化学发光免疫分析方法的研究及应用
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析原理化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是一种基于化学发光原理的免疫分析技术，它结合了免疫学和化学发光技术的优势，具有高灵敏度、高特异性和广泛的应用前景。
本文将从化学发光原理、免疫分析方法和应用领域等方面对化学发光免疫分析原理进行介绍。
化学发光原理。
化学发光是指在化学反应中产生的光。
化学发光反应的基本原理是两种或两种以上的物质在一定条件下发生反应，通过激发态的分子或离子产生的能量转移到基态的分子或离子上，从而产生光。
化学发光反应是一种放热反应，通常需要一种催化剂来促进反应的进行。
在化学发光免疫分析中，化学发光物质通常被标记在抗体或抗原上，当靶分子与标记的抗体或抗原结合时，激发化学发光反应，产生光信号。
免疫分析方法。
化学发光免疫分析是一种基于免疫学原理的分析方法，它利用抗体与抗原特异性结合的原理，通过检测免疫复合物的形成来定量或半定量地测定样品中的靶分子。
在化学发光免疫分析中，通常使用化学发光仪器来检测化学发光信号的强度，进而确定样品中靶分子的浓度。
与传统的免疫分析方法相比，化学发光免疫分析具有灵敏度高、特异性强、操作简便、快速等优点，因此在临床诊断、药物检测、环境监测等领域得到了广泛的应用。
应用领域。
化学发光免疫分析技术在临床诊断、药物检测、环境监测等领域有着广泛的应用。
在临床诊断中，化学发光免疫分析可以用于检测肿瘤标志物、感染性疾病标志物、内分泌激素等，具有高灵敏度和高特异性，可以帮助医生进行早期诊断和疾病监测。
在药物检测中，化学发光免疫分析可以用于药物代谢产物的检测和药物浓度的监测，有助于指导临床用药。
在环境监测中，化学发光免疫分析可以用于检测水质、空气质量、土壤污染等，具有快速、准确的优势。
总结。
化学发光免疫分析是一种灵敏度高、特异性强的免疫分析技术，具有广泛的应用前景。
通过对化学发光原理、免疫分析方法和应用领域的介绍，我们可以更好地理解化学发光免疫分析的原理和特点，为其在临床诊断、药物检测、环境监测等领域的应用提供理论基础和技术支持。
化学发光免疫技术及其在临床检验中应用论文
化学发光免疫分析技术及其在临床检验中的应用【摘要】化学发光免疫分析是基于放射免疫分析的基本原理，然后将高灵敏的化学发光分析与高特异性的免疫反应结合而建立的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。
这种技术操作方便，检测灵敏度高，且不会造成污染，是当前免疫分析中最完善的分析方法，也是免疫分析重要的发展方向，本文笔者就对这一技术及其在临床检验中的应用做一介绍。
【关键词】学发光免疫分析技术；基本原理；分类；应用文章编号：1004-7484（2013）-01-0463-01化学发光免疫分析技术（chemiluminescence immuno-assay，clia），是在二十世纪八十年代发展起来的，它是比荧光免疫测定、酶免疫、发射免疫更先进的一种最新的免疫测定技术。
这种技术主要用于对各种抗体、抗原、半抗原、脂肪酸、激素和药物的检测分析，下面就介绍一下这种技术的基本原理和分类。
1化学发光免疫分析技术的基本原理化学发光免疫分析技术是由免疫分析和化学发光分析两个系统构成的。
其中免疫分析是用标记物直接标记在抗原或抗体之上的，然后再经过抗原与抗体反应生成抗体免疫复合物，其中标记物可以是化学发光物质，也可以是某种酶。
化学发光免疫分析系统是在免疫反应结束后，加入氧化剂或酶的发光底物，待发光物质氧化后就会形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测，其中被测物的含量就是根据化学发光标记物与发光强度的关系利用标准曲线计算出来的。
化学发光的原理是指分子或原子中的电子吸收能量后，发生能级跃迁而释放光子的过程，能级跃迁过程是电子从基态到激发态的过程，实现了从较低能级向较高能级的跃迁。
