高考生物二轮复习 专题9现代生物科技专题

专题九现代生物科技专题核心考点整合考点整合一：基因工程1．基因工程的基本操作程序（1）目的基因的获取①从基因文库中获取基因组文库：包含一种生物所有基因的基因文库。

部分基因文库：包含一种生物的一部分基因，如cDNA文库。

②利用PCR（多聚酶链式反应）技术扩增目的基因目的——获取大量的目的基因；原理——双链DNA的复制；条件——需要DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和酶促反应所需的离子，同时还要控制温度；过程——变性、复性和延伸。

③人工合成如果基因比较小、核苷酸序列已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接合成。

（2）基因表达载体的构建（基因工程的核心）一个基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞①导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法等；②导入动物细胞：显微注射技术，即采用显微注射仪将目的基因注入受精卵；③导入微生物细胞：转化法。

早期用原核生物作为受体细胞，以大肠杆菌应用最广。

一般是将细菌用氯化钙处理制成感受态细胞，再与重组表达载体DNA分子混合，在一定温度下完成转化过程。

（4）目的基因的检测与鉴定2.基因工程中的工具（1）运载体作为运载体必须具备三个条件：①能在宿主细胞中保存下来并大量复制；②有一个至多个限制酶切位点；③有一定的标记基因，便于进行筛选。

如大肠杆菌割质粒携带的氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，就可以作为筛选的标记基因。

常用的运载体主要有质粒（双链环状DNA分子）、噬菌体或某些病毒。

DNA连接酶将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶断开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键【例1】（2009·天津理综）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。

下图是获取植酸酶基因的流程。

据图回答：①图中基因组文库________（小于/等于/大于）cDNA文库。

②B过程需要的酶是_____________；A．C过程中________（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。

③目的基因I和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中________和________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是________。

大于逆转录酶可以DNADNA耐高温[解析] 解答第①小问的关键是要搞清基因组文库和cDNA文库两个概念之间的区别。

基因组文库为全部基因文库，cDNA文库为部分基因文库，二者的来源不同，前者为DNA用限制酶切割所获得的一定大小范围的DNA，后者为mRNA经反转录得到的互补DNA，基因组文库所包含的信息大于cDNA文库。

由mRNA形成DNA是一个逆转录过程，需要用到的酶是逆转录酶。

因为A．C两过程的目的都是筛选出含相同目的基因的菌株，可以使用同一种探针进行筛选。

解答第③小问的依据是目的基因的获取途径。

目的基因除从文库中获取外，还可以通过PCR扩增，其做法就是通过利用图中DNA和cDNA 为模板进行扩增。

答最后一空时要想到PCR过程的特点及酶与温度的关系，因该过程解链时的温度较高，90～95℃，故用的酶必须是耐高温的，否则酶就会变性失活。

【互动探究1】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

请回答下列问题：限制酶BamH ⅠHind ⅢEcoR ⅠSma Ⅰ识别序列及切割位点↓GGATCCCCTAGG↑↓AAGCTTTTCGAA↑↓GAATTCCTTAAG↑↓CCCGGGGGGCCC↑（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的Sma Ⅰ酶切位点越多，质粒的热稳定性越______。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是__________________________________________________________。

（4）与只使用EcoR Ⅰ相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止____________________________________________。

0、2高Ⅰ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_________________酶。

（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________________________________________________________________________。

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在__________________________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

