动物试验基本知识和操作技术
动物实验的基本知识和操作技术
动物实验的基本知识和操作技术第⼆章动物实验的基本知识和操作技术第⼀节实验动物药理学实验常⽤的动物有蛙、蟾蜍、⼩⽩⿏、⼤⽩⿏、豚⿏、家兔、猫和⽝等。
常根据实验⽬的和要求选⽤不同的实验动物。
由于不同的动物具有不同的特点，故所选⽤的动物应能较好地反映试验药物的选择性作⽤，并符合节约的原则。
（⼀）、实验动物的选择原则1、尽量选择与⼈体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物；2、选⽤的实验动物的解剖、⽣理特点应符合实验⽬的；3、根据⼈与实验动物对同⼀刺激的反应差异，选⽤具有明显反应的动物；4、根据⽣物医学研究必须达到的精确度，选⽤结构功能简单⼜能反映研究指标的动物；5、选⽤患有⼈类类似疾病的近交系或突变系动物；6、选⽤与实验设计、技术条件、实验⽅法等相适应的标准化动物；7、在不影响实验⽬的与结果的前提下，选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物；8、供实验⽤的动物应具备质量合格证。
（⼆）、常⽤实验动物的特点1、蛙和蟾蜍离体⼼脏能较持久地有节律地搏动，常⽤于观察药物对⼼脏的作⽤；坐⾻神经和腓肠肌标本可⽤来观察药物对周围神经、神经肌⾁或横纹肌的作⽤；蛙的腹直肌还可以⽤于鉴定胆碱能药物的作⽤。
2、⼩⽩⿏是实验室最常⽤的⼀种动物。
易于⼤量繁殖，且价廉，适⽤需要⼤量动物的实验，如药物筛选、半数致死量测定、药物效价⽐较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。
3、⼤⽩⿏与⼩⽩⿏相似。
⼀些在⼩⽩⿏⾝上不便进⾏的实验可选⽤⼤⽩⿏，如药物抗炎作⽤的实验常选⽤⼤⽩⿏踝关节制备关节炎的模型。
此外，也可⽤⼤⽩⿏直接记录⾎压、作胆管插管，或⽤⼤⽩⿏观察药物的亚急性或慢性毒性。
⼤⽩⿏的⾎压和⼈相近，且稳定，现常⽤于抗⾼⾎压药物实验。
4、豚⿏是实验室常⽤动物之⼀。
对组织胺很敏感，容易致敏，常⽤于平喘药和抗组胺药的实验。
对结核菌亦敏感，故也⽤于抗结核药的研究。
此外还⽤于离体⼼脏及平滑肌实验，其乳头肌和⼼房常⽤于电⽣理特性及⼼肌细胞动作电位实验，研究抗⼼律失常药物的机理。
实验动物基本知识及基本操作实验方法
实验动物基本知识及基本操作实验方法实验动物是指在实验室内用于科学研究目的的动物，为了保护人类和其他动物的生命、健康和安全，科学研究常常需要进行动物实验。
以下内容将介绍实验动物的基本知识以及实验中的基本操作和实验方法。
一、实验动物的基本知识1.实验动物种类常见的实验动物种类包括小鼠、大鼠、兔子、猴子、猪等。
其中，小鼠和大鼠是最常用的实验动物，因其生命周期短、繁殖能力强、易于养殖和管理，且与人类基因相似度较高。
2.实验动物的饲养环境实验动物需要有严格的饲养环境，包括适宜的温度、湿度、光照和通风条件。
饲养设施应具备合适的空间和设备，如饲养箱、自动饮水器、饲料箱等。
3.实验动物的繁殖和饲养实验动物的繁殖需要注意选配合理的配对，控制种群数量和质量，以确保实验结果的可靠性。
同时，对实验动物进行规范、科学的饲养，提供合适的饲料、清洁的饮用水、舒适的环境等。
二、实验中的基本操作1.动物体重测定动物体重是评估动物生长、健康状态的重要指标。
测定体重时，可以用电子天平称量，将动物置于天平上并记录体重。
2.手术操作一些研究需要进行手术操作，例如在动物体内植入微电极等。
手术操作前需进行充分的准备工作，如消毒手术器具、获取麻醉剂等。
手术操作过程中，需要保持操作区域清洁、注意操作技巧，保护动物的生命安全。
3.采集生物样本实验动物的生物样本如血液、尿液、组织样本等，是研究动物健康状况和药物效果的重要依据。
