电化学发光免疫项目介绍和临床应用
化学发光免疫分析技术

• 化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而 对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清 和辣根过氧化物(HRP)加入到固相包被有抗体的白色不 透明微孔板中,血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结 合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的 游离成分。然后,加入鲁米诺Luminol发光底液 ,利用化 学反应释放的自由能激发中间体,从基态回到激发态,能 量以光子的形式释放。此时,将微孔板置入分析仪内,通 过仪器内部的三维传动系统,依次由光子计数器读出各孔 的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学 模型进行定量分析。最后,打印数据报告,以辅助临床诊 断。
血清FT3和FT4降低: ⑴甲减病人两者皆下降,但轻型甲减、甲减初期多 以FT4下降为主;⑵低T3综合征仅有FT3下降; ⑶某些药物,如苯妥英 钠、多巴胺、糖皮质激素也可使FT3和FT4降低。
• T3、T4均升高:高TBG血症、甲亢、甲状腺激素不敏感综合征。
化学发光免疫分析
一、化学发光免疫技术的概念 二、化学发光免疫分析基本原理 三、化学发光免疫分析的类型 四、临床应用 五、发展与展望
一、化学发光免疫技术的概念
化学发光免疫技术:化学发光分析是根据化学反应统与免疫反应相结合,用化学发光相关的物质标记抗体或抗原,与 待测的抗原或抗体反应后,经过分离游离态的化学发光标记物,加入 化学发光系统的其它相关物产生化学发光,进行抗原或抗体的定量或 定性检测。
磁微粒模式图
特点 – 抗原和抗体结合与未结合 部分的易分离
Y
3.2、化学发光酶免疫分析
化学发光酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗 体,在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成固 相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物 (发光剂),酶催化和分解底物发光,由光量子阅读系统接收,光 电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至 计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。
化学发光免疫分析技术在临床诊断中的应用

化学发光免疫分析技术在临床诊断中的应用化学发光免疫分析技术是一种基于特定抗体和荧光标记物的检测方法,通过测量样品中的荧光强度,可对特定生物分子(如蛋白质、激素、抗体等)进行定量检测。
这种技术广泛应用于医学领域,特别是在临床诊断和药物研发方面,发挥着重要的作用。
一、化学发光免疫分析技术的原理与优势化学发光免疫分析技术是基于光致化学反应的原理,当样品中存在特定生物分子与荧光标记物结合时,激发荧光标记物时产生能量,并在光致化学反应的过程中释放荧光。
通过检测荧光信号的强度,可以测量样品中特定生物分子的含量。
与传统的ELISA(酶联免疫吸附测定法)相比,化学发光免疫分析技术具有很多优势。
首先,其检测灵敏度高,可以检测到非常低浓度的生物分子,能够提高疾病诊断的准确性。
其次,化学发光免疫分析技术具有高度的特异性,可以仅检测到特定的生物分子,而不受其他交叉反应的影响。
此外,该技术快速、可靠,自动化程度高,具有批量分析的能力,大大提高了分析效率和精度。
二、化学发光免疫分析技术在临床诊断中的应用非常广泛,例如:1. 甲状腺功能检测甲状腺功能检测是临床常用的一项检查,常用T3、T4、TSH等指标来确定甲状腺功能的异常。
