芸香苷的提取、分离和鉴定
槐花中芸香苷的提取分离、精制、鉴定二.ppt
香苷的乙醇液作为供试液做芸香苷化学检识反应。
槐花中芸香苷的提取分离、精制、鉴定（二）
• 1、盐酸—镁粉反应：取供试液2ml于试管中，加 入少许镁粉，再向试管中滴加浓盐酸数滴，观察 现象。
• 2、三氯化铝反应：在滤纸片上分别滴两滴供试液 （注意相互不要晕染），其中一滴作为空白对照， 另一滴上面滴一滴三氯化铝溶液。观察二者颜色 变化，并在紫外灯下观察荧光。
• 3、氨熏反应：在滤纸片上分别滴两滴供试液，其 中一滴作为空白对照，将另一滴点有供试液的部 分倒扣在浓氨水的瓶口上。观察二者颜色变化。
槐花中芸香苷的提取分 离、精制、鉴定（二）
Байду номын сангаас
槐花中芸香苷的提取分离、精制、鉴定（二）
• 一、实验目的：使芸香苷在水中重结晶，去除杂质达到精 制的目的。
• 二、实验原理：芸香苷粗品易溶于热水，难溶于冷水。 • 三、操作步骤： • （一）抽滤得到芸香苷粗品。 • （二）芸香苷的精制 • 取芸香苷粗品5/6份，置于500ml烧杯中，加蒸馏水300ml
芸香苷化学检识实训报告
一、引言芸香苷（Rutin），又称芦丁，是一种天然存在于多种植物中的黄酮类化合物，具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗炎、抗凝血等。
为了深入理解芸香苷的化学性质和检识方法，我们进行了芸香苷化学检识实训。
本报告将对实训过程、实验结果及分析进行详细阐述。
二、实训目的1. 了解芸香苷的化学结构、性质和生物活性。
2. 掌握芸香苷的提取、纯化和检识方法。
3. 提高实验操作技能和化学分析能力。
三、实训原理芸香苷是一种黄色针状晶体，易溶于水、甲醇、乙醇等溶剂。
其分子结构中含有多个酚羟基，具有较强的还原性。
在碱性条件下，芸香苷可被氧化成醌类化合物，进而与三氯化铁（FeCl3）反应生成蓝紫色络合物，这一特性可用于芸香苷的检识。
四、实训材料与仪器1. 材料：芸香苷标准品、芦荟叶、无水乙醇、氢氧化钠、三氯化铁、硫酸、蒸馏水等。
2. 仪器：索氏提取器、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、紫外-可见分光光度计、分析天平、滴定管、试管等。
五、实训步骤1. 芸香苷提取：将芦荟叶粉碎，用无水乙醇提取，提取液过滤，滤液旋转蒸发浓缩，得到芸香苷粗品。
2. 芸香苷纯化：将芸香苷粗品用甲醇重结晶，得到纯净的芸香苷晶体。
3. 芸香苷检识：将纯净的芸香苷晶体溶于水，加入氢氧化钠溶液，再加入三氯化铁溶液，观察颜色变化。
六、实验结果与分析1. 芸香苷提取：通过索氏提取法，从芦荟叶中成功提取了芸香苷。
2. 芸香苷纯化：通过重结晶法，得到了纯净的芸香苷晶体。
3. 芸香苷检识：在碱性条件下，纯净的芸香苷晶体与三氯化铁反应，生成蓝紫色络合物，证明实验成功。
七、实训总结1. 本实训成功提取、纯化和检识了芸香苷，掌握了其化学性质和检识方法。
2. 通过实训，提高了实验操作技能和化学分析能力，加深了对黄酮类化合物的认识。
3. 芸香苷作为一种天然活性成分，具有广泛的应用前景，值得进一步研究和开发。
八、建议1. 在提取过程中，可根据实际情况调整提取溶剂和提取时间，以提高提取效率。
芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
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• 实验器材： • 试药：槐花米、0.4%硼砂水溶液、石灰乳、蒸馏
水、浓盐酸、2%硫酸、乙醇、1%氢氧化钠溶液、 1%盐酸溶液、10%α-萘酚溶液、浓硫酸、镁粉、 1%醋酸镁甲醇溶液、正丁醇、醋酸 • 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、 烧杯、层析筒、试管
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实验内容与方法：
• 一、芸香苷的提取 • 取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，
