浅谈高效液相色谱仪期间核查(荧光检测器)
黑龙江纺织 HEILONGJIANG TEXTILE
№.4 Dec.,2013
浅谈高效液相色谱仪期间核查（荧光检测器）
苑向杰
（黑龙江省完达山乳业股份有限公司，黑龙江 哈尔滨 150078） 摘 要：高效液相色谱仪做为强制检定仪器除按规定定期送法定检定机构进行检定外[1],在两次检定周期之间还需对使用 频率高的仪器进行期间核查以维持设备校准状态的可信度。 关键词：高效液相色谱仪；仪器设备；期间核查
表 3 流量设定值（1）误差
设定值 0.5mL/min
收集时间（min） 10
测量值 0.491 0.497 0.499
表 4 流量设定值（2）误差
偏差（%） 0.84
测量次数 1 2 3
设定值 1.0mL/min
收集时间（min） 10
测量值 0.989 0.995 0.998
偏差（%） 0.46
定量重复性（结果见表 1）。
3 被核查仪器特征
名称：液相色谱仪（荧光检测器）。 编号：2206-008。 产地：美国 Waters 公司。 型号：Flexer-FL。 标准物质：维生素 B1。 辅助设备： （1）自动进样器； （2）高压输液泵； （3）柱温箱。
4 期间核查结果及判定
表1
序号 1 2 3 4
Talking About the High Performance Liquid Chromatograph During the Verification(Fluorescence Detector)
YUAN Xiang-jie
(Heilongjiang Provincial Wondersun Dairy Co., Ltd., Harbin 150078) Abstract: High performance liquid chromatography as mandatory testing instrument in addition to the provisions of regularly send legal verification institutions for verification, in between the two cycle of verification is needed during the verification in order to maintain the credibility of the instrument calibration status of the equipment using high frequency. Key words：high performance liquid chromatography; instrument and equipment; intermediate check
黑龙江纺织 Heilongjiang Textile 2013(4)
本文链接：/Periodical_hljfz201304007.aspx
（2）检查贮液器是否清洁，尽可能使用 HPLC 级 的溶剂，非 HPLC 级的流动相一定要通过 0.45um 微 孔滤膜过滤以除去其中的微粒物质，同时更换掉陈 旧的流动相。检查吸滤头是否堵塞，若有堵塞现象， 可先用异丙醇超声处理，然后再用甲醇或乙醇清洗 干净。
收稿日期：2013-11-04 作者简介：苑向杰（1980-），黑龙江省完达山乳业股份有限公司，助理工程师。
1 期间核查的目的
在于及时发现测量设备、参考标准等出现量值 失准的问题，尽量 缩短失准后的追溯时间，尽可能 减少和降低由于设备状态改变对测量结果的影响， 从而有效的维护实验室和客户的利益。
2 期间核查的主要项目
2.1 外观 （1）先检查仪器电源线、信号线等插接紧密，各
开关、旋钮、按键等功能正常，指示灯灵敏，显示器清 晰。外观的检查是很有必要的，它能将发现的问题及 时处理，避免造成更大的损失。
《实验室资质认定评审准则》中 5.5.10 要求“, 当 需要利用期间核查以保持设备校准状态的可信度 时,应按照规定的程序进行”。期间核查也叫“中间检 查”或“运行核查”。由于仪器自身的机械、光学和电 子等特性,导致不稳定、漂移甚至损坏等情况的发生, 或使用频度高，经常带离固定场所，或使用环境恶 劣，或因出现过载易造成测量结果可疑，从而影响检 验数据的准确性、可靠性和公正性，因此,对仪器在 两次检定之间的期间核查非常重要。原子吸收分光 光度计是实验室使用频率最高的仪器, 它的检定周 期为 2 年，在检定周期中每个季度进行一次期间核 查,核查仪器的稳定性、分辨率、灵敏度等指标,这对 于是否持续仪器本身的检测技术要求是非常必要 的。根据 JJG705-2002《液相色谱仪检定规程》,结合 本人进行液相色谱仪期间核查的体会, 介绍液相色 谱仪的期间核查方法,以其能够科学合理、简单方便, 能够真正把液相色谱仪的特性真实反映出来, 并有 利于保证检验数据的准确性、可靠性和公正性。
第4期
黑龙江纺织
