组织基因组DNA提取试剂盒磁珠法

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动物组织基因组 DNA 提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明

动物组织基因组 DNA  提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明

动物组织基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明货号:DM1702规格:50T保存:磁珠可以在室温下(15-25℃)运输,但请在4℃冰箱中保存,禁止冻存。

其余试剂可以室温保存,更长时间的保存可置于2-8℃。

复检期1年。

试剂盒内容:试剂盒组成DM1702-50T裂解液S1-233ml裂解液S2 2.2ml漂洗液1(空瓶)洗脱液 5.5ml磁珠 1.4ml×2说明书1份产品说明:动物组织基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,可从样品中分离纯化高质量基因组DNA。

特殊包被的磁珠在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、便捷,提取的DNA纯度高。

使用本试剂盒纯化的基因组DNA的OD260/OD280均在 1.7-1.9之间,可以应用于各类下游分子生物学实验。

使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。

若裂解液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min溶解沉淀,摇匀后使用。

操作步骤:1.裂解取适量的动物组织样本(肌肉组织≤50mg;心脏≤30mg;肝脏≤20mg;)用液氮研磨成粉末,并迅速转移到已加入600μl裂解液S1-2、40μl裂解液S2的EP管中,吹打或震荡混合均匀。

将EP管置于65℃水浴25~30min。

待冷却到室温,加入400ul氯仿,剧烈震荡15s,静置3min,12000rpm4℃离心5-10min。

2.结合尽量取净上清于新的1.5mL EP管中,加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠,颠倒混匀1min,静置3min。

将EP管置于磁铁上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤加入600μL漂洗液(使用前请预先配置70%乙醇),轻柔混匀1-2min,将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸净管盖及管底的残液;重复本步骤一次。

动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit【目录号】TGDE-5005、TGDE-5030【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃,其它组分室温保存;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,使用前请充分混匀;2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶,如有结晶请置于65℃水浴重新溶解;3. 在使用本试剂盒前,请用户自配80%乙醇;4. 如需去除RNA请自备RNase A溶液(100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl,1mM EDTA, pH值8.0);5. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。

1磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA。

试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。

特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时可以释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。

本试剂盒提取所得基因组DNA产物得量高、纯度好,适用于各种下游分子生物学实验,如:酶切、PCR、QPCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。

本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用,实现高通量操作。

【试剂盒说明】【自备仪器、耗材及试剂】仪器自动版研钵(或组织研磨机、匀浆机)、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。

手动版研钵(或组织研磨机、匀浆机)、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL离心管、离心管配套用磁力架、液氮。

【仪器自动版操作步骤】本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32个样本的提取。

磁珠法(新鲜组织冰冻组织)基因组DNA 提取详细步骤及方法

磁珠法(新鲜组织冰冻组织)基因组DNA 提取详细步骤及方法

磁珠法(新鲜组织/冰冻组织)基因组DNA 提取详细步骤及方法注意事项样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降;◆需要自备材料:异丙醇、磁铁或磁架、1.5mL离心管(最好低吸附的离心管);◆整个过程请勿离心,以免磁珠不可逆聚集而影响提取效果。

实验前准备磁珠用前一定要充分混匀;◆56℃加热源;◆使用前需在Buffer TGW I 中加入相应体积的无水乙醇。

1. 组织预处理:取动物组织10-50mg,于液氮中研磨破碎,然后将研磨后的组织转移到含有500 μl Buffer TGP 的离心管中,涡旋振荡混匀(若有匀浆机,组织液氮研磨后,在500 μl Buffer TGP中用匀浆机将组织彻底磨碎,效果更佳),12000rpm离心1min,弃上清,沉淀备用。

2. 裂解:在上述组织沉淀中加入500 μl Buffer TGL,移液器吹散沉淀,涡旋振荡数秒,室温放置5-10 min(期间不时颠倒混匀);3. 结合:加入500 μL 异丙醇,再加入磁珠悬浮液(MB) 30 μL(使用前充分重悬),颠倒混匀5分钟;将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。

4. 漂洗: (1) 将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer TGW 0,涡旋振荡5S,使磁珠重悬,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤一次。

(2) 将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer TGW I,涡旋振荡5S,使磁珠重悬,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。

重复该步骤一次,待磁珠完全吸附后吸弃液体(液体一定要弃尽,不然残留会影响下游实验),晾干2min。

5. 洗脱:将离心管从磁力架上取下加入50-100 μl Buffer EB ,涡旋振荡结合移液器吹打磁珠,使磁珠完全分散在液体中(一定要完全重悬磁珠,若未充分重悬会影响DNA得率),56℃ 放置5min(每隔2min振荡混匀重悬磁珠),置于磁力架上,将上清DNA转移至一新的离心管中,放入-20 ℃ 保存备用,保质期为2 年。