采集血液时，可以通过尾静脉抽血、眼眶静脉抽血等方法。
采集尿液时，通常采用代谢笼或尿液收集器。
1.长期观察法长期观察法是通过观察实验动物在不同条件下的生长发育、行为表现等来推断不同因素对动物的影响。
例如，用不同饲料供给量观察动物的生长速度，用不同光周期观察动物的行为改变。
2.剖析法剖析法是通过解剖实验动物，观察和记录各种器官的形态结构及组织病理变化，从而了解不同因素对动物生理功能和病理变化的影响。
例如，观察动物心脏、肝脏、肺等器官的大小、形状和病理损伤。
第八篇 动物实验技术
2、按统计学方法测算的样本数
（1）配对试验动物数目的确定：
可用配对试验的t检验法，推倒试验所需动物数 目，欲达到显著水平α=0.05时，则样本的含量可 用下式确定：
n=[(t0.05sd)2]/d2 sd为前人试验或经验所得各组间差异的方差
d为要求达到所预期的差异显著时的均数差值
4、实验方法的选定
实验方法按学科可分为生理学方法、生物化学方 法、生物物理方法、免疫学方法等等；按性质可分为 形态学方法、机能学方法；按范围可分为整体综合方 法和局部分析方法；按水平可分为整体水平、器官水 平、细胞水平、分子水平、量子水平等等。 无论选择何种实验方法，均应保证以下几点： 1、可靠性，即切实可行，稳定可靠，是受大家公 认的方法，也称经典方法； 2、优越性，即指实验方法既具有先进的一面，又 便于与其它实验方法相互配合，故也称先进性和协同 性； 3、创造性，即实验方法的创新或改良。
（二）配对设计（paired design）
是将动物按某些特征或一定条件配成对，再 将每对中两个动物随机分配到两个不同处理组中。 配对的因素是影响试验效应的主要非处理因素， 如动物性别、体重，两组动物取得均衡进行实验，
以减少误差及动物间的个体差异。
（三）随机区组设计
是配对设计的扩大。将全部动物按体重、性 别及其他条件等分为若干组，每组中动物数目与 拟划分的组数相等，体质条件相似，再将每个区 组中的每一只动物进行编号，利用随机数字法将
一、动物实验设计的基本原则
实验研究主要是通过对样本的研究而得出结论。
要将样本的结论外推到总体，必须尽量使样本能够
真实的代表总体。然而，实验动物的种系和个体差
异、实验环境差异、仪器的稳定性、药品的纯度、
实验动物上岗证培训的培训内容
实验动物上岗证培训的培训内容
实验动物上岗证培训的培训内容通常包括以下几个方面：
1. 实验动物的基本知识：包括常用实验动物的种类、特点、生理指标等基本知识，以及实验动物的基本饲养、繁殖和管理技术。
2. 动物福利和伦理：强调对实验动物的尊重和关爱，包括如何提供适宜的饲养环境、充足的食物和水源、合适的体温控制等，确保动物的健康和福利。
3. 实验操作技术：包括实验动物的标记、采样、注射、手术等操作技术的培训，要求培训人员熟练掌握操作技术，减少对动物的伤害和痛苦。
4. 动物相关法律法规：介绍与实验动物使用相关的法律法规，包括实验动物使用的伦理审查和许可、动物福利法等，培训人员需要了解并遵守相关法律法规。
5. 动物疾病防控：介绍实验动物的常见疾病和传染病，以及预防和控制疾病的方法和措施，包括定期的健康检查和疫苗接种等。
6. 实验动物的科学使用：强调实验动物的科学价值和使用原则，讲解实验设计和数据采集的方法，培养培训人员对实验动物使用的科学认知和责任感。
以上是一般实验动物上岗证培训的基本内容，具体培训内容可能会根据不同的实验动物种类和使用需求有所差异。
药理学动物实验的基本知识和技术
科技资讯2016 NO.23SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION科 技 教 育81科技资讯 SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION 实验是药理学教学的一个重要组成部分。
