西南大学分子生物学汇编
西南大学网络与继续教育学院2019年秋季复习题-[0462]《分子生物学》
![西南大学网络与继续教育学院2019年秋季复习题-[0462]《分子生物学》](https://img.taocdn.com/s3/m/771e3d6a0740be1e650e9a82.png)
西南大学网络与继续教育学院课程代码： 0462 学年学季：20192单项选择题1、DNA以半保留方式复制，如果一个具有放射性标记的双链DNA分子，在无放射性标记的环境中经过两轮.都不含放射性.半数分子的两条链都有放射性.都有放射性.其中一半没有放射性2、DNA的一级结构实质上就是( ). DNA分子中的碱基排列顺序. DNA分子中各碱基所占的比例. DNA分子的双螺旋结构. DNA分子中的碱基配对关系3、氨酰tRNA的作用由( )决定。
.氨基酸与反密码子的距离，越近越好.其反密码子.其氨基酸.其固定的碱基区4、某双链DNA分子中腺呤的含t是15%，则胞嘧啶的含应为( )。
. 42.5%. 15%. 35%. 30%5、修补胸腺嘧啶有数种方法，其中之一是用DNA连接酶、DNA聚合酶等催化进行，试问这些酶按下列哪种. B. 核酸内切酶→DNA聚合酶→DNA连接酶.核酸内切酶→DNA 连接酶→DNA聚合酶. DNA聚合酶→核酸内切酶→DNA连接酶. DNA连接酶→DNA 聚合酶→核酸内切酶6、下列哪种碱基只存在于RNA中而不存在于DNA中? ( ). E. 胸腺嘧啶.尿嘧啶.腺嘌呤.鸟嘌呤7、1972年，第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（）. A. EcoB. EcoRI. EcoR II. EcoC8、原核DNA合成酶中()的主要功能是合成前导链和冈崎片段. DNA聚合酶I. RNA聚合酶II.引物酶. DNA聚合酶II9、核酸中核苷酿的连接方式是( )。
. 3",5"-磷酸二酯键.糖苷键. 2",3"-磷酸二酯键. 2",5"-磷酸二酯键10、Z构象的DNA.螺旋方向和A-DNA相同.是自然状态下DNA的主要构象.通常发生在CG含量比较高的DNA区段.螺旋方向和B-DNA相同11、哪些有关免疫球蛋白基因重排的叙述是正确的?( ）.所有物种中V基因的数目是一样的.当一个等位基因中发生有意义的重排时，另一个等位基因也发生重排. J是恒定区的一部分.各部分连接时，将产生缺失或重排12、组蛋白的净电荷是？.负.正.不带电荷.中13、DNA依赖的RNA聚合酶的通读可以靠( )。
西南大学1166 《分子生物学》第三次作业及参考答案
西南大学1166 《分子生物学》第三次作业及参考答案论述题：1. 怎样证明DNA是遗传物质?2. 作为主要遗传物质的DNA具有哪些特性?3. 分别写出病毒、原核、真核生物基因组的概念，它们各有何特点，请比较其异同。
4. 真核生物的DNA序列可分为几种类型?分别写出并简要叙述。
5. 基因编码的主要产物是什么?答：1.怎样证明DNA是遗传物质?DNA是遗传物质的概念起源于1944年Avery等人首次证明DNA是细菌遗传性状的转化因子。
他们从有荚膜、菌落光滑的Ⅲ型肺炎球菌（ⅢS）细胞中提取出纯化的DNA，加热灭活后再加入到无荚膜、菌落粗糙的Ⅱ型细菌（ⅡR）培养物中，结果发现前者的DNA能使一部分ⅡR型细胞获得合成ⅢS型细胞特有的荚膜多糖的能力。
而蛋白质及多糖类物质没有这种转化能力。
若将DNA事先用脱氧核糖核酸酶降解，也就失去了转化能力。
这一实验不可能是表型改变，也不可能是恢复突变，因为ⅡR型菌产生的是ⅢS型的荚膜。
它有力地证明DNA 是转化物质。
已经转化了的细菌，其后代仍保留合成Ⅲ型荚膜的能力，说明此性状可以遗传给后代。
1952年Hershey和Chase等利用大肠杆菌噬菌体实验证实了DNA是遗传物质的本质。
在噬菌体中，DNA是惟一含磷的物质，而蛋白质是惟一含硫的物质。
利用含P或S的放射性培养基培养噬菌体，得到了放射性标记噬菌体。
使标记|的噬菌体吸附细菌，几分钟后离心除去未吸附的噬菌体。