磁珠法ffpe组织基因组dna提取试剂盒

磁珠法ffpe组织基因组dna提取试剂盒

磁珠法FFPE组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads FFPE DNA Extraction Kit【目录号】FFDE-5010、FFDE-5030、FFDE-5100;【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃,蛋白酶K -20℃,其它组分室温;【试剂盒组成】【本卷须知】1)磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;2)使用前检查裂解液中是否出现沉淀,如有沉淀请置于37℃水浴温热至恢复澄清;3)蛋白酶K溶液长期不使用,请置于-20℃保存,融化后4℃保存,并尽快使用;4)本操作指南经公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。

【产品简介】本试剂盒适用于从石蜡包埋组织切片、石蜡块、或福尔马林等固定液中的组织样本中别离纯化基因组DNA。

试剂盒首先使用二甲苯去除样本中的石蜡或者福尔马林,基因组DNA在裂解液环境下得以快速释放,并结合于磁珠外表,经清洗、洗脱等步骤之后,得到高质量的基因组DNA,~1.9之间,完好性好,可直接应用于PCR模板、杂交、STR、以及SNP等下游分子生物学实验。

操作过程简便、快速。

本试剂盒可手动法进展操作,也可以配合核酸提取仪实现自动化操作。

【试剂盒说明】本试剂盒提取结果和组织类型、样本固定效果以及储存条件等因素亲密相关。

一般来讲,固定时间越久、保存时间越长的样本,基因组DNA受损程度越高。

制作FFPE样本时应注意:1〕组织在福尔马林中固定时间不宜过长,否那么DNA易交联和断裂;也不可以太短,否那么组织固定不充分,核酸易降解。

一般来讲,以固定时间在8~24h为宜;2〕确保样本在石蜡包埋以前脱水完全,并尽量去除残留的福尔马林。

【自备试剂】异丙醇、80%乙醇、二甲苯、PBS溶液〔pH值7.4〕、RNase A溶液(100mg/mL,分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。

【自备仪器和耗材】手动版:EP管、EP管用磁力架、金属浴、涡旋震荡仪。

百泰克石蜡组织基因组DNA自动提取试剂盒(磁珠法)说明书

百泰克石蜡组织基因组DNA自动提取试剂盒(磁珠法)说明书

北京百泰克生物技术有限公司BioTeke Corporation地址:北京海淀区留学人员创业园电话:************传真:************网址: Email:****************一般实验室使用,仅用于体外石蜡组织基因组DNA自动提取试剂盒(磁珠法)自动、快速提取石蜡组织基因组DNA目录号:AU7111116次使用手册2016年11月,第4版北京百泰克生物技术有限公司BiotekeCorporation一、试剂盒组成、储存、稳定性本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

注意事项1.为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,使用时可短暂离心后,加入1mL灭菌水溶解,-20℃保存,经常使用可以放在4℃。

2.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

3.核酸提取仪在运行前请先检查仪器是否正常,磁力架是否在水平位置。

4.深孔板在核酸提取仪中放置时要平稳,并用底部卡槽卡紧,避免晃动。

二、操作步骤1)将石蜡组织切成4~10um厚的薄片,用灭菌小镊子将切片放入1.5ml离心管中,组织的量在5-20mg左右(5-10片),加入400uL溶液B,90°C 水浴30min。

2)12,000rpm离心2min,石蜡会浮于液体表面,组织沉于管底,将除石蜡外的液体及组织转移至预装深孔板的第1、7列,加入20ul蛋白酶K。

裂解温度设置65°C,按照下面程序,点击“运行”开始实验,运行40分钟之后加入300ul无水乙醇。

步骤孔位名称等待时间(min)混合时间(min)磁吸时间(s)混合速度容积运行状态11裂解0400慢500否22转移磁珠0130慢300否31吸附核酸02060慢500否42洗涤0030中400否53漂洗0330中400否64漂洗0230中500否75漂洗0130中600否86洗脱21560中200否92弃磁珠000慢0否3)DNA可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,请放置在-20℃。

磁珠法基因组DNA 提取试剂盒 (细胞)

磁珠法基因组DNA 提取试剂盒 (细胞)

磁珠法基因组DNA 提取试剂盒(细胞)样本前处理:细胞用PBS洗两次后,6000rpm/min 离心3min,弃上清,加入500ul Buffer CGP重悬沉淀,12000rpm/min离心1min,弃上清,取沉淀备用。

