Waters QuattroMicro API MS质谱仪调谐参数简介
不同厂家的三重四级杆质谱参数优化
现在各个仪器厂家正热火朝天的推出自己的质谱新品，宣传自己产品的灵敏度多高，稳定性多好……仪器这东西只有自己用过才知道其优点和缺点。
目前应用较多的仪器可能是AB、waters、agilent、Varian、Bruker、Shimadzu等，各个仪器的参数名称是不同的。
现在我们特向大家征集不同厂家仪器的参数名称和优化时的参数设置注意事项。
通过这种方式，希望使我们对仪器的了解和应用能够有所帮助。
参与者重奖，回帖的版友请按下列格式回复。
一.Agilent 6410A仪器型号： Agilent QQQ 6410A生产厂家：Agilent参数名称（中英对照）：Capillary 毛细管电压Fragmentor 碎裂电压（F）collision Energy 碰撞能量（CE）RF Lens RF透镜电压Source Temp 源温Gas Temp 雾化气温度gas flow 雾化气气流EMV 电子倍增器电压值MS RES 有Unit， wide，widest三种分辨力模式，Unit最高，但得到的响应最低参数优化注意事项：1 用10～1ppm对照品溶液，设EMV为50～200，先进行MS Scan 确定母离子的m/z,这时fragmentor一般为100多，分辨力模式为Unit。
2 用连续注射样品溶液，优化质谱参数：在SIM的模式下，输入母离子m/z，优化fragmentor，保证母离子的最大传输效率，即尽可能多到达碰撞池；在子离子扫描（product ion）模式下，输入母离子m/z，最优fragmentor值，考察其碎裂后的子离子，此时可以用多个扫描段、每个扫描段设定不同的collision energy，获得不同碎裂能量下的子离子，确定最丰富、最稳定的子离子在MRM（多离子检测）模式下，输入母离子、子离子的m/z，F，考察不同CE值下的响应，找到最大响应时的CE值3 优化好质谱条件后，可以先优化色谱条件，在确定的色谱条件下优化源温、脱溶剂气等参数。
WATERS公司的UPLCTQD培训资料MS调谐页面
Compromise
94 %
Smooth Appearance
4 data points/amu
100
101
102
103
104
m/z
42
数据点/Da 的数量对表观分辨率的影响
100-500 amu - Continuum - 8 pts/amu
Test3 9 (0.190) 100
353.22
4 Data Points / Dalton No Smoothing
显示的中心 质量数 MS Scan等功能 的显示 显示质量数(Da) 的范围或者宽度 显示的信号 增益
27
峰显示设置
在底部或者顶部的工 具栏双击鼠标，可以 增加或者减少增益的 设置
点击 X 一下，可以恢复前面的范围和增益设 置，再点击一下可以回到缺省的设置。
28
可以同时显示多个质谱峰
点击选择 是否显示
13
常用的质量分析器参数设置 – SIR
14
常用的质量分析器参数设置 - Daughter Scan
15
常用的质量分析器参数设置 – MRM
16
常用的质量分析器参数设置 - Parent Scan
17
典型的质量分析器参数设置 – Constant Neutral Loss
18
流路（Fluidics） 控制
设置Mass 分辨率（Resolution ）
碰撞能量（Collision Energies）已优化 执行采集
1
Accessing the TQD Tune Page
使用仪器快捷菜单 （Instrument Shortcut Item）
仪器调谐页面 (MS Tune)
waters MS UNIFI 启动仪器-调谐_ms
启动仪器,调谐(手动,自动) 仪器系统控制台做质谱调谐Unifi欢迎界面，点击My Work选择Instrument System标签，双击仪器系统进入仪器系统控制台，左边System菜单选仪器系统,Menu选Setup, Setup选Manual Tuning. 右边是质谱的调谐窗口,可以调整和查看状态.例如,开关高压;开关氮气,碰撞气;选择电离模式,四极杆工作模式;源参数设置及反馈值等等.实时显示最多四个离子质量范围出峰.样品调谐XevoTQs质谱源一般性参数设定:Capillary=3, Sample cone=30, Source offset=60, Source Temperature=150, Desolvation temperature=450, Cone gas flow=150, Desolvation gas flow=1000, Nebulizer gas pressure=7.0, Collision=4, Collision gas flow=0.15点击Fluidcs,可以进行质谱流路设置.