通过动物实验不仅可以验证理论知识,而且可以训练学生客观地观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力,培养学生严谨的科学态度、严密的工作方法和实事求是的工作作风。
1 实验动物的选择和用途1.1 实验动物的选择青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、狗等为药理实验常用动物。
动物对药物反应具有种属差异性,应根据实验目的和要求选用不同的实验动物。
实验动物可分为4个级别,药理教学实验可选用一级普通动物,科研实验必须用二级以上实验动物,分别为二级清洁动物、三级无特定病原体的动物和四级无菌动物。
1.2 实验动物的用途在离体情况下,青蛙和蟾蜍心脏节律性搏动保持时间较长,可观察药物对心脏的作用,药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头作用的观察可选用坐骨神经腓肠肌标本。
小鼠易大量繁殖,是最常用实验动物,适用于需要大量动物的实验。
大鼠用途与小鼠基本相同,主要用于一些用小鼠不便进行的实验。
大鼠对炎症反应较为灵敏,其踝关节炎模型常用于观察药物的抗炎作用。
豚鼠对组胺特别敏感,是筛选平喘药和抗组胺药最理想的动物。
家兔性情温顺易饲养,常用于观察药物对心脏、血压、呼吸的影响。
狗易于通过驯养与人合作,适于慢性实验。
2 实验动物的捉持方法2.1 青蛙和蟾蜍用左手的食指和中指夹住左前肢,大拇指压住右前肢,下肢用右手拉直并在无名指和小指之间予以固定。
毁脑和脊髓时,左手食指和中指夹持头部,右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔,左右摆动探针捣毁脑组织。
如需破坏脊髓,毁脑后退回探针刺入椎管即可。
2.2 鼠类可双手配合或只用左手捉持小鼠。
用右手将鼠尾提起并放在笼子或粗糙面上,将鼠尾向后轻拉,迅速将小鼠头颈部皮肤用左手拇指和食指捏住,并以左手小指、无名指在手掌尺侧将其尾部压住。
动物实验基本操作
Reduction (减少)
Refinement (优化)
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三、常用手术器械
1、手术刀
执弓式
握持式
用于切割各种软 组织，也可用于 切割软骨
执笔式
反挑式
执刀方法
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弯手术剪用于给动物剪毛
2、手术剪
直手术用于剪皮肤、脂肪、肌 肉以及血管、神经等组织
执镊方式类似于执毛笔，以拇指对 食指和中指
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5、动脉夹
用于夹闭动脉阻断血流，以便插动 脉导管
6、玻璃分针
玻璃分针用于钝性分离的周围组织， 暴露血管和神经干
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四、动物实验的基本操作技术
1、实验动物的捉拿与固定 家兔
小白鼠
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2、实验动物的编号
染色法
挂牌法ห้องสมุดไป่ตู้
烙印法
3、实验动物的给药方法 摄入法、注射法、涂布法和吸入 法
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4、实验动物的麻醉
（1）麻醉的概念
