肌红蛋白(Myoglobin)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求lztk
肌钙蛋白和肌红蛋白测定试剂盒介绍(精)
允许的生物学变异
肌红蛋白： <5.6% CK-MB质量： <9.3% cTn： <10%
标准化问题
标准化问题
肌红蛋白、CK-MB质量、cTn均尚未标准化
讨论
cTnI测定标准化问题
结构稳定性 、 释放形式 蛋白水解、磷酸化 、氧化还原 、抗原决定簇 外周血中存在形式 90% 为I-C复合物。 测定校准品 不同方法之间无可比性
96.0
ROC 曲线
TNI ROC Curve
100 96
SENSITIVITY
92 88 84 80 0.0 4.0 8.0 12.0 16.0 20.0 1-SPCIFICITY
注意事项
标本处理
用血清或血浆标本（肝素抗凝），在4小时内 测定。标本于使用前离心，4000转/分，15分 钟。2~8℃贮存的标本应在24小时内测定，如 标本存放超过24小时，应于—20℃以下冻存， 融化后必须离心，避免反复冻 融。
线性范围
0.14 0.12 0.10
y = -0.0002 x 2 + 0.0091 x + 0.0006 R 2 = 1.0000
È â ¶ ü ¹ Î
0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 0 5 10 15 20 25 30
¨È Å ¶
图1 cTnI浓度与吸光度线性相关图
方法学特性 （cTnI）
1.有剧烈而持久的胸痛史： 2.明确的心电图改变，包括ST段抬高和异常 的Q波出现： 3.系列酶的水平的改变，早期浓度升高，随 后恢复正常浓度。
技术背景
随着医学科学研究的进展，心肌损伤的血液生 化标志物已从早先的以酶活性为主的检测发展 到目前的以蛋白质质量浓度为主的检测，包括 多种标志物 。 AST、LD及其同工酶以及β-羟丁酸脱氢酶等以 酶活性为主的检测项目在诊断心脏疾病时已逐 渐少用以至不再应用。
血清肌红蛋白光激化学发光免疫测定法的建立
四 、干扰试验 在 Mb浓度为 155 ng /m l的新鲜混合血清样
品中分别加入高浓度的血红蛋白 (Hb) 、总胆红素 ( TB il) 、三酰甘油 ( TG) ,获得干扰样品 ,用同样的 方法加入样品稀释液作为对照样品 ,每个样品按 照随机次序测定 10次 ,取干扰样品和对照样品各 自测定值的 x 计算干扰率 。 Hb 浓度为 2. 6 g /L 时 ,干扰率为 - 9. 61% ; TB il浓度为 342 μmol/L 时 ,干扰率为 - 4. 56% ; TG浓度为 11. 3 mmol/L 时 ,干扰率为 7. 47%。按照文献 [ 5 ]的标准 ,认为 干扰率 > 10%才有临床意义 。因此在溶血 (Hb < 2. 6 g /L ) 、黄疸 ( TB il < 342 μmol/L ) 、脂血 ( TG < 11. 3 mmol/L ) 时 , 对本检测方法的干扰无临床 意义 。
检验医学 2006年第 21卷第 1期 Laboratory Medicine 2006, Vol 21. No 1. 文章编号 : 100122087 (2006) 0120055203 中图分类号 : R446. 1 文献标识码 : A
·55·
血清肌红蛋白光激化学发光免疫测定法的建立
马宏伟 1 , 赵卫国 2 , 潘柏申 1 (1. 复旦大学附属中山医院检验科 ,上海 200032; 2. 上海交通大学医学院医学检验重点实验室 ,上海 200023)
我们采用光激化学发光免疫测定技术 ( light induced chem ilum inescent immunoassay, L IC I)建立 一种定量检测血清 M b的方法 ,并对检测性能进
行了初步评价 。
肌红蛋白(Myo)测定试剂(荧光免疫层析法)产品技术要求万孚
肌红蛋白（Myo）测定试剂（荧光免疫层析法）
性能指标
1 外观检查
外观应平整，材料附着应牢固，各组份应齐全，卡固定紧密。
2 物理检查
膜条宽应不小于2.0mm；液体移行速度应不低于10mm/min。
3 线性范围
取同一批号的试剂分别对五个浓度的肌红蛋白参考品进行检测，其检测范围为2.0ng/mL～400.0ng/mL，每份参考品重复检测3次，计算相关系数r，其中r值应≥0.9900。
4 精密度
4.1 批内精密度
随机抽取同一批号的试剂10份，分别对同一浓度的肌红蛋白参考品进行检测，其变异系数CV（%）值应≤15%。
4.2 批间精密度
随机抽取连续三个批号的试剂，每个批号取3份分别对同一浓度的肌红蛋白参考品进行检测，其变异系数CV（%）值应≤15%。
5 准确度
用同一批号试剂分别测定三个水平浓度的肌红蛋白参考品，计算样本测定结果均值和相对偏差，其中相对偏差（Bias%）应在±15%内。
6 最低检出限
取同一批号的试剂10份，对配制参考品基质进行检测，计算样本测定结果均值X和标准偏差SD，其中（X+2SD）≤2.0ng/mL。
7 分析特异性
选择同一浓度的肌红蛋白参考品分别加入胆固醇、甘油三酯、胆红素，使干扰物最终浓度胆固醇60mg/mL、甘油三酯40mg/mL、胆红素2mg/mL，各干扰样本重复检测3次，计算样本检测结果的均值和相对偏差，其中相对偏差（Bias%）应在±15%内。
肌红蛋白(Myoglobin)作业指导书
检验科免疫室分析项目作业指导书第页，共页版本：A/0生效日期：2008-02-01 35重复性测定采用的是美国临床化学实验室标准委员会修订稿EP5—A标准方法进行评估，使用了Elecsys试剂及人血清池、质控进行测定:连续测定10天，每天测定6次（n＝60次）；E170的批内重复性共测定了21次。
结果如下:分析灵敏度（最低检测限)：< 21ng/ml，分析灵敏度代表了能与零区别的最低的肌红蛋白值10.干扰因素该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl)、溶血(血红蛋白〈1.4g/dl)、脂血（脂质〈2200mg/dl）和生物素〈50ng/ml 干扰。