加0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加石灰乳调PH8， 加热微沸30分钟，静置几分钟倾出上清液，用棉花 过滤，药渣同上重复一次。合并滤液用6N盐酸调 PH2~3，放置冰箱中析晶（一夜以上），待全部结 晶析出，抽滤，得粗芸香苷（滤饼用水洗3~4次）， 放置空气中自然干燥得粗品，称重、计算提取率。
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实验内容与方法：
• 二、芸香苷的精制
• 取2g加蒸馏水400ml，加热煮沸溶解，趁热 抽滤，滤液放置过夜，析晶，抽滤，得精制 芸香甙。烘干。
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实验内容与方法：
• 三、芸香苷的水解
• 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加 2%H2SO4溶液80ml，加热回流30分钟至1小时， 开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针状结 晶，即为槲皮素。放冷抽滤得结晶，滤液保留作为 糖的检查，沉淀物用蒸馏水洗至中性，抽干水份， 晾干称重，得粗制槲皮素。必要时可用稀乙醇重结 晶。
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• 五、芸香苷及槲皮素的纸层析鉴定 • 层析材料：层析滤纸 • 点 样：（1）提取的芸香苷乙醇溶液
（2）提取的槲皮素乙醇溶液 • 展开剂：正丁醇∶醋酸∶水（4∶1∶5）上层溶液 • 显色：（1）先在可见光下观察斑点颜色，然后在
药材粗粉中芸香苷分离流程
药材粗粉中芸香苷分离流程一、药材粗粉的准备。
咱得先有药材粗粉呀。
这药材粗粉就像是一堆宝贝原料，等着咱们去发掘里面的芸香苷呢。
这些粗粉是经过初步处理得到的，可能就是把药材简单地碾碎之类的。
这一步虽然看起来简单，但可重要啦，要是粗粉的质量不好，后面的分离就会麻烦不少呢。
比如说，要是粗粉太粗了，可能里面的芸香苷就不好被提取出来；要是太细了，又可能会有一些杂质混在里面，增加后续分离的难度。
二、提取过程。
接下来就是提取芸香苷啦。
这就像从一堆沙子里挑出金子一样。
通常呢，会用到一些溶剂，比如说乙醇之类的。
把药材粗粉放到乙醇里，就像给粗粉洗个澡，芸香苷就会慢慢地跑到乙醇这个“大澡堂”里。
这个过程得控制好一些条件哦。
比如说温度，不能太高也不能太低。
温度太高了，可能会把一些其他的成分也带出来，就像洗澡水太烫，把不该洗下来的东西也洗下来了。
温度太低呢，芸香苷又可能不太愿意出来，变得懒洋洋的。
而且溶剂的量也得合适，太少了洗不干净，太多了又浪费。
三、初步分离杂质。
等芸香苷跑到乙醇里之后，可不能直接就说得到纯的芸香苷啦，里面还有好多杂质呢。
这时候就像是要把混在金子里的小石子挑出来。
可以用一些过滤的方法，比如说滤纸过滤呀。
把那些大颗粒的杂质先挡住，不让它们跟着芸香苷混在一起。
这一步就像是给芸香苷和杂质来个初步的分家，让它们先拉开点距离。
不过呢，这时候还是有一些小的杂质在里面，还得继续努力。
四、进一步精制。
那怎么把剩下的杂质去掉呢？这就需要一些更巧妙的办法啦。
有时候会用到重结晶的方法。
就像让芸香苷重新找个舒服的家一样。
把含有芸香苷和杂质的溶液慢慢地改变条件，让芸香苷自己重新结晶出来，而杂质就留在溶液里。
这个过程就像是给芸香苷做个小手术，把那些不好的东西都去掉。
不过这可得小心翼翼的，条件要是没控制好，芸香苷可能就不好好结晶，或者结晶出来的也不纯。
五、最后的检测和确定。
经过前面这些步骤，咱们觉得得到纯的芸香苷了，可不能就这么自信满满地结束哦。
药材粗粉中芸香苷分离流程
药材粗粉中芸香苷分离流程一、药材粗粉的准备。
咱得先有药材粗粉呀。
这药材粗粉就像是一群小伙伴聚在一起，里面啥都有呢。
这些药材可能是从山上采来的，或者是从市场上买来的，不过都得经过处理变成粗粉。
就像把一堆水果做成水果泥之前，先得把水果切成小块一样。
这个粗粉的粗细程度也是有讲究的，不能太粗，不然后面的步骤不好进行，也不能太细，太细了可能会在一些步骤中造成损失。
二、提取。
