紫外-荧光检测器
荧光检测器原理
荧光检测器原理
荧光检测器是指利用荧光原理来探测光信号的仪器。
它主要由一个发射器、一个检测器和一些相关的结构和电路组成，发射器用来发射光信号，检测器用于探测发射器发出的光信号。
发射器和检测器通常是互斥的，也就是说，当发射器发出的光信号被检测器检测到时，就会切断发射光信号的电源。
荧光原理是一种光探测技术，也被称为“荧光技术”。
这种技术采用一种可以监测特定频率的精密图像信号传递系统，以探测某一特定波长范围的紫外光。
当这种特定波长的紫外光照射在某种物体上时，它会被吸收，变成其他更长波长的光，被称为“发散光”或“发射光”。
这种发射光就是荧光，可以被检测器检测到，以此来确定它穿过物体的频率和功率。
荧光检测器也可以用在安全监控用途，这种设备可以用来监控某个特定频率的荧光信号的频率和功率，用来探测区域是否存在有人。
它也可以用来检测反射荧光，通过探测反射光来判断区域里的物体。
总的说来，荧光检测器的原理就是利用发射器发出特定波长的紫外信号，当物体穿过紫外信号时，就会发出发散光或发射光，而这些发射光又可以被检测器探测到，从而获得精确的信号传输系统和区域检测技术。
紫外荧光测硫仪操作规程
2.3如测标样（0.5 ppm）时不在范围，待仪器稳定后重新做曲线，按“2.1.1”-“2.1.3”步骤重新操作；
2.4标样保证在一年之内出厂；
2.5仪器老是不稳定，停机检查，管路衬管；
2.6污染管路更换，衬管用重铬酸钾洗液，稳定在范围内，方可检测；
1.5结束测试
测试结束后，单击工作站控制面板“退出系统”按钮后选择“退出工作站”，即可关闭计算机。
2.0仪器操作注意事项
2.1做标准曲线：
2.1.1接“TS-3000测硫仪使用说明”(3)步骤，进入工作站控制面板，点击使用“低档”，开“紫外灯”，使用“标样”模式，取一支与待测样品硫含量接近的标样（目前取0.5 mg/L）用25 uL进样针抽取标样，点选“开始积分”，在“样品浓度”内输入样品实际含量，“进样体积”输入25.4uL，氧气含量300，氩气150。点击“进样”键，同时按自动进样器“前进开关”，待样品注射完取下进样针，如此反复5-6次；
1.3.2旋动主机右下端旋钮，调节载气流量至氧气300ml/min，氩气150ml/min。
1.3.3进入工作站控制面板，点击使用“低档”，开“紫外灯”，（需要预热15 min）使用“样品”模式。
1.3.4点击“打开校正曲线”按钮，点击左下角“打开”，选择以保存的标准曲线文件，点击求平均值，点击右下角“绘图”后，单击“确定”键退出。
1.3.5点击“基线”按钮，点击“自动清零”调校基线回到零点。
1.3.6单击“启动”，输入“样品名称”，“进样体积”与“载气流量”，先使用标样进行测试，若结果异常，则点击控制面板最下状态栏中部“高压（V）”进行调整，结果偏高则向下微调，偏低则向上微调（调节幅度1~2V）。
检测器的种类及选择方法
荧光检测 fluorescence and (b) chemiluminescence profiles of HRP-immunolabeled GFP.
电化学检测器(ECD)
电化学检测器是测量物质的电信号变化，对具有氧化还原 性质的化合物，如含硝基、氨基等有机化合物及无机阴、阳 离子等物质可采用电化学检测器。包括极谱、库仑、安培和 电导检测器等。前三种统称为伏安检测器，用于具有氧化还 原性质的化合物的检测，电导检测器主要用于离子检测。其 中安培检测器(AD)应用较广泛，更以脉冲式安培检测器最为 常用。 原理：在两电极之间施加一恒定电位，当电活性组分经过 电极表面时发生氧化还原反应(电极反应)，电量(Q)的大小符 合法拉第定律Q＝nFN。因此，反应的电流(I)为：I＝nFdN／ dt，式中n为每摩尔物质在氧化还原过程中转移的电子数，F 为法拉第常数，N为物质的摩尔数，t为时间。当流动相的流 速一定时，dN／dt与组分在流动相中的浓度有关。
紫外检测器(UV)
The data showed that glucuronidation of the 3- and 40-hydroxyls resulted in band I λmax hypsochromic shifts (or blue shift) of 13-30 and 5-10 nm, respectively. Glucuronidation of the 5-hydroxyl group caused a band II λmax hypsochromic shift of 5-10 nm. In contrast, glucuronidation of the 7-hydroxyl group did not cause any λmax change in band I or II λmax, whereas glucuronidation of the 6hydroxyl group did not cause predictable changes in λmax values. The paper demonstrated for the first time that a rapid and robust analysis method using λmax changes in online UV spectra can be used to pinpoint region-specific glucuronidation of flavones and flavonols with hydroxyl groups at the 40-, 3-, 5-, and/or 7-position(s).
