2012级《微生物与微生物工程实验》实验报告
微生物工程实验报告
实验1 培养基的配制和灭菌一、目的要求1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。
2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。
3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。
4.每2人一组，每人一份实验报告。
二、实验材料1.药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O、1N HCl、1N NaOH2.设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。
3.材料：天平、药匙、电炉、pH 试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL 注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、移液器（1mL 0.2mL）、牛皮纸、线绳、标签等。
三、实验内容(一) 培养基的配制1．培养基的配制方法和步骤1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。
2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。
3)调pH 值：用1N NaOH 或1N HCl 调pH，用pH 试纸对照。
4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。
5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。
6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。
7)灭菌：在高压锅中， 115 °C 高温灭菌30min。
2．培养基的配制A.富集培养基（液体）：海水2216E 液体培养基（g/L）：蛋白胨5.0，酵母粉1.0，海水1L，pH 8.0。
取50mL 分装250mL 三角瓶后，8 层纱布封口，外包1层牛皮纸，121℃，高温灭菌20min。
B. 2216E 斜面（固体）：海水2216E 液体培养基中加入2%的琼脂粉，加热溶化琼脂，每支试管内。
加入3mL，121℃高温灭菌20min，灭菌后摆斜面。
C. 无菌生理盐水和保种液：生理盐水： NaCl 0.85% 蒸馏水配制。
每支试管加入5mL，盖上试管帽、包扎、121°C 高温灭菌20min。
保种液：生理盐水，加25%甘油D. 碳源优化培养基：以海水2216E 液体培养基（蛋白胨0.5%，酵母粉0.1%，磷酸铁0.01%，人工海水，pH7.6）为基础，碳源分别是：葡萄糖、蔗糖、甘油、柠檬酸钠、乳糖，每种碳源的添加量为1%。
微生物学课程实习实验报告
微生物学课程实习实验报告一、实验目的通过本次微生物学课程实习，了解和掌握微生物的基本实验技能，培养观察、分析问题的能力，加深对微生物学理论知识的认识，提高实验操作的规范性和准确性。
二、实验原理微生物学实验是通过一系列的操作和技术，对微生物进行分离、纯化、鉴定和培养。
本实验主要运用微生物的分离和纯化技术，通过观察微生物的形态、结构和生理特性，对其进行分类和鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤、水、食物等自然样本；细菌、真菌等微生物；各种培养基、试剂和染色剂。
2. 仪器：显微镜、光学显微镜、培养箱、灭菌锅、天平、滴定管、移液器、试管、平板、接种针等。
四、实验步骤1. 样本的采集与处理：从不同环境中采集样本，如土壤、水、食物等，对其进行处理，提取微生物。
2. 微生物的分离：将处理后的样本接种到不同的培养基上，通过培养和观察，分离出不同的微生物。
3. 微生物的纯化：将分离出的微生物进行纯化，得到单一的微生物菌株。
4. 微生物的鉴定：通过观察微生物的形态、结构和生理特性，对其进行分类和鉴定。
5. 实验结果的记录与分析：将实验结果进行记录和分析，得出结论。
五、实验结果与分析1. 微生物的分离：通过分离，从土壤样本中分离出多种细菌和真菌，如大肠杆菌、酵母菌等。
2. 微生物的纯化：通过纯化，得到单一的大肠杆菌和酵母菌菌株。
