微生物实验中常见的问题汇总
微生物检验中的问题及对策
微生物检验中的问题及对策摘要】随着医疗技术的不断进步，微生物检验也获得了长足的发展，在临床工作中，微生物检验也越来越至关重要了。
但是，医学微生物检验还有许多问题等待我们去探索和解决。
【关键词】微生物检验问题对策【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）16-0368-011 微生物检验中存在的问题1.1微生物标本采集质量提高检出率的重要因素就在于一定要正确采集标本。
标本采集时，一定要进行严格的无菌操作，避免标本感染而产生误检，直接影响微生物检验的临床诊断。
尽量在抗菌药物使用之前采集标本。
对于寒战和间歇期发热患者，应该在体温寒战期或上升期采集血液。
1.2微生物标本保存运送不够规范微生物标本保存和运送的原则是维持病原菌的活力，防止非病原菌的污染或过量繁殖。
标本应置于无菌容器之中，采集后立即送至细菌室。
以棉拭子采集的标本如咽拭子，肛拭或伤口拭子，宜插入运送培养基送检。
对环境敏感的微生物包括志贺氏菌、淋球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌对低温敏感，在标本运送过程中，要保持在室温条件下尽快送检，特别是在冬天，更应注意。
1.3微生物检验中的质量控制微生物检验结果的准确性，依赖于标本质量、相关临床资料，还有检验人、检验方法、检验过程、培养基、试剂、仪器、结果的报告等相关，应制定相关的文件和程序，及时发现错误，采取纠正措施。
2 对策2.1临床微生物检验人员应具有良好的职业道德，熟练的实验技能，结合工作中的实际经验，制定微生物检验的规范。
制定标本的采集、保存、运送的具体要求，并向医护人员宣教，宣传正规采集标本的重要性。
2.2微生物检验人员应加强检验中质量控制。
从标本采集前到检验中、检验后出具结果，均要进行严格的质量控制。
同时加强与临床医师的联系，使临床医护人员能正确理解和解释报告并用于临床诊断，使微生物检验报告能发挥相应的作用。
微生物检验中存在的问题及改进方法
微生物检验中存在的问题及改进方法微生物检验在临床实践中是诊断感染性疾病最有效的方法，其通过对患者的病原体进行检测，可以明确导致患者引发疾病的微生物，并根据检验结果合理选择药物。
但现阶段，在微生物检验中在检验人员素质、标本质量、检验方案以及检验室与临床的沟通等方面还存在一些亟需解决的问题，本文将对这四方面所存在的问题进行简单分析，并提出相应的改进方法，以供参考。
1.微生物检验中存在的问题1.检验人员素质方面微生物的检验是需要大量的专业理论知识做基础的，然而，通过调查可以了解到，很多医院的微生物检验人员并没有足够扎实的专业理论知识水平，这直接导致其在对标本的形态和反应进行检验的时候缺少足够的判断能力，不利于检验结果的准确性；除此之外，尚有些检验人员素质偏低，责任心不强，因恐惧标本具有传染性而不愿意接受微生物检验工作，专职的微生物检验人员较少。
1.标本质量方面想要获得准确的检验结果，首先检验标本需要合格，而现在很多检验人员因为操作不规范，没有注意采集标本的要求或对注意事项了解不多，导致采集的标本质量出现问题。
例如，微生物检验中常出现的标本痰液，正确的采集方法应该是患者先漱口，然后用力咳出气管深处的痰液，再吐到无菌容器中，而现实是患者或者没有漱口，或者咳出的痰只是气管浅处的，这样会造成检验结果不精准，出现假阳性或者假阴性的现象，耽误患者的病情。
另外，还有的医院在采集标本后，没有妥善保存标本，使标本接触到了外界空气，空气中的有毒有害物质污染了标本，这样也会影响检测结果。
1.检验方案方面微生物检验的检验方案，是检验人员专业技能水平的直接体现，也关系到检验结果是否准确。
比如说，检测痰液标本通常有以下几种方法：PCR检测、集菌检查、培养检测、直接涂片，而这些方法检查出来的阳性率依次降低，PCR检测法检出的阳性率甚至比直接涂片法检出的阳性率高出3倍以上。
1.检验室与临床的沟通方面检验室和临床医护人员及时沟通，在现实生活中也是十分重要的，而据了解，现在很多检验室和临床医护人员、患者的沟通很缺乏，一方面检验人员不能充分了解患者的目的，设计的检验方案也许不是最有效的；另一方面医生对检验结果有疑问或不理解时，没有办法及时得到解答，不能给患者更好的治疗方案，最终耽误了患者的治疗。