化学发光免疫分析技术可以用来准确测量这些指标的含量,从而确定甲状腺功能异常的类型和严重程度。
2. 肝功能检测肝功能检测可通过检测ALT、AST、ALP、GGT等多种指标来确定肝功能异常。
使用化学发光免疫分析技术,可以快速、准确地测量这些指标的含量,以及检测血清中的乙型肝炎病毒等。
3. 细胞因子水平检测细胞因子是调节免疫反应的重要分子,其水平的异常会导致许多免疫性疾病的发生。
化学发光免疫分析技术可以用来检测细胞因子的含量,从而确定免疫反应的程度和类型。
4. 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测是诊断肿瘤的重要手段之一,常用于癌症的早期筛查和治疗效果监测。
化学发光免疫分析技术可以用来检测血液或尿液中特定肿瘤标志物的含量,从而提高癌症的检测准确率和治疗效果监测的精度。
(整理)电化学发光检测项目及其临床应用

电化学发光检测项目及其临床应用一、甲状腺功能甲腺原氨酸(T3, triiodothyronine)T3是甲状腺激素对各种靶器官作用的主要激素。
T3(3、5、3’-三碘酪氨酸)主要在甲状腺以外,尤其是在肝脏由T4经酶解脱碘生成。
因此,血清T3浓度反映出甲状腺对周边组织的功能甚于反映甲状腺分泌状态。
T4转变成T3的减少会导致T3浓度的下降。
见于药物的影响,如丙醇、糖皮质类固醇、胺碘酮等以及严重的非甲状腺疾病(NTI),称为“T3低下综合征”。
与T4一样,99%以上的T3与运输蛋白质结合,但T3的亲和力要低10倍左右。
T3测定可用于T3-甲亢的诊断,早期甲亢的查明和假性甲状腺毒症的诊断。
甲状腺素(T4, thyroxine)T4是甲状腺分泌的主要产物,也是构成下丘脑-垂体前叶-甲状腺调节系统完整性不可缺少的成份。
对合成代谢有影响作用。
T4由二分子的二碘酪氨酸(DIT)在甲状腺内偶联生成。
T4与甲状腺球蛋白结合贮存在甲状腺滤泡的残腔中,在TSH的调节下分泌释放。
血清中99%以上的T4以与其它蛋白质结合的形式存在。
由于血清中运输蛋白质的浓度易受外源性和内源性作用的影响,因此,在检测血清T4浓度的过程中需考虑到结合蛋白质的状况。
如果忽略这一点,结合蛋白质浓度的变化(如怀孕期、服用雌激素或者患肾病综合征等),会导致反映甲状腺代谢状况检测的错误结果。
T4测定可用于甲亢、原发性和继发性甲状腺功能减退的诊断以及TSH抑制治疗的监测。
游离T3(FT3- free triiodothyronine)三碘甲腺原氨酸(T3)是血清中的甲状腺激素之一,起调节代谢作用。
测定该激素的含量对鉴别诊断甲状腺功能是否正常、亢进或低下有重要意义。
绝大多数的T3与其转运蛋白质(TBG、前白蛋白、白蛋白)结合,fT3是T3的生理活性形式。
fT3测定的优点是不受其结合蛋白质浓度和结合特性变化的影响。
因此不需另加测定结合参数(T-uptak e,TBG)。
电化学发光法术前检测项目临床意义

电化学发光法术前检测项目临床意义1、乙肝表面抗原(HBsAg)HBsAg是乙肝病毒颗粒(HBV)的外壳成份,为一条大小不一的多肽。
HBsAg决定簇a是引起免疫反应的主要成分,普遍存在于HBsAg颗粒上。
HBsAg是首选的免疫学标志物,在临床症状出现前的数天或数周就已存在。
罗氏电化学发光法第二代乙肝表面抗原试剂能检测目前临床出现的13种乙肝病毒变异株及其基因突变型。
乙肝表面抗原临床应用:①急、慢性乙肝的诊断。
②诊断HBV感染和预防HBV通过血制品传播。
③急、慢性乙肝患者的病程监测和抗病毒疗效观察。
④用作产前检查的实验室项目之一,以尽早预防HBV的母婴传播。
2、丙型肝炎抗体丙型肝炎病毒抗体1989年首次被鉴定出,是在世界范围内继发感染和接触性感染中最常见的非A非B型肝炎发生的原因。
输血是其最主要的感染途径。
丙型肝炎病毒感染通常导致慢性肝炎和肝硬化,并且与肝细胞癌的发生有密切联系。
常见的肝外证据表明同混合性冷球蛋白血症和其他的风湿性疾病有关。
丙型肝炎病毒是单股正链RNA包膜病毒。
被分在已有的基因家族黄病毒属中。