3. 微生物的鉴定：通过观察和分析，确定分离出的微生物为大肠杆菌和酵母菌。
4. 实验结果分析：通过实验，掌握了微生物的分离和纯化技术，加深了对微生物学理论知识的认识，提高了实验操作的规范性和准确性。
六、实验结论通过本次微生物学课程实习，掌握了微生物的基本实验技能，能够独立完成微生物的分离、纯化和鉴定，为后续的微生物学研究奠定了基础。
同时，也培养了自己的观察、分析问题的能力，提高了实验操作的规范性和准确性。
七、实验体会本次实验让我深刻体会到了微生物学实验的重要性，实验操作的规范性和准确性对实验结果的影响。
微生物实验实训总结报告
一、前言微生物实验实训是生物技术、食品科学等相关专业的重要实践环节，通过实验操作，使学生在理论知识的指导下，掌握微生物学的基本实验技能，提高实际操作能力。
本次实训旨在培养学生的动手能力、观察分析能力和创新能力，为今后的学习和工作打下坚实的基础。
以下是本次实训的总结报告。
二、实训内容1. 微生物的形态观察与分类本次实训首先对微生物的形态结构进行了观察，通过显微镜观察了细菌、真菌等微生物的形态，了解了它们的生长特点。
随后，对观察到的微生物进行了分类，加深了对微生物分类学的认识。
2. 微生物的分离与纯化实训中，我们学习了微生物的分离与纯化技术，包括平板划线法、稀释涂布平板法等。
通过这些实验，掌握了微生物分离纯化的基本操作，为后续实验奠定了基础。
3. 微生物的鉴定在微生物鉴定实验中，我们学习了细菌、真菌的鉴定方法，如形态观察、生化反应、显微镜观察等。
通过这些实验，提高了我们对微生物鉴定的实际操作能力。
4. 微生物的培养与保藏实训中，我们学习了微生物的培养方法，包括液体培养、固体培养等。
同时，还学习了微生物的保藏方法，如冷冻保藏、石蜡封存等。
通过这些实验，掌握了微生物培养与保藏的基本技能。
5. 微生物的代谢实验微生物的代谢实验主要包括营养物质的需求实验、代谢产物的检测等。
通过这些实验，了解了微生物的营养需求和代谢特点。
6. 综合实训项目在综合实训项目中，我们进行了微生物发酵实验，包括培养基的制备、发酵条件的优化、发酵液的提取与纯化等。
通过这个项目，培养了我们的团队协作能力和创新思维。
三、实训收获1. 理论联系实际：通过本次实训，将微生物学理论知识与实验操作相结合，使我们对微生物学有了更深入的了解。
2. 提高实验技能：在实训过程中，我们掌握了微生物学实验的基本操作，提高了实验技能。
3. 培养团队协作能力：在综合实训项目中，我们分工合作，共同完成实验任务，培养了团队协作能力。
4. 增强创新意识：在实训过程中，我们不断尝试新的实验方法，提高了创新意识。
微生物实验报告
微生物实验报告实验名称：微生物实验实验目的：1. 掌握微生物的培养方法。
2. 了解微生物的形态特征和生长规律。
3. 观察和比较不同微生物产生的效应。
实验步骤：1. 准备培养基：取适量琼脂糖、胨粉、酵母浸膏等材料，加入适量蒸馏水煮沸溶解，煮沸后装入培养皿中，冷却并凝固。
2. 无菌操作：将培养皿放入高温高压锅中，进行高温高压处理，杀灭培养基中的微生物，避免外来微生物污染。
3. 接种微生物：选择需要培养的微生物菌株，用无菌棉签取少量微生物悬液在琼脂糖培养基表面涂抹均匀。
4. 培养条件控制：将培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和湿度，以促进微生物的生长。
观察培养皿中微生物的生长情况，并记录生长的时间和形态特征。
5. 结果观察与分析：观察不同微生物在培养基上的生长情况，比较不同微生物产生的效应。
实验结果：通过实验观察，发现不同微生物在培养基上的生长情况存在着明显差异。
有些微生物在培养基上形成了均匀的菌落，有些则形成了不规则的斑点状。
同时，可以观察到菌落的颜色、大小、形状等也存在差异。
实验结论：1. 不同微生物菌株在培养基上的生长速度和形态特征不同。
2. 微生物的生长受环境因素的影响较大，如温度、湿度等。
3. 微生物在培养基上的生长情况可以用于鉴定和分类微生物。
存在的问题：1. 对微生物的培养条件控制不够精细，可能导致结果的偏差。
2. 对微生物形态特征的观察和描述不够准确。
改进方案：1. 对微生物的培养条件进行更加精确的控制，确保实验结果的准确性。
2. 对微生物的形态特征进行更加准确的观察和描述，可以通过借助显微镜来观察微生物的细节结构。
备注：本报告中的微生物实验为虚构实验，仅作为示例展示微生物实验报告的基本结构和内容，实际实验应根据具体需要进行设计和操作。
微生物实验报告
