4×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明
蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法
蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法20% （W/V） Glucose配制量100ml配制方法:1. 称取20 g Glucose置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml 的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
0.5 M EDTA （pH8.0）配制量1 L配制方法:1. 称取186.1 g Na2EDTA•2H2O，置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。
3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH）。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。
1 M DTT配制量50ml配制方法:1. 称取7.71g DTT，加入到100ml烧杯中。
2. 加50 ml的0.01 M NaAc（pH5.2），溶解后根据使用情况0.22um滤膜过滤除菌。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
30%丙烯酰胺（29：1）配制量1 L配制方法:1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
Acrylamide 290gBisacrylamide 10g2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45um滤膜滤去杂质。
4. 于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液组份浓度 0.125 M Tris, 1.25 M Glycine,0.5%（W/V）SDS配制量 1 L配制方法：1．称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
2．取下列溶液，加入烧杯中。
Tris 15.1gGlycine 94gSDS 5g3. 加入约800 ml的去离子水，搅拌溶解。
蛋白上样缓冲液详解
蛋白上样缓冲液详解
关于《蛋白上样缓冲液详解》，是我们特意为大家整理的，希望对大家有所帮助。
蛋白质上样缓冲溶液这类东西针对绝大多数的人而言全是较为生疏的东西，由于这一东西在我们的日常生活基本上是看不到的，沒有机遇去掌握这类东西的用途和作法，实际上蛋白质上样缓冲溶液是一种十分有效的实验试剂，在科学研究的层面而言是较为有打用途的，这类有机化学药物针对我们而言需要一个专业知识普及化，下边就看看详细介绍吧。
蛋白电泳上样缓冲溶液带有溴酚蓝，功效是标示上样蛋白质的跑胶时标识的，凡士林是提升上样净重的，以防飘浮，烧开是使蛋白质转性的。
在其中的SDS是确保试品中的全部蛋白质带正电荷一致，降低正电荷对电泳原理結果的影响。
氧化剂是让二硫键处在断掉情况，确保蛋白质分子结构的线形，降低因蛋白质空间布局影响电泳原理結果。
蛋白电泳上样缓冲溶液带有溴酚蓝，功效是标示上样蛋白质的跑胶时标识的，凡士林是提升上样净重
的，以防飘浮，烧开是以便使蛋白质转性。
蛋白电泳上样缓冲溶液的功效及烧开的功效蛋白电泳上样缓冲溶液包含2%SDS , 0.1%溴酚蓝10%凡士林,SDS 是确保试品中的全部蛋白质带正电荷一致，降低正电荷对电泳原理結果的影响。
氧化剂是让二硫键处在断掉情况，确保蛋白质分子结构的线形.溴酚蓝功效是标示上样蛋白质的跑胶时标识的，凡士林是提升上样净重的，以防飘浮，烧开是使蛋白质转性的保存起来。
日常生活有很多的东西是我们触碰不上的，可是便是这种触碰不上的东西却可以给我们的日常生活产生极大的改变，蛋白质上样缓冲溶液便是一种那样的东西，尽管难以看到，也基本上不容易听闻这类东西，可是在专业人员来看，蛋白质上样缓冲溶液是运用于科学研究生产中不可或缺的东西。
TruPAGE LDS蛋白上样缓冲液(4×)
北京雷根生物技术有限公司 TruPAGE LDS 蛋白上样缓冲液(4×)简介：蛋白上样缓冲液有很多种，如SDS-PAGE Sample Loading Buffer 、PAGE 连续蛋白上样缓冲液、Tricine 加样缓冲液、TruPAGE LDS 蛋白上样缓冲液等，其中TruPAGE LDS 蛋白上样缓冲液是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的2倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
Leagene TruPAG LDS Sample Buffer(4×)常用于TruPAGE 蛋白样品的上样，不含DTT ，不含有毒物质β-巯基乙醇。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(2×)。
水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2、 取适量的蛋白样品和TruPAG LDS Sample Buffer(4×)，按1:3混合，充分混匀。
如有必要可加入DTT ，使DTT 终浓度达到25nM 。
3、 70℃水浴加热10min ，以充分变性蛋白。
4、 冷却到室温后，直接上样到TruPAG 胶加样孔内即可。
5、 通常电泳至染料到达PAGE 胶的底部附近即可停止。
