梅毒筛查(TRUST)实验操作规程
性病实验室梅毒SOP

目的:规范的梅毒螺旋体检验操作,确保检测结果准确。
适用范围:性病实验室工作人员责任人:实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性,医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法,各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要,用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml,室温静置1-2小时(或37℃静置30分钟),待血液凝固、血块收缩后,3000r/min离心10-15分钟,分离新鲜血清,备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要,用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml,轻轻颠倒混匀8-10次,3000r/min离心10-15分钟,分离血浆,备用。
血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验(一般仅用于RPR实验,),但易出现假阳性反应(需用血清复试),如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂,1岁以下儿童采用足跟部)。
一次性采血针刺破皮肤,用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液,立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测,或取渗出液直接涂片,用于镀银染色试验。
1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,刮取渗出液,加入有DNA保存液(1ml/管)的标本管中,备用。
1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结,注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次,取少量的淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。
NJKM-SOP0301.17---梅毒TRUST检测作业指导书--Version4.0

梅毒TRUST检测作业指导书1、试验原理:梅毒非特异抗体检测是采用抗原抗体凝集反应。
其原理如下:采用VDRL抗原(牛心磷脂、卵磷脂及胆固醇)重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成,供在白色卡片上进行实验,以检测血清或血浆中反应素用。
2、样本收集和贮存:标本仅限于血清或血浆。
适宜标本量为血清或血浆500ul,最少标本用量为血清或血浆200ul,三天内检测的标本应在2-8℃保存,三天内不检测的标本应贮存在-20℃,同时避免反复冻融血清。
对于出现以下情况之一的标本应拒收:送检血清或血浆低于最少用量;蛋白变性标本;标本中含有颗粒物质;严重溶血、严重脂血的标本;有微生物污染的标本。
3、安全防范:3.1检测试剂盒及内容物视为有传染性物质,属于生物危害物品。
3.2移液过程禁止用口。
3.3 在处理试剂和标本的地方禁止吸烟,饮食。
^3.4使用试剂盒和标本时,必须戴一次性手套,穿试验服。
使用后请彻底洗手清洁。
3.5患者样本及其他潜在感染材料试验后应放入医用垃圾桶内。
4、试剂:4.1 储存与稳定性:试剂应在2-8℃保存,效期1年。
4.2试剂盒组成:(上海荣盛)TRUST抗原悬液×1瓶阳性对照血清 1mL×1支阴性对照血清 1mL×1支实验专用卡片 120人份专用滴管及针头 1套'说明书 1份5、仪器设备:5. 1振荡器5. 2微量移液器6、操作步骤:6. 1分别吸取阴性和阳性对照,各滴加l滴(50UL)(或用加样枪吸取50 UL)到反应卡的二个圈内铺匀。
6. 2吸取血清或血浆50UL (不需灭活)均匀涂满到白色卡片的另一个卡圈内。
6. 3轻轻摇匀抗原悬液,用加样枪吸取50 UL于血清圈内。
6. 4按每分钟100转振荡或摇动卡片8分钟后,立即肉眼观察结果。
6. 5结果记录于《免疫室夜班项目操作表2》。
7、结果解释?7.1肉眼见到较大或较小的红色凝聚物,定为阳性反应。
代表该标本中可以检测出反应素。
梅毒血清学检测的操作规范

检测操作
血清分离
抗凝处理:加入抗凝剂如肝 素钠
离心分离:将血液样本放入 离心机中,以一定速度离心
采集静脉血:使用无菌注射 器抽取静脉血
分离血清:将离心后的血液 分为血清和血细胞两部分
抗原检测的原理
抗原检测
抗原检测的方法
抗原检测的注意事项
抗原检测的结果解释
抗体检测
采集样本:采 集静脉血液样 本,确保样本
一次性使用的针头、针管、玻片等物品,应按照医疗废物处理。 检测过程中产生的废弃标本,应按照生物安全要求进行高压灭菌或化学消毒处理。
检测过程中产生的废弃试剂、缓冲液等,应按照实验室废弃物处理规定进行分类处理。
检测结束后,应对实验室进行全面清洁和消毒,确保环境安全。
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汇报人:
频率:每周至少进行一次室内质控,并记录相关数据
室间质评
定义:室间质评是指实验室与其他实验室之间对相同或相似项目进行比较和评价
目的:提高实验室检测结果的准确性和可靠性
实施方式:通过参加权威机构组织的室间质评活动,对实验室的检测能力进行评估和 验证
意义:帮助实验室发现存在的问题和不足,及时采取措施进行改进,提高实验室的整 体水平
假阴性结果:可 能由于窗口期、 检测方法等原因 导致,需要结合 临床判断
注意事项
生物安全防护
实验室布局与设施:合理规划实验室空间,确保空 气流通,使用专用实验台和防护服
单击此处输入你的正文,请阐述观点
废弃物处理:正确处理实验废弃物,防止交叉感染 和环境污染
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严格遵守实验室操作规程,确保实验结果的准确性 和可靠性
静脉血:采集肘静脉血
采集部位
性病实验室梅毒SOP副本