微生物实验报告引言微生物是地球上一种极其微小的生物体，广泛存在于自然界中，对生态系统的维持和人类的生活产生着重要影响。
本次实验旨在通过观察、培养和鉴定不同类型的微生物，深入了解微生物的特性以及其在生活中的重要性。
一、实验材料与方法1. 实验材料：培养基、显微镜、培养皿、试管等。
2. 实验方法：采集样品、制备培养基、培养微生物、显微观察和鉴定等。
二、实验过程1. 采集样品：我们选择了不同的环境中进行微生物的采集，包括土壤样品、水样和不同食物表面的拭子样品。
2. 制备培养基：根据不同微生物的需求，我们制备了含有不同营养成分的培养基，如富含碳源、氮源和矿物质等。
3. 培养微生物：将采集到的样品分别在不同培养基上进行接种，并分别置于适宜的温度和湿度下培养。
4. 显微观察和鉴定：利用显微镜观察培养皿中的微生物，根据它们的形态、结构和运动方式进行初步鉴定。
三、实验结果与讨论经过一段时间的培养和观察，我们发现培养皿中出现了很多微生物。
通过显微观察，我们发现了几种常见的微生物类别，并对其进行了初步的鉴定。
1. 真菌类微生物我们从土壤样品中分离并鉴定了一种纤维状的菌丝状微生物，初步判断为真菌类。
根据其结构和颜色，我们推测这可能是一种放线菌。
放线菌广泛存在于土壤中，对于分解有机物质和抗生素的产生具有重要作用。
放线菌的发现为潜在的药物研发提供了重要线索。
2. 病原菌类微生物在拭子样品中，我们发现了一种圆形、革质质地的微生物，初步鉴定为一种病原菌。
病原菌是引起疾病的微生物，对人体健康具有潜在的危害。
这次实验的结果提醒我们加强个人卫生，并重视食品安全的重要性。
3. 酵母菌类微生物在水样中，我们发现了一种悬浮于水中的微生物，形态呈球状，初步判断为酵母菌。
酵母菌是有机物质的腐败者，也是食品、酒类和酵母发酵等产业的重要组成部分。
通过鉴定和进一步培养，我们可以研究这种酵母菌的生理特性和应用潜力。
四、实验总结与展望本次微生物实验通过采集样品、培养和鉴定微生物，深入了解了微生物的多样性和其在生活中的重要性。
微生物实验报告
微生物实验报告实验目的，通过观察微生物在不同环境条件下的生长情况，了解微生物的生长规律，为微生物在工业生产和生活中的应用提供参考。
实验材料，琼脂培养基、试管、无菌移液器、培养皿、恒温培养箱、显微镜等。
实验步骤：1. 准备琼脂培养基，将琼脂培养基加热至液态状态后倒入培养皿中，待琼脂凝固后，用无菌移液器在琼脂表面均匀涂抹微生物样本。
2. 将涂有微生物样本的培养皿放入恒温培养箱中，设置不同的温度和湿度条件，观察微生物的生长情况。
3. 每隔一定时间，取出培养皿观察微生物的生长情况，记录下微生物的数量、形态和颜色等信息。
4. 利用显微镜对微生物进行观察和拍摄，进一步了解微生物的细胞结构和生长状态。
实验结果：在25摄氏度和相对湿度为60%的条件下，大肠杆菌的生长速度最快，菌落数量呈指数增长；在30摄氏度和相对湿度为70%的条件下，酵母菌的生长状况最佳，菌落呈现出圆润饱满的状态；而在20摄氏度和相对湿度为50%的条件下，霉菌的生长速度最慢，菌落数量增长缓慢。
结论：通过本次实验，我们发现微生物的生长受到环境条件的影响很大，不同的微生物在不同的温度和湿度条件下有着不同的生长规律。
这为微生物在工业生产中的应用提供了重要的参考，也为我们更好地了解微生物的生长特性提供了依据。
在今后的实验中，我们将进一步探究微生物在不同营养条件下的生长情况，以及微生物在不同环境条件下的代谢特性，为微生物的应用和研究提供更多的数据支持。
通过本次实验，我们对微生物的生长规律有了更深入的了解，也为微生物在工业生产和生活中的应用提供了更多的可能性。
希望本次实验结果能够对相关领域的研究和应用产生积极的影响。
微生物实验实训报告总结
一、实验背景微生物实验实训是生物学教育中不可或缺的一部分，旨在通过实际操作，让学生掌握微生物的基本知识、实验技能和科学思维方法。
本次实训课程主要围绕微生物的基本形态、生理生化特性、分离纯化及培养技术等内容展开。
二、实验目的1. 掌握微生物的基本形态和生理生化特性。
2. 熟悉微生物的分离纯化及培养技术。
3. 培养学生的实验操作技能和科学思维方法。
4. 提高学生对微生物学的兴趣和认识。
三、实验内容1. 微生物的基本形态观察通过显微镜观察细菌、放线菌、真菌等微生物的形态，了解其基本结构特征。
2. 微生物的生理生化特性实验进行微生物的菌落计数、生长曲线测定、溶氧量测定等实验，了解微生物的生长规律、代谢特点及环境适应性。