2.裂解结合:在细胞沉淀中,加入500μLBuffer CGL,室温放置5-10min,再加入500μl异丙醇和30ul磁珠悬浮液(MB) (使用前充分重悬),颠倒混匀,室温放置5min(期间不时颠倒混匀);将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。

3.漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW 0,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤1次。

(2)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW I,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。

重复该步骤一次,待磁珠完全吸附后吸弃液体(液体一定要弃尽,不然残留会影响下游实验),晾干2min。

实验准备56°C加热源磁珠用前一定要充分混匀;使用前需在Buffer CGW I中加入相应体积的无水乙醇。

4.洗脱:将离心管从磁力架上取下加入50-100μl Buffer EB ,涡旋振荡结合移液器吹打,充分吹散磁珠(一定要完全吹散磁珠,若未充分重悬会影响DNA 得率),56°C 放置5min(每隔2min振荡混匀重悬磁珠),置于磁力架上,将上清DNA转移至一新的离心管中,放入-20 °C保存备用,保质期为2 年。

纯度效果评价通过测定洗脱液中DNA的A260来确定RNA产量,通常情况下A260值在0.1~1.0之间数据比较可信。

如果不在此范围内,请稀释或浓缩样品调整;通过测定洗脱液中RNA的A280和A230来确定DNA纯度,A260/A280比值在1.8-2.0之间,小于1.8表示可能有蛋白质污染。

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒概述本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA 具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。

使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。

适用范围适用于从各种革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌等中提取基因组DNA,适用于自动化核酸提取平台。

试剂盒包装及组成试剂盒组成数量Buffer A20 ml×1瓶Buffer B 1 ml×1瓶Buffer C 1 ml×1瓶磁珠结合液25 ml×1瓶洗涤液Ⅰ50 ml×1瓶洗涤液Ⅱ30 ml×1瓶,使用前加入80 ml无水乙醇,混匀洗脱液10 ml×1瓶使用说明书1份注意事项1. Buffer A在使用前在温浴设备中温育至白色沉淀完全溶解后使用。

2.如果下游实验对RNA污染比较敏感,可在裂解中第⑶步加1µl RNaseA(10mg/ml)。

3. Buffer B 4℃保存,可能会析出白色粉末状沉淀,使用前混合均匀,不影响使用效果。

4.磁珠结合液用前一定要充分混匀。

5.溶菌酶用缓冲液稀释,缓冲液为(20mMTris,pH8.0;2mMNa2-EDTA;1.2%TritonX-100 )。

6.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数(洗脱次数最好不要超过3次)。

操作方法1.裂解⑴取1ml过夜培养的菌液至1.5ml EP管中,12000 rpm离心1min,尽量吸净上清。

⑵如果样品为革兰氏阳性菌(葡萄球菌除外,葡萄球菌可直接按照阴性菌步骤操作,加入适量溶葡萄球菌酶裂解效果更好)可加入25µl20mg/ml的溶菌酶(客户自备)反复吹打使菌体充分悬浮,37℃消化30~60min(注:消化时间取决于所用的菌种),如果样品为革兰氏阴性菌可直接进行步骤⑶。

游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书

游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书

游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书【产品名称】通用名称:核酸提取或纯化试剂商品名称:游离DNA 提取试剂盒(磁珠法)英文名称:Magbind CFDNA Kit 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的游离DNA (Free circulating / Cell-free DNA)提取方法,适用于从血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA 。

纯化得到的离DNA 质量稳定、可靠,可用于下游常规实验。

 该试剂盒可与转移液体法的核酸提取仪配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。

【预期用途】 样品裂解后,在高盐存在时,DNA 结合于硅基包被的磁珠表面,漂洗后,高纯度DNA 被洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。

DNA 得率与样品的类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。

【检验原理】50次/盒;400次/盒【包装规格】版本号:11/2020【样本要求】1.适用标本类型:新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA 或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、淋巴细胞、无细胞体液等样本。

2.标本处理与保存:血清及血浆样本按常规方法制备,新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存,避免反复冻融。

3.样本运输:应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。

【检验方法】实验前准备:向蛋白酶K 中加入指定用量的蛋白酶K 保存液使其溶解,终浓度为20 mg/ml ,-20℃保存。

1.向1.5 ml 离心管中加入20 μl 蛋白酶K 溶液。

2.向上一步的离心管中加入200 μl 血清/血浆样品。

注意:冻存样品需提前在4℃冰箱中放置使其溶化。

溶化过程中反复颠倒样品储存管使其混匀。

3.向上一步的离心管中加入200 μl 裂解缓冲液,涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃、1300 rpm 的Thermomixer 上振荡裂解10分钟。