目的:标准的梅毒螺旋体查验操作,确保检测结果准确。
适用范围:性病实验室工作人员责任人:实验操作者一、标本的搜集与处置标本搜集的大体要求操作应标准化。
所有标本都应当被视为具有传染性,医务人员应戴手套谨慎操作。
梅毒标本搜集梅毒的实验室诊断要紧有病原体检测和血清学检测方式,各期梅毒的检测方式及部位见下表。
血液血清标本依照需要,用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml,室温静置1-2小时(或37℃静置30分钟),待血液凝固、血块收缩后,3000r/min离心10-15分钟,分离新鲜血清,备用。
也可采纳保留于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可阻碍试验结果。
血浆标本依照需要,用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml,轻轻倒置混匀8-10次,3000r/min离心10-15分钟,分离血浆,备用。
血库血浆和EDTA抗凝血浆一样能够用于梅毒血清学实验(一样仅用于RPR实验,),但易显现假阳性反映(需用血清复试),如用其他抗凝剂应第一评判后再用。
末梢全血消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂,1岁以下儿童采纳足跟部)。
一次性采血针刺破皮肤,用无菌棉签擦掉第一滴血。
搜集滴出的血液,当即用于检测。
皮损部位组织液用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片当即用于暗视野显微镜检测,或取渗出液直接涂片,用于镀银染色实验。
用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,刮取渗出液,加入有DNA保留液(1ml/管)的标本管中,备用。
淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结,注入无菌生理盐水并反复抽吸2-3次,取少量的淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片后当即进行暗视野镜检或备用。
脑脊液操作由专业人员进行,一样用腰椎穿刺术取得。
【VIP专享】梅毒螺旋体检测标准操作规程

编 码文件名称梅毒螺旋体检测标准操作规程页 数实施日期制 订 人审 核 人批准人制订日期审核日期批准日期目 的:规范的梅毒螺旋体检验操作,确保检测结果准确。
适用范围:性病实验室工作人员责 任 人:实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性,医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法,各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本临床表现取材部位检查方法一期梅毒溃疡、淋巴结、血液暗视野检查、血清学检查二期梅毒皮损、淋巴结、血液暗视野检查、血清学检查潜伏梅毒血液血清学检查三期梅毒血液、脑脊液血清学检查神经梅毒血液、脑脊液血清学检查根据需要,用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml,室温静置1-2小时(或37℃静置30分钟),待血液凝固、血块收缩后,3000r/min离心10-15分钟,分离新鲜血清,备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要,用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5ml,轻轻颠倒混匀8-10次,3000r/min离心10-15分钟,分离血浆,备用。
血库血浆以及EDTA抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验(一般仅用于RPR实验,),但易出现假阳性反应(需用血清复试),如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂,1岁以下儿童采用足跟部)。
一次性采血针刺破皮肤,用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液,立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测,或取渗出液直接涂片,用于镀银染色试验。
梅毒甲苯胺红不加热血清试验TRUST-检验科免疫室作业指导书

梅毒甲苯胺红不加热血清试验TRUST原理采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液,在白色卡片上进行试验,检测血清或血浆中反应素。
可作为梅毒病人的诊断和疗效参考。
标本采集2.1标本采集前病人准备:受检者应空腹。
2.2标本种类:血清2.3标本要求:采集静脉血2ml,室温放置不超过4小时,分离血清备用。
3.标本储存:待测样本在2–8℃不超过48小时,-20℃不超过三个月,-70℃以下长期保存。
应避免反复冻融。
4.标本运输:室温运输。
标本拒收标准:细菌污染、溶血、脂血标本不能作测定。
试剂6.1试剂名称:梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒6.2试剂生产厂家:上海荣盛生物技术有限公司6.3包装规格:120人份6.4试剂组成:6.4.1TRUST抗原悬液2.5ml×1瓶6.4.2阳性对照血清1m×1支6.4.3阴性对照血清1m×1支6.5.4试验专用卡片120人份6.5.5专用滴管及针头1套6.5.6使用说明书1份6.5试剂储存条件及有效期:保存于2-8℃,有效期1年。
操作步骤7.1定性试验:7.1.1分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
7.1.2取待检血清50微升(不需灭活)置于纸卡的另一圆圈中。
7.1.3用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。
7.1.4按每分钟100转摇动8分钟,肉眼观察结果。
7.2定量试验将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后按上述定性方法进行试验,以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。
结果判断8.1阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的红色凝聚物。
8.2弱阳性反应(+~++):可见较小的红色凝聚物。
8.3阴性反应(-):可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。
临床意义TRUST阳性为诊断梅毒的筛选试验。
参考范围:阴性质量控制:每次试验均应做阴性和阳性对照,阴性对照不出现凝聚物,阳性对照出现明显凝聚物;同时应以2NCU/ml含量的梅毒抗体质控血清试验,应出现可见凝聚物。
梅毒螺旋体抗体测试标准操作规程

