胰酶、EDTA的使用及注意事项
细胞传代消化时所用胰酶浓度
细胞传代消化时所用胰酶浓度？
常见浓度为0.25%的胰酶（含有螯合剂），半贴壁细胞或者对胰酶敏感的细胞，可采用0.05%浓度的胰酶（含有或者不含有螯合剂）进行细胞消化。
由于细胞膜上的粘附蛋白需要金属离子维持其活性，常见的胰酶中含有EDTA等螯合剂，如果细胞贴壁不是非常紧密，也可用不含有螯合剂的胰酶进行细胞消化。
胰酶对细胞膜上粘附蛋白的损害比较大，如果进行细胞膜上蛋白的研究，建议选择温和的细胞消化试剂，尽量减少对细胞膜上蛋白的损伤。
此外，由于胰酶自身也是一种蛋白，胰酶也会自己剪切自己，建议胰酶不要反复冻融，拿到手中的大瓶胰酶进行分装使用。
除了常见的胰酶（含有或者不含有EDTA），百灵生物（除了提供cellmax 胎牛血清）还提供含另外一种更温和螯合剂的胰酶，对于娇贵或者贴壁不牢的细胞，这也不失为一种选择。
Cellmax胎牛血清Max choice, Max cells。
胰酶配制及注意事项
•页•博客•相册•个人档案•好友细胞消化胰酶的配制对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。
低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2 ，增加消化效力问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。
急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。
2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。
EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。
EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。
如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。
如果对贴壁没影响，那么可不离心。
3、EDTA的浓度也是质量体积比。
和胰酶一起溶于PBS。
4、注意，血清可终止胰酶的作用，但不能终止EDTA的作用，对有些细胞来说，终止消化后的离心是必要的。
5、胰酶和EDTA在pH 为8左右的时候最易溶解，在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8，注意，胰酶可使溶液变酸，所以要边溶边测pH，随时调整。
注意，不可加过量NaOH，否则过碱，细胞会受不了。
6、胰酶EDTA相对比较难溶，可用磁力搅拌器，或放入4度冰箱过夜，待溶解后过滤除菌。
胰酶的配制
胰酶的配制过程姓名：李达专业：预防兽医学号：2013022060 导师：汤德元一．胰酶-EDTA的配制1、专用PBS缓冲液配方：1000mlPBS: 7.000g NaCl1.100g Glucose·H2O 或 1.000g Glucose0.3700g KCl0.2g Na2PO4H3.000g Tris0.2400g KH2PO40.4000g EDTA超纯水1000ml所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。
0.0010g 酚红5ml PS2.5g 胰酶（HyClone 胰蛋白酶1:250 SH30848.018）2、配制步骤：1）所用容器先泡酸12小时，后用自来水洗至无色后用蒸馏水洗净，再用超纯水洗三遍，最后高压灭菌，烘干。
2）将缓冲液配好后高压灭菌，同时洗好的广口瓶灭一瓶超纯水备用。
3）加入5ml双抗（PS）。
4）以灭菌的超纯水补足高压过程中损失的水分定容至1000ml。
5）转移到1L的试剂瓶中，加入酚红（0.0010g）。
6）调PH至7.2-7.4。
7）低温冰浴中溶解Tryspin2.5g.混匀。
此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。
8）在细胞间里用0.22um的滤膜过滤，分装入灭菌的50ml或1.5ml离心管中。
此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。
-20℃保存。
9）不可反复冻存。
每次解冻后4℃保存，并在短期内用完。
3、注意事项：1）整个分装过程在无菌条件下进行。
2）机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫酶就变性了。
低温可防止酶失活。
3）加入的EDTA可以络合细胞外基质中的Ca2+ ，增加消化效力。
4）在调节PH时一定要注意保护探头，防止损伤电极。
5）分装时不要太满，防止冻存后体积增大而溢出。
50ml离心管装45ml左右，1.5ml离心管装1.4ml左右。
6）分装后的胰酶尽快转移到-20℃冰箱中冻存。
二．0.25%胰酶（无EDTA）的配制1、250ml胰酶配制方法Tryspin 0.625gPS 2.5ml苯酚红0.1g所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。
胰蛋白酶-EDTA溶液
胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)产品简介：胰蛋白酶（Trypsin）是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶。
胰蛋白酶的特点还在于已经活化的胰蛋白酶，能够继续活化更多胰蛋白酶原，这种过程即自动催化。
胰蛋白酶在小肠工作，它会将蛋白质水解为肽，进而分解为氨基酸，其最适温度约为37℃。
Leagene的 Trypsin-EDTA solution，含0.25%胰酶、0.02%EDTA。
该溶液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。
该产品通常室温消化1min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
主要成分：主要由0.25%胰酶、0.02%EDTA等组成，不含酚红，过滤除菌。