临床微生物检验中存在的问题，如何改进？
临床微生物检验中存在的问题，如何改进？一、临床微生物检验中存在的问题临床微生物检验是作出正确临床诊断、实施有效治疗的重要基础，伴随科学技术的不断发展，也推动医疗技术上了一个台阶，其中，医学分子生物学的发展成果最为显著。
所以作为医学分子生物学的重要组成部分，临床微生物检验可以帮助医务工作者快速获取致病菌的准确信息，其临床意义重大。
但是临床上对微生物检验的要求很高，我国临床微生物检验中也还存在一些问题，临床微生物检验还未达到令人满意的程度。
1、微生物样本质量控制问题关于实验室中微生物检验样本的质量控制问题，主要从样本的采集、运送及储存几个方面考虑。
微生物检验样本的采集往往由临床医护人员负责，如果在采集样本的过程中，医护人员不清楚样本采集要求，采集方式、采集过程不规范，则容易使其所采集的样本被污染或出现错误。
有些医护人员可能采集到了致病菌，但是由于所采集的量太少，而无法获得正确的检验结果等。
除了微生物样本的采集方式，样本的采集时间也关乎中微生物检验结果的准确性。
通常情况下，样本的采集应该是在早期、症状较典型时期及患者服用之前进行，如果采集样本的医护人员不对时间进行仔细的区分，而盲目的进行采集，比如在患者已经服药的状态下进行样本采集，则会影响样本检验结果的质量。
不符合样本采集时间而采集的微生物样本，所得出的检验结果是不可信的。
再有，微生物样本的运送与存储也是决定检验结果的关键，样本运送过程是否干净、无污染，样本的保存是否合理，这都是保障样本检验结果准确的重要前提。
临床上，不同病原微生物具有不同的生活习性，所以其运送和保存条件有所不同，比如淋病奈瑟菌对低温条件比较敏感，所以应该将其储存于合适室温环境中。
检验人员对目标病原微生物的特性加以区别，在样本的运送与储存过程中注意卫生和自我防护，确保样本不被污染。
2、检验人员的专业素养问题在临床微生物检验过程中，检验人员的主观判断及操作技能对检验结果意义重大，而大部分临床微生物检验都是要求很高的高精度实验，检验结果不能出现错误。
微生物检测过程中的问题及解答
微生物检测过程中的问题及解答1.微生物实验过程中使用的移液枪怎么灭菌？答：移液枪用纱布包好，外面报纸包好灭菌。
不能湿热灭菌的枪，在枪口处塞入少许棉花，外面采用表面灭菌的方法擦拭灭菌，里面采用热空气交换法或者洁净空气交换法处理。
2.微生物实验过程中如果移液枪枪头想要重复使用怎么办？答：枪头盒装好，报纸包好灭菌。
枪头少的话放入平皿或者小烧杯后，报纸包好灭菌。
3.微生物实验回收率上下限是多少？答：50—200%（药典规定）。
4.灭菌后的物品怎么保存，几天内可以继续使用?答：移液管、平皿之类的工器具没打开放无菌室一般可以放置两个星期左右。
灭菌后的培养基放冰箱冷藏保存通常可放一星期。
6.新国标GB4789.10-2016金黄色葡萄球菌检验中培养时间很多都改成了24-48h，这个跨度有点大，具体怎么判定啊？答：如果培养24h后已经长菌就不需要再进行培养了；如果培养24h后未长菌则需要继续培养至48h。
7.新标准GB4789.15-2016霉菌和酵母计数，有一条新的变化：“菌落数在10以内时，采用一位有效数字报告；菌落数在10-100之间，采用两位有效数字报告”，有这样一种情况：样品按照1:10稀释后，最低稀释倍数10倍的结果，如果分别为：1，0，算平均数并乘以相应稀释倍数后，结果为：5，这个时候，结果报：5CFU/g(mL)吗？以前我们是报<10。
就是如果样品稀释了10倍，检测结果是5，这个时候报"5"还是"<10"?这条规则其他标准没提，只适用于霉菌酵母？其他项目菌落总数，大肠菌群等，是否适用？？？答：6.1.5若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
也就是说以小于1乘以稀释倍数形式报告时，是指均无菌落生长时，你的平板既然有长菌落，结果就应该是5，“菌落数在10以内时，采用一位有效数字报告；菌落数在10-100之间，采用两位有效数字报告”这个主要是为了防止出现8.5这样的结果，按10版100以内采用两位有效数字报告，那8.5是符合要求的，存在歧义，16版更严谨了些。