注意事项：1、 Leagene TruPAG LDS Sample Buffer(4×)，有轻微刺激性气味，但不含由毒物质β-巯基乙醇。
有效期： 12个月有效。
相关：编号 名称 PE0052 Storage TruPAG LDS Sample Buffer(4×) 5ml 4℃ 使用说明书 1份编号名称 DH0006苏木素伊红(HE)染色液 PE0018 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒。
蛋白上样缓冲液详解
蛋白上样缓冲液详解
蛋白上样缓冲液这种东西对于大部分的人来说都是比较陌
生的东西，因为这个东西在我们的生活中几乎是看不见的，没有机会去了解这种东西的用处和做法，其实蛋白上样缓冲液是一种非常有用的试剂，在科学的方面来说是比较有打用处的，这种化学药剂对于我们来说需要一个知识普及，下面就看看介绍吧。
蛋白电泳上样缓冲液含有溴酚蓝，作用是指示上样蛋白的跑胶时标记的，甘油是增加上样重量的，以免漂浮，煮沸是使蛋白变性的。
其中的SDS是保证样品中的所有蛋白带电荷一致，减少电荷对电泳结果的影响。
还原剂是让二硫键处于断开状态，保证蛋白分子的线性，减少因蛋白空间结构影响电泳结果。
蛋白电泳上样缓冲液含有溴酚蓝，作用是指示上样蛋白的跑胶时标记的，甘油是增加上样重量的，以免漂浮，煮沸是为了使蛋白变性。
蛋白电泳上样缓冲液的作用及煮沸的作用蛋白电泳上样缓冲液包括 2%SDS , 0.1%溴酚蓝 10%甘油,SDS 是保证样品中的所有蛋白带电荷一致，减少电荷对电泳结果的影响。
还原剂是让二硫键处于断开状态，保证蛋白分子的线性.溴酚蓝作用是指示上样蛋白的跑胶时标记的，甘油是增加上样重量的，以免漂浮，煮沸是使蛋白变性的永久保存。
生活中有许多的东西是我们接触不到的，但是就是这些接触不到的东西却能够给我们的生活带来巨大的改变，蛋白上样缓冲液就是一种这样的东西，虽然很难看见，也几乎不会听说这种东西，但是在专业人士看来，蛋白上样缓冲液是应用于科学生产中必不可少的东西。
蛋白上样缓冲液的主要成分和作用
蛋白上样缓冲液的主要成分和作用蛋白上样缓冲液是生物化学实验中常用的一种缓冲液，它的主要作用是在蛋白质电泳分离过程中，维持样品的稳定性，防止蛋白质的降解和聚集。
本文将从成分和作用两个方面来介绍蛋白上样缓冲液。
一、成分蛋白上样缓冲液的主要成分包括缓冲剂、还原剂、表面活性剂和添加剂等。
1. 缓冲剂缓冲剂是蛋白上样缓冲液中最重要的成分之一，它能够维持溶液的pH 值，防止蛋白质在电泳过程中发生电泳漂移。
常用的缓冲剂有Tris-HCl、MES、MOPS等。
2. 还原剂还原剂是蛋白上样缓冲液中的另一个重要成分，它能够还原蛋白质中的二硫键，使其保持在还原状态下，从而防止蛋白质的氧化和聚集。
常用的还原剂有DTT、β-巯基乙醇等。
3. 表面活性剂表面活性剂是蛋白上样缓冲液中的一种添加剂，它能够降低蛋白质的表面张力，使其更容易进入凝胶中。
常用的表面活性剂有Tween-20、Triton X-100等。
4. 添加剂添加剂是蛋白上样缓冲液中的一种辅助成分，它能够增加样品的稳定性和电泳分离效果。
常用的添加剂有甘油、牛血清白蛋白等。
二、作用蛋白上样缓冲液的主要作用是维持样品的稳定性，防止蛋白质的降解和聚集。
具体来说，它有以下几个作用：1. 维持pH值稳定蛋白上样缓冲液中的缓冲剂能够维持溶液的pH值，防止蛋白质在电泳过程中发生电泳漂移，从而保证电泳分离的准确性和稳定性。
2. 还原蛋白质中的二硫键蛋白上样缓冲液中的还原剂能够还原蛋白质中的二硫键，使其保持在还原状态下，从而防止蛋白质的氧化和聚集，保证电泳分离的准确性和稳定性。
3. 降低表面张力蛋白上样缓冲液中的表面活性剂能够降低蛋白质的表面张力，使其更容易进入凝胶中，从而保证电泳分离的准确性和稳定性。
4. 增加样品稳定性蛋白上样缓冲液中的添加剂能够增加样品的稳定性，防止蛋白质的降解和聚集，从而保证电泳分离的准确性和稳定性。
综上所述，蛋白上样缓冲液是生物化学实验中不可或缺的一种缓冲液，它的主要作用是维持样品的稳定性，防止蛋白质的降解和聚集。
蛋白示踪上样缓冲液
•蛋白示踪上样缓冲液（还原，4x）•
保存：-20℃• •
组分说明•
SDS-PAGE loading buffer5•ml•
产品简介
蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE loading buffer)是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，4倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的 SDS-PAGE蛋白电泳样品上样。
本产品含有两种示踪染料，分别是蓝色的溴酚蓝和红色的派洛宁γ,可实时监控蛋白样品电泳进程。
同时，在凝胶上显现的红色条带可伴随蛋白样品转移至印迹膜上，因此本产品具有检测Western•Blotting 转膜效率的作用。
使用本产品操作简单，用法与普通上样缓冲液相同。
测试效果
操作步骤•
1. 将蛋白示踪上样缓冲液（还原，4x）与蛋白样品按照1：3 的比例混匀。
•
2. 将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5 分钟。
•
3. 待蛋白样品充分变性后冷却至室温，离心30 秒。
•
4. 离心后，以微量进样器取适量上清，直接加入SDS-PAGE 凝胶加样孔内。
•
5. 进行常规电泳，当染料到达距离凝胶底端0.5•cm-1•cm 处即可停止电泳。
注意事项•
1.本产品分为还原型和非还原型两种，还原型上样缓冲液中含一定量的巯基乙醇，有
轻微刺激性气味，较易区分。
2.本产品在不同的胶浓度中，红色染料与溴酚蓝泳动的前后顺序会略有不同。
3.本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。