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（3）开启仪器各部分电源,检查泵、检测器、柱温 箱，电脑主机与软件等运行状况必须正常。检测室内 室温应在 15℃～30℃，并保持 8h 内温度无变化，相 对湿度 20%～85%。一切正常后才能进行下面的检 定工件。 2.2 泵
流量设定误差（结果见表 1）。 2.3 检测器
基线噪声和基线漂移（结果见表 1）。 2.4 整机
5结语
该型号 Flexer-FL 荧光检测器的流量设定误差、 基线噪声、基线漂移、定量重复性等指标均能达到校 准规定的技术要求。
浅谈高效液相色谱仪期间核查（荧光检测器）
作者： 作者单位： 刊名：
英文刊名： 年，卷(期)：
苑向杰， YUAN Xiang-jie 黑龙江省完达山乳业股份有限公司,黑龙江 哈尔滨,150078
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核查参数
核查结果
噪音极限（AU）
0.258×10-4
基线漂移(AUh)
0.0824×10-3
定量重复性 RSD（%）
0.35
流量设定误差
0.84
（0.5mL/min）（%）
流量设定误差
0.46
（1.0mL/min）（%）
推荐值 5×10-4 5×Байду номын сангаас0-3
3 5
3
结果判定 合格 合格 合格 合格
合格
测定次数 1 2 3 4 5 6
平均值 RSD（%）
表 2 定量重复性测定数据
保留时间（min） 7.417 7.444 7.449 7.503 7.495 7.518
峰面积 288327 288164 285854 286297 287434 286745 287136
0.35
测量次数 1 2 3
高效液相色谱仪期间核查规程
高效液相色谱仪期间核查规程1 目的保证高效液相色谱仪计量的准确度。
2 范围适用于高效液相色谱仪的期间核查。
3 期间核查项目和技术要求3.1. 泵流量设定值误差应Ss≤±2%；流量稳定性误差应SR≤±2%。
3.2. 定性测量重复性误差(5次定量环进样)应RSD≤1.5%。
3.3. 定量测量重复性误差(5次定量环进样)应RSD≤1.5%。
4 核查步骤4.1. 泵流量设定值误差Ss，流量稳定性误差SR的核查。
4.1.1. 仪器与用具分析天平，万分之一，秒表，精度0.01秒，10ml容量瓶。
4.1.2. 操作程序4.1.2.1. 将泵、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相。
4.1.2.2. 按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先精密称定过重量的容量瓶收集流动相，同时用秒表记录，准确收集10～25分钟，再精密称定其重量。
收集时间应符合下表规定，每个设定值重复测定3次。
4.1.3. 结果计算按下列公式计算SS和SR：Fm=（W2-W1）/（P.t）SS=（Fm-FS）/FS×100%SR=(Fmax-Fmin)/F×100%W2为容量瓶+流动相的重量(g)W1为容量瓶的重量P为实验条件下的流动相密度(g/cm3)t为收集流动相的时间(min)PFm流量实测值(ml/min)FS流量设定值Fmin同一组测量中流量最小值Fmax同一组测量中流量最大值F为同一组测量中流量的算术平均值4.1.4. 结果判断：SS和SR值应符合下表规定流量设定值(ml/min) 1.0测量次数 3收集流动相时间(min) 5允许误差 SS 2%SR 2%4.1.5. 注意事项:收集时间应将“秒”换算为“分”代入公式计算。
4.2. 定性、定量测量重复性试验4.2.1. 色谱条件色谱柱：C18流动相：乙腈：水（55：45）流速：1ml/min波长：350nm进样量：20ul（定量环或是自动进样）4.2.2.操作程序将仪器连接好，使之处于正常的工作状态，待基线稳定后，用进样阀的定量环注入20ul，浓度为1ug/ml左右的甲醛衍生物溶液或稳定的待分析样品溶液，连续进样5次，记录甲醛的峰保留时间和峰面积。
高效液相色谱仪期间核查操作规程
高效液相色谱仪期间核查操作规程1目的为使高效液相色谱仪检测功能在检定期间内处于正常的工作状态，确保检验结果的准确性和有效性。
在仪器设备两次检定期间，对该设备进行期间核查，以验证设备是否保持校准时的状态,确保检验结果的准确性和有效性。
2范围适用于中心U3000高效液相色谱仪的期间核查。
3 核查项目泵流量设定值误差S S、泵流量稳定性S R、基线噪声、基线漂移，采用有证的标准物质萘甲醇溶液（已知浓度u并给出不确定度Ur的单标准物质）1.0×10-7g/ml、1.0×10-4g/ml，检出限（L）、定性重复性、定量重复性。
4 核查依据JJG694-2009《原子吸收分光光度计检定规程》5 核查方法计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后的运行检查。