然后利用捣碎机捣碎使噬菌体和细菌分开。
离心后细菌在沉淀中，而噬菌体在上清液中。
这时发现放射性的硫有80%在上清液中，只有20%在沉淀中，而磷的情况则相反。
说明在噬菌体感染的过程中，DNA进入了细菌体内，而蛋白质留在细菌体外。
证明具有遗传作用的是DNA而不是蛋白质。
2. 作为主要遗传物质的DNA具有哪些特性?作为遗传物质的DNA具有以下特性：①贮存并表达遗传信息；②能把遗传信息传递给子代；③物理和化学性质稳定；④有遗传变异的能力。
西南大学级分子生物学试题及答案b卷上课讲义
西南⼤学级分⼦⽣物学试题及答案b卷上课讲义西南⼤学2011级分⼦⽣物学试题及答案B卷⼀、名词解释（共5题，4分/题，共20分）1．基因和基因组基因:基因是承载具体遗传讯息，通常编码⼀个蛋⽩质，或有功能的⾮编码RNA，或实现特殊调控功能的⼀段核酸序列，在绝⼤部分已知⽣物中为⼀段DNA序列。
基因组：基因组是遗传讯息的总集，即基因序列和基因间未知功能序列的总集，在绝⼤部分已知⽣物中为其DNA序列信息的总和。
2.密码⼦摇摆假说在蛋⽩质⽣物合成中转移核糖核酸反密码⼦的5′位碱基不严格的特异性的假说。
允许反密码⼦的5′位(第⼀位)碱基与信使核糖核酸的密码⼦3′位(第三位)碱基通过改变了的氢键配对(如⾮G-C、A-U 配对)，从⽽识别⼀种以上的密码⼦。
3.PCR技术PCR是⼀种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板，DNA聚合酶引物和4种dNTP的情况下，通过⾼温变性——低温退⽕——中温延伸这样反复循环的过程，在体外扩增特异性DNA⽚段的分⼦⽣物学技术。
1) ⾼温变性：加热94℃，保温1分钟，使DAN双链分开形成单链。
2）低温退⽕;冷却到引物的Tm 以下，引物与DNA模板结合形成引物-模板复合物。
3) 中温延伸：温度上升72℃维持⼀段时间，以引物为固定的起点，以4种单核⽢酸作为底物合成新DAN链。
4.CpG岛许多基因，尤其是管家基因的启动⼦区，基因的末端通常存在⼀些富含双核苷酸“CG”的区域，称为“CpG岛”。
5.同源异形基因仅供学习与交流，如有侵权请联系⽹站删除谢谢2通过对⼤量的果蝇突变株的研究,⼈们发现⼀套在果蝇体节发育中起关键作⽤的基因群,称同源异型基因(Hox genes)。
因其在基因表达调控中的主导作⽤⼜称homeotic selector gene,亦称Hox基因。
这些基因都含有⼀段⾼度保守的由180bp组成的DNA序列，称同源框。
同源框编码的60个氨基酸⼜称同源异型结构域，所形成的α螺旋-转⾓-α螺旋结构可与特异DNA⽚段中的⼤沟相互作⽤启动基因的表达⼆、判断题（共8题，2分/题，共16分）1、DNA模板链和后随链的复制过程中都需要引物,引物是⼀段短的RNA。
最新版2016年西南大学120166分子生物学西南平时作业满分答案
名词解释1.广义分子生物学2.狭义分子生物学3.基因4.基因组5.断裂基因6.外显子7.内含子8.C值与C值矛盾9.半保留复制10.半不连续复制11.转座子12.超螺旋结构1.广义分子生物学：广义的分子生物学概念包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。
例如，蛋白质的结构、运动和功能，酶的作用机理和动力学，膜蛋白结构与功能和跨膜运输等。
2.狭义分子生物学：是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平阐明蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控机理的学科。
3.基因：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位。
包括编码蛋白质和tRNA、rRNA的结构基因，以及具有调节控制作用的调控基因。
基因可以通过复制、转录和决定翻译的蛋白质的生物合成，以及不同水平的调控机制，来实现对遗传性状发育的控制。
基因还可以发生突变和重组，导致产生有利、中性、有害或致死的变异。