3. 微生物的分离纯化实验采用平板划线法、稀释涂布法等分离纯化技术，分离纯化微生物，获得单菌落。
4. 微生物的培养技术学习微生物的固体培养、液体培养、厌氧培养等技术，了解微生物的培养条件及注意事项。
四、实验过程1. 实验准备（1）实验材料：各种微生物样品、培养基、实验试剂等。
（2）实验仪器：显微镜、培养箱、培养皿、移液器、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
2. 实验操作（1）微生物的基本形态观察：取适量微生物样品，制成涂片，进行显微镜观察。
（2）微生物的生理生化特性实验：按照实验要求，进行菌落计数、生长曲线测定、溶氧量测定等实验。
（3）微生物的分离纯化实验：采用平板划线法、稀释涂布法等分离纯化技术，分离纯化微生物，获得单菌落。
（4）微生物的培养技术：按照实验要求，进行固体培养、液体培养、厌氧培养等。
3. 实验结果与分析（1）微生物的基本形态观察：观察到的微生物形态与理论知识相符。
（2）微生物的生理生化特性实验：实验结果符合微生物的生长规律和代谢特点。
（3）微生物的分离纯化实验：成功分离纯化出单菌落，证明分离纯化技术可行。
（4）微生物的培养技术：成功培养出所需微生物，证明培养技术可行。
五、实验总结1. 实验收获（1）掌握了微生物的基本形态和生理生化特性。
微生物实习报告
微生物实习报告本次微生物实习分为两个部分，分别是实验操作和报告撰写。
实验操作部分包括细菌的培养、纯化、鉴定、药敏试验等；而报告撰写部分则是对实验结果的整理、分析和总结。
以下是本人对本次微生物实习的报告撰写部分的总结。
一、实验目的和内容本次实验的主要目的是通过对不同细菌菌种的培养与鉴定，学习了解微生物在自然环境和工业领域重要的地位和作用；并掌握细菌在人类医学、食品卫生、环境卫生等方面的检测方法和应用技术。
本次实验的内容主要包括：细菌的培养和分离、细菌的药敏试验、细菌的鉴定和特性分析。
二、实验操作和结果1.细菌的培养和分离我们以肠杆菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌四种常见细菌为实验样本。
首先，我们拿到细菌菌液，进行接种和培养。
接种方法是通过接种环在琼脂平板上进行涂布，由于接种环接触到的是有机物，所以需要高温高压灭菌，避免带入其他菌种。
接着进入培养箱内进行培养。
在培养箱内我们调节了培养温度、培养时间、光照强度、细菌营养等等条件，将每个菌种进行生长培养。
生长时间根据不同的菌种有所不同，肠杆菌需要1-2天，而枯草芽孢杆菌则需要5-6天生长才能够进行观察。
最后，我们将培养好的菌种进行分离。
分离涂板是通过不同的脱培养方法将板上的细菌分群，来获取不同菌落形态、色素沉淀和其他的特性。
分离后，肉眼下可以看到不同菌种形态、大小、色泽的差异，并从中获得多种不同的单菌株。
2.细菌的药敏试验对于一些人类疾病的治疗，我们使用的是抗生素，抗生素的药敏试验就是通过不同种类的抗生素来测试细菌的抗药性，来选择对细菌具有较好杀菌作用的抗生素。
具体的实验操作是，在琼脂培养基上涂布细菌菌液，然后在其表面筛选几种指定抗生素，形成抗生素浓度的梯度，观察菌落生长情况，判断细菌对各种抗生素的耐受力和敏感性。
3.细菌的鉴定和特性分析为了确定细菌种类，我们需要进行鉴定。
鉴定细菌的方法多种多样，有通过微观形态、生理特性、生化反应、分子生物学等多种方式来区分细菌。
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2
2.1
2.1.1实验材料
6个盛9ml无菌水的试管，盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶,制霉菌素母液（抑制真菌）。
7、媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。
8、脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗。
9、复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗。至此，革兰氏染色结束。
10、在油镜下观察。
2.2.5菌种的常规生理生化鉴定
（1）甲基红试验
