芦丁的提取分离及鉴定
新试验一 芦丁的提取、分离与鉴定
实验一 芦丁的提取、精制与鉴定一、实验目的与要求l 、以芦丁为例学习黄酮类化合物的提取方法；2.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷, 苷元和糖部分的鉴定方法。
R=-glu-rha 芦丁 R=H 槲皮素芦丁溶解度: 冷水1: 8000 热水1: 200冷乙醇1: 300 热乙醇1: 30难溶于乙酸乙酯、丙酮, 不溶于苯、氯仿、乙醚、及石油醚等溶剂。
槲皮素溶解度: 冷乙醇1: 650 热乙醇1: 60可溶于甲醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮、吡啶, 不溶于石油醚、乙醚、氯仿和水中。
二、实验原理本实验是利用芦丁在热水中和冷水中溶解度相差较大的性质, 用热水提取和精制；芸香苷属于苷类化合物, 可被稀酸水解成槲皮素（苷元）, 葡萄糖和鼠李糖。
芦丁和槲皮素通过化学反应, 色谱法和光谱分析进行检识与鉴定。
三、实验内容（一）提取分离和纯化l 、芦丁的提取:2.精制（重结晶）:3、芦丁的水解:OO OHOH OROH HO流程图如下:槐米（20g）研碎, 于500ml烧杯中,加350, 250ml水煮沸15min,10min棉花过滤150ml, 1%H2SO4 80倍水加热溶解, 趁热抽滤直火加热水解30min放冷抽滤, 沉淀水洗至中性不溶物（弃去）滤液放置 1-1.5h, 抽滤精品芦丁（水浴浓缩至2ml）(二)鉴定l、化学检识取芦丁和槲皮素少量, 置2支试管中分别加乙醇8ml使溶解(1)盐酸—镁粉反应: 取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml, 置2支试管中分别加浓盐酸5滴, 再加少量镁粉, 观察颜色变化。
(2)Molish反应: 取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml, 置2支试管中分别加10%α—萘酚0.5ml摇匀, 倾斜试管, 沿管壁缓缓滴加浓硫酸0.5ml, 静置, 观察二层溶液界面处颜色变化, 并比较芦丁和槲皮素的区别。
(3)FeCL3反应: 取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml, 置2支试管中分别加1%三氯化铁乙醇液几滴, 观察颜色变化。
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定槐花是一种常见的中草药，其花中富含多种有效成分，其中包括芦丁。
芦丁是一种天然的黄酮类化合物，具有明显的生理活性，如抗氧化、抗炎、降血压、保护心脑血管等作用。
因此，芦丁的提取、分离与鉴定一直是研究的热点。
提取方法：1.超声波提取法超声波提取是一种利用高频声波的机械震荡作用使样品中植物成分迅速从固相进入溶液的方法。
对于槐花花中芦丁的提取，超声波提取法是一种快速、高效的方法。
具体步骤如下：(1)将干燥的槐花花朵研磨成粉末。
(2)将槐花花粉末加入乙醇水溶液中，浸泡4小时。
(3)将浸泡的样品置于超声波清洗仪中，进行超声波萃取。
(4)离心沉淀，取上清液。
(5)将上清液蒸干，然后用乙醚-乙酸乙酯(1:1)提取，得到芦丁。
2.微波辅助提取法分离方法：1.硅胶柱色谱法硅胶柱色谱法是一种利用柱填充物在不同极性条件下对化合物进行分离和纯化的方法。
对于槐花花中芦丁的分离，硅胶柱色谱法是一种常用的方法。
具体步骤如下：(1)将经过提取的芦丁用甲醇溶解。
(2)将甲醇溶液在硅胶柱上进行逐级洗脱，采用乙醚、乙醇、混合溶液等不同极性的溶剂。
(3)收集洗脱液并进行旋蒸去除溶剂。
(4)取得芦丁。
2.高效液相色谱法(2)将甲醇溶液注入高效液相色谱仪中，以C18为固定相，用水-醋酸溶液-甲醇混合物作为移动相，在一定的流速下进行分离。
(3)收集并分析分离得到的芦丁。
鉴定方法：1.红外光谱法红外光谱法是一种运用分子在红外辐射下的振动和旋转运动来研究分子结构和化学键的强有力的分析方法。
对于芦丁的鉴定，红外光谱法是一种常用的方法。
芦丁的红外光谱图谱表现为具有多种特征峰的典型光谱，如C=0伸缩振动、C-O键伸缩振动和苯环伸缩振动等。