其中可以根据形成激发态分子的能量来源不同将发光过程分为化学发光（chemiluminescence）、光照发光（photoluminescence）和生物发光（bioluminescence）。
化学发光免疫分析技术
• 化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而 对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清 和辣根过氧化物（HRP）加入到固相包被有抗体的白色不 透明微孔板中，血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结 合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的 游离成分。然后，加入鲁米诺Luminol发光底液 ，利用化 学反应释放的自由能激发中间体，从基态回到激发态，能 量以光子的形式释放。此时，将微孔板置入分析仪内，通 过仪器内部的三维传动系统，依次由光子计数器读出各孔 的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学 模型进行定量分析。最后，打印数据报告，以辅助临床诊 断。
血清FT3和FT4降低： ⑴甲减病人两者皆下降，但轻型甲减、甲减初期多 以FT4下降为主；⑵低T3综合征仅有FT3下降； ⑶某些药物，如苯妥英 钠、多巴胺、糖皮质激素也可使FT3和FT4降低。
• T3、T4均升高：高TBG血症、甲亢、甲状腺激素不敏感综合征。
化学发光免疫分析
一、化学发光免疫技术的概念 二、化学发光免疫分析基本原理 三、化学发光免疫分析的类型 四、临床应用 五、发展与展望
一、化学发光免疫技术的概念
化学发光免疫技术：化学发光分析是根据化学反应统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与 待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入 化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或 定性检测。
磁微粒模式图
特点 – 抗原和抗体结合与未结合 部分的易分离
Y
3.2、化学发光酶免疫分析
化学发光酶免疫分析（chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗 体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固 相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物 (发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光 电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至 计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。
荧光和化学发光免疫分析方法
荧光和化学发光免疫分析方法荧光和化学发光免疫分析方法是一种常用的生物分析技术，广泛应用于生命科学研究、临床诊断和药物研发等领域。
本文将详细介绍荧光和化学发光免疫分析方法的原理、应用以及优缺点等方面。
首先，荧光免疫分析方法利用标记有荧光物质的抗体或抗原与待检测物相互作用，通过检测荧光信号来定量分析目标物。
其原理是当荧光标记物被激发后，会发射出特定波长的荧光信号，利用荧光光谱仪测量荧光强度来确定目标物的浓度。
荧光免疫分析方法具有高灵敏度、高选择性和多样性的优点，可用于检测蛋白质、核酸、细胞等生物分子。
化学发光免疫分析方法则是利用特定的化学反应产生荧光信号来检测目标物。