5.1 核查条件（1）环境条件核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。
室温（15—30）℃，检定过程中温度变化不超过3℃，室内相对湿度20%—85%。
仪器应平稳的放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好。
（2）其他要求核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，萘-甲醇溶液1.00×10-4g/ml和1.00×10-7g/ml。
拓展不确定度小于4%，k=2。
5.2通用技术要求：目视、手动检查。
5.3输液系统泵流量稳定性S R设定流量1ml/min，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5min时间流出的流动相，在分析天平称重，按公式计算S s和S R，重复测量3次。
式中：——流量3次测量值算术平均值，ml/min；——流量设定值，ml/min式中：F max——同一设定流量3次测量值的最大值，mL/min;F min——同一设定流量3次测量值的最小值，mL/min。
F min=(W2-W1)/（ρt·t）(2) 式中：F m——流量实测值，ml/min；W2——容量瓶＋流动相的质量，g；W1——容量瓶的质量，g；ρt——实验温度下流动相的密度,g/cm3（不同温度下流动相的密度参见JJG694-2009《原子吸收分光光度计检定规程》附录C）t——收集流动相的时间，min。
高效液相色谱-质谱联用期间核查操作规程
高效液相色谱-质谱联用仪期间核查操作规程1 目的为了确保高效液相色谱-质谱联用仪检测性能在仪器两次检定期间内处于正常状态，对仪器设备进行期间核查，以确保检测结果的准确性和有效性。
2 范围适用于高效液相色谱-质谱联用仪的期间核查。
3核查项目检测器：分辨力、信噪比、峰面积重复性、保留时间重复性。
4 核查依据JJF 1317-2011 液相色谱-质谱联用仪校准规范、液相色谱-质谱联用仪操作指导书。
5 核查方法5.1 测定条件：温度：15～30℃，相对湿度20～80%。
仪器室不得有明显的机械振动,无电磁干扰。
标准物质：利血平溶液标准物质，相对扩展不确定度由于5%（k=2）移液器或移液管：量程范围100uL或200uL，B级或以上；容量瓶：10mL或25mL，B级或以上。
5.2 分辨力将仪器运行稳定后，根据仪器说明书的推荐条件设置参数，将扫描范围设为606~612,直接注入，注入5ng利血平，观察质谱图，记录m/z为609质谱峰，并计算其50%峰高处的缝宽，得到W1/2，作为分辨力的结果。
5.3 信噪比根据附录B设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z设为表2中特征离子的m/z,经色谱柱注入相应量的利血平。
观察色谱图，记录其色谱峰峰高作为Hs。
同时记录信号峰后1min~3min时间内的基线输出信号的最大值与最小值之差，作为Hn。
根据公式计算信噪比S/N，连续测量6次，以6次测量S/N的平均值作为信噪比的结果。
S/N= Hs /Hn式中：Hs——为提取离子m/z的色谱峰峰高H n ——为基线噪声值信噪比测量条件表5.3 峰面积重复性与保留时间重复性：根据附录B 设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z 设为表2中特征离子的m/z,经色谱柱注入相应量的利血平。
连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按下述公式计算相对标准偏差RSD.RSD=1001)1/()(12⨯⨯--∑=x n x x ni i %6 评定标准6.1 三重四级杆串联质谱： 6.1.1 分辨力ESI+≤1u ；6.1.2 信噪比ESI+≥30:1；ESI-≥10:1；APCI+≥30:1 6.1.3 峰面积重现性≤10% 6.1.4 保留时间重复性≤1.5%； 7 核查周期在仪器设备两次检定之间，每六个月核查一次。
高效液相色谱仪期间核查操作规程
高效液相色谱仪期间核查操作规程1 目的为了确保高效液相色谱仪检测性能在仪器两次检定期间内处于正常状态，对仪器设备进行期间核查，以确保检测结果的准确性和有效性。
2 范围适用于高效液相色谱仪的期间核查。
3核查项目检测器：基线噪声、基线漂移、定性定量重复性；4 核查依据JJG 705-2014 液相色谱仪检定规程、液相色谱仪操作指导书。
5 核查方法5.1 测定条件：温度：15～30℃，相对湿度20～80%。
5.2 基线噪音和基线漂移的测定紫外检测器和二极管阵列检测器：选用C18色谱柱,以100%甲醇为流动相,流量为1.0mL/min,检测器的波长选择在254nm,检测灵敏度调到最灵敏档。