挑取新的待试纯培养物少许，接种于通用液体培养基，培养于36±1°C或30°C（以30°C较好）1-5天，从第二天起，每日取培养液1ml，加甲基红指示剂1-2滴，阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定结果。 甲基红为酸性指示剂，pH范围为4.4~6.0，其pK值为5.0。故在pH5.0以下，随酸度而增强红色，在pH5.0以上，则随碱度而增强黄色，在pH5.0或上下接近时，可能变色不够明显，此时应延长培养时间，重复试验。
（3）混合碳源(或氮源)的影响
1、配制LB培养基，共计400mL装在4个锥形瓶中，其中分别加入2%葡萄糖、2%淀粉、2%葡萄糖+1%淀粉、2%葡萄糖+2%淀粉四种不同碳源，灭菌。
2、接种细菌，然后将液体培养基置于摇床上在160r/min,37℃条件下培养24h。
3、从每个培养液中取2ml，装入离心管中，在4000r/min的离心机上离心5min，从每个离心管里吸取1ml上清液测酶活力，剩余菌体稀释15-20倍在分光光度计下测菌体浓度。
配制固体培养基
配制200ml淀粉培养基，配好后装在锥形瓶中用封口膜封住，连同实验所需其他仪器放入灭菌锅中灭菌。
灭菌完成后配制土壤稀释液
称取土样lg，放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇约20min，使土样与水充分混合，将锥形瓶加塞、包扎、摇匀（无菌室里），利用恒温水浴装置80℃左右水浴，水浴锅温度恒定后维持20min（制悬液时就应先开始加热），制成10-1g/ml的土壤悬液。用一支lml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，然后用无菌吸管从此试管中吸取lml加入另一盛有9ml无菌水的试管中，混合均匀，以此类推制成10-2、10-3、10-4、10-5、10-6不同稀释度的土壤溶液。
（4）pH值的影响
1、预先配制500ml液体培养基，分装在5个锥形瓶中，灭菌。
2、用1M NaOH和1M HCl对培养基进行调配，用pH试纸测定培养基pH，分别将pH调至6.0、6.5、7.0、7.5、8.0,接种细菌，然后将液体培养基置于摇床上在160r/min,37℃条件下培养24h。
3、从每个培养液中取2ml，装入离心管中，在4000r/min的离心机上离心5min，从每个离心管里吸取1ml上清液测酶活力，剩余菌体稀释15-20倍在分光光度计下测菌体浓度。
3、实验方法部分内容要尽量详细介绍。
4、2.2.6部分要根据各班实际实验设计内容详细说明培养基的组成及培养条件。
5、实验结果部分内容根据实际实验结果撰写；图和表都必须要有标题，根据内容顺序按表1、表2…或图1、图2…按顺序列出；图的标题在图下方，横纵坐标轴需要时都要有标题和单位；表的标题在表上方，须绘制成三线表。如下所示：
淀粉酶在工业酶制剂生产中占有十分重要的地位 ，广泛应用于粮食加工 、食品工业 、酿造、发酵 、纺织品工业和医药行业 ，居市场份额第一。但是，我国的α一淀粉酶制剂的品种和生产菌株都很单一，α一 淀粉酶酶活也较国外同行业低 。淀粉酶的生产主要依靠微生物发酵。生产菌种选育近年来尽管转导转化和基因克隆等分子生物学技术已经广泛应用，但是这些方法成本较高，目前投入商业化生产的α一淀粉酶生产菌株几乎都是通过从自然界中分离得到的野生型菌株。因此不断从自然界中分离淀粉酶产生菌，并探索其最佳发酵条件有重要意义 。
2、固体培养基：淀粉6g，酵母膏13g，氯化钠5g，添加1．O％的吐温于1000mL蒸馏水中；最佳培养条件为：初始pH值为7．5；培养温度为37℃，培养时间36h。
3、原碘液 称取碘11g，碘化钾22g，用少量水使碘完全溶解，然后定容至500ml，储于棕色瓶中。
4、稀碘液 吸取原碘液2ml，加碘化钾20g并用水定容至500ml，储于棕色瓶中。
用无菌涂布器涂布。右手拿无菌涂布器平放在平板培养基表面上，将菌悬液先沿同心圆方向轻轻地向外扩展，使之分布均匀。室温下静置5～l0min，使菌液浸入培养基。
2、培养
平板倒置于37℃培养箱中培养随时观察细菌生长情况。
3、产淀粉酶菌的筛选、鉴定
①第二天早上，发现10-2，10-5等平板已有大量菌落，在菌落周围滴加碘液观察水解圈，对有水解圈且水解圈大的菌落进行斜面转接，同时用画线法将该菌落接种在另一干净平板上。
5、可溶性淀粉液 称取可溶性淀粉2g，用温水调成浆状，在搅动下缓缓倾入70ml沸水中，然后以30ml水分几次冲洗装淀粉的烧杯，加热至完全透明，定容至100ml。
6、磷酸缓冲液 称取磷酸氢二钠45.23g，柠橄酸8.07g，用水溶解并定容至1000ml，配好后用PH试纸校正至PH=6.0.