染色体由编码3000个多肽氨基酸的 9.5kb拷贝组成,这些多肽为结构和非结构区。
同其它的RNA病毒一样, HCV染色体在复制期有显著的不均一性。
至少有11种基因型、多种亚型和病毒变体在世界范围被报导。
特异基因型的感染能引发严重疾病和影响治疗效果。
罗氏电化学发光法Anti-HCV抗体检测可单独使用,或和其他检测(如HCV-RNA)联合使用,检测个体是否感染丙型肝炎病毒和筛选被HCV污染的血液和血制品。
3、爱滋病抗原抗体复合试验(HIV combi)人类免疫缺陷病毒(HIV)是引起获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的病原体,属于逆转录病毒家族。
HIV能通过被污染的血液和血制品传播,也可通过性接触传播,婴儿在出生前、出生时以及出生后也能经受HIV感染的母亲传染。
迄今为止发现了两型人类免疫缺陷病毒,分别为HIV-1和HIV-2。
电化学发光免疫传感器的研究及应用现状

电化学发光免疫传感器的研究及应用现状摘要:电化学发光免疫技术是将高灵敏度的电化学发光和高特异性的免疫反应相结合的一种交叉学科研究的成果。
电化学发光主要应用在免疫系统、生物酶等方面的研究,而电化学发光免疫传感器在临床领域中有较明显的成果。
因此,本文将从电化学发光免疫传感器的研究和应用现状两个方面,对电化学发光免疫传感器进行进一步的研究,尤其在医学方面能够有更多突破,实现在更多领域中的应用。
关键词:电化学发光;免疫传感器;研究;应用现状;一、电化学发光免疫传感器的概念(一)电化学发光的概念电化学发光即电致化学发光,是一种通过在电极上施加一定电压,用来引发物质在电极表面进行电化学反应,反应产生的能量激发发光物质由基态迁移到激发态,处于激发态的物质不稳定会返回基态,在这一过程中会伴随光信号产生,产生光信号后通过光/电转换器,将光信号转换成电信号,来实现对目标物的检测。
ECL分析法不仅具有仪器简单,灵敏度高,还具有试剂用量少、时空可控性强等优点,现阶段,电化学发光技术已广泛应用于免疫分析、生物分子和其他生物分子检测中。
(二)免疫传感器的概念免疫传感器是一种将高特异性的免疫反应和高超的物理转换器结合起来的一种分析类器件。
由于免疫反应具有强的特异性,加之物理转换器的高的灵敏度,使得免疫传感器也成为一种有效检测样品的方法,受到人们的热切关注。
目前,免疫传感器也已经广泛地应用于临床医学检测等领域。
(三)电化学发光免疫传感器的概念电化学发光免疫传感器是一种将电化学发光与免疫传感器结合起来的一种具有很高免疫特性的一种装置。
利用电化学发光的高灵敏度的传感技术,再结合特异性免疫反应,最终可以达到一种对临床中微量物质进行定量的检测。
二、电化学发光免疫传感器的研究及应用电化学发光免疫传感器是将抗体或者抗原通过一定方式负载在电极上作为识别探针,当抗体与抗原发生特异性反应后,其产生的复合物与电化学发光信号之间建立一定关系,然后通过光电转换器,将光信号转换成电信号,从而对目标物进行检测。
电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用研究

电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用研究目的:分析电化学发光免疫分析的方法和医学中的应用情况。
方法:对AFP 含量进行电化学发光免疫分析与放射免疫分析,做出线性评价、精密度评价与回收实验,并进行对比,运用两种方法对60例患者血清标本的AFP含量进行平行检测,然后进行相关性分析。
结果:电化学发光免疫分析法的重复率明显优于放射免疫分析。
电化学发光免疫分析法的回收率明显优于放射免疫分析。
数据差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:电化学发光免疫检测血清甲胎蛋白的精确度与准确性都要优于放射免疫分析法,值得临床推广与运用。
