Tris缓冲生理盐水(TBS)、DAB显色液等4Tris缓冲生理盐水(TBS)0.5M Tris-HCl缓冲液100mlNaCl 3.5-9g(0.15M)重蒸水至1000ml先以重蒸水少许溶解NaCl,再加Tris-HCl缓冲液,最后加重蒸水1000ml,最终浓度为0.05M。
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L染料1%溴酚蓝(bromophenol blue)加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。