紫外光谱法是利用物质分子中的电子跃迁所产生的吸收现象来确定物质的性质和结构的分析方法。
对于芦丁的鉴定，紫外光谱法也是一种常用的方法。
芦丁的紫外光谱图谱表现为具有两个吸收峰，分别位于286 nm和330 nm。
芦丁的提取分离及鉴定
此实验中，水提取法制取芦丁的得率为15%，纯度高达 80%，所得产物量与张来新等[2]的研究结果基本符合，实 际产量相当。实验结果表明。芦丁是重要的黄酮类生物活 性物质，槐米中含有丰富的芦丁，通过性质试验及色谱鉴 定，能够清楚的表现处黄酮类化合物的一些性质。但与舒 晓宏等[12]采用频率20 kHz的超声法从槐米中提取芦丁成分 及黄汉昌13]，胡杰[15]等采用冷碱（Na2SO3与石灰水混 合—渗漉提取）酸沉淀法相比较则产率太低，原料浪费比 较严重。 因此，本研究认为在探索芦丁的提取方法的过程中，特别是 在医疗方面[10]，我们应尽可能采取更高效率的提取方法， 如超声辐射法，热水提大孔吸附树脂纯化法等。无论采用什 么方法,在实验的操作过程中，我们必须做到操作规范，严谨 细致，实事求是。
2. 实验仪器及药品
SHZ-D循环水式真空泵（河南省巩义市英峪 仪器一厂），电热恒温水浴锅（上海医疗器 械五厂），烧杯（1000ml），圆底烧瓶，球 形冷凝管，漏斗，托盘天平，抽滤瓶，布氏 漏斗滤纸，试管，滴管，新华1号滤纸，铅笔， 铁架台，电炉，石棉网，橡皮管。 槐花米（2011年购于同仁堂大药房）， 95%乙醇，浓硫酸，浓盐酸，镁粉，醋酸铅 试剂，1-萘酚，正丁醇，醋酸，1%三氯化铝 乙醇溶液，无水乙醇，硼砂水，饱和石灰水。
OH
HO
O
O
OH
O
CH2O
OH
O OH
O
OH OH OH OH
OH
OH
Hale Waihona Puke OHOOH OH O
槲皮素（Quercetin）：C15H10O7·2H2O，黄色结晶， mp313～314 ℃（2分子结晶水），316 ℃（无水物）。能溶 于冷乙醇（1:290），易溶于沸乙醇（1:23），可溶于甲醇、 乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等 溶剂。
芦丁的提取分离和鉴定
综合化学实验: 芦丁的提取分离和鉴定芦丁简介:芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。
目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。
尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophora japonica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。
中药槐米（炒碳）味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
西医研究其主要有效成分为有机化合物“芦丁”而中药槐米中芦丁的含量可高达12~16%，是主要的芦丁天然来源。
槐米中还含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
研究文献证明芦丁具有VitP（维生素P）样作用（VitP具有生物类黄酮的功能，可防止维生素C被氧化而受到破坏，增强维生素功效；增加毛细血管壁强度，防止瘀伤。
有助于牙龈出血的预防和治疗，有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等）。
而芦丁具有类似作用如可降低毛细血管脆性和调节通透性等，在医学临床上常将其用作毛细血管脆性引起的出血症以及防治高血压病等的辅助治疗药物。
芦丁是由槲皮素（quercetin）3位上的羟基与芸香糖（rutinose，一种由葡萄糖glucose与鼠李糖rhamnose组成的双糖）脱水合成的苷，是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无结晶水时188~190℃。
溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