标签:电化学发光免疫;临床运用;放射免疫;检验电化学发光免疫分析出现于自20世纪90年代,是一类化学发光免疫分析技术,集纳米微粒子技术、电子发光技术、抗原-抗体免疫反应、生物素-亲和素系统以及电磁场分离整合设计的自动化标记免疫分析系统,结合了电化学发光与免疫测定,具有化学发光与电化学两个过程,磁珠微球当做固相载体,发光物质为三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+,电极进行激发,三丙胺参与循环反应,稳定快速的发光,检测的结果可靠、稳定,具有的准确度与精密度要高于酶联免疫法[1]。
发光检测灵敏度高,不具有人为操作误差的影响。
1材料与方法1.1材料选取60例患者血清标本,18份标本血清甲胎蛋白浓度正常,42份标本血清甲胎蛋白的浓度超出正常的范围。
通过Roche Elecsys2010全自动化学发光免疫分析仪器与SN-697型自动双探头放射免疫γ计数器进行检验。
1.2方法放射免疫分析法运用甲胎蛋白宽范围放射免疫分析测定盒,电化学发光免疫分析运用的检测试剂为Elecsys2010配套AFP定量检测试剂盒,按照试剂说明书进行检测操作。
2结果2.1 通过NCCLS精密度评价方案,运用电化学发光免疫分析与放射免疫分析法对高浓度、中浓度、低浓度的血清甲胎蛋白质控血清作重复性实验。
实验结果显示,电化学发光免疫分析与放射免疫分析法都具有较好的重复性,而电化学发光免疫分析的CV值对比放射免疫分析法相对较小。
电化学发光各项目临床意义

AFP
AFP作为诊断胎儿异常,畸行及某些恶性 肿瘤,肝病的可靠依据,
原发性肝癌最好的肿瘤标志物之一 1.70%肝细胞癌AFP增高,多持续性升
高,用于原发性肝细胞癌的诊断与鉴别
AFP
2.睾丸癌:精原细胞瘤很少增高,其它 肿瘤70%升高,而YOL-SAC(卵黄囊) 肿瘤100%升高
3 .卵巢内胚窦癌,AFP明显升高,用于妇 产科的疾病诊断,疗效观察,预后判断
定性用于妊娠早期诊断 定量用于异位妊娠的诊断,完全或不全流
产鉴别,绝育效果评价; 用于胎盘滋养层肿瘤筛查,诊断和疗效监
测
HCG
增高: 葡萄胎,恶性葡萄胎,绒毛膜上皮细胞癌,
精原细胞瘤,畸胎瘤,异位HCG分泌肿 瘤(如胃癌,胰腺癌,肺癌,结肠癌,肝 癌,卵巢癌,消化系统类癌等) 降低:流产,异位妊娠等。
FT3
FT4
增高
1. 弥漫性或结节性甲状腺功能亢进症,自 主高功能性腺瘤(毒性甲状腺结节),亚 急性甲状腺炎或无痛性甲状腺炎的急性期。 T3型甲亢TT4和FT4正常,TT3和FT3增 高。甲亢治疗后FT3正常化迟于FT4, 疾病 加重时则相反,FT3升高早于 FT4。FT3 是反映甲状腺功能亢进和T4代谢的敏感指 标
4.某些胎儿畸形,羊水中的AFP也可升 高,
5.部分肝炎肝硬化患者AFP亦可一过性 升高
Hale Waihona Puke CEA CEA最初发现于结肠癌和胎儿肠组织中, 故名癌胚抗原
也是正常胚胎组织所产生的成分,出生后 逐渐消失,或仅存极微量。当细胞癌变时, 此类抗原表达可明显增多。
CEA
升高
1. 常见于肠癌、胰腺癌、胃癌、小细胞肺癌、 乳腺癌、甲状腺髓样癌,此外,血清CEA水平 与大肠癌的分期有明确关系,越晚期的病变, CEA浓度越高。97%的健康成人血清CEA浓度 在2.5ng/mI以下。 原发性结肠癌患者CEA增 高占45-80%。除原发性结肠癌以外,腺胰癌、 胆管癌、胃癌。食道癌、腺癌、肺癌、乳腺癌 和泌尿系统的肿瘤阳性率也很高,一般在50- 70%。
免疫化学发光全套检查项目及临床意义(附参考数值)

免疫化学发光全套检查项目及临床意义(附参考数值)展开全文化学发光免疫分析技术发展于上世纪90年代,通过对标记的化学发光物质发光的控制及测量,检测相应的生物标志物,因具有灵敏度高、检测快速、试剂稳定无生物毒性、易全自动等特点,成为免疫分析技术中最具发展前景的发光之一,在许多疾病的临床诊断中具有重大意义。
本文整理化学发光临床常见的检测项目、临床意义及参考范围,不足之处敬请指正。