开机预热，待仪器稳定后记录基线30min。
荧光检测器：选用C18色谱柱,以100%甲醇为流动相,流量为1.0mL/min,激发波长设定为290nm,发射波长设定为330nm。
开机预热，待仪器稳定后记录基线30min。
示差折光检测器：选用C18色谱柱，将仪器各部分连接好，以甲醇为流动相，流量为1 mL/min,参比池充满流动相，灵敏度选择在最灵敏当，接通电源，待仪器稳定后，记录基线30min5.3 整机性能（定性、定量重复性）测定将仪器各部分连接好，选用C18色谱柱，选择100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，根据仪器配置的检测器选择测量参数，紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器波长设定为254nm，灵敏度选择适中，基线稳定后由进样器注入10uL的1*10-4g/mL萘的甲醇溶液；荧光检测器将激发波长和发射波长分别设定为290nm和330nm，灵敏度选择在中间档，基线稳定后注入10uL的1*10-5g/mL萘的甲醇溶液；示差折光检测器灵敏度选择在中间档，注入10 uL的200μg/mL的甲醇中胆固醇标准溶液, 连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，计算相对标准偏差RSD.6 评定标准7 核查周期在仪器设备两次检定之间，每六个月核查一次。
最新液相色谱仪期间核查作业指导书资料
1目的对高效液相色谱仪运行情况进行检查，保证其正常使用，确保检验数据准确可靠。
2范围适用于本公司高效液相色谱仪在两次检定之间或修理后的运行检查。
3职责3.1检测中心液相主要使用人负责液相色谱仪期间核查的准备工作、操作及记录。
3.2检测中心设备管理员负责统筹安排及记录归档。
4计量性能要求4.1 输液系统泵流动稳定性应符合表1的要求。
表1 泵流量稳定性S的指标要求仪器的检测器的主要技术指标见表2。
表2 液相色谱仪检测器的主要技术指标4.3 整机性能仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示，指标要求见表3。
表3 液相色谱仪整机性能指标要求5 通用技术要求5.1 仪器外观仪器上应有仪器名称、型号、制造厂名、产品系列号、出产日期等内容的标牌，国产仪器应有制造计量器具许可证标志。
5.2 仪器电路系统仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰。
6 计量器具控制计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后的运行检查。
6.1 核查条件6.1.1 环境条件6.1.1.1 核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。
6.1.1.2 室温（15—30）℃，检定过程中温度变化不超过3℃（对示差折光率检测器，室温变化不超过2℃），室内相对湿度20%—85%。
6.1.1.3 仪器应平稳的放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好。
6.1.1.4 电源电压为（220±22）V，频率为（50±0.5）Hz。
6.1.2 核查设备6.1.2.1 秒表：最小分度值不大于0.1s。
6.1.2.2 分析天平：最大称量不小于100g，最小分度值不大于1mg。
6.1.2.3 数字温度计：测量范围为（0—100）℃，最大允许误差为±0.3℃。
以上器具需经计量检定合格。
6.1.3 其他要求6.1.3.1 核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，分析纯的丙酮和异丙醇，紫外分光光度计，萘-甲醇溶液1.00×10-4g/ml和1.00×10-7g/ml，甲醇中胆固醇溶液200μg/ml和500μg/ml 和胆固醇等。
高效液相色谱仪常用的检测器及其性能
高效液相色谱仪常用的检测器及其性能(1)紫外吸收(UV)检测器UV检测器是目前HPLC应用最广泛的检测器。
它是依据光吸收原理，以适当的光路和电路，输出一个与试样组分浓度成正比的紫外一可见光吸收信号，其结构与一般光度计相似。
其流通池是组分流过的光学通道，池体积一般为8μl，内径小于lmm，长度10mm左右。
这种检测器灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度变化不敏感，可用于梯度洗脱分离。
紫外吸收检测要求被检测样品组分有紫外一可见光吸收，而使用的流动相无吸收，或在被测组分吸收波长处无吸收。
一般选择在欲分析物有最大吸收的波长处进行检测，以获得最大灵敏度和抗干扰能力。
