关于生物化学常用试剂配制
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后参加10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A 液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序参加，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品，最后补足水到总量。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。
（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。
（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。
乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份，-20℃贮存。
（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。
注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。
（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。
（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。
生物学实验室常用试剂的配制方法
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA 的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
常用化学试剂的配制方法
常用试剂配制的具体操作1.HCL（1＋1）：在1000ml棕色瓶或白色瓶中，先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水，然后再缓慢加入盐酸，摇匀，密封备用。
（打开盐酸时，需要用纸，盖在瓶盖上再打开。
因为里面可能存在压力，若是直接打开，可能会因为压力过大，造成液体冲出，伤害到眼睛）也可以放置少量在白色滴瓶中待用。
2.抗坏血酸（5%）：用一次性塑料杯，称取抗坏血酸1g，硫脲0.1g，加入20ml纯净水，在超声器中用玻璃棒搅匀，再倒入30ml小棕色瓶中保存。
（在实验前需要看颜色变化，如果颜色变深，则代表试剂过期）。
3.盐酸—硼酸混合酸：用一次性塑料杯称取硼酸25g，500ml量杯分2次量取900ml纯净水，清洗塑料杯，并倒入1000ml烧杯中，再加入HCL（1＋1）70ml，放置在超声器中，用玻璃棒搅匀溶解，再倒入1000ml的棕色瓶中保存（也可以用500ml白色塑料瓶，插10ml刻度移液管）4.钼酸钠（6%）：用一次性塑料杯称取钼酸钠30g，500ml量杯量取500ml纯净水，边清洗塑料杯边倒入500ml烧杯中，然后放置在超声器中，用玻璃棒搅匀，再倒入至500ml白色塑料瓶中，密封保存。
（插5ml刻度移液管）5.H₂O₂（1＋20）：全名为过氧化氢或者双氧水。
用1ml刻度移液管，吸取1ml过氧化氢至一次性塑料杯中，20ml量杯量取20ml纯净水，倒入塑料杯中，摇匀，再倒入至30ml的小棕色瓶中。
（容易失效，所以做溶液和检测时都需要速度快）6.三乙醇胺（TEA）（1＋1）:在1000ml棕色瓶中，先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水，然后再缓慢倒入500ml三乙醇胺，摇匀备用。
（也可以用白色塑料瓶，加黑色外袋保存，插5ml刻度移液管）7.H2SO4（1＋1）：带橡胶手套及口罩。
用500ml量杯先量取300ml纯净水，在1000ml烧杯内，先倒入300ml纯净水。
用脸盆装半脸盆自来水，将烧杯先放入脸盆中，再用500ml量杯量取300ml浓硫酸，缓缓倒入浓硫酸，并用玻璃棒不停搅拌。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中，加0.5mL硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
0.1g苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加2.75mL浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋0.5g洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
生物类经常用的一些化学试剂的配制方法
生物类经常用的一些化学试剂的配制方法l．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL 培养基中加入lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后加入10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反应试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
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常规试剂配制和测定方法一、溶液的配制1. Mandels营养盐溶液（1000 mL）名称重量（g）硫酸铵（(NH4)2SO4）14磷酸二氢钾（KH2PO4）20尿素（H2NCONH2） 3硫酸镁（MgSO4·7H2O） 3氯化钙（CaCl2·2H2O） 4注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