一、甲状腺功能1、总三碘甲状腺原氨酸(Tot T3)临床意义:Tot T3是判断甲状腺功能亢进首选指标之一,对甲状腺功能紊乱进行确诊。
增高:Grave 病,大多数是由于甲状腺机能亢进引起(特发性T3型甲亢、新生儿一过性甲亢、亚急性甲状腺炎、TBG、白蛋白增高时、地方性缺碘甲状腺肿、服用外源性T3等)。
降低:原发性甲状腺机能减低(如呆小症、Hashimoto 甲状腺炎、先天性甲状腺形成异常、新生儿甲状腺机能减退症、特发性粘液性水肿等);继发性甲状腺机能减低(如垂体功能低下、TSH单独缺乏症等);下丘脑功能障碍、重症消耗性疾病;先天性TBG减少症;65岁以上。
参考范围 1.34~2.73 nmol/L (0.87–1.78 ng/mL)2、总甲状腺素(T ot T4 )临床意义:增高:甲亢;妊娠、新生儿;服用雌激素和避孕药;高TBG血症;急性肝炎;服用碘时;亚急性甲状腺炎;TSH分泌性肿瘤;甲状腺激素过度使用。
降低:甲减;TSH不应症;甲状腺形成异常;母体抗甲状腺制剂的应用;TBG低下症;某些严重肝病、禁食、高热病、肾病综合症。
参考范围 78.38~157.4 nmol/L (6.09~12.23 ug/dL)3、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)临床意义:甲亢增高,甲减降低,与病理生理相一致,不受TBG等的影响,故可诊断妊娠性甲亢,并是诊断甲亢的最佳指标。
参考范围 3.8~6.0 pmol/L (2.5~3.9 pg/mL)4、游离甲状腺素(FRT4)临床意义:甲亢、T4中毒症、恶性肿瘤等增高,甲减降低,与病理生理相一致,不受TBG等影响,是诊断甲减的最佳指标。
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垂体
(+) 促甲状腺激素
(-)
甲状腺
甲状腺激素
甲状腺疾病
人群发病率>5% 65 ,000,000
甲
甲
亢
减
原发性甲亢(Graves病) 约80%
毒性多结节性甲状腺肿
毒性甲状腺肿 (plummer病)
甲单 状纯 腺性 肿
甲 状 腺 炎
肿甲 瘤状
腺
急性化脓性 亚急性
慢性淋巴细胞性 (自身免疫性甲状腺炎
血清甲状腺激素测定(T4 T3 FT3 FT4)
• T4 全部由甲状腺合成 • T3 20%直接来自甲状腺,80%在外周组织中由T4而来。T3是甲状腺激素在组织
实现生物作用的活性形式。
• 循环中的T4仅有 0.02%为游离状态(FT4) • 循环中的T3约 0.3%为游离状态(FT3)
• 结合型甲状腺激素是激素的储存和运输形式,游离型甲状腺激素是甲状腺激 素的活性部分,直接反应甲状腺的功能状态。
分离
信号检测
e analyzer performance
罗氏全自动电化学发光免疫分析系统
cobas® e 411
✓ 2008年初在中国市场上市 ✓ 测试速度:86测试/小时
✓ 反应时间9或18分钟
✓ 常规操作时可随时插入急诊样品 ✓ 对于BNP/PCT/HCG等急诊项目有重大意
义
电化学发光免疫平台检测菜单
治疗
治疗监测
罗氏集团简介
罗氏诊断——全球体外诊断行业名列第一
20%
20141, 2 体外诊断市场占有率
12%
12%
10%
6%
3%
3%
3%
3%
Roche* Siemens Abbott
J&J
Beckman bioMérieux Bayer
Becton
Coulter
Dickinson
1 Source: company reports, Industry consultants, Roche analysis based on peer sales 2009 (BD, Bayer and Inverness 2013 figures)
肿瘤标志物
AFP CEA CA 125 II CA 15-3 CA 19-9 CA 72-4 Total PSA Free PSA NSE CYFRA 21-1 S-100
其它
IgE S-100 (brain damage)
心肌标志物
CK-MB Troponin T Myoglobin NT-proBNP