紫外、荧光分光光度计说明
一、设备名称：RF-5301PC荧光分光光度计；二、使用原理1、荧光分光光度计由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。
荧光是光致发光，任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱，发射波长总是大于激发波长。
荧光激发光谱是通过测定荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱，反映不同波长激发光引起荧光的相对效率。
荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光，是荧光强度对发射波长的关系曲线，表示在所发射的荧光中各种波长相对强度。
由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长，可用它来鉴定荧光物质。
有些发荧光的物质其荧光强度与物质的浓度成正比，故可用荧光分光光度法测定其含量。
在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
利用某些物质受激发出的荧光，其光强度与该物质的含量成一定函数关系的性质而制成的。
三、组成结构光源、光件、样品池、检测器、数据处理器1、荧光分光光度计图RF5301PC荧光分光光度计主要是由激发光源、激发单色器、样品池、发射单色器、检测器以及数据处理系统几部分组成1. 光源：为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm 范围内强度几乎相等，故较常用。
2．激发单色器：置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
3．发射单色器：置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。
筛选出特定的发射光谱。
4．样品室：通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。
测量液体时，光源与检测器成直角安排；测量固体时，光源与检测器成锐角安排。
hplc检测器种类及特点
hplc检测器种类及特点HPLC检测器种类及特点HPLC（高效液相色谱法）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于各个领域的实验室。
HPLC系统由多个部分组成，其中检测器是其中之一，用于监测样品在色谱柱中的分离和识别。
不同类型的HPLC检测器具有不同的特点和适用范围，本文将详细介绍一些主要的HPLC检测器种类及其特点。
紫外检测器（UV检测器）：紫外检测器是使用紫外线（UV）光源照射样品，并测量样品吸收/透射的紫外光强度的一种检测器。
这种检测器适用于大多数化学物质，因为大多数有机化合物和某些无机化合物（如金属离子）对紫外线具有吸收能力。
紫外检测器的工作原理是通过比较进样溶液和参比溶液对紫外光的吸收量来确定样品的存在和浓度。
UV检测器具有极高的检测灵敏度和广泛的线性范围，且对各种溶剂和化合物的稳定性较好。
然而，该检测器不能提供化合物的结构信息，因为它只是根据吸收强度进行检测。
荧光检测器：荧光检测器是在分离柱后的样品流中使用荧光探针，通过测量样品产生的荧光强度来检测化合物。
这种检测器适用于大多数有荧光性质的化合物，包括天然化合物、药物、色素等。
荧光检测器的工作原理是在激发光源（通常是紫外线）的作用下，分子从低能级跃迁到高能级，然后放射出荧光光子。
荧光检测器具有较高的检测灵敏度和特异性，且具有多通道检测的能力，可以同时测定多个组分。
然而，荧光检测器对环境和溶剂的要求比较高，并且需要选择合适的激发波长和荧光波长。
电化学检测器：电化学检测器是使用电化学技术进行检测的一种检测器。
电化学检测器可以测量样品中的电子转移反应、电荷转移反应、离子传递等电化学过程。
常见的电化学检测器有电导检测器（CD）和安培检测器（AD）。
电导检测器是通过电荷传递反应量测样品离子浓度的一种方法，适用于带电离子和非离子。
安培检测器则是通过测量样品中电流强度来识别化合物的一种方法，适用于具有可测电流的化合物。
电化学检测器具有非常高的选择性和灵敏度，能够检测到微量的化合物，但它们对电极的选择和维护要求较高。
不同液相检测器的区别