补充知识:关于苷（gān）和甙(dài): 苷类（glycosides，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。
芦丁的提取分离与鉴定实验步骤
芦丁的提取分离与鉴定实验步骤芦丁是一种常见的中药化合物，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。
其提取分离与鉴定是中药研究和应用的重要环节之一、下面将介绍芦丁的提取分离与鉴定的实验步骤。
一、实验材料和仪器设备准备：1.实验材料：苦橙干燥植物材料、无水乙醇、石油醚、正己烷、醋酸乙酯、以及色谱柱填料等。
2.仪器设备：真空泵、旋转蒸发器、离心机、高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计等。
二、芦丁的提取：1.将苦橙植物材料粉碎成粉末，并称取适量的粉末样品。
2.将粉末样品加入具有提取性质的溶剂中（如乙醇），在室温下进行搅拌提取一定时间。
3.使用滤纸或过滤杯过滤掉植物残渣，得到提取液。
4.通过旋转蒸发器将提取液中的溶剂蒸发掉，得到精制的芦丁提取物。
三、芦丁的分离与纯化：1.将精制的芦丁提取物溶解在适量的溶剂中，制备样品溶液。
2.使用色谱柱装填适合的色谱填料（如硅胶），并将样品溶液注入柱上。
3.使用不同极性溶剂按梯度洗脱柱上的化合物。
4.通过比色法或紫外可见分光光度计测定洗脱液中芦丁的吸收强度，并收集含有目标化合物的部分。
5.通过旋转蒸发器将洗脱液中的溶剂蒸发掉，得到芦丁的分离纯化产物。
四、芦丁的鉴定：1.使用高效液相色谱仪对分离纯化产物进行分析。
2.调节适宜的流动相，并设定合适的检测波长和流速。
3.使用芦丁的标准品制备不同浓度的标准曲线，用于定量分析。
4.将分离纯化产物溶解在流动相中，进行色谱分析并记录色谱图。
5.通过比较分离纯化产物的保留时间和峰面积与标准曲线的关系，定量分析样品中芦丁的含量。
通过以上的步骤，可以完成芦丁的提取分离与鉴定工作。
实验过程中要注意实验条件的控制，如提取溶剂的选择、色谱柱填料的选择和流动相的调节等。
同时，还应注意实验操作的规范和安全，确保实验的准确性和可重复性。
芦丁的提取分离与鉴定实验报告
芦丁的提取分离与鉴定实验报告芦丁的提取分离与鉴定实验报告引言：芦丁是一种天然的黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
本实验旨在通过提取分离与鉴定的方法，探究芦丁的化学性质和药理作用。
实验步骤：1. 样品准备：将芦丁来源的植物材料研磨成细粉，称取一定质量的样品。
2. 提取：将样品加入适量的溶剂（如乙醇、甲醇等），进行浸泡提取。
3. 过滤：将提取液过滤，去除植物渣滓。
4. 浓缩：将过滤后的提取液进行浓缩，使其体积减小。
5. 结晶：将浓缩后的提取液置于低温环境中，促使芦丁结晶。
6. 分离：通过过滤或离心等方法，将芦丁晶体与溶剂分离。
7. 干燥：将芦丁晶体放置于通风干燥的环境中，使其失去残余溶剂。
8. 纯化：通过重结晶等方法，提高芦丁的纯度。
9. 鉴定：利用色谱、质谱等分析技术，确定芦丁的结构和纯度。
实验结果：经过以上步骤，我们成功地从植物材料中提取分离出芦丁，并得到了纯度较高的芦丁晶体。
通过质谱分析，确认了芦丁的分子结构和相对分子质量。
同时，利用色谱技术对芦丁进行了定性和定量分析，得到了芦丁的含量。
讨论：芦丁作为一种黄酮类化合物，具有多种生物活性。
其抗氧化作用可保护细胞免受自由基的损伤，具有抗衰老、抗炎等作用。
芦丁还具有抗肿瘤作用，能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
此外，芦丁还具有抗菌、抗病毒等作用，对一些疾病具有一定的治疗潜力。
结论：通过本实验，我们成功地提取分离并鉴定了芦丁，确认了其化学结构和纯度。
芦丁作为一种天然的黄酮类化合物，具有多种生物活性，对人体健康具有积极的作用。
进一步的研究可以探索芦丁的药理机制，为其在临床应用中提供更多的依据。
总结：本实验通过提取分离与鉴定的方法，成功地从植物材料中提取分离出芦丁，并对其进行了鉴定和分析。
芦丁作为一种具有多种生物活性的黄酮类化合物，具有广泛的应用前景。
通过深入研究芦丁的化学性质和药理作用，可以为其在医药领域的开发和应用提供更多的支持。