自备材料：1、微量移液器2、PBS、Hanks液或无血清培养液3、显微镜4、离心机操作步骤(仅供参考)：1、贴壁细胞的消化①吸除培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置0.5～2min，不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。
此时吸除胰酶细胞消化液。
加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入Trypsin-EDTA solution重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。
1000～2000g离心1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：1、尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
细胞 加药技巧
细胞加药技巧
药物选择
在选择细胞培养药物时，需要考虑药物的质量、纯度、浓度、细胞毒性等多种因素。
常用的细胞培养药物包括胰酶、EDTA、PBS等。
选择药物时需注意以下几点：
确保药物来自可靠的供应商，并按照说明书进行配制和使用。
了解药物的保存条件和有效期，避免使用变质或过期药物。
在使用多种药物时，要注意药物之间的相互作用，并遵循医生的建议。
药物配制
根据细胞培养所需的浓度和用量，对药物进行配制。
配制时需注意以下几点：
按照说明书要求的浓度和体积进行配制，确保准确性。
配制过程中要避免污染，使用无菌技术。
对于需要过滤或分装的药品，应使用无菌滤器或注射器进行操作。
细胞处理
在加药前需要对细胞进行处理，主要包括细胞的计数、细胞的接种量、培养液的更换频率等内容。
处理时需注意以下几点：
细胞计数要准确，遵循细胞计数规范。
细胞的接种量要适当，根据细胞类型和实验需求进行调整。
更换培养液时要保证无菌操作，并及时更换。
加药步骤
加药时需要注意以下几点：
按照预定的加药计划进行操作，确保加药量和时间的准确性。
加药前要确认药品的名称、浓度和使用量，避免错误。
加药时要避免对细胞造成冲击，遵循无菌操作规范。
[资料]edta-胰蛋白酶的配制
![[资料]edta-胰蛋白酶的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/de79027c9a6648d7c1c708a1284ac850ad020490.png)
00000001、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。
2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。
EDTA 并不是必须的，容易消化的细胞可不加。
EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。
如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。
如果对贴壁没影响，那么可不离心。
3、EDTA的浓度也是质量体积比。
和胰酶一起溶于PBS。
4、注意，血清可终止胰酶的作用，但不能终止EDTA的作用，对有些细胞来说，终止消化后的离心是必要的。
5、胰酶和EDTA在pH 为8左右的时候最易溶解，在配制时可先滴几滴NaOH将p H调至8，注意，胰酶可使溶液变酸，所以要边溶边测pH，随时调整。
注意，不可加过量NaOH，否则过碱，细胞会受不了。
6、胰酶EDTA相对比较难溶，可用磁力搅拌器，或放入4度冰箱过夜，待溶解后过滤除菌。
7、可配2－3乘的胰酶，这样比较节约时间和滤器，用的时候对上灭菌PBS即可。
8、储存液放在－20度冰箱冻存，使用液放在4度，用的时候不要放在27度水浴锅温浴，因为这样会让胰酶很快失效，使用前放在室温下一会，因为加的量很少，所以一般不会冻坏细胞。
9、消化时，向培养瓶中加入适量胰酶，个人经验，一般10cm培养皿加入0.5ml足已，加入后，立刻摇晃培养皿，使胰酶铺满，一旦铺满，立刻用负压吸引器吸去多余的胰酶，再放入37度培养箱消化。
10、注意，过量的胰酶对细胞是有害的，而EDTA过多也会影响贴壁，所以没必要把细胞泡在胰酶里面消化。
11、胰酶37消化效果最好，低于37度也有消化能力，有些容易消化的细胞在消化时甚至不需要放入培养箱。
注意，不可消化过久。
EDTA抗原修复液（1×）使用方法及注意事项
EDTA抗原修复液（1×）使用方法及注意事项EDTA抗原修复液（1×）使用方法及注意事项货号：C1033规格：100ml/500ml保存：室温密封保存，有效期12个月。
产品说明：细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阴性染色结果。
所以要求在进行免疫组化染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。
从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高检测的准确性。
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval solution，1×)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。
抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。
当冰冻切片免疫染色效果不理想时，考虑进行抗原修复。
按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算，100ml抗原修复液(1×)可以用于10个样本的抗原修复。
使用方法：1.对于石蜡切片：a.脱蜡：二甲苯3次，每次3-5min→无水乙醇2次，每次3-5min →95％乙醇1次，3-5min→90%乙醇1次，3-5min→75％乙醇1次，3-5min→蒸馏水洗2次，每次3-5min。
b.抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约15 min(加热时间可以控制在10-20min内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。
抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。
胰酶配制及注意事项
•页•博客•相册•个人档案•好友细胞消化胰酶的配制对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。
低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2 ，增加消化效力问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。
急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。
2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。
EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。
EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。
如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。
如果对贴壁没影响，那么可不离心。
3、EDTA的浓度也是质量体积比。
和胰酶一起溶于PBS。
4、注意，血清可终止胰酶的作用，但不能终止EDTA的作用，对有些细胞来说，终止消化后的离心是必要的。
5、胰酶和EDTA在pH 为8左右的时候最易溶解，在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8，注意，胰酶可使溶液变酸，所以要边溶边测pH，随时调整。
注意，不可加过量NaOH，否则过碱，细胞会受不了。
6、胰酶EDTA相对比较难溶，可用磁力搅拌器，或放入4度冰箱过夜，待溶解后过滤除菌。
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胰酶（pancreatin)是一种自猪胰中提取的多种酶的混合物，主要为胰蛋白酶（将蛋白质消化成蛋白胨）、胰淀粉酶（将淀粉消化成糖)与胰脂肪酶（将脂肪消化成甘油和脂肪酸）。
其通过在特定位置上降解蛋白，使细胞间结合处蛋白降解，这时细胞由于自身内部细胞骨架的张力作用下成为球形，从而使细胞分开。
不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。
胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。
使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。
因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。
终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
胰酶本身就是消化蛋白的，而细胞膜又富含各种膜蛋白，消化过头会对细胞造成损伤的。
细胞之间是通过CAM（细胞粘性分子）相连的，而很多粘性分子只有在有+2价金属离子，如Ca2+,Mg2+，的存在下才能行使这种功能。
在胰酶中加EDTA的作用是熬合这些二价离子，使细胞被消化成单细胞形态。
EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。
一般和胰蛋白酶配合使用。
原因在于，钙，镁等金属离子会降低胰酶活力，故在使用胰酶消化液时要配合加入EDTA。
它可以螯合这些离子，消除对胰酶的抑制。
ED TA用得非常多,一般浓度在0.02%左右。
作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。
注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。
因此，配制时应调节好酸碱度。
它不能被中和。
因此，消化下来的细胞要拿PBS洗一遍。
胰酶
这是用得最多的，常用浓度在0.25%。
作用时间根据细胞种类、作用温度、作用ph等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。
0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。
主要作用于细胞间。
配制时不能用含钙、镁离子的平衡液，否则影响活性。
终止是用血清蛋白，血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂。
保存于-20度。
胶原酶。
这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。
这种方法作用温和，对细胞损伤较小，价格也较贵，不易保存，使用期限短，中止同样是用血清蛋白。
胰酶使用注意
1．在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌、支原体污染。
2．胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，过长会损伤细胞，导致细胞铺板后生长状况较差。
贴壁细胞的消化
1．吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的死细胞/血清。
2．加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量，室温放置2-5分钟（不同的细胞消化时间有所不同）。
3．显微镜下观察，细胞明显皱缩成圆形，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者在瓶壁上有部分成点状区域细胞脱落；或者用手拍打克氏瓶正好能够使细胞脱落；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。
4．此时加入含血清的完全细胞培养液停止消化，吹打下细胞，即可直接用于后续实验；如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。
