真菌DNA提取试剂盒使用说明书
真菌DNA提取试剂盒
真菌DNA提取试剂盒Fungal DNAout货号:M090091产品及特点本产品用于快速提取各种真菌的基因组DNA，其中包括酵母（如：Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris）、动物病原真菌（如：Candida albicans、Aspergillus niger）和植物病原真菌（如：Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum）。
本产品的主要特点是：1.DNA纯净，OD260/280一般都在1.9左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
DNA 大小在50 Kb左右。
2.操作简单，整个过程约30分钟左右，比大多数同类产品短。
3.液体培养物处理量在0.1-3 mL 之间，真菌菌丝、孢子、子实体的处理量在0.1-0.5 g之间。
4.价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
5.安全无毒，不需要使用氯化苄等有毒物质，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分10次包装成份（CAT：M090091）溶液A 10 mL溶液B 10 mLRNase A溶液150 uL使用手册1份运输及保存常温运输，4℃保存，有效期一年。
使用方法1.先将全部RNase A溶液全部加入到50 mL溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.称取0.1-0.5g湿的真菌菌丝、孢子、子实体或0.1-3 mL液体培养物离心得到的沉淀，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5 mL 塑料离心管中。
注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA会吸附在表面，影响得率。
如果菌丝或子实体等已经十分干燥，则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍；如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA，则需要先去除红细胞等成份)，请按相关的标准方法先将该真菌预纯化出来，以沉淀物的形式放液氮研磨。
真菌基因组NA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
真菌基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN41目录编号包装单位DN4101 50次DN4102 100次DN4103 200次适用范围：适用于快速提取真菌组织细胞基因组DNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次RNase A(10mg/ml) -20℃250 μl500 μl 1 ml 缓冲液AP1 室温25 ml 50 ml 100 ml 缓冲液AP2 室温10 ml 20 ml 40 ml缓冲液AP3/E 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇漂洗液WB 室温15 ml 25ml 50ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 20 ml 40 ml 吸附柱AC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.裂解液AP1、AP3/E低温时可能出现析出和沉淀，可以在65℃水浴几分钟帮助重新溶解（AP3加入乙醇前可加热，加入乙醇后不可加热），恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统，适合于从真菌组织细胞中快速简单地提取基因组DNA。
可在30分钟内完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的真菌样品DNA的纯化工作。
提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀，并能快速高效地去除多糖类、酚类和酶抑制物等杂质，纯化的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。
新鲜或干燥的真菌组织（细胞）磨碎后经裂解液裂解；蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除；然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
CTAB法抽提真菌DNA（五篇）
CTAB法抽提真菌DNA（五篇）第一篇：CTAB法抽提真菌DNA提取液：1M Tris.HClpH8.010ml 0.5M EDTApH8.04ml CTAB2g NaCl8.176g 巯基乙醇2ml（使用时加入）加70ml ddH2O溶解定容至98ml步骤：1.在液氮中研磨菌丝体，直到菌丝体研磨成解决白色细粉2.将菌丝体装入1.5ml离心管中，加入600μlCTAB提取液，于62-65℃水浴中加热1h，间或振荡数次3.加入600μlTris饱和酚：氯仿：异戊醇（25:24：1），【现用现配，按比例混匀后再加入管中】，温和振荡几次，然后在12000rpm 下离心15分钟4.取上清至新的离心管中，然后加入1/10体积的3M/L NaAc，1倍体积的异丙醇，轻柔混匀，在-20℃下静置30-60分钟，在12000rpm下离心5分钟5.离心后去上清，沉淀用70％乙醇润洗2次6.加入适量的TE缓冲液溶解沉淀，7.加入1μl RNase（10mg/ml）37℃水浴1小时8.加入1倍体积的饱和酚：氯仿：异戊醇（25:24：1），【现用现配，按比例混匀后再加入管中】，温和振荡几次，然后在12000rpm下离心15分钟，取上清至新的离心管9.加入1倍体积的氯仿，温和振荡几次，在12000rpm下离心15分钟，取上清至新的离心管中10.加入2倍体积无水乙醇，-20℃静置30分钟以上，8000rpm离心12分钟11.去除上清，沉淀用70％乙醇润洗2次，加入100μl TE缓冲液溶解沉淀，放入-20℃存放，待电泳检测第二篇：血液标本抽提DNA抗凝全血中提取DNA准备：配制80%异丙醇和70%乙醇各1ml备用。