在没有最大吸收时，可采用末端吸收。
检测波长的选择除取决于待测物质的成分和分子结构外，还必须考虑流动相组成、共存组分干扰等因素。
特别是各种溶剂都有一定的透过波长下限值，超过这个波长，溶剂的吸收会变得很强，以至于不能很好地测出待测物质的吸收强度。
表1列出了HPLC中一些常用的溶剂透过波长的下限。
(2)光电二极管阵列(IJDA)检测器PDA检测器又称为二极管阵列检测器(diode array UV detector，DAD)，这种检测器以光电二极管阵列作为检测元件，可进行多通道并行检测，在一次色谱测量中，可同时获得时间、波长、吸光度三者的关系，通过计算机处理，在荧光屏上显示出三维图谱，也可作出任意波长的吸光度一时问曲线和任意时间的吸光度一波长曲线。
DAD的光路与紫外检测器不同，光源发出的光聚焦后先通过检测池，通过检测池的透射光由全息光栅色散成多色光，不同波长的色散光按波长顺序聚焦在阵列元件上，每个元件对应一定的纳米数。
当光照射到光电二极管时，光电二极管产生讯号。
由于色散过程及透射光的检测是全波长范围的，可在瞬间检测流经检测池的全吸收光谱，得到三维色谱一光谱图。
计算机化的数据处理，还可进行色谱峰光谱相似性比较、峰纯度检测及利用谱图库对掣定样品进行检索等，为定性、定量分析提供更丰富的信息。
高效液相色谱仪期间核查规程
高效液相色谱仪期间核查方法一、依据和目的保证高效液相色谱仪的正常运行，在两次检定/校准之间进行期间核查，验证该设备是否保持检定/校准时的状态，确保其检验数据的有效性和准确性。
二、使用范围该运行检查方法适用于使用中的1200高效液相色谱仪的期间核查检查方法。
三、基本原理高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
四、仪器工作条件及要求1、环境温度：15～35℃环境湿度：≤75RH%2、室内无强磁场干扰；3、室内部不存在妨碍仪器正常工作的震动；4、室内清洁，无腐蚀性气体；5、稳压器正常，并保持良好接地；6、供电电源：交流电压220V±10%；7、排风设备完好，排风量达到实验要求；8、仪器放置在坚固的实验台上，并避免阳光直射。
五、核查方法1、通用技术要求(1)检查贮液器是否清洁；(2)检查滤头是否堵塞；(3)检查仪器电源线、信号线等插接是否紧密；(4)检查各开关、旋钮、按键等功能是否正常，指示灯是否灵敏；将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，启动仪器，待压力平稳后保持10min ，用滤纸检查各管路接口应无湿迹2、泵流量设定值误差SS 、流量稳定性误差的检定SR分别设定流量为0.5 mL/min 、1.0 mL/min 、2.0 mL/min ，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5 min 流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1 ）、式（2 ）计算S S 和S R 。
%100/)(⨯-=s s m S F F F S （1）%100/)(⨯-=m in m R F F F S （2）式中：m F ――()()t W W F m *-=ρ/12, 流量实测值，mL/min ；2W ――容量瓶+流动相的质量，g;1W ――容量瓶的质量，g ；ρ――试验温度下流动相的密度，g/mL ；t ――收集流动相的时间，min ；m F ――同一组测量的算术平均值，mL/min ；S F ――流量设定值，mL/min ；m F ――同一组测量中流量最大值，mL/min ；in F ――同一组测量中流量最小值，mL/min ；3、基线噪声和基线漂移选用C 18色谱柱，以甲醇：0.02mol/L 乙酸铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min ，紫外检测器的波长选在230nm ，检测灵敏度调到最灵敏档，开机预热，待仪器稳定后记录基线10 min ，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU ）作单位表示。
高效液相色谱仪期间核查操作规程
高效液相色谱仪期间核查操作规程1目的为使高效液相色谱仪检测功能在检定期间内处于正常的工作状态，确保检验结果的准确性和有效性。
在仪器设备两次检定期间，对该设备进行期间核查，以验证设备是否保持校准时的状态,确保检验结果的准确性和有效性。
2范围适用于中心U3000高效液相色谱仪的期间核查。
3 核查项目泵流量设定值误差S S、泵流量稳定性S R、基线噪声、基线漂移，采用有证的标准物质萘甲醇溶液（已知浓度u并给出不确定度Ur的单标准物质）1.0×10-7g/ml、1.0×10-4g/ml，检出限（L）、定性重复性、定量重复性。