建议调谐液用目标化合物标准溶液,浓度不高于100ng/mL,放入A/B/C其中一个流路.先选择Reservoir-Wash(质谱清洗液,用1:1 ACN:Water),purge2次,然后Reservior选择调谐液流路,如A/B/C,purge1次.Flow path选Combined,流动相选择LCMS实验使用的A/B路,一般比例为1:1,流速设0.3ml/min(或LCMS实验用流速),Infusion flow rate设为10ul/min.点击Startinfusion.下方,调整质谱峰观察窗口,仅打开一个峰窗口如Plot1,MS1 scan监测目标母离子,span用10.质谱采集模式用MS,关碰撞气.结合Source标签下的参数,主要调整毛细管电压, 锥孔电压,脱溶剂温度,气流量,将母离子信号调整到最高;母离子质量数精确到小数点后一位,在下方的监测窗口使用Daughter scan,span设大,确保范围包括50Da到母离子质量数,质谱采集模式用MS/MS,开碰撞气.结合Source标签下的参数,主要调整碰撞能量.确定主要碎片,之后改变span为10,确定该主要碎片对应的最佳碰撞能量.全部调整好后点击保存按钮,保存调谐界面参数.如果调谐标准品纯度高,目标母离子峰附近无干扰峰,强度足够,信号稳定,也可以使用自动调谐,做compound optimization.左边质谱仪的Setup里选Compound Optimization.右边点Create,输入化合物名称,单同位素准确分子量(精确到小数点后一位)或分子式,完成后点OK之后,点Settings,输入最小碎片,碎片数目,锥孔电压和碰撞能量优化的范围,完成后点OK点击Start开始,在Optimization对话框输入毛细管电压优化范围,推荐手动设定值,锥孔电压和碰撞能量在一定的范围优化,Sample Reservoir 选择实际调谐液位,最后点击OKcombineB等待.优化完成后,结果如图勾选要导出的MRM,并点击Export.在导出结果对话框,输出报告名称,描述,位置.一定勾选Export to,选择一个库.最后点击OK.那么导出到库的化合物方法便可在以后的Analysis method里调用了.。
QuattroMicro中文操作手册
QuattroMicro中文操作手册Quattro Micro 操作手册目录开启控制软件MassLynx二、以设定溶液开始质谱调谐，确定质谱仪的状态三、信号提取四、查看文件五、液相色谱操作程序六、测试送检样品之标准操作程序七、子离子扫描模式八、质量校正九、当长时间停电或移机必须关机时，关闭电源，和泄真空的程序一、开启控制软件MassLynx：1. 从桌面以鼠标左键双击MassLynx图示打开文件。
2. 开启后将自动开启的预设页面，如图示：3. 单击质谱调谐图示（MS Tune）以开启质谱控制页面4. 开启后质谱调谐页面如下：5. 该画面即为调谐和信号提取的主要画面。
二、以设定溶液（setup solution）开始质谱调谐，确定质谱仪的状态1. 在质谱调谐页面（MS Tune）选择扫描模式和扫描离子质量范围：选中全部四个扫描功能，选择全扫描（MS Scan），设定扫描质量（Mass）为175.1、609.3、1080.8、2034.6，扫描范围（Span）为10（或5）。
2. 以注射针筒抽取设定溶液（setup solution），以直接进样（infusion）的方式连接注射针和管路，让样品得以被注射针泵推送，直接进入质谱仪分析。
3. 在质谱调谐页面（MS Tune）以鼠标左键单击氮气（API GAS）和注射针的图示，接着单击开始操作键（Press for Operate），直到原本红灯的图标显示为绿灯（此时该图标所显示的文字为Press for Standby）。
单击注射针图示则注射针泵会开始运作而推送样品；单击氮气会开始供应三方面的氮气：雾化气体（nebulizing gas）、去溶剂气体（desolvation gas）、气帘气体（cone gas），可以确保样品的气化；而单击操作键之后会开始供应电压，使得样品带电形成离子并使离子通过质谱仪分析。
4. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括号内的数值即为设定值：LM Resolution 1（15.0）、HM Resolution 1（15.0）、Ion Energy 1（0.0）、Entrance（50）、Collision（2）、Exit（50）、LM Resolution 2（15.0）、HM Resolution 2（15.0）、Ion Energy 2（3.0），此为配合质谱扫描的参数。