微生物问题及解决方法
微生物问题及解决方法
微生物是一类极小型的生物体，包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。
它们在自然界中广泛存在，有些对人类和其他生物有益，有些则可能对生物体造成危害。
以下是一些关于微生物的问题以及针对这些问题的解决方法：
1. 微生物在食品中的污染问题，食品中的微生物污染可能导致食品腐败和食品中毒。
解决方法包括加强食品卫生管理，采取适当的储存和加工措施，以及使用抗菌剂和防腐剂等技术手段。
2. 医院感染问题，医院是微生物传播的重要场所，医院感染可能对患者造成严重危害。
解决方法包括加强医院环境清洁和消毒、医护人员的个人防护措施，以及严格执行感染控制措施。
3. 抗生素耐药性问题，微生物的抗药性是当前全球面临的严重问题，解决方法包括合理使用抗生素、开发新型抗生素、加强监管和管理，以及推广正确的抗生素使用知识。
4. 土壤微生物多样性保护问题，土壤微生物是土壤生态系统中的重要组成部分，对土壤肥力和作物生长具有重要影响。
解决方法
包括保护自然生态环境、合理施肥、减少农药使用，以及推广有机农业等做法。
5. 水体微生物污染问题，水体中的微生物污染可能对人类健康和水生生物造成危害。
解决方法包括加强水体保护、改善水质、加强污水处理和消毒，以及推广健康饮水知识。
总的来说，解决微生物问题需要综合运用科学技术手段、加强管理监管、推广科学知识和改善环境等多种途径，才能有效应对微生物可能带来的各种问题。
微生物检验常见问题解答
微生物检验常见问题解答微生物检验常见问题解答一、方法验证1.做过验证的样品微生物检验方法是否都需要按照新的方法进行重新验证?答：对于微生物限度检查的产品而言，由于培养时间调整，应重新进行验证。
对于无菌检查的产品而言，如果方法未作实质性调整，可以不必重新验证。
个别产品在各论中收载了新的无菌检查方法，对这些品种，应对收载方法的适用性进行验证。
2.以前做过无菌验证的品种是否需要重新按照新的标准再验证?答：参见问题1。
3.“新增抗生素供试品应选择低吸附的滤器及滤膜”比如注射用克林霉素磷酸酯属于抗生素，是否需要重新选取滤膜再验证?答：目前采用的方法如果经验证表明可行，则可以继续使用该方法。
4.微生物方法学验证时，培养时间是否跟样品日常检验所培养时间一致?答：应该一致。
5.微生物限度验证时，如果一个方法只有金葡回收率达不到要求，该方法时是否可以用来做细菌霉菌的检测方法?答：按药典的规定，一个计数方法通过验证，是指所有试验菌的回收率均达到要求。
如果采用各种方法以及方法的组合仍无法使金葡回收率达标，则可以采用使金葡回收率最高的方法作为计数方法。
6.薄膜过滤的冲洗量不能超过1000ml，我公司的喹诺酮类产品原来的方法是每张膜冲洗量为1500和2000ml，请问有没有合适的方法将冲洗量降至1000，各菌的回收率仍能符合规定?答：有几种办法可以降低冲洗剂的用量：1)降低接触滤膜的供试品的浓度;2)改进冲洗的方式，如少量多次地冲洗、降低蠕动泵的转速等;3)添加中和剂，如高价金属离子。
7.微生物限度检查法规定，技术方法验证时，采用上述方法若还存在一株或多株试验菌的回收率达不到要求，那么选择回收率最接近要求的方法和试验条件进行供试品检验。
请问，上述方法是指仅通过一种方法还是一定要通过几种方法联用的?答：应该要把可能采用的所有方法包括方法联用都进行验证。
8.供试品不溶于稀释剂，同时又有抑菌性，限度检查时应如何消除抑菌性?答：采用低速离心的方式，尽可能把供试品去除干净，取离心后的上层液，进行薄膜过滤。
无菌检测和微生物限度常见问题
无菌检测和微生物限度常见问题1、问:做无菌验证时阳性对照菌是怎么加入的？可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入吗？答:严格的说是要在最后一遍冲洗液中加入阳性对照菌的,这主要是考量滤膜对于阳性菌的截留性～但是滤器如果可以提供滤膜对于阳性菌的充分截留的话在最后的培养体系中加入阳性菌也是未尝不可的.如果供试品没有抑菌作用,可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入,摇匀如果供试品有抑菌作用,正如安哥洛卡所讲,在最后一次冲洗液中加入阳性对照菌,摇匀,抽虑,加培养基.无菌检查，加入阳性的方法可以有许多种，可以根据个人的习惯。
