金黄色葡萄球菌(借鉴材料)
金葡球菌实验报告

一、实验目的通过本次实验,掌握金黄色葡萄球菌的分离、培养和鉴定方法,了解其生物学特性,为临床诊断和治疗提供依据。
二、实验材料1. 实验菌株:金黄色葡萄球菌标准菌株2. 培养基:普通琼脂、血琼脂、Baird-Parker培养基、营养肉汤3. 实验仪器:恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜、移液器、试管、培养皿等4. 实验试剂:革兰氏染色液、碱性复红液、氯化钠、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甲基红等三、实验方法1. 菌株分离与纯化(1)将金黄色葡萄球菌标准菌株接种于营养肉汤中,37℃培养24小时。
(2)取培养好的肉汤,用无菌移液器吸取适量接种于普通琼脂平板,37℃培养24小时。
(3)挑取单菌落,接种于血琼脂平板,37℃培养24小时。
(4)挑取单菌落,接种于Baird-Parker培养基平板,37℃培养24小时。
2. 鉴定试验(1)革兰氏染色:取纯化后的金黄色葡萄球菌,进行革兰氏染色,观察菌体形态。
(2)生化试验:进行触酶实验、葡萄糖发酵实验、麦芽糖发酵实验、乳糖发酵实验、蔗糖发酵实验、甲基红反应、VP反应等,以确定金黄色葡萄球菌的生化特性。
(3)溶血试验:观察金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的溶血情况。
(4)过氧化氢酶试验:观察金黄色葡萄球菌在Baird-Parker培养基平板上的过氧化氢酶反应。
四、实验结果1. 菌株分离与纯化在普通琼脂平板、血琼脂平板和Baird-Parker培养基平板上均分离出金黄色葡萄球菌,菌落呈圆形、凸起、表面光滑、湿润、不透明,产生黄色脂溶性色素。
2. 革兰氏染色金黄色葡萄球菌革兰氏染色阳性,呈球形,排列成葡萄串状。
3. 生化试验金黄色葡萄球菌触酶实验阳性,分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、产酸不产气,甲基红反应阳性,VP反应阴性。
4. 溶血试验金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上产生溶血环。
5. 过氧化氢酶试验金黄色葡萄球菌在Baird-Parker培养基平板上产生黑色沉淀。
五、实验结论根据实验结果,分离出的金黄色葡萄球菌符合金黄色葡萄球菌的生物学特性,可以确认为金黄色葡萄球菌。
金色葡萄球菌介绍及图片

金色葡萄球菌介绍及图片简介金色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌,隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus),可引起多种严重感染。
有“嗜肉菌"的别称。
菌类介绍细菌按形态可分为:球菌,杆菌,和螺旋菌.金黄色葡萄球菌就是球菌的一种.它是革兰氏阳性菌的代表.革兰氏阳性菌就是可以被结晶紫初染,碘液媒染,乙醇处理,沙黄(红色)复染后呈现紫红色的细菌.而革兰氏阴性菌则呈现红色.这些差别源于金黄色葡萄球菌细胞壁的组成和结构不同.金黄色葡萄球菌细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸.其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密,造成了不同的染色结果.金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源.当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了,于是发现了青霉素.而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显.这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。
生物学特性典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37°C,最适生长pH 7.4,干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1~2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10~15%NaCl肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。
甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。
感染与致病机理金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。
金黄色葡萄球菌实训报告