Waters 液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程
Waters Quattro Premier液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程（SOP）2004-11-09目录1．简述 (1)1.1样品入口 (2)1.2真空系统 (2)1.3数据系统 (2)2．环境要求 (3)3．仪器使用 (3)3.1开机步骤 (3)3.2质谱调谐窗口各项参数设定 (5)3.3创建项目 (6)3.4质量校正 (7)3.5调谐(Tuning) (14)3.6信号采集 (15)3.7 2695型液相色谱（Inlet Method） (19)3.8创建质谱方法 (25)3.9创建样品列表 (27)3.10 运行样品列表（ Sample List） (30)3.11 QuanLynx来编辑定量方法 (39)3.12 用QuanLynx进行批处理 (44)3.13 查看QuanLynx定量结果 (47)3.14关机 (52)4．注意事项 (53)5．维护与保养 (54)1. 简述Quattro Premier (Figure 1-1 )是一台高效串联四极杆质谱仪，用于常规LC/MS/MS分析。
Figure 1-1 Quattro Premier Mass Spectrometer样品的离子化发生在处于大气压状态下的离子源中。
离子通过取样锥孔进入真空系统，然后穿过源travelling-wave（T-Wave TM）进入第一级四极杆，在此按照质/荷比(m/z)过滤(Figure 1-2 )。
按照质量数分开的离子进入T-Wave碰撞室，进一步发生碰撞诱导裂解（CID）或者直接进入第二级四极杆。
碎片离子通过第二级四极杆进行质量分析。
离子最后经过倍增电极，phosphor和光电倍增器检测系统检测。
输出信号被放大，数字化后传给信号系统。
Figure 1-2 Quattro Premier Schematic1.1 样品入口该仪器可以与下列两种进样方式组合：a. HPLC系统，可以提供LC流出组分的分子量信息，进行目标分析和定量。
waters-液质联用
waters-液质联用1.适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、XevｏＴＱ-Sm ｉcro ＭS/MＳ质谱仪,适用于食品、药品中各种有机物得定性、定量分析，就是一种具有高灵敏度得检测仪器，仪器由主机、计算机与数据处理软件等组成.2、职责2、１操作人员按照本规程操作仪器,认真填写实验使用记录。
２、２保管人员负责对仪器进行定期维护与保养。
2、３科室负责人负责监督检查规程得执行。
３.操作程序日常操作步骤：准备UPＬC —→设置样品表—→运行样品—→定量-→打印报告。
注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪,使其保持真空。
建立新方法与ｐｒｏject得操作步骤:准备ＵPLC -→建立新得projecｔ-→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UＰLC方法—→设置样品表-→运行样品—→定量—→打印报告。
3、1开机：3、１、１彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接,开氮气发生器、开氩气,小表<０、1mpａ.打开计算机电源> 等待windows正常启动＞电脑界面右下角网络图标红叉.打开UPLC自动进样器电源,等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。
打开UPLC泵电源,等约３０ｓ或者就是有响声。
打开质谱电源 ,等待５mｉn,离子源透视镜里面亮。
打开Masslyｎｘ软件，masｓlynx主界面————-左侧iｎｓtrｕｍent————Ｍass ｔunｅ—-—界面菜单栏ｖaｃｕｕm-—－ｐｕmｐ同样界面左侧偏上diagnosｔics--—vacuum－－—ａnalyｓer MS1 tｕrbo sｐeeｄ［％]要在5 分钟内升到80.至少抽真空４个小时> 查瞧真空状态主界面ｍasｓｃonsｏle---界面左侧xevo tq ms ｄｅteｃtor加号展开－-—ｍs d ｉsplａy 〉碰撞室真空度〉达到１、3２Ｅ—5 mBaｒ。
3、1、2 日常开机顺序(仪器未关闭) 开氮气发生器、开氩气,小表〈０、1mpａ，打开Maｓslynx软件，进入工作站。
waters三重四极杆质谱仪离子参数