4.含巯基的试剂有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(2×)
北京雷根生物技术有限公司
SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(2×)
简介：
SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液即SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的2倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)常用于SDS-PAGE 蛋白样品的上样，含少量DTT ，但不含有毒物质β-巯基乙醇。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(2×)。
水浴溶解后立即
室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2、 取适量的蛋白样品和SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)等量混合，充分混匀。
3、 100℃或沸水浴加热5～10min ，以充分变性蛋白。
4、 冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
5、 通常电泳至蓝色染料到达PAGE 胶的底部附近即可停止。
注意事项：
1、 Leagene SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)中含少量DTT ，有轻微刺激性气味，
但不含由毒物质β-巯基乙醇。
2、 SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)必须完全溶解后再使用。
编号 名称 PE0024 PE0024 Storage SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×) 5×1ml 10ml -20℃ 使用说明书 1份。
Western Blot膜封闭液体使用说明
Western Blot膜封闭液体使用说明
货号：SW3010
规格：100ml
保存：2-8℃保存，有效期一个月。
产品说明：
Western Blot膜封闭液(Blocking Buffer)适用于Western Blot实验中PVDF膜或NC膜等转印膜的封闭。
封闭后，可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比，以达到理想的显色效果。
按照每张膜封闭需要5-10毫升封闭液计算，一个包装的Western封闭液可以封闭10-20张膜。
使用方法：
Western Blot膜封闭液为即用型，无需稀释。
蛋白转膜后将转印膜置于容器中，加入足够量的膜封闭液充分覆盖膜，室温下振荡封闭半小时至1小时，即完成膜的封闭，然后进行一抗孵育等后续操作。
注意事项：
通常在室温封闭60分钟即可。
对于一些背景非常高的抗体，可以4℃封闭过夜。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂：
P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT）
PE0010ECL Plus荧光检测试剂(ECL超敏发光液)
PR1800Western blotting蛋白MARKER
SW3020Western Blot膜再生液
T108020×TBS。
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4×蛋白上样缓冲液（含DTT）使用说明
货号：P1015
规格：10ml
保存：-20℃保存，建议分装冻存，避免反复冻融，自发货之日起至少12个月有效。
产品简介：
4×蛋白上样缓冲液（含DTT）适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。
其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。
DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。
最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。
溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
使用说明：
1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。
如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
注意事项：
4、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右，胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。
请根据自己目的条带来判断电泳时间。
5、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
相关试剂：
P10182×蛋白上样缓冲液（含DTT）
P10174×非变性蛋白上样缓冲液
P001210×丽春红染色液
P1300-500考马斯亮蓝快速染色液
P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
PR1700预染次高分子量蛋白MARKER。