4.基因组：基因组是指细胞或生物体中，一套完整单体的遗传物质的总和；或指原核生物染色体、质粒、真核生物的单倍染色体组、细胞器、病毒中所含有的一整套基因。
5.断裂基因：在真核生物基因组中，基因是不连续的，在基因的编码区域内部含有大量的不编码序列，从而隔断了对应于蛋白质的氨基酸序列。
这一发现大大地改变了以往人们对基因结构的认识。
这种不连续的基因又称断裂基因或割裂基因。
6.外显子：基因中编码的序列称为外显子。
7.内含子是在信使RNA被转录后的剪接加工中去除的区域。
8.C值与C值矛盾：C值指生物单倍体基因组中的DNA含量，以pg表示（1pg=10-12g）。
C值矛盾（C value paradox）是指真核生物中DNA含量的反常现象。
9.半保留复制：在DNA复制程程中，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种方式称为半保留复制。
西南大学1166《分子生物学》第五次作业及参考答案
西南大学1166《分子生物学》第五次作业及参考答案论述题：1.基因与多肽链有什么关系?2.hnrna转变成mrna的加工过程包含哪几步?3.作为蛋白质生物合成模板的mrna有何特点?4.原核基因表达调控存有什么特点?5.真核基因表达调控与原核生物相比有什么异同点。
6.详述分子生物学在医药工业中的应用领域。
参考答案：1.基因与多肽链存有什么关系?多肽链是基因的编码产物，基因的碱基序列与蛋白质分子中氨基酸的序列之间的对应关系是通过遗传密码实现的。
2.hnrna转变成mrna的加工过程包含哪几步?hnrna转变成mrna的加工过程包括：①5`端形成特殊的帽子结构（m7g5`ppp5`n1mpn2p-）；②在链的3`端切断并加上多聚腺苷酸（polya）；③通过剪接除去由内含子转录而来的序列；④链内部的核苷被甲基化。
3.做为蛋白质生物合成模板的mrna有何特点?信使核糖核酸具有以下特点：①其碱基组成与相应的dna的碱基组成一致，即携带有来自dna的遗传密码信息；②mrna链的长度不一，因为其所编码的多肽链长度是不同的；③在肽链合成时mrna应与核糖体作短暂的结合；④mrna的半衰期很短，因此mrna的代谢速度很快。
4.原核基因表达调控存有什么特点?原核生物大都为单细胞生物，没有核膜，极易受外界环境的影响，需要不断地调控基因的表达，以适应外界环境的营养条件和克服不利因素，完成生长发育和繁殖的过程。
原核生物基因的表达调控存在于转录和翻译的起始、延伸和终止的每一步骤中。
这种调控多以操纵子为单位进行，将功能相关的基因组织在一起，同时开启或关闭基因表达，既经济有效，又保证其生命活动的需要。
调控主要发生在转录水平，有正、负调控两种机制。
在转录水平上对基因表达的调控决定于dna的结构、rna聚合酶的功能、蛋白因子及其他小分子配基的相互作用。
细菌的转录和翻译过程几乎在同一时间内相偶联。
5.真核基因表达调控与原核生物较之存有什么优劣点。
（完整word版）[已整理]现代分子生物学复习要点及习题
![（完整word版）[已整理]现代分子生物学复习要点及习题](https://img.taocdn.com/s3/m/9f3eb67abf23482fb4daa58da0116c175e0e1e57.png)
（完整word版）[已整理]现代分子生物学复习要点及习题第一章绪论分子生物学分子生物学的基本含义(p8)分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
分子生物学与其它学科的关系分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，凝聚了不同学科专长的科学家的共同努力。
它虽产生于上述各个学科，但已形成它独特的理论体系和研究手段，成为一个独立的学科。
生物化学与分子生物学关系最为密切:生物化学是从化学角度研究生命现象的科学，它着重研究生物体内各种生物分子的结构、转变与新陈代谢。