常用的化学发光免疫分析方法有酶免疫分析和化学发光免疫分析。
在酶免疫分析中，酶标记的抗体或抗原与待检测物相互作用后，加入底物，酶催化底物发生化学反应产生荧光信号。
而化学发光免疫分析则是通过特定的化学反应产生激发态分子，激发态分子发生无辐射跃迁产生荧光信号。
化学发光免疫分析方法具有高灵敏度、快速、稳定性好的特点，常用于临床诊断和药物研发等领域。
荧光和化学发光免疫分析方法在生命科学研究中有广泛的应用。
例如，在蛋白质研究中，可以利用荧光免疫分析方法检测蛋白质的表达水平、相互作用以及酶活性等。
在细胞研究中，荧光免疫分析方法可以用于检测细胞的分子分布、内源性蛋白质的表达和细胞信号传导等。
此外，荧光和化学发光免疫分析方法还可以用于检测病原体、药物残留和环境污染物等。
荧光和化学发光免疫分析方法具有许多优点。
首先，这些方法具有高灵敏度，可以检测到非常低浓度的目标物。
其次，这些方法具有高选择性，能够在复杂的样品中准确地检测目标物。
此外，荧光和化学发光免疫分析方法还可以实现高通量分析，节省时间和成本。
然而，荧光和化学发光免疫分析方法也存在一些缺点。
首先，荧光信号受到背景干扰的影响，可能导致误差的产生。
其次，荧光标记物的稳定性较差，容易受到光照和温度等因素的影响。
临床检验中化学发光免疫分析的应用研究
新粘结 ，使 用至今未脱落 。另一例失败病 例为根尖周 炎导致修复 体拆 除 ，重新根管治 疗后修复 至今未有异常 。粘结是纤 维桩 成功 的关键 ， 隔湿是粘结操作 中最基本 的要 求。只要适 应证选择合理 操作正确纤 维
桩在 临床中达到零失败是有可能 的。 参 考文 献 ［ １ 】 毛峻武， 王萍． 纤维 桩 系 统 的发展 历 史 与进 展 ［ Ｊ ］ ． 中国 临床 实 用 医学 ， ２ ０ １ ０ ， １ １ （ １ １ ） ： ２ ４ １ — ２ ４ ２ ． ［ ２ ］ 南桂 枝， 杨 孟云 ． 桩 核 冠对牙 体缺 损修 复 中的应用 及效 果评 价 ［ Ｊ ］ ＿
口腔 门诊部 ）接 受纤维桩修复 ，能 自愿配合 治疗 及 随诊 的患者８ ９ 名， 共使 用纤维 桩 １ ３ ６ 颗 。所 有患者 皆有本 人完成 。患者年 龄范 围１ ７ 岁至 ７ ５ 岁 ，所有 纤维桩 为瑞士康特威尔登特Ｐ ａ ｒ ａ Ｐ ｏ ｓ ｔ Ｔ ａ ｐ ｅ ｒ Ｌ ｕ ｘ ，粘结剂及 核采用瑞士康 特威 尔登特 Ｐ ａ ｒ ａ Ｃ ｏ ｒ ｅ 双 固化高强度复合树 脂。 １ ． ２ 纤维桩 修复操 作步骤 如下 ：①确定根 管大小 ：通过ｘ线检查 确定 要预备 根管 的长度和直径 。②桩 的选择 ：根 据ｘ 线检查 的根管直 径选 择 桩 的直径 。根 管壁要 保 留至少 ｌ ｍｍ厚度 ，根尖 部分保 留３ ～ ５ ｍｍ牙 胶 尖 。③根管预备 ：ａ ． 去 除牙胶尖 ：用 预成钻 或热牙胶充 填器去 除牙 胶 尖。ｂ ． 根管成型 ：用引导 钻作初步 预备 ，用橡 皮标 出所 要预备 的长
中国美容 医学 ， ２ ０ １ ２ ， ２ １ （ ６ ） ： １ ０ １ ５ — １ ０ １ ６ ．
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析是一种常用的生物分析技术，其原理是利用化学发光反应检测目标分析物。
该技术主要应用于生命科学研究、临床诊断和药物研发等领域。
化学发光免疫分析的步骤如下：
1. 样品处理：将待测样品进行处理，通常包括样品的稀释、蛋白质提取、核酸提取等步骤，以满足后续分析的要求。
2. 特异性结合：将待测样品与特异性抗体结合，这是化学发光免疫分析的关键步骤。
特异性抗体能够与目标分析物结合，形成抗原-抗体复合物。
3. 化学发光：在抗原-抗体复合物形成后，加入一种化学发光底物，底物与复合物发生化学反应，生成激发态分子或产生紫外、可见光等发光物质。
4. 光学检测：利用光学检测系统，测量发光信号的强度或荧光信号的荧光强度。
一般情况下，强度与待测样品中目标分析物的含量成正比。