用药物使整个实验动物或其手术部位处于无 知觉状态，并使其基本生命活动不受影响
（2）麻醉方法
全身麻醉
局部麻醉
静脉注射
吸入麻醉 注射麻醉
腹腔注射
肌肉注射
实验 善待实验动物，不做野蛮手术，实验结束后将兔急性放血处死 神经应避免牵拉，防止放电 颈总动脉插管时一定要弄清楚步骤，动脉夹一定要夹闭近心端
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【复习思考题】
1、麻醉效果如何观察？
2、简述颈总动脉插管术的基本操作流程
实验动物基本操作技术
实验动物基本操作技术动物饲养是实验动物基本操作技术的核心之一、在实验动物饲养过程中，需要关注以下几个方面的内容：1.饲料和水的供给：不同动物种类对饲料和水的需求有所差异，必须根据种类的需要提供合适的饮食。
同时，要保持饲料和水的干净卫生，定期更换。
2.温度和湿度的管理：动物对温度和湿度的适应能力有限，要提供适宜的环境温度和湿度，确保动物的舒适和安全。
3.条件和设备的维护：保持动物舍内的垃圾清理和消毒工作，保持动物舍的通风良好，还需定期检查设备的功能和安全性，确保工作的顺利进行。
4.动物健康监测：对饲养的动物进行定期体检，观察动物的行为和身体状况，及时发现问题并采取相应的处理措施。
标记是实验动物基本操作技术中另一个重要的环节。
通过给动物进行标记，可以对动物进行个体识别，以便进行个体差异的研究和实验的后续分析。
常用的标记方法包括：1.耳标和足环：适用于鸟类和其他较小的动物。
2.皮下植入芯片：适用于小鼠、大鼠等较大的实验动物，可以在动物身体中植入微型芯片，通过读卡器来读取个体信息。
3.颈环和颈圈：适用于大型鸟类和大型哺乳动物。
取材是实验动物基本操作技术中的重要环节，包括活体取材和死体解剖两种情况：1.活体取材：一些实验需要从活体动物中获得血液、组织、器官等样品，一般采用静脉采血或者穿刺取材的方式。
在实施这些操作时，需要注意动物的安全和舒适，确保操作程序正确。
2.死体解剖：一些实验需要对动物进行死体解剖，获得更加精确的样本。
在进行解剖时，需要注意解剖操作的规范化，防止交叉污染。
检查和观察是实验动物基本操作技术中必不可少的环节。
通过对实验动物进行检查和观察，可以了解动物的健康状况、行为和生理变化等信息，为后续实验数据的解释提供依据。
常用的观察方法包括：1.行为观察：观察动物的一般活动情况，包括精神状态、进食、排便和休息等行为。
2.体征观察：观察动物的体表情况，包括毛发的质量和数量、皮肤的颜色和温度变化等。
总之，实验动物基本操作技术是进行动物实验的基础，包括动物饲养、标记、取材、检查和观察等操作。
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术动物实验作为一种科学研究手段，常用于医学、生物学等领域的实验研究。
为了确保实验的可靠性和安全性，研究人员需要正确掌握基本的动物实验操作技术。
下面将介绍一些常用的动物实验基本操作技术。
首先，动物实验前，需要对动物进行适当的饲养管理，确保其健康状态。
这包括提供适宜的饲料和饮水，保持合适的环境温度和湿度，以及定期清洁和消毒动物饲养环境。
此外，研究人员还需对动物进行身体检查，以排除可能影响实验结果的健康问题。
其次，对于需要进行手术的实验，研究人员需要具备相关的手术技术。
例如，动物麻醉技术是必不可少的，可以采用静脉注射麻药、局部麻醉或气管插管麻醉等方法。
在动物手术过程中，需要准确切割皮肤或组织，处理血管、神经和器官，以及进行缝合和止血等操作。
因此，研究人员需要熟练掌握相关手术技术，确保手术过程的顺利进行。
此外，动物实验中还常使用动物注射技术。
注射技术包括口服给药、皮下注射、肌肉注射和静脉注射等。