传统生物化学的中心内容是代谢，包括糖、脂类、氨基酸、核苷酸、以及能量代谢等与生理功能的联系。
分子生物学则着重阐明生命的本质----主要研究生物大分子核酸与蛋白质的结构与功能、生命信息的传递和调控。
细胞生物学与分子生物学关系也十分密切:传统的细胞生物学主要研究细胞和亚细胞器的形态、结构与功能。
探讨组成细胞的分子结构比单纯观察大体结构能更加深入认识细胞的结构与功能，因此现代细胞生物学的发展越来越多地应用分子生物学的理论和方法。
分子生物学则是从研究各个生物大分子的结构入手，但各个分子不能孤立发挥作用，生命绝非组成成分的随意加和或混合，分子生物学还需要进一步研究各生物分子间的高层次组织和相互作用，尤其是细胞整体反应的分子机理，这在某种程度上是向细胞生物学的靠拢。
第一章序论1859年发表了《物种起源》，用事实证明“物竞天择，适者生存”的进化论思想。
指出：物种的变异是由于大自然的环境和生物群体的生存竞争造成的，彻底否定了“创世说”。
达尔文第一个认识到生物世界的不连续性。
意义：达尔文关于生物进化的学说及其唯物主义的物种起源理论，是生物科学史上最伟大的创举之一，具有不可磨灭的贡献。
西南大学1166《分子生物学》第二次作业及参考答案
西南大学1166《分子生物学》第二次作业及参考答案以下是为大家整理的西南大学1166《分子生物学》第二次作业及参考答案的相关范文，本文关键词为西南,大学,1166,分子生物学,第二次,作业,参考,答案,，您可以从右上方搜索框检索更多相关文章，如果您觉得有用，请继续关注我们并推荐给您的好友，您可以在综合文库中查看更多范文。
西南大学1166《分子生物学》第二次作业及参考答案论述题：1.分子生物学的发展趋势是什么?2.现代分子生物学研究的主要内容有哪几方面?3.研究DnA的一级结构有什么重要的生物学意义?4.RnA的功能主要是参与蛋白质的生物合成，起着遗传信息由DnA到蛋白质的中间传递体核心功能，此外它的功能多样性还表现在哪些方面?5.实施基因工程（DnA重组技术）的重要理论基础之一是什么?参考答案1.分子生物学的发展趋势是什么?当前，人类基因组研究的重点正在由结构向功能转移，一个以基因组功能研究为主要研究内容的\后基因组”（post-genome）时代已经到来。
它的主要任务是研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白图式，或者说是\从基因组到蛋白质组”。
由此，分子生物学研究的重点又回到了蛋白质上来，生物信息学也应运而生。
（1）功能基因组学（2）蛋白质组学（3）生物信息学2.现代分子生物学研究的主要内容有哪几方面?按照狭义分子生物学的定义，可以将现代分子的研究内容概括为五大方面：（1）基因与基因组的结构与功能；（2）DnA的复制、转录和翻译；（3）基因表达调控的研究；（4）DnA重组技术；（5）结构分子生物学。
3.研究DnA的一级结构有什么重要的生物学意义?所谓DnA的一级结构就是指DnA分子中的核苷酸排列顺序。
生物的遗传信息通过核苷酸不同的排列顺序储存在DnA分子中，DnA 分子4种核苷酸千变万化的序列排列即反映了生物界物种的多样性。
为了阐明生物的遗传信息，首先要测定生物基因组的序列。
迄今已经测定基因组序列的生物数以百计。
西南大学2020年春季分子生物学 【1166】课程考试大作业参考答案
学期：2020年春季
课程名称【编号】：分子生物学 【1166】A卷
考试类别：大作业 满分：100分
论述题（选做4题，每题25分。）
1.DNA半保留复制是如何被证实的？
2.某次实验中，我班一同学将一条DNA模板链记录为以下序列，单链3’……ACATTGGCTAAG……5’试写出：（1）复制后生成的DNA单链碱基顺序？（2）转录后生成的mRNA链的碱基顺序？
基因表达的空间特异性是指多细胞生物个体在某一特定生长发育阶段，同一基因的表达在不同的细胞或组织器官不同，从而导致特异性的蛋白质分布于不同的细胞或组织器官，故又称为细胞特异性或组织特异性。例如肝细胞中涉及编码鸟氨酸循环酶类的基因表达水平高于其他组织细胞，其中某些酶(如精氨酸酶)为肝脏所特有，这些酶蛋白的基因表达均呈细胞特异性C两种多个核苷酸任意排列的共聚多核苷酸作模板时，可出现哪几种三联体？怎样测知每个三联体所代表的密码氨基酸？