化学发光免疫分析的优点是灵敏度高、特异性强，且能够同时分析多个目标分析物。
它在临床诊断中广泛应用，例如检测某些疾病标志物、药物浓度和病原微生物等。
此外，化学发光免疫分析还可用于药物研发中的蛋白质相互作用研究、基因表达分析等。
总之，化学发光免疫分析是一种重要的生物分析技术，通过特异性抗体与荧光底物的配对应用，实现对目标分析物的定量检测，具有灵敏度高、特异性强和多重分析的优势。
化学发光法检测分析中的应用
化学发光法检测分析中的应用化学发光法是一种应用广泛的分析方法，其可以被用于各种领域的检测分析，如医学、药学、食品科学、环境科学等等。
通过化学反应方式发生的化学发光，在定量和定性分析中都具有重要的应用。
本文将介绍化学发光法的检测原理、检测方法和应用案例。
一、检测原理化学发光是指某些物质在化学反应中释放出光的现象。
常见的化学发光反应有氧化还原反应、酶催化反应、亚硝胺反应等等。
这些化学反应所释放出的光与反应物的浓度成正比关系，因此可以通过测量光强来确定反应中物质的浓度。
二、检测方法1. 酶促发光法酶促发光法是基于酶催化反应和化学发光原理的检测方法。
此方法为生物技术和生物医学领域应用广泛的检测方法。
该方法主要采用双酶法，将触媒化学发光底物催化剂和酶学底物相互作用产生化学反应链，从而放出化学荧光。
通过测量荧光的强度，可以得出样品中酶的含量。
2. 气相色谱发光检测法气相色谱发光检测法是一种将气相色谱技术与发光检测方法相结合的新型检测方法。
该方法首先将样品通过气相色谱柱进行分离，然后在检测器中通过光的激发作用产生化学发光，通过检测这种化学发光的强度进行分析和检测。
3. 化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法是一种基于化学反应和免疫学原理相结合的检测方法。
该方法将样品与已知抗原或抗体进行反应，然后添加酶标记抗体或抗原，通过荧光或化学发光检测法分析产生的化学反应。
该方法可快速、准确、灵敏地检测出各种生物分子。
三、应用案例1. 生化污染的检测生化污染是指非法添加和假冒伪劣的生化制品的行为，而定量测定小分子抗生素中的残留成分是评价生化制品较重要的一个指标。
李梅等人通过化学发光法检测分析，发现处于贮存温度较高或贮存时间过长的青霉素、链霉素等抗生素，其残留量有较大增加，因此化学发光法被广泛用于生化污染的检测。
2. 药物纯度及含量的检测药学中常常需要检测药品的纯度及含量。
王丽等人通过化学发光法检测氨氯地平的药剂及体外生物样品，发现药品残留量与样品的浓度呈线性关系，因此化学发光法可被用于药物纯度及含量的检测。
化学发光免疫检测在生化检验中的应用
化学发光免疫检测在生化检验中的应用摘要：化学发光免疫检测法是一种利用磁场来分离抗体，并将抗原的沉淀和游离，从而对检测对象展开定性和定量的一种检测方法，在临床上也可将其称作化学发光标记免疫测定法，目前它已被广泛地用于心脏疾病、病毒标志物、临床肿瘤、免疫系统疾病的诊断和治疗，尤其是在对于甲状腺疾病的诊断过程中，其中一个重要的环节就是甲状腺球蛋白浓度，但是如果仅仅使用常规的检测方法，则会导致假阴性和假阳性的检出率比较高，并且很难为后续的临床治疗方案设计工作提供依据，因此，有必要对化学发光免疫检测在生化检验中的应用展开进一步的研究。
关键词：化学发光免疫检测；生化检验；应用1化学发光免疫概述化学发光免疫分析指的就是将发光分析和免疫反应相结合，所构建起来的一种微量抗原以及抗体新型标记免疫分析技术。
在这些技术当中，典型的标记技术包括了荧光免疫技术、放射免疫技术、发光免疫技术、酶免疫技术。
在原子中的电子或者分析吸收了能量之后，电子或者原子可以由基态跃迁到激发态，然后再回到到基态中，并对光子进行释放，从而出现发光的现象。
其基本原理是：针对抗原或抗体，标记化学发光物或酶标志物，在产生免疫反应之后，将复合物放入到氧化剂或者化学发光剂中，使其发光，并对其发光强度进行检测，并计算待测浓度。
通常情况下，利用有机物做化学发光剂，通过氧化反应来激发其发出的光。