芦丁的提取分离和鉴定11页
芦丁的提取分离和鉴定11页芦丁（rutin）是黄酮类化合物，具有多重药理活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖、抗过敏等。
由于其广泛应用，芦丁的提取分离及鉴定备受关注。
本篇文章主要介绍芦丁的提取分离及鉴定过程。
一、芦丁的提取分离1.提取方法芦丁的提取方法有多种，如超声波提取法、微波提取法、加热提取法、水提法、醇提法等。
其中最常用的是醇提法和水提法。
醇提法：将干燥的植物材料粉碎，加入适量的醇类溶剂（如95%乙醇），浸泡24小时，滤除渣物，将滤液浓缩至一定浓度，再用二甲苯提取，蒸干得到芦丁。
水提法：将干燥的植物材料粉碎，加水浸泡，加热水浴提取，滤去渣物，用非极性溶剂提取，蒸干得到芦丁。
2.分离方法芦丁的分离方法主要有两种，分别是硅胶柱层析和高效液相色谱。
硅胶柱层析：将提取得到的芦丁溶液加入硅胶柱中，用适当的溶剂进行洗脱，收集芦丁纯品。
高效液相色谱：高效液相色谱（HPLC）是目前广泛使用的分离技术。
该法可实现高效、快速、自动化的芦丁纯化，且纯品质量较好，长期保存无损失。
二、芦丁的鉴定1.质谱鉴定质谱鉴定是一种快速、简便、高效的无损鉴定方法。
目前常见的质谱方法有质谱联用技术和飞行时间质谱法。
质谱联用技术：质谱联用技术包括气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）等。
通过对芦丁的母离子或其碎片离子进行分析，可以确定芦丁的分子量、结构和定量信息。
飞行时间质谱法：飞行时间质谱法（TOF-MS）是一种高分辨率质谱分析技术，可以准确测定芦丁的分子量。
2.红外光谱鉴定红外光谱鉴定是一种无损鉴定方法，可以检测芦丁的特征吸收峰。
通过与标准参照物比较，可以确定芦丁的物质性质。
3.紫外光谱鉴定紫外光谱鉴定是一种常用的鉴定方法，可以分析芦丁的吸收光谱和波长。
通过与标准参照物比较，可以确定芦丁的含量。
4.核磁共振鉴定核磁共振鉴定可以测定芦丁的分子结构、质量以及定量信息。
该方法通常采用氢核磁共振（1H-NMR）和碳核磁共振（13C-NMR）。
芦丁提取分离和鉴定
综合化学实验: 芦丁的提取分离和鉴定芦丁简介:芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。
目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。
尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophora japonica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。
中药槐米（炒碳）味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
西医研究其主要有效成分为有机化合物“芦丁”而中药槐米中芦丁的含量可高达12~16%，是主要的芦丁天然来源。
槐米中还含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
研究文献证明芦丁具有VitP（维生素P）样作用（VitP具有生物类黄酮的功能，可防止维生素C被氧化而受到破坏，增强维生素功效；增加毛细血管壁强度，防止瘀伤。
有助于牙龈出血的预防和治疗，有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等）。
而芦丁具有类似作用如可降低毛细血管脆性和调节通透性等，在医学临床上常将其用作毛细血管脆性引起的出血症以及防治高血压病等的辅助治疗药物。
芦丁是由槲皮素（quercetin）3位上的羟基与芸香糖（rutinose，一种由葡萄糖glucose与鼠李糖rhamnose组成的双糖）脱水合成的苷，是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无结晶水时188~190℃。
溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
补充知识:关于苷（gān）和甙(dài): 苷类（glycosides，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。