5.举例说明基因表达的时间特异性和空间特异性。
1.答：DNA半保留复制是Meselson和Stahl于1958年首先证实的，采用的方法为稳定同位素标记和密度梯度离心技术。将大肠杆菌连续12代培养在以15NH4CL为唯一氮源的培养基中以使所有DNA分子均被15N标记，然后将15N完全标记的大肠杆菌转移到14N培养基中逐代分别培养。分别收集15N全标记和15N全标记后在14N培养基中培养一代、二代等各自的DNA，并进行氯化铯密度梯度离心，可得到高密度带（15N带），中密度带（15N－14N带）和密度逐渐接近最低密度（14N带），由此得知DNA是半保留复制的，即子代DNA双链一条是亲代的，一条是新合成的。3H脱氧胞苷标记实验和以后的其它方法均证实了DNA半保留复制。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
分子生物学添加时间：2008.10.29 | 作者：admin实验一仪器介绍和实验规范训练及实验准备一、实验目的1. 系统回顾分子生物学实验技术的发展。
2. 了解分子生物学——特别是关于分子克隆的实验方法和理论、了解分子生物学实验安全规则和注意事项。
3. 掌握分子生物学实验所用试剂的配制过程。
二、实验内容1. 分子生物学实验的条件与设施, 包括各种仪器设备、房屋设置等；2. 分子克隆的常规实验方法和理论；3. 分子生物学实验安全规则和注意事项；4. 配制近期实验所需要的公共试剂。
三、实验所需仪器设备1. 多媒体设备2. 实验所需仪器37℃培养箱、温控空气摇床、温控水浴摇床、超净工作台( 双人双面)、电子天平、双蒸水器、高压锅、磁力搅拌器、移液枪、振荡器、-20℃冰箱、制冰机、-70℃冰箱、高温烘箱、离心管、枪头、烧杯、量筒等。
3. 实验药品氯化钠、氢氧化钠、Tris 碱、琼脂糖、盐酸、酵母提取物、胰蛋白胨、琼脂粉、SDS 、EDTA 、无水乙醇、95% 乙醇、低熔点琼脂糖。
四、注意事项1. 高压蒸气灭菌（1）紧盖和开盖时，都应采用对角式均匀地转动紧固螺栓，并且双手同时操作。
切不可采用将紧固螺栓逐个拧紧或松开的方法。
（2）灭菌结束以后，切勿过早打开排气阀，否则，开盖时试管内的培养基会由于内外压力不平衡而冲出管口，使棉塞上沾染培养基而发生污染。
2. 紫外线防护在操作紫外装置时，注意自我防护，避免直接接触紫外线，以防灼伤皮肤或眼睛。
实验二家蚕基因组DNA提取及检测一、实验目的1. 了解并掌握苯酚法提取动物基因组DNA 的原理和步骤。
2. 了解DNA 浓度和质量测定的技术。
二、实验原理酚、氯仿是蛋白质变性剂，能有效出去核蛋白，使核酸从核蛋白复合体中分离出来。
氯仿还能加速有机相与液相的分层，少许异戊醇能稳定界面，减少蛋白质变性操作过程中产生气泡。
三、实验材料、试剂和设备1. 实验材料和试剂材料：家蚕蛹试剂：液氮、平衡酚（Tris饱和）、1 mol/L Tris-HCl（pH8.0）、0.5 mol/L EDTA （pH 8.0）、TE（P H8.0）、10mol/L CH3COONH4、70%乙醇、20mg/ml Proteinase K、10mg/ml RNA酶。
抽提缓冲液：10 m mol/L Tris-Cl（pH8.0）0.1 mol/L EDTA （pH 8.0）0.5% SDS加样缓冲液：0.25%溴酚蓝；0.25%二甲苯青（FF）；15%聚蔗糖水溶液2. 实验仪器冷冻离心机、常温离心机、电泳仪、核酸电泳槽、核酸蛋白定量仪、37℃培养箱、温控水浴摇床等。