超过85检测个项目
甲状腺功能
TSH FT3 FT4 T3 T4 Anti-TG Anti-TPO Anti-TSHR T-Uptake TG
贫血
Ferritin Vitamin B12 Folate RBC Folate
激素
FSH LH Progesterone Prolactin Testoterone Estradiol HCG+ß Insulin C-Peptide Cortisol DHEA-S SHBG ACTH 孕早期唐氏筛查 Free ß-HCG PAPP-A
Digoxin Digitoxin
骨标志物
ß-Crosslaps 25-(OH) Vit.D3 Intact PTH N-MID Osteocalcin Total-P1NP
传染性疾病 自身免疫
Anti-HBc
Anti-CCP
Anti-HBe
Anti-HBs
HBe Ag
HBs Ag
Anti-HAV Anti-HAV IgM Anti-HBc IgM AntiHCV HIV Combi Rubella IgG/IgM
电化学发光免疫项目介绍和临床应用
全方位解决临床诊断需求
罗氏集团简介
电化学发光检测原理
电化学发光项目介绍
• 甲状腺功能 • 肿瘤标志物 • 激素—性激素/HCG+β/糖尿病二项
罗氏集团简介
罗氏集团架构
制药
诊断
制药
基因泰克 中外
应用科学部 分子诊断部 专业诊断部 组织诊断部 健康医护部
早期检测
预防
诊断
脓毒血症
IL-6
BRAHMS PCT
先兆子痫风 险评估
sFLT-1 PIGF
Toxo IgG/IgM
CMV IgG/IgM
*更多项目在不断研发中
罗氏集团简介
电化学发光检测原理
电化学发光项目介绍
• 甲状腺功能 • 肿瘤标志物 • 激素—性激素/HCG+β/糖尿病二项
甲状腺疾病__目前的常见病
• 发病率不断上升 (人群发病率>5%) ➢饮食和其他生活习惯的改变 ➢精神压力的变化 ➢平均期望寿命的提高 ➢检测的灵敏度不断上升
• 研究发现 ➢甲状腺疾病与其他疾病密切相关
甲状腺功能
•甲状腺有合成、贮存 和分泌甲状腺素的功 能。
•甲状腺激素功能:促 进新陈代谢、维持机 体正常生长发育、提 高神经系统的兴奋性
•甲状腺的功能活动受 大脑皮层——下丘 脑——垂体前叶系统 的控制和调节。
寒冷、过度紧张等
下丘脑
(-)
促甲状腺激素释放激素
2 In vitro diagnostics market; excludes Life Science research market; * Includes Ventana
Inverness
罗氏集团简介
诊断产品线——从实验室诊断到床边诊断的全面解决方案
实验室 ICU/急诊
临床
优化工作流程
Pre-Analytics
电化学发光项目介绍
• 甲状腺功能 • 肿瘤标志物 • 激素—性激素/HCG+β/糖尿病二项
ECL检测原理
ElectroChemiLuminescence (ECL)
结合 ium
转移至
磁结电珠合化学记 复 游电发后 合 离极光免 物 组;标疫 与 分技术施 启 发加 动 光电 化 反压 学 应
或桥本炎)
甲状腺实验室诊断指标
所有疾病中最丰富
功能指标: • 总T4(TT4),游离T4(FT4) • 总T3(TT3),游离T3(FT3) • 促甲状腺激素TSH
蛋白和自身免疫指标: • 甲状腺球蛋白(TG) • 甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb) • 甲状腺球蛋白抗体(TGAb) • TSH-受体抗体(TRAb)
Clinical Chemistry
Immunology
Lab Results
HDL: 77 LDL: 81 HbA1c: 70
cobas IT
Coagulation Reflotron
Serum Work Area Urinalysis
BGE Cardiac Reader
罗氏集团简介
电化学发光检测原理