有了药材粗粉之后，就要把芸香苷从这堆“小伙伴”里提取出来。
这就像是从一群人中找到特定的那个人。
通常呢，我们会用到溶剂提取法。
溶剂就像是一个超级英雄，它能把芸香苷从药材粗粉里“拽”出来。
比如说乙醇，它就很厉害，能够溶解芸香苷。
把药材粗粉放到乙醇里，然后让它们充分地混合，就像是在开一场盛大的派对，乙醇分子和芸香苷分子在里面欢快地跳舞。
这个过程可能需要一些时间，就像炖肉一样，小火慢炖才能出好味道。
三、过滤。
提取完了之后，可不能就这么算了呀。
溶液里除了有我们想要的芸香苷，还有一些杂质呢，就像在一杯果汁里有果肉渣一样。
这时候就要过滤了。
过滤就像是一个筛子，把那些不需要的杂质筛出去，只留下含有芸香苷的溶液。
可以用滤纸来过滤，看着溶液一点点地透过滤纸，就像水穿过细密的沙子一样，感觉还挺奇妙的呢。
四、浓缩。
过滤后的溶液里芸香苷的浓度可能还不够高，这时候就要进行浓缩了。
想象一下，把一大锅汤熬成一小碗浓汤，精华都在这小碗里了。
我们可以用加热蒸发溶剂的方法来浓缩，就像把水烧开，水慢慢变成水蒸气飞走了，剩下的就是更浓的含有芸香苷的溶液了。
不过在加热的时候要小心哦，不能太猛了，不然芸香苷可能会被破坏，那就前功尽弃了。
五、沉淀。
浓缩后的溶液里芸香苷还是混在其他东西里面呢，这时候就要想办法让芸香苷单独出来。
我们可以通过改变溶液的酸碱度之类的方法让芸香苷沉淀下来。
就像让一个本来在溶液里游来游去的小虫子突然停下来，沉淀在水底。
当看到芸香苷开始沉淀的时候，就像看到宝藏慢慢浮现一样，心里可激动了呢。
实验三中药化学成分提取槐米
实验三槐米中芸香苷的提取、精制和检识
一、目的要求
掌握芸香苷的主要性质及提取、分离精制和检识方法。
二、实验原理
根据芸香苷可溶于碱水，在酸性条件下又可沉淀析出，采用碱溶酸沉法提取。
根据芸香苷在冷水和热水中溶解度相差较大，以水为溶剂,采用结晶法进行精制。
三、实验方法
（一）芸香苷的提取
1.不锈钢锅中加500毫升水，加热至沸后加入槐米50克，
用石灰乳调pH值8-9，继续加热20分钟，随时补充损失的水分，趁热用纱布过滤，药渣再提取一次，两次滤液合并。
2.用浓盐酸调提取液使pH值2-3，放置过夜。
3.抽滤，将沉淀抽干，置于室温中自然干燥，得芸香苷粗品。
（二）芸香苷的精制
1.取芸香苷粗品2克置800毫升的烧杯中，加水约400毫升，
加热至沸，使芸香苷完全溶解，趁热抽滤，滤液放置过夜，析晶。
2.抽滤，自然干燥，得芸香苷精制品。
（三）芸香苷的检识(要求写出反应现象)
1.氢氧化钠实验
取芸香苷少许置于试管中，加入2ml蒸馏水，振摇。
滴加2-3滴氢氧化钠溶液，芸香苷溶解，呈黄色澄明溶液。
再滴加盐酸溶液2-3滴，观察是否有沉淀生成。
2.α-萘酚—浓硫酸实验（Molish反应）
取芸香苷少许置干燥试管中，加2ml无水乙醇，振摇。
再滴加2-3滴α-萘酚溶液，振摇。
将试管倾斜，沿管壁滴加1ml 浓硫酸，观察两液面交界处颜色变化。
3.盐酸-镁粉实验
取芸香苷少许置于试管中，加入2ml 50%的乙醇，水浴加热溶解。
加入少许镁粉，再加入盐酸数滴，观察颜色变化。
实验四--槐米中芸香苷的提取分离与鉴定
实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定芦丁(Rutin)亦称芸香甙(Rutisude)，广泛存在于植物界中。
现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、荞麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。
尤以槐花米和荞麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。
槐花米为豆科植物槐(Sophora japonica L。
)的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达12%~16%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。
芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性。