选择2ml的离心管。
血液的体积为2ml。
先向2ml的离心管中加入1ml的血液。
后加入1ml的buffer MG-A，剧烈摇晃20次；10000xg 离心30s，缓慢倒掉上清。
再加入1ml的血液，再加入1ml的buffer MG-A，剧烈摇晃20次；10000xg 离心30s，缓慢倒掉上清。
真菌基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
真菌基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN41目录编号包装单位DN4101 50次DN4102 100次DN4103 200次❖适用范围：适用于快速提取真菌组织细胞基因组DNA❖试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次RNase A(10mg/ml) -20℃250 μl500 μl 1 ml 缓冲液AP1 室温25 ml 50 ml 100 ml 缓冲液AP2 室温10 ml 20 ml 40 ml缓冲液AP3/E 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇漂洗液WB 室温15 ml 25ml 50ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 20 ml 40 ml 吸附柱AC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
◆TRIpure Reagent 抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpure Reagent 抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpure Reagent 抽提指南◆目录号RP02储存事项:1.裂解液AP1、AP3/E低温时可能出现析出和沉淀，可以在65℃水浴几分钟帮助重新溶解（AP3加入乙醇前可加热，加入乙醇后不可加热），恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍：该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统，适合于从真菌组织细胞中快速简单地提取基因组DNA。
可在30分钟内完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的真菌样品DNA的纯化工作。
提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀，并能快速高效地去除多糖类、酚类和酶抑制物等杂质，纯化的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。
细菌基因组DNA提取试剂说明书
细菌基因组DNA提取试剂盒使用说明本试剂盒可用于革兰氏阴性和阳性菌的基因组DNA提取，由细菌重悬液、裂解液、蛋白沉淀液以及DNA溶解液组成。
可从1-5ml菌液中提取基因组DNA。
整个提取过程不超过45分钟。
提取过程包括：1菌液离心，重悬。
2裂解菌体，释放基因组DNA。
3盐析沉淀蛋白，分离DNA。
4异丙醇沉淀脱盐并浓缩。
5 70%乙醇清洗，晾干并用DNA溶解液溶解。
本试剂盒采用复合裂解液，其中含有抑制DNA酶的成分，在加热（65°C）状态下，可保证完整的细菌基因组DNA的充分裂解释放，本试剂盒即可提取异丙醇沉淀时，罕见浑浊的蛋白质杂质的共沉淀。
提取的基因组可用于PCR扩增、内切酶消化以及膜杂交等。
一、试剂盒组成（本试剂盒提供的组份, 至少可提取100份1-5ml菌液基因组DNA的纯化，每种组份均有足够的富余量）1．复合裂解液：30ml×1瓶。
2．蛋白沉淀液：300ml×1瓶。
3．DNA溶解液：20ml×1瓶。
4．操作说明书一份。
二、本试剂盒未提供，须用户自备的试剂为：异丙醇，70%乙醇（国产分析纯）。
三、提取操作：1．菌液离心：取革兰氏阴性菌菌液1-2ml；或者革兰氏阳性菌菌液2-5ml，1000rpm离心1分钟。
2．加入细菌重悬液100ul，震荡使菌体重悬。
3．将复合裂解液置65°C水浴加热，使结晶成分溶解，每个细菌重悬液中分别加入300ul的复合裂解液。
4．混璇器震荡混匀10秒，置65°C水浴中反应10分钟（革兰氏阴性菌），20分钟（革兰氏阳性菌）。
5．各管中加入300ul蛋白沉淀液。
上下颠倒5-6次使两者混匀。
6．13000-16000×g, 离心3-5分钟。
7．将上清液转移至新的离心管中（注意：由于有些细菌含有多糖或者脂蛋白成分，离心后会出现细胞成分上浮的情况，此时取漂浮层下的均一透明液体），加入等体积异丙醇，此时可见透明的絮状物，混匀后离心，同步骤5，吸去上清。
试剂盒DNA提取详细操作步骤
一、试剂盒打开后需要准备的工作1、ProteinaseK（蛋白酶K）的溶解①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管，每管100u l〜200ul③将分装好的ProteinaseK放入-20°C冰箱中保存，使用期限为12个月2、组织抑制剂（InhibitorRemovalbfer）的调配加入20ml无水乙醇（absoluteethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩3、洗液（washbuffer）的调配加入80ml无水乙醇（absoluteethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩二、组织DNA提取（试剂盒）1、组织样品处理与消化①将采集来的样品剪碎（WO.lcm）洗净保存液。