注意:1)如无Thermomixer ,需将离心管放于56℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟,期间每隔2分钟涡旋振荡5秒钟。

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组织基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)
使用说明书(Cat#Yu-TD02-1)
【产品介绍】
组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系,能从样品中分离纯化高质量DNA。

在一定条件下,磁珠表面修饰的基团高效吸附目的DNA,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、无毒、便利,提取的DNA质量稳定、纯度高。

纯化后的DNA适用于多种后续实验。

本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。

【产品特点】
1. 效率高:DNA提取得率高,操作简便。

2. 安全、无毒害:整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质,提取环境更加安全。

3. 高纯度:OD260/230在1.5左右,OD260/280在2.0左右。

可直接用于各种分子生物学实验。

【试剂盒组成】
【规格】50T/盒
【自备试剂】无水乙醇,异丙醇
【贮藏与有效期】
裂解吸附液和Buffer AW1必须室温(15-25℃)避光保存;磁珠室温保存;其他所有试剂室温保存,有效期为1年。

【注意事项】
1、Buffer AW1使用前,加入18mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为60%。


2、Buffer AW2使用前,加入21mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为70%。


3、磁珠使用前必须充分混匀。


4、组织最好置于组织核酸(DNA/RNA)保存液(Cat#Yu-TP01)或液氮中保存。

【操作步骤】
1、样本的处理
1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后,使液氮充分挥发。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨。

以下进入步骤2。

1.2、组织保存液中保存的样本取出在组织保存液中保存的组织,加入1mL无水乙醇洗涤组织两次。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨。

以下进入步骤2。

2、吸取400µL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中,加入5µL蛋白酶K,60℃1500rpm10分钟。

3、取出EP管,加入250µL异丙醇和10µL混匀的磁珠,闭盖,充分混匀。

室温1500rpm振荡10min。

4、取出EP管,瞬时离心,将EP管放于磁力架上,吸附磁珠4分钟。

5、在磁力架上,打开EP管盖,吸弃液体,保留磁珠。

6、加入600µL Buffer AW1,闭盖。

从磁力架上取下EP管,充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。

注:可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒,使EP管壁上的磁珠完全分散至洗液中。

7、将EP管放回磁力架,吸附磁珠3分钟至液体清澈(吸附磁珠2分钟后,颠倒磁力架3次,使EP管盖上残留的磁珠被充分回收)。

打开EP管盖子,吸弃液体,保留磁珠(需吸干EP管底和管盖中的残留液体)。

注:由于各个实验室磁力架磁力不尽相同,吸附时间可以延长,直至液体清澈。

8、加入600µL Buffer AW2,闭盖。

从磁力架上取下EP管,充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。

注:可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒,使EP管壁上的磁珠完全分散至洗液中。

9、将EP管放回磁力架,吸附磁珠2分钟至液体清澈(吸附磁珠1分钟后,颠倒磁力架3次,使EP管盖上残留的磁珠被充分回收)。

打开EP管盖子,吸弃液体,保留磁珠(需吸干EP管底和管盖中的残留液体)。

注:由于各个实验室磁力架磁力不尽相同,吸附时间可以延长,直至液体清澈。

10、加入600µL无水乙醇,闭盖。

从磁力架上取下EP管,充分混匀使磁珠完全分散至无水乙醇中。

注:可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒,使EP管壁上的磁珠完全分散至无水乙醇中。

11、将EP管放回磁力架,吸附磁珠1分钟至液体清澈(吸附磁珠30秒后,颠倒磁力架3次,使EP管盖上残留的磁珠被充分回收)。

打开EP管盖子,吸弃液体,保留磁珠(需吸干EP管底和管盖中的残留液体)。

注:由于各个实验室磁力架磁力不尽相同,吸附时间可以延长,直至液体清澈。

12、开盖,37℃金属浴晾干3分钟。

13、在EP管中加入50-100µL洗脱液,充分吹打混匀磁珠。

闭盖,50℃金属浴1500rpm振荡孵育5min。

注:①洗脱液的量可以根据需要调整。

②50℃振荡洗脱后不能离心收集磁珠,离心会导致EP管中的残留物进入洗脱液,从而抑制后续实验。

14、将EP管放入磁力架上,吸附磁珠2分钟至液体清澈。

打开盖子,吸取洗脱液转移至新的EP管(RNase-free)中。

洗脱液即可直接用于下游实验,也可-80℃保存备用。

注:①提取过程中必须全程使用RNase-free EP管和Tip头。

②为了避免磁珠分离后的洗脱液中微量磁珠的残留,洗脱液转移至新的EP管后,可以10,000×g 离心1分钟,以彻底去除磁珠。

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