DNA连接鉴别和筛选含有目的基因的细胞蔗糖为唯一含碳营养物质[解析] 本题综合考查基因工程的工具与操作过程，意在考查考生的识图分析与应用知识的能力。

（1）质粒为小型环状的DNA分子，环状DNA分子中没有游离的磷酸基团；经Sma Ⅰ切割后在切口处每端各含1个游离的磷酸基团。

（2）因Sma Ⅰ酶的识别序列中全部是C －G碱基对，而G－C碱基对间氢键数目比A－T碱基对间多，故插入的Sma Ⅰ酶切位点越多，质粒的热稳定性越强。

（3）若用Sma Ⅰ切割质粒和外源DNA，则质粒中作为标记基因的抗性基因的结构被破坏，外源DNA中目的基因的结构也会被破坏。

（4）若只使用EcoR Ⅰ切割目的基因和外源DNA，则除了含目的基因的片段和质粒连接外，质粒和含目的基因的片段可能会自身连接而环化。

（5）含目的基因的片段与质粒连接形成重组质粒，需DNA连接酶将两个DNA片段的末端“缝隙”连接起来。

（6）重组质粒中的抗性基因是作为标记基因便于鉴别和筛选含有目的基因的细胞。

（7）目的基因为蔗糖转运蛋白基因，所用的受体细胞为丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，若将重组质粒导入了受体细胞，则受体细胞应能从培养基中吸收蔗糖，故应在以蔗糖为唯一碳源的培养基上进行培养。

考点整合二：细胞工程第四步：杂种植株的诱导与鉴定隆抗体的提纯用途（1）克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交亲本的组合范围；（2）克服有性杂交的母系遗传，获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传（1）制备单克隆抗体；（2）诊断、治疗疾病，如生物导弹【例2】（2010·东城区抽样测试）细胞工程是按照人们的意愿通过某种工程手段改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的综合科学技术。

科学家从红豆杉的体细胞中分离出具有独特抗肿瘤的物质——紫杉醇。

由于全世界每年紫杉醇的需求量是4000 kg，但全世界紫杉醇的产量是250 kg，供求严重失衡，导致一些地区红豆杉资源遭到严重破坏。

现在可以采用植物组织培养技术解决这一问题。

（1）植物组织培养依据的原理是________________________________________________________________________。

（2）在得到红豆杉的________________________________后，经过消毒就可以在培养基上进行培养。

人工合成的培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物外，_____________________________是其生长必需的，________是植物细胞脱分化及再分化不能缺少的调节物质。

从该生产的目的看，得到________就可以提取紫杉醇。

植物细胞的全能性离体的植物器官、组织或细胞矿质元素或无机盐植物激素愈伤组织[解析] 植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。

要解答第（2）小题，解题思路就是联系植物组织培养的过程图，围绕培养的各个环节。

植物细胞的全能性得以表达的前提条件是离体培养，所以操作的对象是离体的植物器官、组织或细胞，生长条件同时需要适宜的营养成分、温度和pH等，其中营养物质矿质元素或无机盐是必需的。

按照培养的目的，可培养到愈伤组织阶段，利用愈伤组织就可提取紫杉醇。

【互动探究2】（2010·南宁调研）有性生殖的生物产生后代需要进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需要进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。

下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：（1）若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。

由于一对隐性纯合基因（rr或hh）的作用，在光照强度大于800 lx时两种烟草都不能生长。

要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是________________________________________。

（2）若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是_________________________，这种育种方法的优点是_______________________________________________大于800 lx光照植物细胞的全能性克服了远缘杂交不亲和的障碍（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是___________________________________。

由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_______________________________的特点。

生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是______________________________________________________________既能无限繁殖，又能产生特定的抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一B淋巴细胞高度分化，不能增殖（4）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。

顺序是________________________________________________________________________。

考点整合三：胚胎工程动物种类卵母细胞的采集方法采集后的培养实验动物，如小鼠，家畜猪、羊等超数排卵用促性腺激素处理雌性动物，使其排出更多的卵子，从输卵管直接与获能的精子在体外受精中冲取卵子大家畜或大型动物，如牛、马等从屠宰后母畜卵巢中采集卵母细胞从刚屠宰的母畜体内摘出卵巢，经洗涤、保温后，在无菌条件下用注射器或真空泵抽吸卵巢表面一定直径卵泡中的卵母细胞。

也可对卵巢进行切片，收集卵母细胞在体外经人工培养成熟后才能与获能的精子受精从活体卵巢中采集卵母细胞借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞2.胚胎移植和胚胎分割（1）胚胎移植：①操作对象：雌性动物的早期胚胎，或通过体外受精及其他方式得到的胚胎；②受体：同种的、生理状态相同的其他雌性动物；③本质：生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程；④地位：是胚胎工程技术的终端环节，即任何胚胎只有移植给受体才能获得后代。