一、实验目的1. 熟悉金黄色葡萄球菌的基本生物学特性。
2. 掌握金黄色葡萄球菌的分离、纯化及鉴定方法。
3. 了解金黄色葡萄球菌的致病性及防治措施。
二、实验原理金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种革兰氏阳性球菌,广泛存在于自然界和人类及动物体内。
该菌具有高度的致病性,可引起多种化脓性感染,如肺炎、败血症、心内膜炎等。
实验中,通过观察金黄色葡萄球菌的形态特征、生化反应和药物敏感性,实现对金黄色葡萄球菌的鉴定。
三、实验材料1. 金黄色葡萄球菌菌种:购自某生物技术公司。
2. 实验器材:显微镜、无菌操作台、接种环、接种针、无菌培养皿、营养琼脂、血液琼脂、药敏纸片、生理盐水、75%酒精、碘酒、显微镜油镜等。
3. 实验试剂:青霉素、红霉素、万古霉素、庆大霉素等药敏纸片。
四、实验方法1. 金黄色葡萄球菌的分离与纯化(1)接种:将金黄色葡萄球菌菌种接种于营养琼脂平板,37℃恒温培养24小时。
(2)挑取单菌落:用接种环挑取生长良好的单菌落,接种于新的营养琼脂平板,37℃恒温培养24小时。
(3)重复挑取:继续挑取单菌落,直至获得纯化后的金黄色葡萄球菌。
2. 金黄色葡萄球菌的形态特征观察(1)革兰氏染色:将纯化后的金黄色葡萄球菌涂片,进行革兰氏染色,显微镜下观察。
(2)菌落观察:将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于营养琼脂平板,37℃恒温培养24小时,观察菌落形态。
3. 金黄色葡萄球菌的生化反应鉴定(1)糖发酵实验:将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于糖发酵培养基,37℃恒温培养24小时,观察是否产生气泡。
(2)氧化酶实验:将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于氧化酶培养基,37℃恒温培养24小时,观察是否产生颜色变化。
4. 金黄色葡萄球菌的药物敏感性实验(1)药敏纸片法:将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于营养琼脂平板,将药敏纸片贴于平板表面,37℃恒温培养24小时,观察抑菌圈的大小。
(2)最低抑菌浓度(MIC)测定:将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于微量肉汤稀释法培养基,分别加入不同浓度的药物,37℃恒温培养24小时,观察生长情况,确定最低抑菌浓度。
金黄色葡萄球菌(牛肉膏蛋白胨培养基)

金黄色葡萄球菌(牛肉膏蛋白胨培养基)一、生物学特性典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8 ^m左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37。
C,最适生长pH7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1-2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10-15% NaCI肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。
甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素, 还原硝酸盐,液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。
二•流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而,食品受其污染的机会很多。
近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占4 5% ,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点:季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83% ,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
一般说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。
肠毒素形成条件:存放温度,在37°C内,温度越高,产毒时间越短;存放地点,通风不良氧分压低易形成肠毒素;食物种类,含蛋白质丰富,水分多,同时含一定量淀粉的食物,肠毒素易生成。
金黄色葡萄球菌检测实验报告

金黄色葡萄球菌检测实验报告一、实验目的金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌,能够引起多种感染性疾病。
本次实验的目的是通过一系列的检测方法,准确检测出样本中是否存在金黄色葡萄球菌,并确定其数量和特性,为食品安全、临床诊断和环境卫生等领域提供可靠的检测依据。
二、实验原理金黄色葡萄球菌具有一些独特的生物学特性和生化反应,可通过以下几种方法进行检测:1、血浆凝固酶试验:金黄色葡萄球菌能够产生血浆凝固酶,使血浆发生凝固。
2、甘露醇发酵试验:金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇产酸。
3、革兰氏染色:金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,呈葡萄串状排列。
三、实验材料1、样本:食品样本(如乳制品、肉类)、临床样本(如脓液、血液)等。
2、培养基和试剂:血琼脂平板甘露醇氯化钠琼脂培养基兔血浆革兰氏染色液生理盐水3、仪器设备:恒温培养箱显微镜无菌接种环、移液管等四、实验步骤1、样本处理食品样本:称取一定量的样品,加入适量生理盐水进行均质处理,制成稀释液。
临床样本:直接进行涂片或适当稀释。
2、增菌培养将处理后的样本接种于 75%氯化钠肉汤中,置于 36±1℃恒温培养箱中培养 18 24 小时。
3、分离培养从增菌培养物中分别划线接种于血琼脂平板和甘露醇氯化钠琼脂培养基上,于 36±1℃培养 18 24 小时。
4、形态观察观察血琼脂平板上的菌落形态,金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色,周围有明显的透明溶血圈。
观察甘露醇氯化钠琼脂培养基上的菌落,金黄色葡萄球菌能使培养基变黄。
5、革兰氏染色挑取可疑菌落进行革兰氏染色,在显微镜下观察,金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,呈葡萄串状排列。
6、血浆凝固酶试验取兔血浆与可疑菌落混合,置于 36±1℃培养箱中观察,若血浆发生凝固,则为阳性。
7、甘露醇发酵试验接种可疑菌落于甘露醇氯化钠琼脂培养基中,观察是否产酸。
五、实验结果1、形态观察在血琼脂平板上观察到金黄色、周围有透明溶血圈的菌落。
在甘露醇氯化钠琼脂培养基上观察到变黄的菌落。
金黄色葡萄球菌β溶血素的探究论文