7、液体发酵培养基 采用牛肉膏蛋白胨培养基加2％可溶性淀粉，即牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaC1 5g、可溶性淀粉2g溶于1000mL蒸馏水中，pH调至7．2，121 灭菌15min。
图*：&&&&&&&&&&&
表*：&&&&&&&&&&&
表
头
部
分
6、分析与论部分内容可结合本实验实际结果和课程所学理论知识展开讨论；结论部分只做文字性总结，不出现图表。
7、第5、6部分必须认真思考撰写，内容不可缺。
8、第7部分内容要小组成员讨论决定，结果直接决定成绩的高低，请认真对待。
9、内容定稿后请更新目录：菜单栏/引用/更新目录/只更新页码。
挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加3%过氧化氢溶液2mL，观察结果。
2.2.6菌种的液体培养及产酶条件优化
（1）菌种生长曲线的测定方法
1、菌种的活化
将保藏的菌种洗脱接种到一个装有50ml液体培养基的锥形瓶里，放在摇床上在160r/min,37 条件下培养24h。
2、生长曲线的测定
将培养好的菌种分别接种在3个装150ml培养基的锥形瓶中，每个里面接4ml。接种完成后按设定的0，2，4，6，8，10，12，14，16，20，22，24，28，30，34，38，40，44h测定菌种浓度，同时在160r/min,37 的摇床上培养。
8、3%过氧化氢溶液。
2.1.3仪器设备
冰箱、高压灭菌锅、摇床、721分光光度计、恒温水浴锅、电加热器、酒精灯、试管、接种环、锥形瓶、量筒、移液管、洗耳球、玻璃棒、烧杯、PH试纸。
2.2
2.2.1含菌土样的采集
在西苑餐厅背面选取一个采样点，产去表层5cm，取5-15cm处。用无菌器具规范采样几十克，装入无菌的塑料袋或纸袋中扎好，记录采样时间、地点、采样环境等以备考证。
（5）接种量的影响
1、预先配制500ml液体培养基，分装在5个锥形瓶中，灭菌。
测定时按时间在严格无菌条件下从每个培养液中取4ml，装入离心管中，在4000r/min的离心机上离心5min，从每个离心管里吸取2ml上清液测酶活力，剩余菌体稀释30倍在分光光度计下测菌体浓度；
（2）碳源(或氮源)种类及浓度的影响
1、配制分别含葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉四种碳源2%的LB培养基，灭菌。
2、配制LB培养基，其中加入2%淀粉1%葡萄糖共计400mL，装在4个锥形瓶中，在锥形瓶中分别加入0.5%牛肉膏、蛋白胨、(NH4)2SO4、KNO3、灭菌。接种细菌，然后将液体培养基置于摇床上在160r/min,37℃条件下培养24h。
3、从每个培养液中取2ml，装入离心管中，在4000r/min的离心机上离心5min，从每个离心管里吸取1ml上清液测酶活力，剩余菌体稀释15-20倍在分光光度计下测菌体浓度。
10、正文文本字体为宋体，数字、英文等为Times New Roman，小四号，1.25倍行距，目录和1-3级标题的字体格式尽量不要调整。
11、本范本仅供参考，框架和标题内容不完备、不合理之处同学可自行修整。
12、实验一和实验二的实验报告内容请参照其他实验课程常规格式和课堂要求撰写，不做特殊要求。
产淀粉酶菌种的分离、筛选、鉴定和产酶条件优化
②将接好的斜面和平板放在恒温培养箱中培养。
③待下午时所转接细菌已长出菌落，再进行三点法培养（在接种针上粘上该细菌，在干净灭菌的平板上分三个地方点三点）。
④同时配好液体培养基，灭菌，将该细菌接种到液体培养基中，每个接3瓶。⑤将接种好的固体和液体培养基放在培养箱中培养。
2.2.4产酶菌种的革兰氏染色观察
固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。
3、晾干：让涂片在空气中自然干燥。
4、固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。
5、染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。
6、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
生命科学学院
《微生物与微生物工程实验》
实验报告
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学号：************
年级专业：2012级生物技术
小组成员：曹海锋孙向龙马红兵李鹏辉