接受高剂量生物素（〉5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8 小时后才能采血。
不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。
50 种常用药物经试验对本测定无干扰作用。
肌红蛋白浓度高到30，000ng/ml 也不出现钩状效应.接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。
肌红蛋白测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。
11.临床意义肌红蛋白是一种细胞浆蛋白质，存在于心脏和骨骼的横纹肌中，具有转运氧气和贮存氧气的功能，分子量17.8kD，由于分子量较小，当肌细胞受损时,肌红蛋白很快被释放进入血循环中。
检测血清肌红蛋白是诊断急性心肌梗死，早期再度梗死以及观察溶栓治疗后成功再灌注的重要指标。
症状发生后约两小时，肌红蛋白水平即可升高，因此肌红蛋白被认为是心肌梗死很早期的标志物.梗死发生后4-12 小时，肌红蛋白的血浓度达到最高值.24 小时后恢复到正常值水平.肌红蛋白升高也可见于骨骼肌损伤和肾功能极度衰竭的病人。
Elecsys 肌红蛋白采用双抗夹心法原理和两种不同的抗肌红蛋白单克隆抗体。
12.参考文献。
心肌标志物复合定值质控品产品技术要求mairui
2.性能指标
2.1.外观和性状
2.1.1.颜色性状
质控品复融前外观应呈现粉末块状固体，不起泡，不塌陷，复融后应为清澈透明液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.1.2.包装
分装瓶应完整无泄漏，盒贴、瓶贴、标签标识、说明书、参考值表应完整、清晰牢固。
2.2.测量准确度
2.2.1.质控参考值表
质控品应可提供一份参考值表，包含适用型号的迈瑞化学发光免疫分析系统
的检测项目参考值及参考范围。
2.2.2.赋值准确性
经校准的迈瑞全自动化学发光免疫分析仪检测质控品所包含的检测项目，结果应在参考范围内（不同批次的质控品参考范围参见参考值表）。
2.3.均一性
2.3.1.瓶内均一性
质控品瓶内均一性应满足变异系数CV≤8.0%。
2.3.2.瓶间均一性
质控品瓶间均一性应满足变异系数CV≤5.0%。
2.4.生物安全性
使用国家权威管理机构认可的、且不低于我国法定用于血源筛查体外诊断试剂
灵敏度的检测试剂，对质控品中乙型肝炎病毒表面抗原、人类免疫缺陷病毒抗体（HIV-I型和HIV-II型）、丙型肝炎病毒抗体、梅毒螺旋体抗体的检测应为阴性。
1。
肌钙蛋白和肌红蛋白测定试剂盒介绍
胶乳增强免疫比浊法原理
方法学特性 （cTnI）
该试剂灵敏度为0.3ng/ml; 线性范围为25ng/ml; 批内及批间精密度均小于10%； 以99%单侧界值1.7 ng/ml，敏感性86%，
特异性99%，阳性结果预示值97.7%， 临床符合率96%。
线性范围
校准曲线：
采用速率法多点校准，多参数曲线方程 （如logit/log）拟合。线性范围达25ng / ml。校准曲线至少稳定30天，测试条件 变化时应重新校准，以免试验结果出现 偏差。
超敏CRP对心梗有一定预报价值。
缺点
特异性不高
晚期标志物（发病后6-9h血中增高并持续数天，
对心肌损伤的敏感性和特异性都较高）
心肌肌钙蛋白（cTn）
有cTnI和cTnT两种亚型。因cTn灵敏度 高、特异性强、发病后持续时间长，是 目前诊断心肌损伤较好的确定标志物。
新修订MI的诊断标准
ESC和ACC于2000年联合发表文件，重新修订 MI的诊断标准，最重要的是将检测到心肌损伤 标志物（主要是cTn）的异常变化作为诊断MI 急性发病的必要条件。
临床评价
不同分布下的诊断界值
单侧上限（%） 86.5 95.0 97.5
99.0 99.5
临界值 ( ng/ml) 0.80 1.10 1.36 1.68 1.89
不同诊断界值的临床诊断效率
50例确诊心梗病人和149例对照标本
临界值( ng/ml) 特 异 性 （ % ） 灵 敏 性 （ % ） 符 合 率 （ % ）
方法学特性 （Myoglobin）
试剂灵敏度为1.0 ng/ml; 线性范围为500 ng/ml; 批内及批间精密度小于5.6 %； 95%临界值 为57 ng/ml时，敏感性96.1%，
心肌肌钙蛋白I肌红蛋白肌酸激酶同工酶检测试剂盒胶体金
心肌肌钙蛋白I/肌红蛋白/肌酸激酶同工酶检测试剂盒（胶体金免疫层析法）产品技术审评规范（征求意见稿）本审评规范旨在指导注册申请人对心肌肌钙蛋白I/肌红蛋白/肌酸激酶同工酶（以下简称“心梗三项”）检测试剂盒（胶体金免疫层析法）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。
本审评规范是对心梗三项检测试剂盒（胶体金免疫层析法）的一般要求，申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，并依据产品特性确定其中的具体内容是否适用。
本规范是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本规范。
本规范是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围心梗三项检测试剂盒（胶体金免疫层析法）是指利用胶体金免疫层析法对人血清、血浆、全血样本的心梗三项指标（包括心肌肌钙蛋白I、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶）进行体外定性分析的试剂盒，包括此三项指标的独立检测或任意组合产品。
