胚胎培养液
商品化培养液对人类胚胎发育及妊娠结局的影响
商品化培养液对人类胚胎发育及妊娠结局的影响目的比较两种商品化序贯培养液Cook和Vitrolife对人类胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。
方法回顾性分析2014年8月～2015年5月于南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行体外受精（IVF）或卵胞浆内单精子注射（ICSI）的398例患者的临床资料。
根据受精方式与胚胎培养液不同进行分组，IVF周期分为Cook组（n = 103例）和Vitrolife组（n = 196例），ICSI周期分为Cook组（n = 40例）和Vitrolife组（n = 59例）。
比较同一受精方式下两种培养液组的受精率、正常受精率、卵裂率、可利用胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚率、临床妊娠率、胚胎种植率和早期流产率。
结果IVF和ICSI周期中，Cook组受精后第3天可利用胚胎率均显著低于Vitrolife组（31.22%比40.61%，33.43%比42.34%，P 0.05）。
见表1。
2.2 IVF/ICSI周期中Cook与Vitrolife培养液对胚胎发育及妊娠结局的影响IVF/ICSI周期中，Cook组的第3天可利用胚胎率显著低于Vitrolife组，而囊胚形成率及可利用囊胚率显著高于Vitrolife组，差异均有统计学意义（P 0.05）。
见表2。
2.3 不同培养液对取卵后第3天胚胎发育速度的影响对取卵后第3天胚胎的发育速度进行分析（Cook组共1716枚分裂胚，Vitrolife组共2922枚分裂胚）。
Cook组5～7个细胞的胚胎所占比例显著高于Vitrolife组，而Vitrolife组8～10细胞的胚胎所占比例显著高于Cook组，差异均有统计学意义（P 0.05）。
见表3。
3 讨论国际辅助生殖技术监督委员会（ICMART）和欧洲人类生殖与胚胎学会（ESHRE）的统计数据显示，通过辅助生殖技术受孕的孩子逐年增多，但其安全性还需进一步验证[11-12]。
植入前胚胎在体外培养过程中将经历从受精至内细胞团和滋养外胚层等不同细胞谱系的派生等过程，体外培养液可能会导致这些关键性事件发生改变进而可能会影响胚胎的后续发育[13-14]。
试管婴儿胚胎培养液
试管婴儿胚胎培养液试管婴儿胚胎培养液是在做试管婴儿过程中必不可少的重要的物质。
这是一段非常“幸福”的过程。
试管婴儿进行到受精的时候，精卵在体外结合形成受精卵，然后就会将受精卵放置在培养液中进行培养，这样做是为了模拟子宫环境，使得胚胎得到最好的发育。
那么。
我们通常使用到的培养液有哪些呢？“滔滔顾问”来为我们一一列举出来：第一种，Isolate梯度分析液。
包括Lower Layer高密度分析液和Upper Layer低密度分离液，用于精子分离。
第二种，IVF30。
用于受精、体外培养、胚胎移植和精子洗涤等。
第三种，Gamete30。
主要用于精子洗涤。
卵子清洗、ICSI操作等。
第四种，透明质酸酶。
主要用于去除颗粒细胞。
第五种，PVP液。
用于ICSI时精子制动。
第六种，卵泡冲洗液。
ASP、PBS。
第七种，组织培养油。
OVOIL，用于覆盖培养液。
第八种，囊胚培养液。
G2，用于囊胚培养期胚胎的培养与移植，使用时需加外源性蛋白(如HSA)。
取卵前一日下午准备取卵要使用的液体（也即准备培养液）过程：第一步，查看卵细胞数和E2值，估计培养皿数目并进行准备。
第二步，准备培养液。
第三步，卵泡冲洗液：ASP或PBS。
第四步，OCCC清洗液：每个3001培养皿中加入2.5ml Gamete30。
第五步，洗精液：每个患者准备4mlIVF30。
第六步，受精液：四孔培养皿中每孔加入100μl IVF30培养液，并在上面覆盖0.8ml 组织培养液，置于二氧化碳培养箱中平衡过夜。
用于卵母细胞的培养及受精。
第七步，将足够次日用的培养液放入培养箱。
准备培养液的注意事项：1、必须在专用的超净工作台内准备液体。
2、使用无菌操作技术。
3、准备以上培养液时应尽快，减少开封的培养液在培养箱外的时间。