2. Mandels微量元素溶液（1000 mL）名称重量（g）氯化钴（CoCl2·6H2O）硫酸锌（ZnSO4·7H2O）硫酸锰（MnSO4·H2O）硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
3. DNS试剂的配制（1000 mL）（1）取：3,5-二硝基水杨酸（C7H4N2O7）7.5 g氢氧化钠（NaOH ）14.0 g充分溶解于1000 mL 水中（水预先煮沸10 min）（2）加入：酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）216.0 g苯酚（在50 ℃水浴中融化）mL偏重亚硫酸钠（Na2S2O5） 6.0 g（3）充分溶解后盛于棕色瓶中，放置5天后便可使用，平时盛一小瓶(250 mL)使用，要放在冰箱中冷藏。
此溶液每月配制一次。
注意：倒入瓶中时要尽量装满！！4. 考马斯亮蓝G-250的配制（1000 mL）称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中，加入100 mL 85 %磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL ，滤纸过滤。
最终试剂中含%（w/v）考马斯亮蓝G-250，%（w/v）乙醇，%（w/v）磷酸。
5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制（1000 mL）名称分子量Mn 重量(g)柠檬酸（C6H8O7·H2O）210 210NaOH 40准确称取柠檬酸210 g，溶于约750 mL煮沸（10 min）蒸馏水中，待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g，完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中，冷却后将容量瓶定容到1000 mL（原始）。
（检验方法：取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍，测定稀释液的pH值，pH值应为）6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定（1）标准糖溶液的配制准确称取2.000 g葡萄糖/木糖（葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h），蒸馏水溶解，全部转移至1 L容量瓶内，摇匀，配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。
取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶，蒸馏水定容，摇匀。
即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液。
取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶，每瓶再加入mL柠檬酸缓冲液，蒸馏水定容，摇匀。
即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖。
（2）标准方程的测定：①葡萄糖/木糖标准方程的测定取10支25mL刻度管，10支1mL刻度吸管，分别加入0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液1 mL，DNS溶液3 mL。
100 ℃煮沸5 min，水浴冷却后定容至25 mL，摇匀。
以蒸馏水作为空白对照，550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标，C为横坐标，制定标准曲线。
（7230型分光光度计输出方程为：A = MC + N，723型分光光度计输出方程为：C = KA + B）②酶解木糖标准方程测定（测定木聚糖酶活力）取6支25 mL刻度管，6支2 mL刻度吸管，分别加入1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解木糖标准溶液mL，DNS溶液3 mL，100 ℃煮沸5 min，水浴冷却后定容至25 mL，摇匀。
以蒸馏水作为空白对照，550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标，C为横坐标，制定标准曲线。
（7230型分光光度计输出方程为：A = MC + N，723型分光光度计输出方程为：C = KA + B）③酶解葡萄糖标准方程测定（测定滤纸酶活力、CMC酶活力）取6支小试管，6支2 mL刻度吸管，分别加入1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖标准溶液mL，DNS溶液3 mL，100 ℃煮沸5 min，水浴冷却后，量筒定容至50 mL（定容至25 mL，测定CMC酶活力），摇匀。
以蒸馏水作为空白对照，550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标，C为横坐标，制定标准曲线。
（7230型分光光度计输出方程为：A = MC + N，723型分光光度计输出方程为：C = KA + B）7. 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制注：Na2HPO4，Mr =；mol/L溶液为28.40 g/LNa2HPO4·2H2O，Mr =；mol/L溶液为35.61 g/LC6H8O7·H2O，Mr =；mol/L溶液为21.01 g/L二、酶活力的测定1. 滤纸酶活力的测定—纤维素酶的总体酶活力采用国际理论和应用化学协会（IUPAC）推荐的标准方法测定[Ghose,., et al,Pure & .,1987,59,257-268]，一个滤纸酶活力的国际单位（FPIU）等于在标准反应条件下每分钟生成1 μmol葡萄糖量的酶量。