②加入组织破解液Tissue-lysis200ul蛋白酶K40ul然后放入55C水浴锅内3个小时使其充分消化。
2、DNA提取①在消化好的组织样品中加入结合液bindingbuffer200ul然后放入70°水浴锅中10分钟。
②再加异丙醇lOOul混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g—分钟。
③倒掉底液，加500ul组织抑制剂InhibitorRemoval然后离心倒掉底液④加洗液washingbuffer500ul离心（洗液加两次）⑤在70C预热ElutionBuffer，然后将洗好的柱体下部分丢掉，换新的离心管加入ElutionBuffer200ul溶解10分钟离心保留底液放-20C保存。
三、细胞DNA的提取（试剂盒）1、组织样品处理与消化①将带有培养基的样品用PBS清洗干净8000rpm/1min离心，倒掉上清②加PBS200ul振荡摇匀使之样品成为单个细胞的悬浊液③加200ulBindingBuffer，40ul蛋白酶K混合均匀放入70C水浴锅内消化10分钟。
2、DNA提取①加异丙醇lOOul混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g—分钟。
真菌检测试剂使用说明书
【产品名称】 通用名称：真菌(1-3)--D 葡聚糖检测试剂盒（光度法） 英文名称： Test Kit for the Detection of Fungus (1-3)- -D-Glucan (Photometric Assay) 【包装规格】单人份/盒、两人份/盒、6 人份/盒、10 人份/盒、20 人份/盒 【预期用途】用于人血液(1-3)--D 葡聚糖的定量检测，为临床诊断深部真菌感染以及治疗预 后提供参考依据，也可用于真菌相关疾病的医学研究。 【检测原理】在实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1-3)--D 葡聚糖能够特异性地激活本 试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。利用(1-3)--D 葡聚糖标准 品建立-D 葡聚糖生物效应与透光度关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1-3)--D 葡 聚糖含量。 【主要组成成份】试剂盒由(1-3)--D 葡聚糖检测试剂、试剂复溶液、采血瓶以及血浆稀释液 组成。 【储存条件及有效期】2~10℃避光贮存（切勿冻结） ，有效期 2 年。 【适用仪器】LKM-02 系列动态试管检测仪或具有相同功能的仪器。 【样品要求】 1. 血浆的制备： 用无菌无-D 葡聚糖的采血器具采集受试者静脉血 1~2mL， 注入采血瓶 中，将采血瓶以 400g 离心 10 分钟，取出后置 2-8℃冰箱备用；若在 4 小时内不用， 可分离出血浆置-20℃以下保存 30 天。 注意：在采血以及分离血浆过程应避免样品发生溶血。溶血的样品对检测有干扰， 不能使用。 2. 供试品溶液制备： 取已制备的血浆 0.1mL 加入血浆稀释瓶中， 混匀后置 75℃10 分钟， 即为 1:10 稀释的血浆供试品溶液。 若不立即使用， 应把血浆稀释瓶移至 2~8℃冰箱存 放。 【检验方法】 （以两人份试剂盒使用为例） 1. 取试剂复溶液 1 支，开启备用。 2. 取-D 葡聚糖检测试剂 1 支，加入 0.25mL 试剂复溶液，轻轻摇匀，得试剂溶液备用。
PH0210 细菌基因组DNA提取试剂盒实验操作手册
保存
本试剂盒在室温（25℃左右）干燥条件下，可保存 1 年；更长时间的保存可置于 2–8℃。2–8℃保存条件下，若溶液产生沉 淀，应在使用前置于 37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。蛋白酶 K、溶菌酶和 RNaseA 收到后-20℃保存。
试剂组分
Component 缓冲液 GA 缓冲液 GB 去蛋白液 GD(浓缩液) 漂洗液 GW(浓缩液) 洗脱缓冲液 EB 蛋白酶 K（20mg/ml） 溶菌酶（5mg/ml） RNase A（10mg/ml） 吸附柱 CG 收集管（2 ml） 说明书 50T 15 ml 15 ml 18 ml 25 ml 15 ml 1 ml 1ml 1ml 50 个 50 个 1份 100T 30 ml 30 ml 36ml 25 ml 15ml 2×1 ml 2×1 ml 1 ml 100 个 100 个 1份 Storage 室温 室温 室温 室温 室温 -20℃ -20℃ -20℃ 室温 室温 ——
DNA 浓度及纯度检测： 基因组 DNA 片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫
外分光光度计检测浓度与纯度。 可配制 0.8-1.0％琼脂糖凝胶， 使用λ/HindIII 判断基因组的大小， 完整的基因组大小应在 23kb 以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280 比值应为 1.7–1.9 之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗 脱，比值可能偏低，但并不表明 DNA 纯度不高。
操作步骤： 如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1. 取细菌培养液 1–2 ml，10,000 g 离心 1 分钟，尽量吸净上清；向细菌沉淀中加入 180μl EB，旋涡混匀后加入 18μl 溶