高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种，有什么区别？高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似，实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池，一个作参比，一个作测量用，光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出。
当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
局限：流动相的选择受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相，每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器，是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
液相色谱紫外-荧光串联检测器法检测我国污水中常见11种抗生素
液相色谱紫外-荧光串联检测器法检测我国污水中常见11种抗生素液相色谱紫外-荧光串联检测器法检测我国污水中常见11种抗生素引言近年来，随着抗生素的广泛使用和滥用，我国污水中抗生素的排放量逐渐增加，对环境和人类健康造成了潜在风险。
因此，开发一种高效可靠的检测方法来监测污水中抗生素的含量显得尤为重要。
液相色谱紫外-荧光串联检测器法结合了紫外吸收和荧光检测技术的优势，已成为一种常用的方法来检测污水中的抗生素。
方法1. 样品预处理污水样品在进行检测之前需要进行预处理。
首先，将收集的污水样品进行过滤，去除固体颗粒物。
然后，使用净化剂去除样品中的杂质和有机物。
最后，将样品进行固相萃取，以浓缩目标物质。
2. 色谱分离使用液相色谱分离目标化合物。
液相色谱具有高效隔离、良好的分离度和分离效果，并能够使检测物质在短时间内被完全分离。
3. 检测方法使用紫外-荧光串联检测器来检测分离的目标化合物。
紫外检测器通过测量样品吸收光的强度来确定化合物的浓度。
荧光检测器则通过测量目标化合物的荧光强度来评估其含量。
使用两者串联检测器的优势在于可以提高检测的特异性和准确性。
结果与讨论使用液相色谱紫外-荧光串联检测器法成功检测了我国污水中的11种常见抗生素。
结果显示，这些抗生素在污水样品中的含量普遍较高。
其中包括青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、氟喹诺酮类等不同种类的抗生素。
结论液相色谱紫外-荧光串联检测器法是一种可靠而有效的方法，可用于检测我国污水中的常见抗生素。
通过该方法，可以对抗生素在污水中的污染情况进行定量分析，及时了解污水处理厂的处理效果，并在必要时采取相应的控制措施。
此外，该方法还可用于监测抗生素的排放和迁移过程，为环境保护和人类健康提供科学依据。
展望尽管液相色谱紫外-荧光串联检测器法已经取得了较好的成果，但仍然存在一些挑战和改进的空间。
未来的研究可以进一步优化样品预处理方法，提高检测灵敏度和准确性，并加强对其他污染物的分析，以全面了解我国污水中的抗生素污染情况。
液相检测器原理
液相检测器原理
液相检测器是一种用于分析化学样品中溶解物的工具，它利用液相色谱法（HPLC）或凝胶电泳法等方法进行分析。
液相检测器的工作原理是利用化学或物理性质来检测溶解物的存在和浓度。
以下是几种常见的液相检测器原理：
1. 紫外-可见光检测器（UV-Vis Detector）：该检测器利用样品中溶解物对紫外-可见光的吸收特性进行检测。
当光线通过样品时，溶解物会吸收特定波长的光，产生吸收峰。
通过测量吸收光的强度，可以确定溶解物的存在和浓度。
2. 荧光检测器（Fluorescence Detector）：该检测器利用溶解物的荧光性质进行检测。
在样品中加入荧光染料或特定的荧光标记物后，当激发光照射样品时，溶解物会发射荧光。
通过测量发射荧光的强度或波长，可以确定溶解物的存在和浓度。
3. 振动式试管检测器（Refractive Index Detector）：该检测器利用溶解物对折射率的影响进行检测。
当溶解物与载体溶剂相互作用时，会使溶剂的折射率发生变化。
通过测量样品和纯溶剂间的折射率差异，可以确定溶解物的存在和浓度。
4. 电导检测器（Conductivity Detector）：该检测器利用溶解物对电流的导电性进行检测。
溶解物的存在会改变电解液的电导率，从而产生电流信号。
通过测量电流信号的强度，可以确定溶解物的存在和浓度。
液相检测器根据不同的原理可以选择合适的检测器进行分析，以实现对溶解物的准确检测和分析。