4、加液体时，不能碰孔边，避免气泡。
5、仔细检查液体，确保其被组织培养油完全覆盖。
6 将培养皿放入培养箱时按先后顺序放置，以方第二天使用，避免拿错。
辅助生殖用培养液技术要求
辅助生殖用培养液技术要求随着科技的不断发展，辅助生殖技术已经成为解决不孕不育问题的有效手段之一。
而辅助生殖用培养液作为其中的重要组成部分，对于培养和保护胚胎发育起着至关重要的作用。
本文将就辅助生殖用培养液的技术要求进行探讨。
辅助生殖用培养液的基本要求是能够提供胚胎生长所需的营养物质和环境。
培养液中需要包含适量的氨基酸、糖类、脂类、维生素和无机盐等营养物质，以满足胚胎发育所需的能量和物质。
此外，培养液还应该具备维持适宜的温度、pH值和氧气浓度等环境条件的能力，以保证胚胎在培养过程中的生长和发育。
辅助生殖用培养液的无菌性要求非常高。
胚胎在培养液中的生长发育过程是一个极其微妙的过程，任何微小的污染物都可能对胚胎的发育产生不利影响。
因此，辅助生殖用培养液的制备过程必须严格控制，保证其无菌性，避免任何可能的污染。
辅助生殖用培养液的稳定性也是一个重要的技术要求。
由于胚胎的发育是一个时间较长的过程，因此培养液需要具备长时间的稳定性，以保证胚胎在整个培养过程中能够得到持续的营养和保护。
在辅助生殖用培养液的技术要求中，还有一个重要的方面是对于培养液成分的优化。
科学家们通过研究不同的培养液配方，不断优化培养液的成分，以提高胚胎的存活率和发育质量。
例如，一些研究表明，添加一定浓度的胎牛血清可以提高胚胎的存活率和发育能力。
而其他研究则发现，添加适量的维生素C和E可以减少胚胎的氧化应激，提高胚胎的发育质量。
因此，对于辅助生殖用培养液的优化研究，将会为辅助生殖技术的发展带来更多的机会和挑战。
总结起来，辅助生殖用培养液技术要求是非常严苛的。
它需要满足营养物质和环境条件的要求，具备无菌性，保持稳定性，并且不断优化其成分。
只有通过不断的研究和技术创新，才能够为辅助生殖技术的发展提供更好的支持和保障。
胚胎培养液的配制方法与流程
胚胎培养液的配制方法与流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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动物细胞培养及胚胎培养培养基的要求
动物细胞培养时对培养基的要求：培养基按其来源可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的营养成分与细胞在体内所需条件比较接近，但就细胞在体外生存的环境来说，合成培养液也有其独特之处，譬如成分便于控制和标准化。
体外培养的细胞直接生活于培养基中，无论何种培养基都应该能满足细胞生长所需的营养与生理的基本要求。
(1)营养成分：1）氨基酸合成培养液中的氨基酸以12种必需氨基酸为主，这些氨基酸不能由细胞自身合成，必需由培养液供给。
在氨基酸的成分中谷氨酰胺的作用特别重要，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，在配制各种培养液中应补加一定量的谷氨酰胺。
2）单糖葡萄糖是最常用和最好的单糖3）维生素维生素在细胞代谢过程中必不可少，主要可以提供辅酶和辅基。
生物素、叶酸、泛酸、核黄素、维生素B12等等4）其他成分：细胞生长过程中除需钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素外，还需要一些微量元素，如铁、锌、硒、铜、锰、钼等。
此外，为优化细胞生存环境，合成培养基中有时还添加些其他成分，包括核酸降解物、抗氧化剂等。
（2）促生长因子及激素各种激素、生长因子对于促进细胞生长、维持细胞功能、保持细胞的状态具有十分重要的作用。
如胰岛素能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸，泌乳素可促进乳腺上皮细胞生长的作用。
各种生长调节因子的作用更加明显并具有特异性。
（3）pH大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围对细胞将产生有害影响。
造成培养基pH 波动的主要物质是细胞代谢产生的二氧化碳。