研究人员需要准确计量给药剂量，选择合适的注射部位和注射器具，并注意注射速度和注射途径的选择。
在实验中，研究人员还需要掌握注射后的观察和记录技巧，及时发现和处理可能的不良反应。
另外，动物实验还涉及到采集和处理生物样本的技术。
例如，研究人员需要采集血液、组织或其他体液样本，以进行生化分析、细胞培养或组织学检查等。
采样时需要注意卫生与无菌操作，避免交叉污染。
采样后，研究人员需要合理保存和处理样本，以保证实验结果的可靠性。
此外，动物实验中的数据记录与分析也是十分重要的。
研究人员需要仔细记录实验过程的各种参数，包括实验开始时间、操作步骤、药物剂量、实验结果等。
此外，研究人员还需要进行数据分析，以得出科学合理的结论。
在数据分析过程中，研究人员可以使用统计学方法，如平均值、标准差、方差分析等。
最后，动物实验的伦理与法规也是非常重要的。
研究人员需要遵守相关的伦理规范和动物保护法律法规，保证动物实验的道德性和合法性。
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C57BL/6
•按微生物控制分
・一级，普通动物(CV):是微生物控制要求中最低的一个级别 的塑
兰竺带有动物烈性传染病和人畜共患病原体 :除不带有普通动物应排除的病原体外， 逅壁邑西盘划塑学实验
干扰大的病原体。 ・耳瓦云宣鼬赫逐敬:除不带有普通动物、清洁动 物应排除的病原
体外，还应排除有潜在感染或条件性致病的病 原体，以及对实 验干扰大的病原。
•••
在针缓 气栓慢 泡下向 下拉上 方使推 轻小针 弹气检 针泡一 筒融 8
成需 大充 气满 泡针
头
动物实验基本操作
•教师
注意事项
・动物来源规范
・实验操作讲解及示教规范、仔细、耐心
•学生
・认真听讲操作要领
・认真观看操作示范 ・认真、专心操作实践
・如遇实验操作任何问题，及时向老师请教，不要盲目、违 规操作，如因自身违规操作所导致的一切后果，由学生自 己负责
•灌胃容积一般0.l~0.2ml/10g ,最大0.35ml/10g ,每只小鼠 的最大灌胃容积£0.8ml
小鼠灌胃（_）
小鼠灌胃（二）
小鼠肌注要领
•操作时一人 S 定小 E3 ;另一人用一手抓住小鼠的一条后 肢，另一手拿注射器
•针头与皮肤呈30~45。角刺入大腿外侧肌肉约1/4 ,将 药液注入
大鼠（Rat）
大鼠应用于生理学,药理学,免疫学，内分泌学,神经生理,营 养学,传 染病，肿瘤和肝外科等的研究。
豚鼠(Guinea pig )
常用于免疫学.微生物学,传染病学■听觉生理.实验性坏血症 III 等研究。
家兔（Rabbit）
常用于免疫学■肿瘤,实验生理学,生殖生理.遗传性疾病 等的方面的研究，制造生物制品。
•动作轻柔，从口角进入，针头置于小鼠舌头上，逐渐竖直，并 尽量往咽后壁靠
•进针过程中，如遇阻力，可原地轻轻转动针头，待阻力消失后 再行进针，不可强行插入，避免剌破食管或误入气管
•本实验室所用灌胃针头自小鼠口腔插入体内几乎全部深度既可 推注药液，推注时动作缓慢，注意观8 察小鼠反应，如有窒息表 现，即刻停止
药品、生物制品的生产▼和检定及其它科学研究 的动物。
实验动物
蟾蜂(Toad)
蟾蜂属两栖动物，其一些基本= 生命活动与哺乳动物近似，其离体幺 织和器官所需的生理环境比较简单（无须供氧和恒温）O
蟾蛛常用于神经生理.肌肉生理,心脏生理，微循环,水肿等实验。
小鼠(Mouse)
小鼠被广泛的用于生物学.医学,兽医学.生理学,遗传学,药 理,毒理, 肿瘤.放身寸性,食品.生物制品等的科研.生产和教学。
猫（Cat）
猫的神经系统和循环系统较发达，与人很相似。常用于神经、 循 环和呼吸方面的实验。
犬(Dog)
常用于基= 础医学,药理.毒理学,实验外科学. 肿瘤学等方面研究。
