常用试剂的配制.
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具，常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。
在实验室中，通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂，合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性，保证实验结果的准确性和可重复性。
接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。
1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一，常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。
溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积，并将溶质溶解在适量的水中。
以盐酸为例，盐酸的浓度通常以摩尔浓度（M）或质量浓度（%）来表示，假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。
- 取适量的去离子水，加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸质量，并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。
2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液，以得到所需的浓度。
稀释液的浓度计算方法非常简单，只需要使用C1V1=C2V2的公式即可，其中C1为原液的浓度，V1为原液的体积，C2为稀释液的浓度，V2为稀释液的体积。
以盐酸溶液为例，如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据C1V1=C2V2的公式，计算出需要的盐酸的体积。
- 取适量的去离子水，加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸体积，并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。
3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液，常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。
缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量，并按照一定的比例混合制备。
以Tris缓冲液为例，Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间，如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液，则按照下面的步骤进行：- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。
常用试剂配制方法
1、裴林甲液：配制：称取五水合硫酸铜69.278g 加蒸馏水稀释到1000ml ，摇匀，即得。
标定：吸取甲液5.0ml 于250ml 碘量瓶中，加30%醋酸溶液2ml 和1.5g 碘化钾固体，充分混匀并溶解后，加盖避光放置5分钟，用装有蒸馏水的洗瓶将塞子和瓶内壁冲洗干净，之后，先用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色，加2ml0.5%淀粉指示剂，继续滴定至兰色消失出现乳白色沉淀即为终点，同时用5ml 蒸馏水做空白，裴林甲液的比值F 按下式计算：01748.05006357.0V ⨯⨯-=）（空白样品V F 0.5%淀粉指示剂配制：称取0.5000g 淀粉，放入烧杯中，先调成糊状，加入到热的沸水中，并沸腾几分钟，至溶液呈现透明，冷却至室温。
30%醋酸溶液：30ml 冰乙酸用蒸馏水稀释并定容至100ml 。
2、水中总磷的测定：钼酸铵溶液：称量6.0g 分析纯钼酸铵溶于500ml 水中，加入0.2g 酒石酸锑钾和83ml 分析纯浓硫酸，冷却后，稀释至1L 。
充分混匀后，存于棕色试剂瓶中，贮存期6个月。
硫酸溶液（C=0.5mol/L ）：取30ml 分析纯浓硫酸缓缓加入适量蒸馏水中，冷却至室温，加蒸馏水稀释至1000ml ，摇匀。
24g/L 过硫酸铵溶液：称取24.0g 过硫酸铵固体，用蒸馏水溶解并稀释定容至1000ml ，充分混匀即可。
17.6g/L 抗坏血酸溶液：称取17.6g 抗坏血酸溶于适量蒸馏水中，加0.2g 乙二胺四乙酸二钠和8ml 甲酸，充分溶解和混匀后，用蒸馏水稀释并定容至1L ，混匀。
贮存于棕色瓶中，有效期为15天。
3、NaOH 标液（0.5mol/L ，0.1mol/L ）配制：称取20.00g（4.00g）分析纯氢氧化钠固体，用蒸馏水溶解，并稀释定容至1000ml，混匀放置。
标定：取在105℃下烘干至恒重的邻苯二甲酸氢钾2g（0.4g），精密称定，加新沸过的冷水50ml，完全溶解，加2滴酚酞指示剂，用配好的该0.5mol/L（或0.1mol/L）NaOH标准溶液滴定至溶液显粉红色，其中每1ml的NaOH标液相当于102.1mg（或20.42mg）的邻苯二甲酸氢钾。
常用试剂配方
常用试剂配方常用试剂储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。
避免光照。
室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。
包装必须密封，切勿受潮。
应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。
操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。
远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。
使用后应留意剩余量，注意及时订购。
8M Urea（尿素）组份浓度：8mol/L Urea（MW：60.07）配制量： 1L配制方法： 1.称取尿素480g，置于1L的蓝盖瓶中。
2. 加水至1L，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3. 于棕色瓶中，4℃保存。
4.使用前，先在常温放置，使析出的尿素溶解。
0.25％AgNO（硝酸银）3（MW：169.87）组份浓度：0.25％（W/V）AgNO3配制量： 500ml配制方法: 1.准确称取硝酸银1.25g。
2.加入500ml的去离子水，充分溶解。
3.于棕色瓶中,常温保存。
0.5M EDTA（PH 8.0）组分浓度: 0.5 mol/L EDTA（MW：372.24）配制量: 500mlEDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。
配制方法: 1．称取93g Na22．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。
4．高温高压灭菌后，室温保存半年。
5M NaCl组份浓度： 5mol/L NaCl (MW：58.5)配制量： 1L配制方法： 1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。
2.用去离子水溶解并稀释至1L。
3.高温高压灭菌后，常温保存。