四、操作步骤1. 将家蚕蛹放入预冷的研钵中，加入液氮后快速研磨成粉末状；加入1mL的抽提缓冲液，轻轻摇匀，形成匀浆状，将匀浆液转至5mL无菌离心管中；再用1mL的抽提缓冲液清洗研钵，并将洗液转入同样的离心管中，然后加入蛋白酶K至终浓度100μg/mL，52℃水浴保温5h或过夜；2. 加入等体积平衡酚，温和振荡，摇匀15 min（置-20℃，5-10 min）；4℃12000 rpm离心10 min，将粘稠的上清液转移到离心管中；3. 再用酚﹕氯仿（1﹕1），氯仿各抽提一次10 min，然后4℃12000rpm离心10 min；4. 移出上层水相，加入2-2.5体积冰冻乙醇，转动离心管使溶液充分混合，DNA立即形成沉淀；4℃，70 00 rpm离心10 min或用高压灭菌过的玻璃棒/消毒牙签将DNA沉淀从乙醇溶液中移出；5. 用70%的乙醇洗涤DNA沉淀2次，晾干后，加入350 μL TE（pH8.0），并加入RNAase使终浓度为50 μg/mL，在37℃培育4h；6. 将DNA转移到1.5mL的无菌离心管中，再加入TE（pH 8.0）350 μL到5mL无菌离心管中洗涤，并将洗液转入同样的1.5mL离心管中；7. 再用等体积的酚，酚：氯仿（1﹕1），氯仿各抽提一次，然后加入2-2.5体积冰冻乙醇，转动离心管使溶液充分混合，DNA立即形成沉淀；8. 用70%的乙醇洗涤DNA沉淀2次，后晾干，加入TE 200 μL溶解DNA；9. 取DNA 4μL与2μL 含有0.3%Goldview染料的6×上样缓冲液混匀，放置5min后，点样到0.8%琼脂糖凝胶中，以 2.5--5 v/cm电泳；10. 紫外灯下观察拍照；11. 取2μL DNA溶液，用98μLTE稀释50倍，然后用分光度计检测DNA的浓度和纯度。
注：第9、10、11步将在实验三中详细讲解。
实验三基因组DNA的检测一、实验目的1. 掌握基因组DNA检测方法。
2. 了解不同类型凝胶电泳的适用范围。
二、实验原理1. 凝胶检测一般来讲，应用凝胶电泳技术分离核酸比分离蛋白质要容易。
核酸是带均匀负电荷的分子，对于双链DNA 来说，基本不存在影响迁移率的复杂结构。
影响核酸在凝胶上的迁移有多种重要的变量，这些变量包括：核酸的构象、凝胶孔径的大小、所用的电压的大小。
在实际操作中，这意味着较大孔径的琼脂糖凝胶用于分离>500-10000bp的片段，而较小孔径的聚丙烯酰胺凝胶或筛分型琼脂糖凝胶则用于分离<1000bp的片段。
图4.1 基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图谱2. 紫外分光法检测DNA和RNA都有吸收紫外光的性质，它们的吸收高峰在260nm波长处。
吸收紫外光的性质是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的，所以嘌呤和嘧啶以及一切含有它们的物质，不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性，核酸和核苷酸的摩尔消光系数（或称吸收系数）用E（P）来表示，E（P）为每升溶液中含有一摩尔原子核酸磷的消光值（即光密度或称光吸收）。
RNA的E（P）260 nm（pH7）为770 0—7800。
RNA的含磷量约为9.5%，因此每毫升溶液含1微克RNA的光密度值相当于0.022—0.024。
小牛胸腺DNA钠盐的E（P）260 nm（pH7）为6600，含磷量为9.2%，因此每毫升溶液含1微克DNA钠盐的光密度值为0.020。
蛋白质由于含有芳香氨基酸，因此也能吸收紫外光。
通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处，在260nm 处的吸收值仅为核酸的十分之一或更低，故核酸样品中蛋白质含量较低时对核酸的紫外测定影响不大。
RN A的260nm与280nm吸收的比值在2.0以上；DNA的260nm与280nm吸收的比值则在1.9左右。
当样品中蛋白质含量较高时比值即下降。
三、实验材料、试剂和设备1. 材料、试剂上次实验提取的家蚕基因组DNA电泳缓冲液染色物质（溴化乙锭、GoldView染料等）电泳级琼脂糖加样缓冲液（6×或10×）DNA分子量标准（Marker）2. 设备水平凝胶电泳装置（恒流电源、凝胶样品梳、电泳槽、托胶板、灌胶平台）紫外分光光度计比色皿微波炉烧杯四、实验步骤（一）琼脂糖凝胶电泳检测1. 制备凝胶，将电泳缓冲液和电泳级琼脂糖在微波炉中或经高压熔化，混匀，加入适量GoldView染料，冷却至55℃，倒入已封好的凝胶灌制平台上，插上样品梳。