只是注意：1、避免人为污染。
2、阳性菌加入数量2、问:离心沉淀法的原理、操作和注意事项是什么?答:原理:利用沉降系数的差异将供试品和微生物进行分离;操作:取规定量的供试液，3000转/分离心20分钟（供试液如有沉淀，先以500转/分离心5分钟，取全部上清液再离心），弃去上清液，留底部集菌液约2ml，加稀释剂至原规定量.注意事项:真菌由于沉降系数比较小,500r/min离心5min，黑曲霉、白色念珠菌回收率为20%,因此其检查不适宜用低速离心沉淀法.3、问:稳定性实验的微生物及无菌检查,是否每次都要做?答:是;原因:一实验期内可能会染菌;二灭菌后微生物并不是就彻底"死亡",有些成为碎片,这些碎片在一定的条件和时间下,可以自我修复而复活.三稳定性的考察，也应包括药品有效期的考察，在此期间所有的项目都应是合格的，无菌也是其中之一，如果在有效期内无菌不合格，也可以说明该药品存在一定的缺陷，至少，有效期有问题。
4、问:眼部给药制剂如何做卫生学检验?答:液体制剂:无菌检查;半固体及固体制剂:微生物限度检查5、问:滴眼液的微生物限度为何进行无菌检查?答:一滴眼剂产品系按照无菌工艺生产且终产品为灭菌产品,故其成品的微生物质量应要求统一为无菌;所以,滴眼剂产品的临床合理用药应与其卫生标准要求一致,即将其微生物质量要求统一为无菌,显然更为合理;二滴眼剂的微生物质量要求为无菌,是与各国药典在滴眼剂要求上的统一,及对《中国药典》此项规定合理性的补充及完善等方面看,滴眼剂成品的微生物质量要求统一为无菌具有必要性。
微生物32道问答题及答案
1.微生物的分类（按大小、结构来分）非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物2、革兰阳性菌与阴性菌的细胞壁有何差异2.青霉素++ +溶菌酶++ +3、何为细菌L型，它的成因和特点是怎样的细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。
特点：高度多形性，大小不一；大多为革兰阴性菌；有一定的致病力。
4、细菌特殊结构有哪些，它们各自的意义如何荚膜：抗吞噬作用，是病原菌的重要毒力因子；抗杀菌物质损伤，如溶酶体、补体；粘附作用，与致病性有关；形成生物膜鞭毛：细菌的运动器官；某些细菌鞭毛与致病有关；鞭毛蛋白有抗原性：H抗原菌毛：普通菌毛粘附结构，性菌毛传递质粒芽胞：有强大的抵抗力；致病性；芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异，有重要的鉴别价值5、根据细菌对氧气的需求与否可把细菌分为哪几类；专性厌氧菌厌氧的原因（1）专性需氧菌（2）专性厌氧菌（3）兼性厌氧菌（4）微需氧菌专性厌氧菌厌氧的原因：缺乏完善的呼吸酶系统，利用氧以外的其他物质作为受氢体6、细菌个体及群体的繁殖规律细菌个体的生长繁殖：二分裂繁殖；繁殖速度一般20～30分钟一代细菌群体的生长繁殖：以培养时间为横坐标，培养物中活菌数的对数为纵坐标，可绘制一条生长曲线。
分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期7、生长曲线的分期及各期的应用生长曲线分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期研究细菌的生物学性状（形态染色、生化反应、药物敏感试验等）选对数期的细菌；细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生8、IMViC试验是哪几个试验，典型的大肠埃希菌的试验结果是怎样的I：吲哚试验M：甲基红试验Vi：VP试验C：枸橼酸盐于鉴定肠道杆菌，大肠埃希菌+ + - -9、热原质的定义及特点热原质：细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。
大多数是G-菌的脂多糖。
热原质耐高温，高压蒸汽灭菌不能破坏（121℃，20 min），250℃高温干烤才能破坏。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