钙离子、镁离子和血清蛋白的存在会降低胰酶活力。
因此，胰酶溶液常用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks’平衡盐溶液配制成0.25%溶液。
消化细胞时，加入一些血清或含血清的培养液，或胰蛋白酶抑制剂能终止胰蛋白酶对细胞的消化作用。
如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。
1000-2000rpm离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
影响因素
•影响消化速度的因素较多，主要有胰酶溶液的活性（配制条件、冻存或4℃保存时间长短、是否反复冻融、化冻后存放时间及温度等）、消化时的温度（气温、细胞培养瓶及胰酶溶液的温度）以及所加胰酶溶液的多少等。
•加入胰蛋白酶-EDTA溶液，视细胞瓶的大小加入体积为2ml或更多（依培养器皿的大小而定），以使充分浸润。
•一般消化时间约为1至3分钟，肉眼观察瓶底由半透明（细胞单层连接成片）转为透明、点状（出现细小空隙）时，弃去细胞消化液，或看见培养瓶壁呈白茫状即可，并加入适量的完全培养液终止消化，吹打分散；如见大量细胞片状脱落，已消化过头，这样会造成大量细胞从瓶壁上脱下，甚至造成细胞破碎，此时迅速加入完全培养基终止反应。
* 血清终止的原理
其一解释其实是竞争抑制，就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合，不给胰酶消化细胞蛋白的机会。
其二解释就是终止是用血清蛋白，血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂。
* 为什么用胰蛋白酶消化
离；广义上讲，还是取决于其特异性。
谷氨酰胺
合成培养基中都含有较大量的谷氨酰胺，其作用非常重要，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，谷氨酰胺缺乏要导致细胞生长不良甚至死亡。
在配制各种培养液中都应该补加一定量（3/10000g)的谷
氨酰胺。
由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，4℃下放置1周可分解50％，故应单独配制，置于-20℃冰箱中保存，用前加入培养液。
加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时，应重新加入原来的谷氨酰胺。
一般培养液中谷氨酰胺的含量为1～4mmol/L。
可以配制200mmol/L谷氨酰胺液贮存，用时加入培养液。
配制方法为，谷氨酰胺2.922g溶于三蒸水加至100ml即配成200mmol/L的溶液，充分搅拌溶解后，过滤除菌，分装小瓶，-20℃保存，使用时可向100ml培养液中加入1ml谷氨酰胺溶液。
上面是用5个MOI的PRRSV感染Marc-145，72小时后得到的细胞病变图片。
上图是CPE，下图是正常细胞对照。
EDTA
EDTA 是一种重要的络合剂。
EDTA用途很广，可用作彩色感光材料冲洗加工的漂白定影液，染色助剂，纤维处理助剂，化妆品添加剂，血液抗凝剂，洗涤剂，稳定剂，合成橡胶聚合引发剂，EDTA是螯合剂的代表性物质。
能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性配合物。
1基本信息
【名称】：
中文名称：乙二胺四乙酸。
EDTA[1]
化学名称：Ethylene Diamine Tetraacetic Acid。
化学简称：EDTA
中文别名：四乙酸二氨基乙烷（二氨基乙烷四乙酸），托立龙。
俗名：依地酸（特别是它的钙盐络合物，医学上称为依地酸钠钙）。
英文名称：Ethylenediaminetetraacetic acid
英文别名：(Ethylenedinitrilo)tetraacetic acid,Edathamil
【线性分子式】：(HO2CCH2)2NCH2CH2N(CH2CO2H)2
【分子式】：C10H16N2O8
【分子量】：292.248（注：EDTA二钠为372.2）。
【密度】: 1.566 g/cm3
【熔点】：250℃
【贮藏】：密封保存。
常温即可。
2理化性能
白色无臭无味、无色结晶性粉末，熔点240℃(分解)。
不溶于冷水、乙醇及一般有机溶剂，微溶于热水，溶于氢氧化钠，碳酸钠及氨的溶液中，能溶于160份100℃沸水。
其碱金属盐能溶于水，钠盐在水中的溶解度见下表(g/L)。
一般用乙二胺四乙酸的钠盐代替
EDTA。
3用途
本品为钙离子络合剂，洗涤剂，血液抗凝剂。
生化研究中用作钙螯合剂，消除微量重金属导致的酶催化反应中的抑制作用。
EDTA是化学中一种良好的配合剂，它有六个配位原子，形成的配合物叫做螯合物，EDTA在配位滴定中经常用到，一般是测定金属离子的含量，在生物应用中，用于排除大部分过度金属元素离子（如铁（III），镍（II），锰（II））的干扰。
在蛋白质工程及试验中可在不影响蛋白质功能的情况下去除干扰离子。
EDTA用途很广，可用作彩色感光材料冲洗加工的漂白定影液，染色助剂，纤维处理助剂，化妆品添加剂，血液抗凝剂，洗涤剂，稳定剂，合成橡胶聚合引发剂，EDTA是螯合剂的代表性物质。
能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性络合物。
除钠盐外，还有铵盐及铁、镁、钙、铜、锰、锌、钴、铝等各种盐。
主要用途：乙二胺四乙酸主要用作络合剂，广泛用于水处理剂、洗涤用添加剂、照明化学品、造纸化学品、油田化学品、锅炉清洗剂及分析试剂。
1、高分子化学工业：用作丁苯胶乳聚合活化剂、腈纶生产装置的聚合反应终止剂；
2、日用化学工业：用作多种洗涤剂、护肤品、烫发护发剂的添加剂；
3、造纸业：用作纤维蒸煮时的处理剂、提高纸张白度，减少蒸锅中的结垢；
4、医药工业：与甲酰胺环合可制得乙亚胺，是一种主要用于治疗银屑病的药物，还作
为某些疫苗的稳定剂及血液抗凝剂；
5、纺织印染业：提高染料上色率和印染纺织品的色调和白度；
6、在食品行业：可在罐头加工等食品行业中作螯合剂，驱除金属离子的干扰。
7、在分子生物学实验中：是二价金属螯合剂，抑制核酸酶；降低细胞膜的稳定性。
此外，EDTA也可用来使有害放射性金属从人体中迅速排泄起到解毒作用。