4 核查依据JJG694-2009《原子吸收分光光度计检定规程》5 核查方法计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后的运行检查。
5.1 核查条件（1）环境条件核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。
室温（15—30）℃，检定过程中温度变化不超过3℃，室内相对湿度20%—85%。
仪器应平稳的放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好。
（2）其他要求核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，萘-甲醇溶液1.00×10-4g/ml和1.00×10-7g/ml。
拓展不确定度小于4%，k=2。
5.2通用技术要求：目视、手动检查。
5.3输液系统泵流量稳定性S R设定流量1ml/min，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5min时间流出的流动相，在分析天平称重，按公式计算S s和S R，重复测量3次。
式中：——流量3次测量值算术平均值，ml/min；——流量设定值，ml/min式中：F max——同一设定流量3次测量值的最大值，mL/min;F min——同一设定流量3次测量值的最小值，mL/min。
F min=(W2-W1)/（ρt·t）(2) 式中：F m——流量实测值，ml/min；W2——容量瓶＋流动相的质量，g；W1——容量瓶的质量，g；ρt——实验温度下流动相的密度,g/cm3（不同温度下流动相的密度参见JJG694-2009《原子吸收分光光度计检定规程》附录C）t——收集流动相的时间，min。
高效液相色谱仪期间核查规程[1]
1．目的为了解高效液相色谱仪的状态,维护高效液相色谱仪在两次检定期间校准状态的可信度,减少由于仪器稳定性变化造成的试验结果偏差,特对高效液相色谱仪进行期间检查。
2. 人员及职责2.1检验员按照指导书负责期间核查计划的具体实施及负责期间核查的核查记录。
2.2审核人：负责审核核查方案、监督期间核查过程、确认核查效果、审核数据。
审核人可由中心负责人兼任。
2.2 质量部长审核期间核查结果并负责组织处理核查发现的不符合项目,审核批准核查报告。
2.3 资料管理员负责仪器设备期间核查记录的归档保管。
3. 引用标准3.1 jjg705-2002液相色谱仪检定规程3.2液相色谱仪使用、维护说明书。
4. 核查条件4.1 环境条件4.1.1环境温度5~35 ℃，相对湿度20%~85%。
4.1.2室内无强烈的机械振动和电磁干扰。
4.2 仪器安装要求：仪器应安装在平稳的工作台面上，电缆线的接插件应紧密配合，仪器接地良好。
4.3 电源要求：电压为（220±22）V，频率为（50±1）HZ。
4.4期间核查的准备4.4.1测试设备秒表：分度值不大于0.1秒电子分析天平微量注射器：10μL， 50μL，（自动进样器不需）游标卡尺：15cm/0.02mm以上器具需计量检定合格4.4.2试药：萘甲醇（色谱纯）4 测试方法4.1 流量设定值误差SS 和流量稳定性误差SR选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，启动仪器，待压力稳定后，在流动相出口处用清洁、干燥已称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5分钟，测量3次，称重，计算SS 和SR。
S S=（Fm平-FS）/FS×100%S R =（Fmax-Fmin）/ Fm平×100%式中：SS—流量设定值误差（%）F m —流量实测值 Fm=（W2-W1）/ρt·tW2—容量瓶+流动相的质量（g）W1—容量瓶的质量（g）FS—流量设定值（mL/min）ρt—实验温度下流动相的密度（g/cm3）t—收集流动相的时间（min）SR—流量稳定性误差（%）Fmax—同一组测量中流量最大值（mL/min）Fmin—同一组测量中流量最小值（mL/min）Fm平—同一组测量的算术平均值（mL/min）4.2 基线噪声ND和基线漂移选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为254nm，启动仪器，待压力稳定后，记录基线30min，计算基线噪声（用AU表示）。
浅析液相色谱仪荧光检测器的检定
１ ５ ６
东
化
工
２ ０ １ ６年 第 ２ ２ 期
ｗｗｗ． ｇ ｄ ｃ ｈ ｅ ｍ． ｔ ｏ ｍ
第４ ３ 卷总第 ３ ３ ６ 期
浅析液相色谱仪荧光检 测器 的检 定
吴武 杰 ，陈瑞 欢 ，贾 锐 ，阳 金 勇
（ 广 东 省计量 科学研 究院 ，广东 广州 Ｉ ５ １ ０ ４ ０ ５ ）