解决这一问题可采取两种方法：一是用具有一定缓冲能力的培养基，如使用NaHCO3-CO2缓冲系统，二是采用开放式培养的方法，使细胞代谢产生的二氧化碳及时逸出培养皿。
（4）渗透压细胞必须生活在等渗的环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定的耐受性。
注：天然培养基主要指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。
合成培养基是人工配制的培养基，给细胞提供一个近似体内生存的环境，又便于控制和标准化的体外生存环境，但合成培养基尚未成为十分完全的培养基。
胚胎培养液用途
胚胎培养液用途
胚胎培养液是一种用于辅助生殖技术中的妇产科和避孕器械，它能够提供胚胎所需的营养和环境。
以下是胚胎培养液的一些主要用途：
1. 在IVF（体外受精）中，胚胎培养液用于支持胚胎的正常发育。
在培养过程中，医生可以监测胚胎的发育情况，并选择最健康的胚胎进行移植，以提高妊娠成功率。
2. 胚胎培养液还可以在胚胎冷冻和胚胎植入前的基因检测中使用。
在胚胎冷冻过程中，胚胎被保存在低温下，以备将来使用。
培养液可以提供胚胎所需的保护和支持，以确保其在冷冻和解冻过程中的存活率和发育能力。
3. 除了在IVF中的应用，胚胎发育培养液还可以用于避孕器械的研发和测试。
通过在培养液中培养人工合成的胚胎模型，科研人员可以评估不同避孕器械对胚胎发育的影响，以确保其安全性和有效性。
总之，胚胎培养液在辅助生殖技术和避孕器械研发中具有重要作用，能够为胚胎提供必要的营养物质和稳定的环境，提高胚胎的存活率和发育能力。
各种培养液的配方
各种溶液的配制基础公式最终摩尔浓度 = 最初摩尔浓度/ 稀释倍数稀释倍数 = 稀释后液体总量 / 需稀释液体量。
最初摩尔浓度×需稀释液体量最终摩尔浓度 =稀释后液体总量例如，需稀释液体量 0.1ml, 浓度为1mmol/L, 最终稀释总量 4 ml , 最终的浓度0.025mmol/L 以配1000ml 液体为例, g = 分子量 * 摩尔浓度(M)(或mmol/1000)配50ml 0.1mmol/L CaCl2为例 g = 147 * 0.5/1000 / 20(1000/50) 0.003675g0.3mol/L 甘露醇 g = 182.2 * 0.3 /20(1000/50) 2.733g或X = 分子量×摩尔浓度（mol/L ）/ （ 1000/ 需要量）X = 分子量×摩尔浓度（mmol/L ）/1000 /（ 1000/ 需要量）各种浓缩液的配制1.FSH 浓缩液FSH（中科院）规格10mg/瓶，用10ml水稀释，即1mg/ml。
分装规格：250μl/管（即浓缩液），配50ml OM液时，加入浓缩液1管，即5μg/ml。
2．LH浓缩液LH（宁波）规格200IU/管，用2ml 水稀释，分装成8管。
分装规格：25IU/管（即浓缩液）。
配50ml OM液时，加入浓缩液2管，即0.5IU/ml。
3．17β-E2浓缩液E22.5mg 溶于100μl 乙醇, 然后用25ml水稀释，分装成25管，分装规格：100μg/ml/管（浓缩液）。
临用前，再分装成500μl/管，配50ml OM液时，加入浓缩液1管。
4．HMG浓缩液HMG（），含有FSH / LH 75IU。
用10ml无离子水稀释。
7.5IU/ml/管(即浓缩液)。
如配100ml OM时加入1管（1ml），即终浓度0.075IU/ml 。
5．Ca、Mg离子浓缩液PBS（200ml）用Ca、Mg离子浓缩液100ml：称取CaCI2.2H2O 2.64g(100×)、MgCI2.6H2O 2g （100×），溶于100ml水中，0.0264g + 0.02g/ml CaCI2.2H2O/MgCI2.6H2O(浓缩液)。
动物细胞培养及胚胎培养培养基的要求
动物细胞培养及胚胎培养培养基的要求动物细胞培养时对培养基的要求：培养基按其来源可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的营养成分与细胞在体内所需条件比较接近，但就细胞在体外生存的环境来说，合成培养液也有其独特之处，譬如成分便于控制和标准化。
体外培养的细胞直接生活于培养基中，无论何种培养基都应该能满足细胞生长所需的营养与生理的基本要求。