表4.1 分离不同大小DNA片段的合适琼脂糖浓度2. 待胶凝固后，从制胶平台上除去封带，拔出梳子，放入加有足够电泳缓冲液的电泳槽中，缓冲液高出凝胶表面约1mm。
3. 用适量的10×加样缓冲液制备DNA样品，然后用移液器将样品加入样品孔中。
一定要包括合适的DNA 分子量标准物。
4. 接通电极，使DNA向阳极移动，在1-10V/cm凝胶的电压降下进行电泳。
5. 当加样缓冲液中的溴酚蓝迁移至足够分离DNA片段的距离时，关闭电源。
6. 已染色的凝胶可以直接在紫外透射仪上照相。
或者，如果必要的话，先用0.5µg/mL溴化乙锭染色10-3 0min，在水中脱色10-30min。
（二）紫外分光光度法1. 开启紫外分光光度计，预热稳定10-30min。
2. 用DNA溶解液（TE缓冲液）校正零点。
3. 用DNA溶解液（TE缓冲液）稀释DNA样品50倍，将稀释液转移到比色杯中。
4. 读取230nm，260nm，280nm，310nm的OD值。
5. 计算出浓度和OD比值。
实验四家蚕基因组DNA的PCR扩增及电泳检测一、实验目的1. 学习PCR反应的基本原理与实验技术；2. 了解引物设计的一般要求。
二、实验原理单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下，可以利用DNA多聚酶按5’一3’方向复制出互补DNA。
这时单链DNA称为模板DNA，寡聚核苷酸片段称为引物（P），合成的互补DNA称为产物DNA。
双链DNA分子经高温变性后成为两条单链DNA，它们都可作为单链模板DNA，在相应的引物引导下，用DNA聚合酶复制出产物DNA。
PCR反应应用以上的基本过程，分别在待复制的已知序列DNA分子两端各设计一条引物，其中在DNA 5‘端的引物（P1）对应于上链DNA单链的序列，3’端的引物（P2）对应于下链DNA单链的序列，P1和P2按5’-3’方向相向配置。
在含有引物、DNA合成底物dNTPs （dATP、dCTP、dGT P、dTTP4种脱氧核糖核苷酸等摩尔数混合物）的缓冲液中，通过高温变性，使双链DNA变成单链DNA 模板，降低温度复性，使引物与模板DNA配对，利用DNA聚合酶便可合成产物DNA。
引物和dNTPs过量，则在同一反应体系中可重复高温变性、低温复性和DNA合成这一循环，使产物DNA重复合成，并且在重复过程中，前一循环的产物DNA可作为后一循环的模板DNA参与DNA的合成，使产物DNA的量按2n方式扩增，所以这一反应称为链式扩增反应。
理论上如果引物及dNTP的量能够满足，则这一过程可无限重复，使模板DNA无限扩增。
PCR反应使几个DNA模板分子通过数小时扩增后增加到百万倍以上，因此能用微量样品获取目的基因，同时也完成了基因在体外的克隆，成为分子生物学及基因工程中极为有用的研究手段。
常规PCR反应用于已知DNA序列的扩增，反应循环数为25～35，变性温度为94℃，复性温度为37℃～55℃，合成延伸温度为72℃DNA聚合酶为Taq酶（可耐受95℃左右的高温而不失活），DNA扩增倍数为106～109。
四、操作步骤1. 在25 μL的反应体系中加：10×Taq DNA聚合酶buffer 2.5 μLMg2+ 1.5--2 mmol/LdNTPs 150--200μmol/L家蚕基因组DNA 10--20 ngTaq DNA聚合酶1 U引物（上下游）1μL加灭菌水至25 μL2. 在PCR仪上进行扩增，扩增程序为：94℃变性30s，Ta℃退火60s，72℃延伸90s，35个循环后接72℃10 min；3. 与2μL 6×样缓冲液混匀，点样到1%琼脂糖凝胶中电泳；4. 扩增产物5--10 μL 含有0.3%Goldview染料的6×上样缓冲液混匀，放置5min后，点样到0.8%琼脂糖凝胶中，以 2.5--5 v/cm电泳；5. 紫外灯下观察拍照。