芦丁的提取分离和鉴别
芦丁的提取分离和鉴别槐花米系豆科槐属植物槐树（SophorajaponicaL）的花蕾。
味苦性凉，入肝、大肠经。
具有清热凉血、止血的功效，常用于治疗便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血和赤血下痢等，常炒炭应用。
槐花米主要化学成分为芦丁（芸香甙），具有维生素P样作用，可降低毛细血管脆性、调解其渗透性。
临床用于防治高血压脑病、视网膜出血和慢性气管炎等。
芦丁羟基化衍生物曲克芦丁能抑制血小板聚集，防止血栓形成的作用，同时能对抗内源性血管损伤，增加毛细血管抵抗力降低其脆性，防止水肿，对急性缺血性脑损伤有显著保护作用，临床用作抗血小板药物。
一、实验目的：1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法；2．掌握黄酮类成分的主要性质及鉴别方法。
二、仪器与试药（一）仪器SHB-III循环水式多用真空泵HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（250mL）ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）（二）试药槐花米粗粉硼砂氧化钙乙醇盐酸浓硫酸硅胶CMC-Na镁粉a-萘酚甲醇乙酸乙酯脱脂棉三氯化铝试液芦丁和槲皮素对照品甲酸丙酮三、主要成分的结构与性质：表5－1槐花米中主要成分的物理性质白桦脂醇* (Betulin) 无色针晶251〜252C能溶于醋酸、丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水。
槐花二醇* (Sophoradiol) 无色针晶219~220C或224C溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇；难溶于水*皂苷（Saponin）,粗品为白色粉末，mp210〜220°C，易溶于吡啶，能溶于200倍的甲醇中,酸水解得上述两种苷元及糖。
糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。
R=H槲皮素R=-glu-rha芦丁四、实验原理：1．芦丁分子结构中含有酚羟基，具有弱酸性，能与碱反应生成盐而溶于水，此盐加酸酸化，又析出芦丁，利用此性质进行提取。
并可利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差悬殊，用水重结晶2．芦丁在酸性溶液中可被水解，生成槲皮素和糖。
实验二2 芦丁的提取分离
“山行/六七里”为什么不能划分为“山/行六七里”？
明确：“山行”意指“沿着山路走”，“山行”是个状中短语，不能将其割裂。“望之/蔚然而深秀者”为什么不能划分为“望之蔚然/而深秀者”？明确：“蔚然而深秀”是两个并列的词，不宜割裂，“望
之”是总起词语，故应从其后断句。【教学提示】引导学生在反复朗读的过程中划分朗读节奏，在划分节奏的过程中感知文意。对于部分结构复杂的句子，教师可做适当的讲解引导。目标导学三：结合注释
．初读文章，结合工具书梳理文章字词。2．朗读文章，划分文章节奏，标出节奏划分有疑难的语句。节奏划分示例
环滁/皆山也。其/西南诸峰，林壑/尤美，望之/蔚然而深秀者，琅琊也。山行/六七里，渐闻/水声潺潺，而泻出于/两峰之间者，酿泉也。峰回/路转，有亭/翼然临于泉上者，醉翁亭也。作亭者/谁？山
之僧/曰/智仙也。名之者/谁？太守/自谓也。太守与客来饮/于此，饮少/辄醉，而/年又最高，故/自号曰/醉翁也。醉翁之意/不在酒，在乎/山水之间也。山水之乐，得之心/而寓之酒也。节奏划分思考
，云归而岩穴暝，晦明变化者，山间之朝暮也。野芳发而幽香，佳木秀而繁阴，风霜高洁，水落而石出者，山间之四时也。直译法：那太阳一出来，树林里的雾气散开，云雾聚拢，山谷就显得昏暗了，朝则
自暗而明，暮则自明而暗，或暗或明，变化不一，这是山间早晚的景色。野花开放，有一股清幽的香味，好的树木枝叶繁茂，形成浓郁的绿荫。天高气爽，霜色洁白，泉水浅了，石底露出水面，这是山中四