Waters三重四极杆质谱仪离子参数摘要本文档介绍了W at er s三重四极杆质谱仪的离子参数，包括离子产生、离子传输和离子检测等相关内容。
通过对这些参数的了解，能够帮助用户更好地进行质谱实验设计和数据分析。
1.引言W a te rs三重四极杆质谱仪是一种常用的质谱仪器，广泛应用于生物医药、环境分析、食品安全等领域。
在使用该仪器进行质谱实验前，了解离子参数是非常重要的。
2.离子产生离子产生是质谱实验中的第一步，它决定了样品分子在质谱仪中是否能够形成离子。
常见的离子产生方式包括电离源和化学离化源。
2.1电离源电离源是将样品分子转化为离子的装置，常用的电离源包括电喷雾源（E SI）和化学电离源（AP CI）。
ES I常用于水溶性样品的离子化，而A P CI适用于脂溶性样品。
2.2化学离化源化学离化源通过化学反应将样品分子转化为离子。
常见的化学离化源包括化学电离源（CI）和电喷雾化学离化源（A PC I）。
C I适用于不易电离的分子，而AP CI则适用于易挥发的分子。
3.离子传输离子传输是离子从离子源进入质谱仪分析区的过程，它主要涉及离子传输管道和离子激发。
3.1离子传输管道离子传输管道是质谱仪中的核心组件，它负责将产生的离子引导到质谱仪分析区。
离子传输管道的设计要考虑离子的稳定传输和损耗尽量减小。
3.2离子激发离子传输过程中，离子可能会因与传输过程中的气体分子碰撞而发生激发。
离子激发会影响质谱实验的灵敏度和分辨率，需要合理控制。
4.离子检测离子检测是确定样品中离子种类和含量的过程，常用的离子检测器包括串行质谱检测器和飞行时间质谱检测器。
4.1串行质谱检测器串行质谱检测器将分子离子分成不同的质荷比，通过电场对离子进行分离和选择，最后进行离子检测。
4.2飞行时间质谱检测器飞行时间质谱检测器利用离子在磁场中的偏转或电场中的加速来实现质荷比的分离，从而进行离子检测。
5.结论通过对W at er s三重四极杆质谱仪离子参数的介绍，我们了解了离子产生、离子传输和离子检测等关键环节。
Quattro Micro中文操作手册
Quattro Micro 操作手册目录开启控制软件MassLynx二、以设定溶液开始质谱调谐，确定质谱仪的状态三、信号提取四、查看文件五、液相色谱操作程序六、测试送检样品之标准操作程序七、子离子扫描模式八、质量校正九、当长时间停电或移机必须关机时，关闭电源，和泄真空的程序一、开启控制软件MassLynx：1. 从桌面以鼠标左键双击MassLynx图示打开文件。
2. 开启后将自动开启的预设页面，如图示：3. 单击质谱调谐图示（MS Tune）以开启质谱控制页面4. 开启后质谱调谐页面如下：5. 该画面即为调谐和信号提取的主要画面。
二、以设定溶液（setup solution）开始质谱调谐，确定质谱仪的状态1. 在质谱调谐页面（MS Tune）选择扫描模式和扫描离子质量范围：选中全部四个扫描功能，选择全扫描（MS Scan），设定扫描质量（Mass）为175.1、609.3、1080.8、2034.6，扫描范围（Span）为10（或5）。
2. 以注射针筒抽取设定溶液（setup solution），以直接进样（infusion）的方式连接注射针和管路，让样品得以被注射针泵推送，直接进入质谱仪分析。
3. 在质谱调谐页面（MS Tune）以鼠标左键单击氮气（API GAS）和注射针的图示，接着单击开始操作键（Press for Operate），直到原本红灯的图标显示为绿灯（此时该图标所显示的文字为Press for Standby）。
单击注射针图示则注射针泵会开始运作而推送样品；单击氮气会开始供应三方面的氮气：雾化气体（nebulizing gas）、去溶剂气体（desolvation gas）、气帘气体（cone gas），可以确保样品的气化；而单击操作键之后会开始供应电压，使得样品带电形成离子并使离子通过质谱仪分析。
4. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括号内的数值即为设定值：LM Resolution 1（15.0）、HM Resolution 1（15.0）、Ion Energy 1（0.0）、Entrance（50）、Collision（2）、Exit（50）、LM Resolution 2（15.0）、HM Resolution 2（15.0）、Ion Energy 2（3.0），此为配合质谱扫描的参数。
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Waters QuattroMicro API MS/MS 质谱仪调谐参数简介
(2009-12-25 11:23:46)转载▼
分类：心灵诺亚