(1)营养成分：1）氨基酸合成培养液中的氨基酸以12种必需氨基酸为主，这些氨基酸不能由细胞自身合成，必需由培养液供给。
在氨基酸的成分中谷氨酰胺的作用特别重要，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，在配制各种培养液中应补加一定量的谷氨酰胺。
2）单糖葡萄糖是最常用和最好的单糖3）维生素维生素在细胞代谢过程中必不可少，主要可以提供辅酶和辅基。
生物素、叶酸、泛酸、核黄素、维生素B12等等4）其他成分：细胞生长过程中除需钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素外，还需要一些微量元素，如铁、锌、硒、铜、锰、钼等。
此外，为优化细胞生存环境，合成培养基中有时还添加些其他成分，包括核酸降解物、抗氧化剂等。
（2）促生长因子及激素各种激素、生长因子对于促进细胞生长、维持细胞功能、保持细胞的状态具有十分重要的作用。
如胰岛素能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸，泌乳素可促进乳腺上皮细胞生长的作用。
各种生长调节因子的作用更加明显并具有特异性。
（3）pH大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围对细胞将产生有害影响。
造成培养基pH 波动的主要物质是细胞代谢产生的二氧化碳。
解决这一问题可采取两种方法：一是用具有一定缓冲能力的培养基，如使用NaHCO3-CO2缓冲系统，二是采用开放式培养的方法，使细胞代谢产生的二氧化碳及时逸出培养皿。
（4）渗透压细胞必须生活在等渗的环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定的耐受性。
注：天然培养基主要指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。
合成培养基是人工配制的培养基，给细胞提供一个近似体内生存的环境，又便于控制和标准化的体外生存环境，但合成培养基尚未成为十分完全的培养基。
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胚胎培养液
胚胎培养液的主要成分包括：水、离子、能量物质、氨基酸、维生素、核酸前体、蛋白质、生长因子激素、缓冲系统及气体，都有商品化现成的培养液可供购买。
水是组成任何培养液的主要成分，在IVF实验室，一般使用Milipore-Q系统产生无致热原的高质量的水( Mii-o)准备培养液及洗涤所有玻璃制品及设备。
目前我们对离子在种植前的作用了解很少，因为在培养液中有许多复杂的相互作用，很难了解一种离子的单独作用。
哺乳动物的输卵管液的特征是高钾和高氯化物浓度。
Roblero等报告高钾有利于精子获能和胚胎发育，培养液中离子的最大作用是控制培养液的渗透压，而渗透压对于人的胚胎发育是很重要的。
种植前胚胎的营养物质包括丙酮酸、乳酸和葡萄糖，胚胎从2细胞发育至囊胚期的各个阶段所需要的各种营养物质的浓度是不同的。
氨基酸在种植前和种植期间对于哺乳动物的发育有生理作用，Hardy和Gardner等观察到在培养液中加入氨基酸可加速小鼠和金黄地鼠胚胎的发育。
人IVF中最常用的蛋白质的来源是血清，一般浓度为5%～10%。
蛋白质在胚胎培养液中的作用不仅仅是固定的氮的来源，并可作为有害金属离子的整合物。
但Caro等发现人胚胎在含有或不含有母亲血清的T6培养液中培养，其受精率、胚胎分裂率和妊娠率无明显差异。
大多数胚胎培养液利用碳酸氢盐／二氧化碳作为缓冲系统以维持培养液的生理pH值为7.2—7.4，这是哺乳动物细胞周围液体的生理性缓冲液。
其缺点是若培养液暴露在空气中时间过长，pH值迅速增加可引起胚胎损伤或坏死。
在培养液上覆盖一层油可减慢培养液中的气体交换。
磷酸盐( HERPES)作为缓冲系统可不需要二氧化碳内环境维持其在空气中的pH 值。
胚胎培养液中的两种气体是氧和二氧化碳，二氧化碳不仅维持碳酸氢盐缓冲液的pH值，还可使种植前各个阶段的小鼠胚胎与蛋白质和核酸结合。
大多数IVF中心应用5%的二氧化碳。
许多作者证明，在培养液中将氧的水平减低至5%～7%时，与空气中20%的氧相比对胚胎发育更有利。