从方法学考虑，本规范是指利用基于抗原抗体反应原理的胶体金免疫层析法对心梗三项进行检测的体外诊断试剂，不适用于定量或半定量产品。
依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）（以下简称《办法》）、《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管[2013]242号），心梗三项检测试剂盒（胶体金免疫层析法）管理类别为Ⅱ类，分类代号为6840。
二、注册申报资料要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《办法》和《国家食品药品监督管理总局关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号）的相关要求，下面着重介绍与心梗三项检测试剂盒预期用途有关的临床背景情况。
肌红蛋白测定试剂盒说明书
肌红蛋白（MYO）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）说明书【产品名称】通用名称：肌红蛋白（MYO）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）英文名称：Myoglobin（CLIA）【包装规格】2×30 人份/盒、2×50 人份/盒、2×100 人份/盒【预期用途】用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌红蛋白的含量。
肌红蛋白（MYO）分子量为17.8 kD，由一个多肽链和一个亚铁血红素辅基组成，由人体骨骼肌和心肌细胞合成并贮存，不存在于其它细胞。
实验证明由骨骼肌和心肌来源的两种肌红蛋白无免疫学上的差异。
肌红蛋白的主要生理功能为携带氧气供细胞呼吸。
肌红蛋白是检测急性心肌梗死(AMI) 的早期指标，具有极高的灵敏度但是特异性较差，在AMI 早期心肌细胞受损，由于MYO 的分子量小，可以很快从破损的细胞中释放出来，在AMI 发病1～3 小时后血中浓度迅速上升，6～7 小时达峰值，12 小时内几乎所有AMI 患者MYO 都有升高，升高幅度大于各心肌酶，因此可以作为AMI 的早期诊断标志物。
由于MYO 也存在于骨骼肌中，而且仅从肾脏清除，所以急性肌损伤、急性或慢性肾衰竭、严重的充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起的肌病患者、肌内注射、剧烈的锻炼、某种毒素和药物摄入后，MYO 都会升高。
因此，采用血清MYO 水平作为诊断AMI 的早期指标，仅限于没有上述相关疾病的患者。
在有急性症状的患者中，4 小时内MYO 水平不升高，AMI 的可能性极低。
由于在AMI 后血中MYO 很快从肾脏清除，发病l8～30 小时内可完全恢复到正常水平。
故MYO 测定有助于在AMI 病程中观察有无再梗塞或者梗塞再扩展。
MYO 频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍在延续。
另外，在神经肌肉疾病如肌营养不良、肌萎缩和多肌炎时血清MYO 水平亦升高。
心脏外科手术患者血清MYO 升高，可以作为判断心肌损伤程度及愈合情况的一项客观指标。
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肌红蛋白(Myoglobin)测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中肌红蛋白（Myoglobin）的含量。
1.1产品型号/规格： 50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成
试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（Myoglobin-Cal）（选配）组成。
组成及含量如下：
2.1 外观
2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；
2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；
2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；
2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限
应不大于21.0ng/mL。
2.3 准确度
将已知浓度的Myoglobin样品加入到血清或其它相应基质中，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.4 线性
在[50.0，3000.0]ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度
2.5.1 分析内精密度
在试剂盒的线性范围内，浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（1000.0±200.0ng/mL）的样品检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间精密度
在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（1000.0±200.0ng/mL）的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6 效期末稳定性
本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性
依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，定标品溯源到罗氏Myoglobin定标液。