于《岳阳楼记》的千古名篇——《醉翁亭记》。接下来就让我们一起来学习这篇课文吧！【教学提示】结合前文教学，有利于学生把握本文写作背景，进而加深学生对作品含义的理解。二、教学新课目标导
学一：认识作者，了解作品背景作者简介：欧阳修(1007—1072)，字永叔，自号醉翁，晚年又号“六一居士”。吉州永丰(今属江西)人，因吉州原属庐陵郡，因此他又以“庐陵欧阳修”自居。谥号文忠
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
此实验中，水提取法制取芦丁的得率为15%，纯度高达 80%，所得产物量与张来新等[2]的研究结果基本符合，实 际产量相当。实验结果表明。芦丁是重要的黄酮类生物活 性物质，槐米中含有丰富的芦丁，通过性质试验及色谱鉴 定，能够清楚的表现处黄酮类化合物的一些性质。但与舒 晓宏等[12]采用频率20 kHz的超声法从槐米中提取芦丁成分 及黄汉昌13]，胡杰[15]等采用冷碱（Na2SO3与石灰水混 合—渗漉提取）酸沉淀法相比较则产率太低，原料浪费比 较严重。 因此，本研究认为在探索芦丁的提取方法的过程中，特别是 在医疗方面[10]，我们应尽可能采取更高效率的提取方法， 如超声辐射法，热水提大孔吸附树脂纯化法等。无论采用什 么方法,在实验的操作过程中，我们必须做到操作规范，严谨 细致，实事求是。
2 .色谱鉴定 色谱鉴定
点样：取新华一号滤纸，距下端3厘米处用铅 笔划线，为起始线，隔1.5厘米处点样品。将 点好样品的滤纸挂在层析缸中饱和半小时， 在上行展开。 芦丁乙醇溶液 b. 精制槲皮素乙醇溶液 展开剂：正丁醇-醋酸-水（4:1:5，上层） 2.2.2 显色：a. 可见光下观察色斑，紫外灯 下观察荧光斑。 1%三氯化铝-乙醇溶液，在观察荧光斑点。
芦丁，又名芸香甙、维生、紫槲成甙，广泛存在于 植物界，如芸香、苦荞麦、槐树蕾、楸树叶、蒲公 英、番茄茎、赤豆等均含有丰富的芦丁，尤以槐花 米（Sophora japoina L.的花蕾）和荞麦叶中含量最 高。芦丁能凉血止血，清肝泻火，具有抗炎作用。 还具有抑制醛糖还原酶的作用，用于预防脑溢血， 高血压，视网膜出血，急性出血肾炎，治疗慢性气 管炎，对糖尿病型白内障也有较好的治疗，而且芦 丁对紫外线具有较强的吸收作用，在化妆品中添加 10%的芦丁，紫外线的吸收率可达98%以上[9]。 本实验主要以槐花米为原料提取芦丁，并以芦丁为 例学习黄酮类化合物的性质及部分鉴定方法。
3. 芦丁的提取
A. 水提法 B.碱水(石灰水) 提取法 C.有机溶剂(乙醇) 回流法
4 . 芦丁的精制
重结晶 将粗制芦丁研细，加95%乙醇回流溶解（每2 g芦 丁需加70 ml左右乙醇）趁热过滤，取1/2滤液浓缩 至原体积的1/3-1/4，放置，析出结晶，抽滤，干燥 称重，得精制芦丁，计算得率。 芦丁的水解 取另1/2量芦丁滤液，加入1 mol硫酸（80 ml）水 浴回流一小时（用聚酰胺薄层检查水解是否完全） 待全部水解后，蒸去乙醇，冷却、析出槲皮素、抽 滤、滤液内含糖。槲皮素沉淀经水洗、抽干、干燥 称重，计算得。再用乙醇重结晶一次，得黄色针晶， 为槲皮素精品。
二、鉴定
1 性质实验 盐酸-镁粉反应：取芦丁少量，加乙醇数滴溶解， 再加浓盐酸5滴，最后加少量镁粉，观察颜色变化。 醋酸铅沉淀反应：取芦丁少许溶于热水，加醋酸 铅试剂数滴，观察结果。 Molish反应：分别取芦丁和槲皮素少量，分别置 于两支试管中各加乙醇数滴，加1-萘酚几滴摇匀， 倾斜试管，沿管壁滴加浓硫酸5滴，静置，观察二 层溶液界面处的颜色变化
2. 实验仪器及药品
SHZ-D循环水式真空泵（河南省巩义市英峪 仪器一厂），电热恒温水浴锅（上海医疗器 械五厂），烧杯（1000ml），圆底烧瓶，球 形冷凝管，漏斗，托盘天平，抽滤瓶，布氏 漏斗滤纸，试管，滴管，新华1号滤纸，铅笔， 铁架台，电炉，石棉网，橡皮管。 槐花米（2011年购于同仁堂大药房）， 95%乙醇，浓硫酸，浓盐酸，镁粉，醋酸铅 试剂，1-萘酚，正丁醇，醋酸，1%三氯化铝 乙醇溶液，无水乙醇，硼砂水，饱和石灰水。