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调谐
教育
两年前开始接触Waters的QuattroMicro API 时对调谐界面上的参数没有什么深入的了解。
使用时基本上是无原则的尝试。
不但消耗了大量的时间，而且效果也不佳。
最近有机会和工程师进行了比较深入的探讨，对这些参数的调谐有了深入的认识。
在此把自己的收获和理解做一个备忘录。
同时也希望能够对有需求的同行有所帮助。
欢迎讨论指导。
在此也感谢Waters 的工程师。
毛细管电压：高压提供液滴过量电荷，从而离子化。
过低离子化效率低。
过高会引起离子源内碎裂。
调谐目标是得到较高的分子离子信号强度。
一般在2－4V之间。
锥孔电压(Cone voltage):锥孔电压主要是影响离子进入质谱的速度。
锥孔电压高，离子速度快，离子损失小，检测灵敏度高。
反之则相反。
过高的锥孔电压会增加离子间的碰撞，引起源内裂解，产生碎片离子。
通常再25－70V之间优化。
低分子量选用低电压，高分子量选用高电压。
二级锥孔萃取电压（Extractor）:二级锥孔电压的作用是让进入到一级锥孔的离子发生偏转(大家都知道waters 的Z-spray 哈), 从而使样品离子进入六级杆透镜前去除大部分基质, 减少干扰. 二级锥孔电压的工作机理以及对分析的影响与前面谈到的锥孔电压(Cone voltage)基本相同. 通常再3－10V之间优化。
射频透镜(RF lens):射频透镜也就是六级杆, 其上加载射频脉冲电压和一很小偏置电压. 六级杆主要起聚焦离子的作用, 类似光学的透镜, 所以称作射频透镜. 六级杆的清洁程度会影响离子的聚焦效果, 从而影响灵敏度. 对于新仪器六级杆比较清洁, 电压为”0” 时及可获得较高的灵敏度. 如果你的仪器需要较高的六级杆电压才能达到较高的灵敏度, 则说明你的仪器比较脏了.
源温度(source temperature):高温帮助溶剂蒸发。
源温度设定主要受样品溶剂影响. 如果样品溶剂沸点较高则需要较高的源温度, 如水. 一般情况下源温度不超过120摄氏度. 当离子由大气压进入到真空时会膨胀吸热, 造成温度降低. 在这种情况下, 水, 甲醇可能会凝结产生M+18等离子造成灵敏度降低.
脱溶剂气温度(Desolvation temperature):高温提高溶剂、离子蒸发气化。
根据流动相的比例和流速大小优化。
含水比例高需要较高的温度。
通常设在350C左右。
一般不超过400C。
温度过高”O”圈易被氧化。
脱溶剂气流量(Desolvation Gas):脱溶剂气主要的作用是去除溶剂。
如果溶剂含水量高，流速大，脱溶剂气流量应大些。
一般在500－600升/小时。
气帘气流量（Cone Gas）：气帘气的主要作用是去除中性离子。
气帘气过高会造成灵敏度降低。
在我的实际应用中一般设在40－50。
如果发现升高气帘气流量时灵敏度急剧降低，有可能是”O”型圈老化了。
清洗锥孔时尽量不要洗“O”型圈。
低端/高端分辨率（LM/HM Resolution）:主要是通过调节直流电压和射频电压的比值来调整分辨率。
LM/HM 高，谱峰窄，分辨率高，但灵敏度有所降低。
LM/HM低则相反。
个人以为在做多反应监测时一级四极杆的分辨率可以设的稍微低一点儿，从而提高灵敏度。
优化其它参数时一般先用比较低的分辨率。
其它参数调好后，再设置到希望的高分辨率。
离子能量（Ion Energy）：离子能量主要影响离子在四极杆内的运行速度。
离子能量高，运行速度快，损失小，灵敏度高。
但速度快，分辨率会降低。
（看来灵敏度和分辨率很难兼得）。
调谐时在不降低信号强度的情况下，离子能量越低越好。
Ion energy 1 一般设在0.5。
Ion energy 2 在调谐时一般也设在0.5，在分析时一般不超过3。
碰撞室进口电压/碰撞室出口电压(Entrance/Exit)：进口出口电压影响离子在碰撞室的通过速度。
电压高通过速度快，电压低通过速度低。
在做全扫描（mass scan）或选择离子（SIM）时，由于不需要碰撞，我们希望离子快速通过，减少离子损失，从而提高灵敏度。
在这种情况下进出口电压都设得比较高，如50/50。
在做多反应监测（MRM）时，我们希望离子在碰撞室通过慢一些，从而充分碰撞、反应，提高灵敏度。
这时进出口电压可以设的低一些，如1 /1。
碰撞室真空（Vacuum, Gas cell pirani）:碰撞室真空如何影响分析本人还不甚了解,大概室影响碰撞能量吧。
（个人理解：真空度高，离子自由行程大，碰撞能量大，但子离子产率低）碰撞室真空貌似有一个行业的标准设定。
一般发表的文章上都说明设定值，看起来还比较重要。
一般设定在3.3*10-3mbar。