测定方法如下：取7支试管在其中1#-5#支小试管中加入50 mg卷成筒状的滤纸条（1 × 6cm），适当稀释酶液，取7支试管按下表操作。
（5#有底物无酶，6#为有酶无底物空白对照）项目1#2#3#4#5#6#7#稀释酶液（mL）0 酶解葡萄糖标样0.05 M柠檬酸缓冲液（mL） 1将上述试管盖上塑料布，用橡皮筋扎紧后置于恒温水浴器中，保持在振幅80和温度50 ℃下保温60 min后立即取出加入3 mL DNS试剂，在沸水中反应5 min，冷却后加水至50 mL并充分摇匀，待滤纸完全沉淀后，取上层清液于550 nm波长下测定吸光度A值。
反应生成的葡萄糖的量根据葡萄糖标准曲线求得。
以、、、酶量所生成葡萄糖的毫克数为横坐标，酶量的对数为纵坐标作图，从图中找出生成2 mg葡萄糖的酶量，按下式计算样品的滤纸酶活力（FPA）：2 mg葡萄糖滤纸酶活力=60min×(mg/μmol)×生成2mg葡萄糖的酶量（mL）一个滤纸酶活力单位定义为每分钟生成1μmol葡萄糖所需的酶量，单位：IU/mL。
备注：当加入mL酶液（指酶液没有被稀释的时候！）仍无法生成2 mg葡萄糖时，按下式计算：滤纸酶活= ×（葡萄糖mg数）2.β-葡萄糖苷酶活力的测定方法一：葡萄糖氧化酶测定法按国际标准方法测定[Ghose,.,etal,Pure & .,1987,59,257-268]。
一个β-葡萄糖苷酶活力国际单位(IU/mL)等于标准条件下每分钟转化1 μmol底物即生成2 μmol葡萄糖的酶量来表示。
预先用0.05 M的柠檬酸缓冲液配制15 mmol/L的纤维二糖溶液（0.513 g纤维二糖/100 mL0.05 M的柠檬酸缓冲液，现配现用）（1）每个样品应做三个不同酶量估计β-葡萄糖苷酶活力（IU/mL）<取酶液量（mL）（2）加料：试管中加入酶液、缓冲液和纤维二糖溶液如下：酶液量（mL）0.05 M柠檬酸缓冲液（mL）纤维二糖溶液（mL）样品适量1－酶液 1酶液空白 1 1 0纤维二糖空白0 1 1每个试管共2mL，用塑料纸包扎好。
注意：纤维二糖溶液必须用0.05M柠檬酸配制。
（3）酶解反应：试管置于50 ℃水浴中，保温30分钟，取出，沸水中放置5分钟使酶失活，冷却至室温。
（4）加显色剂（葡萄糖氧化酶测定试剂）：取试管中冷却液30 μL，加入显色剂mL，混匀；同时做一个葡萄糖标样：取1 g/L葡萄糖标样30 μL，加显色剂mL，混匀；置于37 ℃水浴中，保温15分钟，取出。
（5） 测吸光度：505 nm ，用蒸馏水调零，测各试管溶液吸光度A 值。
1g/L 葡萄糖标样的吸光度为左右。
（6） 计算产生的葡萄糖mg 数：样 品 吸光度测得 酶 空 白 所含葡萄糖 = 2 × （mg ） 纤维二糖空白 1g/L 葡萄糖标样吸光度 样品实际产生的葡萄糖 = [测得葡萄糖mg]－[纤维二糖空白葡萄糖mg]－[酶空白葡萄糖mg] × [酶液量mL] （mg ）注：纤维二糖空白所产生的响应值，当纤维二糖溶液为新鲜配制时，一般很低。
（7） 作图：以log(酶液量mL)为纵坐标，实际产生的葡萄糖mg 为横坐标作图，求出生成1 mg 葡萄糖时对应的酶液量mL 。
（8） 计算β-葡萄糖苷酶活力：β-葡萄糖苷酶活力 = （IU/mL ）生成1mg 葡萄糖对应的酶液量（mL ）注：当加入1mL 酶液仍不能生成1mg 葡萄糖时，β-葡萄糖苷酶活力 = ×（葡萄糖mg 数）☆ 补充：葡萄糖含量测定采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶终点比色法测定。
葡萄糖测定试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司生产，内含R 1（缓冲液）和R 2（酶试剂），使用时将R 1和R 2等量混合。
葡萄糖经葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将4-氨基安替比林与苯酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
测定该有机化合物的吸光度便能计算出葡萄糖的含量。
测定方法如下：在测定管中加入30 μL 待测试样的稀释液（空白管、标准管分别以蒸馏水及1g/L 的葡萄糖标准溶液代替），每一试管中加入由R 1和R 2等量混合的酶酚混合液，将各试管分别摇匀，置于37℃水浴中保温15min ，冷却至室温后，在7230分光光度计上于505 nm 下测定吸光度A 值，用空白管校正吸光度到零点，葡萄糖含量按下式计算：葡萄糖含量（g/L ）= × 稀释倍数测定管吸光度 标准管吸光度方法二：采用pNPG（对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷）试剂测定（1）试剂的配制①50 mmol/L , pH 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制（200 mL）方法：mol/L柠檬酸mL + mol/L磷酸氢二钠mL②1 mol/L Na2CO3溶液（250 mL）称取：26.5 g Na2CO3溶解后定容至250 mL③ 5 mmol/L pNPG（分子量：）溶液的配制（100 mL）称取0.1506 g pNPG，用50mmol/L，柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液溶解后定容至100 mL。