［ 摘 要】 按照 更新 后 Ｊ Ｊ Ｇ ７ ０ ５ — ２ ０ １ ４检定 规程对 以配 置美 国 ＷＡ Ｔ Ｅ ＲＳ公司所 生产 的型 号为 ２ ４ ７ ５荧光检 测器 的检 定为例 。 分析 了新 版液 相色谱 仪检 定规程 与 旧版对 液 相色 谱仪 荧光检 测 器进 行检 定的 不同 ，探 讨 了检 定 方法 更改 带来 的 易操 作 性和 合理性 ，总 结 了检定 过程 中的经 验 ，为 更 好开 展液 相色谱 仪 荧光检 测器检 定工 作提 供 了帮助 。 【 关键 词】 液相 色谱 仪 ；荧光 检测器 ；检 定规 程 ；检 定 方法
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｅ ｔ ：Ａｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｕ ｐ ｄ ａ ｔ ｅ ｄ Ｊ Ｊ Ｇ７ ０ ５ — ２ ０１ ４ ｖ ｅ ｒ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｇ ｕｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｂ ｙ ｔ ｈ ｅ ｐ ｏｄ ｒ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｎ ｙ ｔ ｏ ｃ ｏ ｎ ｉ ｆ ｇ ｕ ￣ ｔ ｈ ｅ Ｗ ＡＴＥ ＲＳ，ｔ ｈ ｅ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｖ ｅ ｒ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ２ ４ ７ ５ ｆ ｌ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ａ ｓ ａ ｌ ｌ ｅ ｘ ａ ｍｐ ｌ ｅ ，ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ｈｅ ｔ ｎ ｅ ｗ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｖ ｅ ｒ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗｉ ｈ ｔ ｔ ｈ ｅ ｏｌ ｄ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｏ ｎ ｔ ｏ ｖ ｅ ｉ ｒ ｉｃ ｆ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｒｏ ｈ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ， ｅ ｘ ｐ ｌ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｈ ｅ ｖ ｅ ｒ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｔ ｏ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ａ ｎ ｄ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ， ａ ｎ ｄ ｓ ｕ ｍｍａ ｒ ｉ ｚ ｅ ｓ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｅ ｉｅ ｒ ｎ ｃ ｅ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ ｖ ｅ ｒ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｔ ｏ ｂ ｅ ｔ ｔ ｅ ｒ ｃ ａ ｒ ｒ ｙ ｏ ｕ ｔ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ａｐ ｒ ｈ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｄ ｅ ｓ ｈ ｅ ｌ ｐ ｖ ｅ ｒ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗｏ ｒ ｋ ． Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ：ｆ ｌｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ：ｖ ｅ ｉｆ ｒ ｉ ｃ ｔｉ ａ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｄ ｕｒ ｅ ｓ ：ｖ ｅ ｒ ｉ ｉｃ ｆ ｔｉ ａ ｏ ｎ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