根据分子能量来源，可分为光照发光、生物发光和化学发光，而化学发光又可分为直接和间接两种。
当化学反应能够释放出足够的能量，促使参与反应的物质进入到激发态时，若被激发的对象是反应产物，那么这一过程就是直接化学发光，若激发转移到另一没有参与化学反应的分子 D上，使得 D分子进入到激发态，就是间接化学发光。
这种荧光探针在上个世纪七十年代就已经在临床上得到了广泛的使用，最初被用作追踪的探针，但由于其灵敏度低，发光时间短等缺点，在实际的使用中受到了很大的制约。
近年来，国内医药领域的技术迅速发展，随着辣根酶标记技术的日益普及，其荧光时间变长、信号变强，以往的缺陷已被明显改进。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
本文由：华夏学术传媒网提供摘要：本文根据各化学发光免疫分析方法所使用标记物质的不同，将化学发光免疫分析方法分为化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析法，并对各方法经典标记物质及分析方法原理进行了分析。
同时，介绍了化学发光免疫分析方法在医学检验、食品安全及环境科学方面的应用进展情况。
关键词：化学发光免疫分析；分类；研究进展化学发光是在常温下由化学反应产生的光的发射。
其发光机理是：反应体系中的某些物质分子，如反应物、中间体或者荧光物质吸收了反应释放的能量而由基态跃迁到激发态，当中间体由激发态回到基态时会释放等能级的光子，对光子进行测定而实现定量分析［1］。
化学发光免疫分析方法是将化学发光与免疫反应相结合的产物，因化学发光具有荧光的特异性，但与荧光产生需要激发光不同，化学发光由化学反应产生光强度，并不需要激发光，从而避免了荧光分析中激发光杂散光的影响。
化学发光免疫分析包含了免疫化学反应和化学发光反应两个部分。
免疫分析系统是将化学发光物质或酶标记在抗原或抗体上，经过抗原与抗体特异性反应形成抗原－抗体免疫复合物。
化学发光分析系统是在免疫反应结束后，加入氧化剂或酶的发光底物，化学发光物质经氧化剂的氧化后，形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测。
待测物质浓度因为与发光强度成一定的关系而实现检测目的［2］。
一、化学发光免疫分析方法的类别化学发光免疫分析法根据标记物的不同可分为3 大类，即化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析法。
（一）化学发光免疫分析化学发光免疫分析是用化学发光剂直接标记抗体或抗原的一类免疫测定方法。
目前常见的标记物主要为鲁米诺类和吖啶酯类化学发光剂。
1. 鲁米诺类标记的化学发光免疫分析。
鲁米诺类物质的发光为氧化反应发光。
在碱性溶液中，鲁米诺可被许多氧化剂氧化发光，其中H2O2最为常用。
因发光反应速度较慢，需添加某些酶类或无机催化剂。
酶类主要是辣根过氧化物酶（HRP），无机类包括O3、卤素及Fe3+、Cu2+、Co2+和它们的配合物。
鲁米诺在碱性溶液下可在催化剂作用下，被H2O2等氧化剂氧化成3－氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子。
鲁米诺的发光光子产率约为0.01，最大发射波长为425 nm。
2. 吖啶酯类标记的化学发光免疫分析吖啶酯用于化学发光免疫分析方法（ChemiluminescentImmunoassay，CLIA）由于热稳定性不是很好，Klee 等研究合成了更稳定的吖啶酯衍生物。
在含有H2O2的碱性条件下，吖啶酯类化合物能生成一个有张力的不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N－甲基吖啶酮，当其回到基态时发出一最大波长为430 nm 的光子。
吖啶酯类化合物量子产率很高，可达0.05。
吖啶酯作为标记物用于免疫分析，发光体系简单、快速，不需要加入催化剂，且标记效率高，本底低。
吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于CLIA，通常采用HNO3+H2O2和NaOH 作为发光启动试剂，有些在发光启动试剂中加入Triton X－100，CTAC，Tween－20等表面活性剂以增强发光。
（二）化学发光酶免疫分析化学发光酶免疫分析（Chemiluminescent Enzyme Immunoassay,CLEIA）是以酶标记生物活性物质进行免疫反应，免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物，在信号试剂作用下发光，用发光信号测定仪进行发光测定。
目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP），它们有各自的发光底物。
HRP 最常用发光底物是鲁米诺及其衍生物。
在CLEIA 中，使用过氧化物酶标记抗体，进行免疫反应后，利用鲁米诺作为发光底物，在过氧化物酶和起动发光试剂（NaOH和H2O2）作用下鲁米诺发光，酶免疫反应物中酶的浓度决定了化学发光的强度。
此传统的化学发光体系（HRP－H2O2－lumi-nol）为几秒内瞬时闪光，存在发光强度低、不易测量等缺点。
后来，在发光系统中加入增强发光剂，以增强发光信号，并在较长时间内保持稳定，便于重复测量，从而提高分析灵敏度和准确性。
碱性磷酸酶（ALP）已广泛用于酶联免疫分析和核酸杂交分析。
碱性磷酸酶和1，2－二氧环己烷构成的发光体系是目前最重要、最灵敏的化学发光体系。
这类体系中具有代表性的是Bronstein 等提出的ALP－AMPPD 发光体系。
AMPPD 为1，2－二氧环己烷衍生物，它是一种生物化学领域中最新的超灵敏的碱性磷酸酶底物，其特点是反应速度快，在很短时间内提供正确可靠的结果。
在它的分子结构中有两个重要部分，一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环，它可以断裂并发射光子；另一个是磷酸根基团，它维持着整个分子结构的稳定。
（三）电化学发光免疫分析方法电化学发光是指由电化学反应引起的化学发光过程。
Leland［3］等已对三联吡啶钌体系的电化学发光机理进行了深入的研究。
电化学发光的反应在电极表面进行，发光底物为三联吡啶钌［Ru （b p y）32+］，三丙胺（TPA）用来激发光反应。
在阳极表面，两种物质同时失去电子。
在电极板上Ru （bpy）32+被氧化成Ru （b p y）33+，TPA也被氧化成阳离子自由基（TPA+ *），TPA+ *自发地释放一个质子而变成非稳定分子（TPA*），将一个电子递给Ru （bpy）33+，形成激发态的Ru （bpy）32+*。
Ru （bpy）32+*在衰减的同时发射一个波长为620 nm 的光子，重新回到基态Ru （bpy）32+。
这一过程在电极表面反复进行，产生高效、稳定的连续发光，并不断增强。
二、化学发光免疫分析方法的应用自1977 年Halman 等［4］创立化学发光免疫分析方法以来，免疫化学分析方法在医学检验、食品安全及环境科学方面的应用取得了很大的进展。
（一）医学检测肺结核病常以人体血清中CA125 含量为疾病标记物，上海交通大学Wang 等［5］建立了CA125 的毛细管化学发光免疫分析方法，以实现对肺结核病的检测。
其方法的线性检测范围为2.5×10－11～1.0×10－9mol/L，检测限（S/N=3）为1.0×10－12mol/L，且标样的添加回收率为93％～109％。
甲胎蛋白（AFP）为肿瘤疾病标志物，Yang等［6］利用链霉素化毛细管柱，建立了AFP 的化学发光免疫分析方法。
该方法的最低检测限为0.1ng/mL，线性检测范围为0.5～200 ng/mL。
研究结果表明该方法具有结构简单、更好的实用性及较宽的线性范围等优点。
Zhang等［7］利用磁性微粒子和包被小管建立了AFP 的化学发光酶免疫分析方法。