50% 甘油组分浓度： 50%(V/V) glycerol配制量： 100ml配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中：100% glycerol 50ml2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。
20几种常用试剂配置方法
20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作，准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法，帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一，通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备，根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂，并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积，然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量，然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式，按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等，并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积，并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积，然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式，计算所需溶液的质量、体积，并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液，并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例，计算所需试剂的质量或体积，并进行配制。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将结晶硫酸铜溶于500mL水中，加硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸 10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法氨试液取浓氨水200ml，置1000ml量杯中，加水稀释至500ml。
碱性酒石酸铜试液：配600ml。
（1）取硫酸铜结晶20.8g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml试剂瓶中备用。
（可长期保存）（2）取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml 试剂瓶中备用。
（需新鲜配制）临用前将两液等量混合，即得。
0.2％酚酞指示液：配500ml。
（可长期保存）粗称酚酞1g，置500ml量杯中，加95％乙醇500ml，使溶解，即得。
0.02mol/l氢氧化钠滴定液：配500ml。
（可长期保存）取氢氧化钠0.4g，置500ml量杯中，加水使溶解成500ml。
稀硝酸：配4000ml。
（可长期保存）取硝酸（16mol/L）210ml，置3000ml烧杯中，加水稀释至2000ml。
配2次。
标准氯化钠溶液（10ug/ml）：配1000ml。
（可长期保存）精称氯化钠16.5mg，置100ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。
（100μg/ml）临用前，精密量取储备液100.0mL，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
8．硝酸银试液：配500ml。
（需新鲜配制）取硝酸银8.75g，置500ml量杯中，加水溶解至500ml。
9．稀盐酸：配3000ml。
（可长期保存）取盐酸（12.5mol/L）702ml，置5000ml烧杯中，加水稀释至3000ml。
10．标准硫酸钾溶液（100ug SO4-2/ml）：配500ml。
（可长期保存）精称硫酸钾90.5mg，置100ml烧杯中，加水溶解后，转移至500ml量瓶中。
11．25%氯化钡：配3000ml。
（可长期保存，第二年如混浊，过滤）粗称BaCl2750g，置5000ml烧杯中，加水超声溶解并稀释至3000ml（澄清）。
12．标准铅溶液（10ugPb/ml）：配600ml 。
化验室常用试剂
化验室常用试剂的配制1、饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾加10ml蒸馏水溶解，必要时适当加热促使其溶解，冷却后贮藏于棕色试剂瓶中。
2、三氯甲烷-冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷加入60ml冰乙酸混匀。
3、硫代硫酸钠标准滴定溶液[C(Na2S2O3)=0.1mol/L]：3.1 配制称取26g Na2S2O·5H2O或16g Na2S2O3，加2g Na2CO3 混溶于1000ml蒸馏水中，缓缓煮沸10min，冷却，放置两周后过滤。
3.2 标定称取0.18g 于120℃±2℃干燥至恒重的工作基准试剂重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶解于25ml水，加2g 碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min，加150ml 水（15-20℃），用配制好的Na2S2O3溶液滴定，近终点时加2ml 淀粉指示液（10g/L），继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。
同时做空白试验。
3.3 浓度计算硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度[C(Na2S2O3)]，数值以mol/L表示，按下式（1）计算：（1）式中：m---重铬酸钾的质量的标准数值，单位为克（g）；V---硫代硫酸钠溶液的体积的数值，单位为毫升（mL）；1---空白试验硫代硫酸钠溶液的体积的数值，单位为毫升（mL）；V2M---重铬酸钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔（g/mol）[M(1/6K2CrO7)=49.031]。
4、乙醚乙醇混合液：按乙醚乙醇2:1混合，用氢氧化钾（3g/L）中和至酚酞指示液指示液呈中性。
5、硝酸银标准滴定溶液（0.1mol/L）：5.1 配制称取8.5g AgNo3 溶于 500 mL 不含Cl-的蒸馏水中，贮藏于带玻璃塞的棕色试剂瓶中，摇匀，置于暗处，待标定。
5.2 标定准确称取基准试剂NaCl 0.12-0.15g，放于锥形瓶中，加50mL不含Cl-的蒸馏水溶解，加K2CrO4指示液1mL，在充分摇动下，用配好的AgNo3溶液滴定至溶液呈微红色即为终点。
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常用试剂的配制
1．无Ca2+、Mg2+Hanks液
NaCl 4.5g KCl 0.2g
NaHCO
3
0.175g
Na
2HPO
4
·12H
2
O 0.076g
KH
2PO
4
0.03g
葡萄糖 0.5g