临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。
槐花米中主要化学成分的结构及性质：1.芦丁(Rutin)淡黄色细小针状结晶，mp.174℃~178℃(含三分子结晶)，188℃(无水物)。
溶解度：水：1:100(冷)，1:200(热)甲醇：1:100(冷)，1:9(热)乙醇：1:650(冷)，1:60(热)吡啶：1:11.7(冷)，易溶(热)不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。
可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。
2. 槲皮素(Quercetin)即芸香甙甙元，为黄色结晶，mp.313℃~314℃(含2分子结晶水)，316℃(无水物)。
溶解度：乙醇：1:290(无水乙醇)，1:23(热)可溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮、吡啶、冰醋酸。
不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚等。
3. 皂甙粗品为白色粉末，mp.210℃~220℃(分解)。
易溶于水、吡啶，能溶于200倍的甲醇中。
酸水解后得白桦脂醇、槐二醇二种皂甙元及葡萄糖，葡萄糖醛酸及葡萄糖醛酸内酯。
(1) 白桦脂醇(Betulin)无色针晶，mp.251℃~252℃。
能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚等溶剂，难溶于石油醚及水。
(2) 槐二醇(Sophoradiol)无色针晶，mp.219℃~220℃或224℃。
能溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇中，难溶于水。
芸香苷实验报告
一、实验目的1. 掌握芸香苷的提取方法。
2. 学习黄酮类化合物的分离纯化技术。
3. 了解芸香苷的鉴定方法。
4. 培养实验操作技能和科学思维。
二、实验原理芸香苷（Rutin）是一种天然黄酮类化合物，广泛存在于槐米、山楂、茶叶等植物中。
本实验采用醇提法提取芸香苷，通过分离纯化得到较高纯度的芸香苷，并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 槐米- 甲醇- 氢氧化钠- 碳酸钠- 盐酸- 硝酸- 氢氧化钠溶液- 醋酸铅溶液- 醋酸镁溶液- 香草醛溶液- 水合氯醛溶液- 蒸馏水- 硅胶2. 实验仪器：- 电子天平- 热水浴锅- 超声波清洗器- 烘箱- 分液漏斗- 抽滤装置- 显微镜- 紫外可见分光光度计四、实验步骤1. 芸香苷的提取：（1）称取干燥的槐米粉末10g，置于100mL三角瓶中。
（2）加入50mL甲醇，超声提取30分钟。
（3）过滤，收集滤液。
（4）将滤液浓缩至约5mL，加入适量的氢氧化钠溶液，调节pH值为8.5。
（5）静置过夜，使芸香苷沉淀。
（6）抽滤，收集沉淀。
2. 芸香苷的分离纯化：（1）将沉淀用适量甲醇溶解，加入适量的硅胶，搅拌均匀。
（2）将混合物倒入色谱柱中，采用柱层析法进行分离纯化。
（3）依次用不同极性的溶剂进行梯度洗脱，收集目标峰。
（4）将收集到的目标峰浓缩，得到纯化的芸香苷。
3. 芸香苷的鉴定：（1）紫外-可见光谱法：取适量纯化后的芸香苷，用甲醇溶解，测定其在254nm和364nm处的吸光度值。
（2）薄层色谱法：将纯化后的芸香苷点于薄层板上，用适宜的溶剂进行展开，与对照品进行对比，观察其斑点位置。
（3）红外光谱法：对纯化后的芸香苷进行红外光谱分析，与标准图谱进行对比，确定其结构。
五、实验结果与分析1. 芸香苷的提取：通过醇提法，从槐米中成功提取了芸香苷。
2. 芸香苷的分离纯化：采用柱层析法，从提取液中分离纯化了芸香苷。
3. 芸香苷的鉴定：通过紫外-可见光谱法、薄层色谱法和红外光谱法，对纯化后的芸香苷进行了鉴定，确认其为芸香苷。