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紫外检测器 荧光检测器来自1、光-波长白炽透明的太阳是由波长小于10nm到1011nm的一组电磁波组成。
太阳
电磁波
2、什么样的物质有紫外、可见吸收
分子的电子结构和分子吸收光后电子状态的变化等可用
分子轨道在任何情况下都是
成键轨道比反键轨道稳定。电子跃迁发生在基态分子轨道（成键）和反键轨道之间，处于基态的电子吸收一
苯丙氨酸（Phe，F） λmax = 257nm
酪氨酸（Tyr，Y） λmax = 275nm
色氨酸（Trp，W） λmax = 280nm
3、紫外检测器
选 择 波 长
发射紫外光的灯 （汞、氘、氙灯）
原理：光源发出的光通过棱镜分解折射出不同波长的光，经过 狭缝调节后，只能让对某组分有最大吸收波长的光通过狭缝照 射到样品上，样品池中的组分吸收了该波长的光，使其通过样 品池后强度下降，使得检测器中的光电敏感元件输出电流发生 变化，这种改变就是测定的结果，这种改变符合比尔定律。
优点：有了参比池可以减小紫外检测器的噪声， 抵抗外来干扰，提高检测器的灵敏度
3、紫外检测器
棱镜发在样品池后，不需 要在棱镜后加狭缝
检测器是排成 一组阵列 的二极管，如256个二组 管，每个可看成一个单 元。
被测定组分通过样品池后照射到多色器上被分解折射成不同波长 单色光。每个二极管都接收到波长不同，强度不等的光，被测组 分通过样品池后的吸收紫外光的情况能够由多色器全波长分解扫 描表现出来，不需要设定特定的波长。
二极管阵列检测器可显示三维色谱图，能够检查 色谱峰的纯度。可同时进行多波长测定。重现性 好。但是灵敏度一般你于普通的紫外检测器。
4、荧光检测器
如果电子吸收了多余的能量，冲出了紫外吸收的范围到达更高的 能阶，在回到低能阶的路途中因与其它分子的碰撞或其它原因， 这些高能电子不会很快消失，当它们到达一个特定的次高能阶时， 一下子降到一个特定的次低能阶，这个过程发出的光就是荧光， 吸收能量的分子中的电子被激发从低能阶到高能阶，在跃迁的过程中电 亦称发射荧光。 子吸收了能量使紫外光的强度降低。这是紫外吸收的原理。
优点
10~1000倍。
需要的样品最少
一定是这类化合物的分子中的电子被激发后能吸收多 余能量达到更高能阶，所以才能用荧光检测器检测。
λ发射荧光＜λ激发荧光（电子撞击失去一部分能量）
激发荧光能阶≈紫外吸收的能阶 举例：糖基化：激发波长260nm，发射波长420nm
4、荧光检测器
荧光检测器多采用90°角的光路，这样避开了激发光和发射光之间的
干扰。所用灯与紫外检测器一样，一般用氙灯，也是光电倍增管作为
敏感器。
有极高的灵敏度和良好的选择性，灵敏度约为紫外的
3、紫外检测器
原理：双光路一路是样品池，一路是参比池， 两路对等，光源以完全相等的两束光投射到测 量池和参比池上，若两池中都是纯流动相（有 的参比池中充满空气作为参比物），它们的吸 收值是相等或几乎没有吸收，则两光照射到光 电敏感器上的强度相等，无信号输出。即使有 噪音也相互抵消，基线平稳。当有组分进入样 品池，吸收紫外光使两边的光电敏感接受到的 照射强度不等，像天平失衡，电路上着重电泳 补偿，于是有信号。
定能量的光子后，可发生 σ- σ*、 σ-π*、π-σ*、π-π*、n-σ*、n-π*、各跃迁所需能量不同。
2、什么样的物质有紫外、可见吸收
41、、πσ--πσ*跃*所迁需是能双量键最中大π，电不子易由激π发成，键如轨饱道和向烃反，键只轨含道有的σ跃键迁，，其能跃量迁比出n→现π在*远跃紫迁外大区，，比波n-长σ* 小小，于因20此0n这m，种例跃如迁A也ma大xC部H4分=1出25现nm在等在。近紫外区，其εmax较大，大多数是强吸收峰。根据π-π*产 生2、的n体-σ系*跃不迁同，，杂吸原收子带O可、表N、示S以、下X都几含种有：n非键轨道，如C-Cl，C-OH等都发生n-σ*跃迁，其跃 （迁1所）需、能共量轭比非σ封-闭σ体*小系中但的是π主-要π还*（是K在带）20如0n丁m以二下烯。CH2=CH-CH=CH2，λmax=217nm。 （3、2）n→、πB带*跃（迁苯，吸只收有）分芳子香中族同和时杂存环在芳杂香原族子化（合有物n光非谱键的轨特道征）吸和收双。键芳π环电的子B时带才吸有收可在能发生 2n3-0π~2*7跃0n迁m，，如如苯C=乙O，烯N，=Nλ，mNa=xO=等24，4n其m、吸λ收m能ax量=2小82，nm大。部分在200~700nm之间，但是εmax较小， （是3弱）吸、收封。闭共轭体系（如芳香族和杂环芳香族化合物）