微生物实验中常见的问题汇总
一、无菌操作要求
1. 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。
2. 进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。
3. 接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。
4. 进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。
5. 从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。
6. 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
7. 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。
8. 吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。
二、无菌间使用要求
1、无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7平方米的小窗，以备进入无菌间后传递物品。
2、无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。
3、无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。
4、处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。
5、在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置。
三、消毒灭菌要求
微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方
能使用。
（一）干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法
1、灭菌前准备
（1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。
（2）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。
2、装放
（1）干热灭菌器：装放物品不可过挤，且不能接触箱的四壁。
（2）大型高压蒸气锅：：放置灭菌物品分别包扎好，直接放入消毒筒内，物品之间不能过挤。
3、设备检查
（1）检查门的开关是否灵活，橡皮圈有无损坏，是否平整。
（2）检查压力表蒸气排尽时是否停留在零位，关好门和盖，通蒸气或加热后，观察是式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行：
①手提式高压锅在主体内加入3L清水，立式高压锅加水16L（重复使用时应将水量补足，水变混浊需更换）.
②手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中（无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用）。
③盖好顶盖拧紧，勿使漏气；置灭菌器于火源上加热，立式压力锅通上电源，并打开顶盖上的排气阀放了冷气（水沸腾后排气10-15min）。
④关闭排气阀，使蒸气压上升到规定要求，并维持规定时间（按灭菌物品性质与有关情况而定）。
⑤达到规定时间后，对需干燥的物品，立即打开排气阀排出蒸气，待压力恢复到零时，自然冷却至60℃后开盖取物，如为液体物品，不要打开排气阀，而应立即将锅去除热源，待自然冷却，压力恢复至零，温度降到60℃以下再开盖取物，以防突然减压液体剧烈沸腾或容器爆破。
（3）卧式压力锅蒸气灭菌器的使用按下列步骤进行：
①关紧锅门，打开进气阀，将蒸气引入夹层进行预热，夹层内冷空气经阻气器自动排出。
② 夹层达到预定温度后，打开锅室进气阀，将蒸气引入锅室，锅室内冷空气经锅室阻气器自动排出。