梅毒螺旋体抗体测试标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:梅毒螺旋体抗体(速写TP);组合项目申请:性病检测、输血前监测定加选本项目。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1 标本采集2.1.1 采用含高效促凝剂或含分离胶的真空采血管,常规静脉采血约2 ml,无需抗凝。
2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符号。
2.1.3 急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.1 标本量不足:少于0.5 ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2 无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.3 其它如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2 标本保存2.2.1 标本接收后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2 标本保存时间:血清室温(15~25℃)下可稳定48h,在冰箱中(2~8℃)可稳定7天。
-20℃放置12个月。
为避免标本中水份挥发使血清浓缩,对保存超过1天的标本均加塞密闭或覆盖保鲜膜。
2.2.3 已完成测试的标本保存完整的识别号,置2~8℃冰箱内保存7天。
备复检。
2.3 标本采集的注意事项2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛状态。
2.3.2 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理本品采用胶体金免疫检测技术和层析原理,定性检测血清(血浆)样本中的梅毒螺旋体抗体。
检测时,样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原(大肠杆菌表达)结合形成抗原抗体复合物,由层析作用复合物沿纸条向前移动,经过检测线时与预包被的抗原(大肠杆菌表达)结合形成“Au-TPAg-TPAb-TPAg”夹心物而凝聚显色。
游离的胶体金标记梅毒抗原(大肠杆菌表达)则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。
2018-rpr实验步骤-word范文模板 (8页)

本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==rpr实验步骤篇一:梅毒快速检测试验记录(科华)梅毒快速检测试验记录实验步骤:1、取出RPR试剂,平衡到室温;2、分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中;3、另吸取50微升待检血清均匀铺加在纸卡的另一个圆圈中;4、用盒中专用针头,滴管吸取RPR试剂,分别垂直滴加1滴于上述血清中;5、用RPR旋转仪水平转动纸卡8分钟,100转/分钟,然后3分钟内在光线充足处判断结果;6、定性试验呈弱阳性或阳性者,必须做定量试验才能了解患者血清中的抗体滴度,具体方法如下:将待检血清用生理盐水作倍比稀释(原血清、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32),然后对每个稀释度的血清按定性试验方法再进行测定并判断结果结果判断:1、阴性反应(—):可见均匀的抗原颗粒而无凝集物;2、弱阳性反应(+~++):可见较小的黑色凝集物;3、阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的黑色凝块,溶液清亮。
结果分析:检测者:复核者:篇二:梅毒筛查试验梅毒试验简介一、梅毒筛查(TRUST)实验原理:采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。
供在白色卡片上进行试验,以检测血清或血浆中反应素用。
可作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。
二、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)所用抗原为标准的牛心肌脂抗原,该方法操作简便、迅速,适用于大量标本检测,目前许多血站用RPR试验对献血者进行梅毒普查。
RPR试验和df方法对一期梅毒的诊断相互配合,可早期诊断梅毒。
缺点是当抗体含量过高时,易出现假阴性反应,即前带现象(prozone phenomenon),会有漏检;还易出现生物学假阳性反应。
对潜伏期梅毒、神经梅毒不敏感。
RPR是“快速血浆反应素试验”的英文缩写,是一种非螺旋体抗原血清试验。
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梅毒筛查(TRUST)实验操作规程
一、原理:
采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。
供在白色卡片上进行试验,以检测血清或血浆中反应素用。
可作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。
二、操作步骤:
1、定性试验:
①分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
②取待检血清或血浆50ul(不需灭活)置于纸卡的另一圆圈中。
③用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。
④按每分钟100转摇动8分钟,肉眼观察结果。
㈡定量试验:
将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后按上述定性方法进行试验,以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。
三、结果判断:
①阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的红色凝聚物。
②弱阳性反应(+~++):可见较小的红色凝聚物。
③阴性反应(-):可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。
四、注意事项:
①本试验在23~29℃条件下进行。
②TRUST试剂使用前应充分摇匀。
③本试验系非特异性反应,需结合临床进行综合分析,必要时需作梅毒螺旋体抗体特异性试验。
五、正常值:阴性
六、临床意义:
作为诊断梅毒的初筛试验。
TRUST为非梅毒螺旋体抗原试验,此试验敏感性很高,而特异性较差,一些非梅毒病人血清中可暂时或长期测出反应素,称为生物学阳性(BFP)。
故对结果的解释需结合临床具体分析。
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