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2.色谱鉴定 a. 芸香苷和槲皮素的纸色谱 层析材料：定性滤纸。 点 液。 展开剂：正丁醇－醋酸－水（4:1:5）上层溶液。 展开方式：预饱和后，上行展开。 显 色：喷洒三氯化铝试剂前后，置日光及紫外光灯、 （365nm）下检视色斑的变化。 观察记录：记录图谱及斑点颜色。 b. 芸香苷与槲皮素的聚酰胺色谱 层析材料：聚酰胺薄膜。 样：提取的槲皮素承芸香苷的乙醇溶液和对照品的乙醇溶
点 样：提取的芸香苷与槲皮素的乙醇溶液和对照品的乙醇溶液。 展开剂：乙醇－水（7:3）或甲醇－水（8:2）。 展开方式：上行展开。 显 色：喷洒三氯化铝试剂前后，置日光及紫外灯光（365nm）下检视色斑 的变化。 观察记录：记录图谱及斑色颜色。 c. 糖的色谱鉴定 层析材料：定性滤纸。 点 样：糖的供试液及葡萄糖、鼠李糖对照品溶液。 展开剂：正丁醇－醋酸－水（4:1:5）上层溶液。 展开方式：上行展开。 显 色：苯胺－邻苯二甲酸试液，喷洒后先用电吹风冷吹至于，再吹热风 至出现斑点为止。 观察记录：记录图谱及斑点颜色。
五、思考题 1．黄酮类化合物还有哪些提取方法?芸香苷的提取还 可用什么方法? 2．酸水解常用什么酸?为什么用硫酸比用盐酸水解后 处理更方便? 3．本实验中各种色谱的原理是什么?解释化合物结构 与Rf值的关系。
四、鉴定 1.呈色反应 取芸香苷及槲皮素精品约10 mg，各用5 ml乙醇溶解，制成样品溶液， 按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 a. Molish反应 取样品溶液l ml，加10％α-萘酚溶液0.5 ml，振摇后斜置 试管，沿管壁滴加0.5 ml硫酸，静置，观察并记录液面交界处颜色变化。 b. 盐酸－镁粉反应 芸香苷与槲皮素溶液分别置于两试管中，加入金属 镁粉少许，盐酸2滴～3滴，观察并记录颜色变化。 c. 醋酸镁纸片反应 取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇 溶液，然后各加1％醋酸镁甲醇溶液两滴，于紫外光灯下观察荧光变化，记 录现象。 d. 三氯化铝纸片反应 在两张滤纸条上分别滴加芸香苷、槲皮素醇溶液 后，各加1%三氯化铝乙醇溶液两滴，观察颜色变化，记录现象。 e. 锆－柠檬酸反应 取样品溶液2 ml，加入2%二氯氧锆甲醇溶液3滴～4 摘，观察颜色，然后加入2％柠檬酸甲醇溶液3滴～4滴，观察并记录颜色变 化。
芸香苷的提取、 芸香苷的提取、分离和鉴定
一、实验目的 1.熟悉利用化合物的物理、化学性质对其进行分 析和鉴定的方法。 2.掌握紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的方 法和应用。
二、实验原理 主要是利用芸香苷的物理化学性质对其进行提取分离。 三、操作要点 1.芸香苷的提取－水提取法 芸香苷的提取－ 芸香苷的提取 称取槐花米粗粉20 g（压碎），加沸水300 ml，加热煮沸 30 min，纱布趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤 液，室温放置析晶，待全部析出后，减压抽滤，用蒸馏水洗 涤芸香苷结晶，抽干，得粗制芸香苷，置空气中干燥后，称 重。 2.芸香苷的精制 芸香苷的精制 取粗制芸香苷2 g，加蒸馏水400 ml，煮沸至芸香苷全部 溶解，趁热抽滤，冷却后即可析出晶体，抽滤，得芸香苷精 制品，置空气中干燥后，称重。
3.芸香苷的水解 芸香苷的水解 取精制芸香苷1g，研细后置于250ml圆底烧瓶中，加入2% 硫酸100ml，加热回流30min，瓶中混浊液逐渐变为澄清的棕 黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。放冷沉淀，抽滤，保存滤 液（应为澄清无色液体），用做糖的检查，沉淀物为芸香苷 苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称 重。粗制槲皮素再用50%乙醇重结晶得精制的含2分子结晶水 的槲皮素。 取芸香苷水解后的滤液10 ml，加饱和氢氧化钡溶液（或 碳酸钙粉末）中和至中性，滤去白色的硫酸钡沉淀，滤液水 浴60℃浓缩至2～3 ml，加2～3 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。