还含有皂甙，其粗制品为白色粉末，经酸水解后得二 种皂甙元及糖部分，这两种皂甙元是白桦酯醇和槐花 米双醇，另外还含槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米 丙素等。本实验是利用芦丁为黄酮苷，分子中具有酚 羟基，显酸性，可溶于稀碱液，在酸液中沉淀析出的 性质进行提取分离。利用芦丁易溶于热水、热乙醇， 较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精 制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖， 依此可进行槲皮素的制备。通过纸色谱及紫外光谱进 行黄酮及糖的鉴定。
二、论文设计全过程
芦丁的提取 分离及鉴定
实验部分
鉴定
结果分析与 讨论
OH
一、实验部分
1.实验原理 实验原理 芦丁（Rutin） C27H30O16·3H2O，浅黄色针 状结晶，mp 174～178 ℃（含三 分子水）；188 ℃（无水物）。 难溶于冷水（1:8000～10000）， 可溶于热水（1:180～200），热 甲醇（1:10），冷甲醇 （1:100），热乙醇（1:60）， 冷乙醇（1:650）；难溶于乙醚、 三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、 丙酮，易溶于碱液。
致
谢
胡老师在本论文的实验设计、具体细节的 老师在本论文的实验设计、 把握以及论文的撰写等过程中给予了悉心指 导，特此致以我最忠诚的感谢！ 特此致以我最忠诚的感谢！
3、 结果与分析 、
从表3可以看出，在可见光下，芦丁和槲皮素的色 斑均呈现黄色，在253.7 nm紫外灯下，芦丁呈亮绿 色，槲皮素呈亮黄色。再加入1%三氯化铝-乙醇溶 液，荧光斑点的亮度更加明显。 主要原因是因为芦丁和槲皮素的区别在于芦丁水解 后失去了糖苷，其本身的结构发生了变化，故在紫 外灯光的照射下呈现出不同的颜色。 水提法 取20 g 槐花米按水提法的流程操作，可提 取出粗产品，收率仅为5.32 %。 碱液提取法 在加入石灰水中煮沸时, 调节不同酸 度，得酸度对产品质量的影响（见表4 ）
OH
HO
O
O
OH
O
CH2O
OH
O OH
O
OH OH OH OH
OH
OH
OH
O
OH OH O
槲皮素（Quercetin）：C15H10O7·2H2O，黄色结晶， mp313～314 ℃（2分子结晶水），316 ℃（无水物）。能溶 于冷乙醇（1:290），易溶于沸乙醇（1:23），可溶于甲醇、 乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等 溶剂。
2011届本科毕业论文 届本科毕业论文
芦丁的提取分离及鉴定
作者姓名：张娜娜 指导老师：胡浩斌 学 院：化学化工学院 班 级：07化教（2）班 日 期：2011年4月
综
述
本实验以芦丁为例学习黄酮类化合物的提取 方法，掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮甙， 甙元和糖的部分鉴定方法。采用了水提法、 碱水(石灰水) 提取法、有机溶剂(乙醇) 回流 法对芦丁进行了提取分离，并对其进行定性 分析及色谱鉴定。水提法、碱水(石灰水) 提 取法、有机溶剂(乙醇) 回流法，三种方法均 可制的芦丁，且质量合格。从提高芦丁产率 和纯度的角度出发，乙醇回流是较理想的提 取方法。制得芦丁产率高，且测定方法简单、 迅速、灵敏度高。
由表4可知，最佳提取酸度为pH= 8～9。pH＜9，煮沸时间 稍长，可使芦丁水解；pH＜8，芦丁溶解不完全。 有机溶
剂回流法
适宜的回流时间为5 h～6 h，结果见表5 结果见表6。
三种方法的收率
三种方法产品纯度结果见表7
三、结果分析与讨论
1.水提法装置简单，操作方便，也是平常中药的煎 服方法该法不足之处在于产率太低, 原料浪费严重。 2.用碱水提取可得粗产品，提取效率较水提法有明 显提高，但该提取液通常因含有大量粘稠的杂质而 难以过滤，而且整个过程对酸度控制要求较高。 3.从提高芦丁产率和纯度的角度出发，乙醇回流法 要优于以上两种方法，且乙醇可以回收再利用，其 回收率达到92.3%。通过实验可得该方法最佳操作 条件为：槐花米尽可能研细，加0.8%碳酸氢钠，20 倍乙醇，回流4 h～5 h，浓缩回收溶剂。浓缩液加 等量蒸馏水和2%的活性炭，调节使pH=7，冷却、 结晶、过滤、烘干，产品收率可达10.1%。