在该方法中，AFP抗体首先包被于两种不同的固相载体上，如磁性微粒子和包被小管。
再分别对这两种包被模式建立的化学发光免疫分析方法进行比较，通过再抗体包被浓度、标记于抗体上HRP 的稀释比例，分析所需时间，化学发光动力学等角度进行衡量，显示磁性微粒子具有较大的优势。
Zhan 等［8］建立了 C 反应蛋白的电化学发光免疫分析方法。
首先用生物素标记含有Ru （bpy）32+的脂质体后与亲和素反应，再与生物素化的C 反应蛋白抗体结合得到抗体包被的脂质体，同时亲和素包被的磁性微粒子与生物素化的抗体反应，得到抗体包被的磁性微粒子。
两种抗体与 C 反应蛋白结合，构成双亲和素桥联的、磁性微粒子为固相分离剂的反应模式。
通过溶解脂质体释放出Ru （bpy）32+测定其强度进行测定。
该方法的最低检测限为100ng/mL，检测范围为100ng/mL～10μg/mL。
Knight 等［9］采用化学发光免疫夹心分析方法对梅毒病毒进行检测，并与传统的分析方法快速血浆素反应（RPR）和酶免疫分析方法（ELISA）进行比较，通过对多种样品进行检测，并与RPR 及ELISA分析方法结果有99.1％的正确率。
茶碱是一种磷酸二酯酶（PDE）抑制剂，用于呼吸系统疾病的治疗。
Zhou等［10］建立了茶碱的化学发光免疫分析方法，该方法的最低检测限为0.51mg/L，线性范围为0.51～40mg/L，板内及板间变异系数分别为3.20％和3.57％。
通过与FPIA 结果对30 例茶碱浓度进行比较，其相关系数为0.993。
Peter 等［11］通过合成生物素睾酮标记物建立了睾酮的化学发光免疫分析方法，该方法的检测范围为0.2～20.0 nmol/L，最低检测限为0.125 nmol/L，板间方法的精密度为13％～16％，通过质谱仪器确证其方法的回收率为95％，显示了方法良好的灵敏度和准确率。
Mirasoli等［12］建立了唾液中皮质醇的固相竞争化学免疫分析方法。
通过人工重组的发光蛋白标记皮质醇而建立的免疫分析方法检测限为3nmol/L，线性检测范围为10～1 000 nmol/L。
其他关于这方面报道还有Perschel 等［13］通过化学发光免疫分析对原发性醛固酮过多症（PHA）进行快速筛选，Tudorache等［14］利用磁颗粒免疫支持液膜方法（m-ISLMA）检测唾液中的孕酮含量，Iwata 等［15］利用双夹心化学发光免疫分析方法测定血浆中内皮素－1的含量等。
关于这方面的应用，化学发光免疫分析方法应用的最为广泛，正是在医学检测方面大量成功的应用，带动了化学发光免疫分析方法在其他学科方面的普及。
（二）食品安全检测Quan 等［16］建立了食品中伏马菌素B1 的化学发光酶免疫分析方法，经方法优化后其线性检测范围为0.14～0.9μg/L，方法的灵敏度（IC50）为0.32 μg/L，方法的最低检测限（IC10）为0.09 μg/L，与伏马菌素B1 的ELISA 方法相比，其方法灵敏度提高了10 倍。
且通过样品的添加回收率试验表明其有良好的回收率，其分析结果与ELISA 分析方法与HPLC 方法有良好的相关性。
Yang等［17］建立了食品中葡萄球菌肠毒素B（SEB）的碳纳米管的化学发光免疫分析方法，通过将SEB 抗体吸附在碳纳米管表面，然后将抗体－碳纳米管固定在聚碳酸酯表面，再通过增强化学发光免疫法测定SEB 含量。
牛奶、苹果汁和婴儿食品中的SEB 最低检测限为0.01 ng/mL，而ELISA 的最低检测限为1 ng/mL。
Lin 等［18］人建立了食品中氯霉素的化学发光免疫分析方法，其方法灵敏度（0.05 ng/mL）、精密度、特异性及准确度等指标均与ELISA 分析方法类似。
10个样品的板内和板间变异系数分别小于8％和20％，且样品的添加回收率在87％～100％。
四川大学华西医学院杨秀岑等人［19］建立了食品中沙门氏菌的化学发光免疫分析方法。
该方法选用聚氯乙烯平片作为载体固定细菌，再与一抗及HRP 标记二抗温育，以化学发光免疫法测定食品中沙门氏菌。