0.4%酚红 2.5ml
将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO
3调整 pH 值至7.4，4℃冰箱保存备用。
2．甲基红试剂
（1）成份
甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml
95％乙醇 300ml
（2）用途：测定甲基红反应。
3．Hanks液（原液）
原液甲： NaCl 160g
KCl 8g
MgSO
4·7H
2
O 2g
MgCl
2·6H
2
O 2g
上述试剂加入800ml双蒸水。
溶解。
CaCl
2
2.8g溶于100ml双蒸水
上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。
原液乙： Na
2NPO
4
·12H
2
O 3.04g
KH
2PO
4
1.2g
葡萄糖 20g
加入800ml双蒸水，溶解。
0.4%酚红溶液100ml
上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。
使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4℃冰箱保存，使用前用NaHCO
3
调整PH值。
4．0.4%酚红溶液
称取0.4g酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨，直到所有的颗粒
几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。
5．pH7.2 Tris-NH
4
CI溶液(红细胞崩解液）
Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g
NH
4
Cl（氯化氨) 3.735g
加双蒸水至500ml，用浓HCl调pH=7.2，10磅15min灭菌后放4℃保存。
6．0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液
巴比妥 1.84g
加蒸馏水 200ml 加热溶解
巴比妥纳 10.3g
叠氮纳 0.2g
加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
7．磷酸盐缓冲液(PB)
A 液：为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH
2PO
4
·H
2
O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最
后补加蒸馏水至 1000ml 。
B 液：为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na
2HPO
4
.7H
2
O 3.6g（或 Na
2
HPO
4
·12H
2
O
71.6g, 或Na
2HPO
4
· 2H
2
O 35.6g ）, 加蒸馏水溶解，最后加水至 1000ml。
若再加
蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。
8．0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液（BBS）
硼酸钠（Na
2B
4
O
7
.10H
2
O） 0.46g
硼酸（H
2BO
3
） 0.51g
加蒸馏水至100ml 溶解。
9．PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法一：
0.2mol/L Na
2HPO
4
（ Na
2
HPO
4
·12H
2
O 71.6g加蒸馏水至1000ml）
0.2mol/L NaH
2PO
4
（NaH
2
PO
4
·2H
2
O 35.6g加蒸馏水至1000ml）
取0.2mol/L Na
2HPO
4
81.0ml 加0.2mol/L NaH
2
PO
4
19ml,再加1900mlH
2
O和
17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。
PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。
配制方法二：
甲液（0.1mol/LKH
2PO
4
溶液）：KH
2
PO
4
13.608g，加蒸馏水至1000ml。
乙液（0.1mol/L Na
2HPO
4
溶液）：Na
2
HPO
4
35.814g，加蒸馏水至1000ml。
取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。
再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。
10．0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液
Na
2CO
3
1.59g
NaHCO
3
2.93g
加蒸馏水至1000ml。
ELISA实验包被用。
11．0.01mol/L pH7.4 PBS内含2%BSA（牛血清白蛋白）
取BSA2ml加0.01mol/L pH7.4PBS至100ml即可。
ELISA实验封闭用。
12．PH5.0磷酸-柠檬酸缓冲液。
0.2mol/L Na
2PO
4
(28.4g/L) 25.7ml
0.1mol/L柠檬酸(19.2g/L) 24.5ml
加蒸馏水至100ml即为pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液。
13．底物溶液
pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液加入邻苯二胺1mg/ml，再加入30%的H
2O
2
(1μl/ml)溶
解后即为ELISA底物液，临用前配制，避光保存。
14．2mol/L硫酸
浓H
2SO
4
（36N）取 1ml36N的H
2
SO
4
缓缓加入18 ml蒸馏水内即为2mol/L，用于ELISA实
验终止反应。
15．清洁液的配制
清洁液分高、中、低液三种。
低浓度清洁液
重铬酸钾 100g
水 750ml
硫酸 250ml
中浓度清洁液
重铬酸钾 60g
水 300ml
硫酸 460ml
高浓度清洁液
重铬酸钾 100g
水 200ml
硫酸 800ml
先将重铬酸钾倒入自来水中，然后加入浓硫酸，边加硫酸边用玻璃棒搅拌。
由于加入浓硫酸后产生高热，故加酸时要慢，溶器应用耐酸耐高温塑料或陶器制品。
配制好的清洁液，应存于有盖的玻璃溶器内。
需要浸泡的玻璃器皿一定要干燥，如
果清洁液经过长期使用已呈黑色，表明已经失效，不宜再用。
由于清洁液有强腐蚀性，故操作时要十分注意。
16．PH6.4 l/l5mol/ml磷酸盐缓冲盐水（PBS）：
（1）l/l5mol/ml 磷酸二氢钾溶液
KH
2PO
4
9.04g
蒸馏水加至1000ml （2）l/l5mol/ml 磷酸氢二钠溶液
Na
2HPO
4
·2H
2
O 11.87g
（或 Na
2HPO
4
·l2H
2
O 23.86g
蒸馏水加至1000ml （3）PH6.4 l/l5mol/ml 磷酸盐缓冲盐水（PBS）
l/l5mol/ml磷酸二氢钾溶液 73ml
l/l5mol/ml磷酸氢二钠溶液 27ml
NaCl 0.5g
混匀溶解即可。
17．柯氏试剂(靛基质试剂)
（1）成份
纯戊醇 150ml
浓盐酸 50ml
对二甲基氨基苯甲醛 10g
（2）制法：将对二甲基氨基苯甲醛加入纯戊醇内，使其溶解。
将浓盐酸一滴滴慢慢加入，边加边摇，不能加得太快，以致温度升高溶液颜色变深。
（3）用途：测定细菌能否产生吲哚。