行为学,
猪（Pig）
常应用于皮肤烧伤、肿瘤学、免疫学、心血管I及II 糖尿病、遗传性 和营养性疾病，移植,夕卜科手术等方面的研究。
•另一手（一般是左手）迅速用拇指□□ 和食指捏住小鼠头颈部 皮肤，尤其要抓紧小鼠两耳朵, 定头部，防止伤害 •将小鼠翻转置于一手（一般为左手）手掌大鱼际，并以小 指或无名指压住其尾部
小鼠腹腔注射
小鼠灌胃要领
•抓小鼠时，尽量抓紧其两耳及中间皮肤，使其头部充分后仰， 与 颈部成一条直线，利于食管拉直，方便灌胃，减少损伤
•
•
针针
头头
与斜
针面
筒与
连针
接筒
紧刻
密度
朝
向
一
致
•
针 栓 第 一L
J
黑 圈 上 缘
注射器使用后处理
•使用后丢入垃圾箱，防止扎伤
平握法 执笔法
•平握法:腹腔注射、皮下注射、肌内注射（小鼠） •执笔法:灌胃、耳缘静脉注射、肌内注射（家兔）
抽取药液
•抽药液时，需看到针筒刻度，控制药量 •抽出的药液不得再重新注入药液瓶内
动物实验基本知识和操作技术
教学目标
•熟悉操作方法，操作技能 •理论联系实际，巩固知识 •掌握科研程序，理解科研
实验课要求
.预习（值日组清楚本次实验动物种类、数量） •清点药品、器材 •正确操作，小心使用 •认真观察、记录
•遵规守矩（实验后小鼠均处死，尸体放入大鼠笼垃圾袋内,
不得乱扔）
•卫生与值日 •书写报告（独立思考，独立操作，发现问题,分析问题, 解
实验动物编号
小鼠捉拿（_ ）
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冰槌
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黄 蚀
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•一手（一般是右手）提起鼠尾，放在粗糙面（如鼠笼）上, 向后轻拉其尾，使鼠身与鼠尾成一条直线，即 定小鼠于 鼠笼上
断。结论应与该实验的目的相呼应。
实验报告书写
1. 对实验的全面总结 2. 提高分析、综合、概括问题的能力 3. 实验分析要求全面阐述每个实验结果的原理
4. 实验结论要求用1〜2句话概括
•实验动物(laboratory animal)
经人工培育，对其携带微生物实行控制, 遗传 背景明确，来源清楚，可用于科学实验、
・四!1级! ，无菌动物(GF)和悉生动物(GN):无菌动物是指采用当
前的技术手段无法在动物体表、体内检出一切其他生物体。
常用实验器械
注射器结构
M2
一 三
4
=6 =
=8 =
=1
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
•针帽 •针头 •针筒 •针栓
注射器规格
实验器材
•1ml •2.5ml •5ml •10ml
决问题，科学严谨的作风）
卫生与值日
每组负责 清理各自实验桌面、器材（注射器、药盘、剪刀、镶子、 烧杯、鼠笼、兔箱、铁架台、加热板等） 椅子、鼠笼、兔箱等摆放整齐
值日组负责（每次2组）
实验动物的课前领取，课后归还（动物尸体袋子扎紧，鼠
笼扣死） 实验室公共部分打扫（扫地、拖地、倒垃圾、清理水槽台 面、检查各组实验器材归还情况等） 清点器械、药品
关闭门窗、水电
实验报告写作要求
•实验题目:注明实验报告时间、室温。 III •实验目的： •实验材料：实验对象、实验药品和实验器材。 •实验方法： •实验结果:将实验中所观察得到的结果作出详实地记录。
客观的实验结果用数据来表示（要求整理全班结果，并做
出统计分析）o主观的实验结果用文字来描述。
•实验讨论：根据已知的理论知识对结果进行解释和分析。 •实验结论:从实验结果和讨论中归纳出一般的、概括性的 判