金黄色葡萄球菌β-溶血素的探究论文金黄色葡萄球菌β-溶血素的探究论文金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,金葡菌)是一种自然界中广泛存在的革兰阳性菌,可引起人和动物的局部化脓性感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎以及败血症、脓毒败血症等,同时也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一。
金葡菌主要通过产生多种致病因子而致病,这些致病因子包括溶血素、杀白细胞素、肠毒素、凝固酶、耐热核酸酶等。
溶血素(hemolysins),又称细胞溶素(cytolysin),是由细菌分泌的能使细胞溶解的毒素,是金葡菌产生的一种重要毒力因子,包括α、β、γ、δ4种。
其中α、γ、δ又称作打孔毒素(pore-formingtoxin),即能跨细胞膜形成孔道,允许小分子和离子通过,从而使靶细胞代谢紊乱,最终裂解细胞。
而β-溶血素作用机制与其他3种均不同,因此被称之为非打孔毒素。
β-溶血素(β-hemolysins,Hlb),全长993bp,编码330个氨基酸,1~34位氨基酸(aa)为其信号肽,相对分子质量为35×103。
目前国内外对Hlb的研究很少。
已有研究表明,Hlb是一种鞘磷脂酶C,能特异性地水解鞘磷脂,Mg2+的存在能增强其生物活性。
且Hlb在体外具有独特的溶血活性:热冷效应(Hot-cold)溶血特性,即Hlb在37℃作用于红细胞,红细胞不易裂解,随后置于4℃红细胞则能够迅速裂解。
晶体结构表明,Hlb的第149位和287位的组氨酸(H)是其发挥生物学活性的关键性位点,将149或287位的组氨酸(H)突变为天冬酰胺(N)时,Hlb的鞘磷脂酶活性降低。
此外,Medora等还发现Hlb具有结合核酸的活性。
本研究以金葡菌NCTC-8325为模板扩增得到Hlb的全长序列,并构建了野生型Hlb蛋白的重组表达载体,利用点突变技术构建了突变体HlbH-149-N蛋白的重组表达载体,获得了Hlb及HlbH-149-N蛋白,验证其溶血活性,制备了Hlb的特异性抗体,并检测抗体的中和活性。
金黄色葡萄球菌简要资料

金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus),有“嗜肉菌"的别称。
1.1 形态与染色典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜。
革兰染色阳性,衰老或死亡后可转为阴性。
1.2 培养特性金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度35℃~37℃,在21℃~37℃产生肠毒素,其中37℃最易。
最适生长pH7.4。
pH<6.7则不能生长和产生肠毒素。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1~2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。
甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。
图1为文献中金黄色葡萄球菌在37℃下的正常生长曲线Pt曲线。
生长为正常的四个周期。
1.3 抵抗力金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。
抗干燥:在干燥环境中存活数月;空气中存在,但不繁殖;耐热:在7℃~48.5℃(一说12℃~45℃)皆可生长,加热70℃1h ,80℃30min不被杀死(但也有文献显示肉制品中60℃6min,牛奶中75℃6s即可杀灭,71℃可杀灭未产生肠毒素的金黄色葡萄球菌);,肠毒素可耐受100℃煮沸30 min,它引起食物中毒的潜伏期一般在2~4h。
耐低温:在冷冻食品中不易死亡;耐高渗:在含有50%~66%蔗糖或15%以上食盐食品中才可被抑制,能在15%NaCl和40%胆汁中生长。
模拟蟹肉中金黄色葡萄球菌的最低生长温度为3.8℃,最高生长温度为44.1℃,最适生长温度为37.5℃。
上图为6.8℃到45.2℃金黄色葡萄球菌生长速率的变化图。
供参考。
1.4 致病菌致死条件金黄色葡萄球菌对热和干燥的抵抗力较一般无芽胞细菌强。
金黄色葡萄球菌自主实验方案

金黄色葡萄球菌的分离和鉴定一、实验目的金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而食品受其污染的机会很多。
近年来美国疾病控制中心报告由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的 3 3 % 加拿大则更多占到4 5 % 我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害我们要分离出它们并研究。
二、实验原理典型的金黄色葡萄球菌为球型直径0 . 8 u m 左右显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛大多数无荚膜革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高在普通培养基上生长良好需氧或兼性厌氧最适生长温度3 7 ° C 最适生长p H 7 . 4 , 干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起直径 1 — 2 m m。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性可在 1 0 — 1 5 % N a C l 肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖产酸不产气。
甲基红反应阳性V — P 反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸水解尿素还原硝酸盐液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力对磺胺类药物敏感性低但对青霉素、红霉素等高度敏感。
对碱性染料敏感十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。
三、实验材料和设备1 .培养基:牛肉膏蛋白胨培养基(13% NaCl):牛肉膏5g,蛋白胨1 0 g 氯化钠1 3 0 g 琼脂1 5 g 蒸馏水1 0 0 0 m l 1 2 1 ℃灭菌2 0 m i n 后倒平板。
肉汤培养基酵母膏5 g 蛋白胨1 0 g 氯化钠1 0 g 蒸馏水1 0 0 0 m l 1 2 1 ℃灭菌2 0 m i n 。
甲苯胺兰- D N A 平板2 . 试剂磺胺类药物、革兰氏染液3 . 仪器和设备显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。
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金黄色葡萄球菌
简介:金黄色葡萄球菌,也称“金葡菌”,细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。
其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密,染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色,相反,阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差,脂类含量高,所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。
金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。
研究表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。
这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。
新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,被称作超级细菌,几乎能抵抗人类所有的药物,但是万古霉素可以对付它。
典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37°C,最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径0.5~1.0mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10~15%NaCl肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。
甲基红反应阳性,VP 反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物、
青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感,但易产生耐药性,原因是由于这些菌株产生青霉素酶等。
对碱性染料敏感,十万分之一的龙胆紫液即可抑制生长。
流行病学
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因此,食品受到污染的机会很多。
美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点:季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位,常成为污染源。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:
a.溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ四种,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死
b.杀死白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞
c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。
葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关
d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌
e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素,分为A、B、C1、C2、C3、D、E及F八种血清型。
肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。
它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
此外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
f .表皮剥脱毒素:引起烫伤样皮肤综合征,又称剥脱样皮炎。
g.毒性休克综合征毒素(tsst-1)
引发病症
金黄色葡萄球菌肠炎是金黄色葡萄球菌引起的,多因原发疾病长期用抗生素引起肠道菌群失调所致,抗生素敏感菌株受到抑制,耐药的金黄色葡萄球菌株趁机繁殖。
金黄色葡萄球菌为侵袭性细菌,能产生毒素,对肠道破坏性大,所以金黄色葡萄球菌肠炎起病急,中毒症状严重,主要表现为呕吐、发热、腹泻。
呕吐常在发热前出现,发热很高。
轻症大便次数稍多,为黄绿色糊状。