苦丁茶二咖啡酰奎尼酸与肠道微生物的相互作用
一类新药二咖啡酰奎尼酸

一类新药二咖啡酰奎尼酸今日推荐一类新药二咖啡酰奎尼酸2月20日军事医学科学院向外界颁布国内第一个具有自立常识产权的抗乙型肝炎病毒和艾滋病病毒的一类新药二咖啡酰奎尼酸往岁尾完成临床前研究这类源自中医理论的新药同时取得了国度食品药品监督治理局揭橥的临床研究批文。
那么――― 2月20日军事医学科学院向外界颁布国内第一个具有自立常识产权的抗乙型肝炎病毒和艾滋病病毒的一类新药二咖啡酰奎尼酸往岁尾完成临床前研究并取得国度食品药品监督治理局揭橥的两个化学药物临床研究批文为医治乙型肝炎和艾滋病开辟了新门路。
然则这类医治乙肝和艾滋病的新药进进临床到底意味甚么一个药名可治俩病2006年2月10日卫生部颁布了1月份全公法定申报感染病疫情。
个中乙型肝炎和艾滋病位居感染病申报病发数和逝世亡数的前5位。
2月14日北京的相干媒体报导说往年全公法定申报感染病疫情的逝世亡者中艾滋病的逝世亡人数已超越乙型肝炎位列首位。
是以艾滋病和乙肝的医治已经是摆在我们面前的医学艰苦没法躲避也不克不及躲避。
据悉我国乙型肝炎患者和病毒携带者的群体是最宏大年夜的之前的逝世亡人数也是最多的。
然则如今逝世亡数已被艾滋病逝世亡数超越了。
在感染病以外本来癌症是第一杀手但跟着医学程度的进步世界上各类癌症的治愈率已达到40阁下癌症≠逝世亡也已成了共叫。
在如许的背景下被称为世纪瘟疫的艾滋病确切成了现当代界医疗界的头号艰苦。
在二咖啡酰奎尼酸往年事尾取得临床研究批件这条消息中记者留心到了如许一个细节二咖啡酰奎尼酸不但可以医治乙肝还可以医治艾滋病可以说是一箭双雕。
用军事医学科学院放射与辐射医学研究所副所长胡向军的话说这无疑是中国医药界的一颗重磅炸弹。
传统中药潜力巨大年夜据风行病学查询拜访允疚夜 巳阂腋瓮饷婵乖 斐雎蚀?0慢性乙型肝炎的风行率为0.11由慢性肝炎成长为原发性肝癌的概率相当高。
近年来中草药已广泛应用于临床医治乙型肝炎和艾滋病并取得一些疗效。
二咖啡酰奎尼酸这颗重磅炸弹的发明者是军事医学科学院放射与辐射医学研究所董俊兴传授。
苦丁茶中二咖啡酰基奎宁酸对人肿瘤细胞的体外抑制作用及其机制研究

苦丁茶中二咖啡酰基奎宁酸对人肿瘤细胞的体外抑制作用及其机制研究苦丁茶中二咖啡酰基奎宁酸对人肿瘤细胞的体外抑制作用及其机制研究引言肿瘤是当今社会的一大健康问题,由于化疗和放疗等传统治疗方法的限制及其副作用,寻找有效的抗肿瘤药物一直是科研界的重要任务之一。
苦丁茶作为传统中草药,被广泛认为具有抗癌作用。
本研究旨在探究苦丁茶中二咖啡酰基奎宁酸抑制人肿瘤细胞的体外作用,以及其抑制机制。
材料与方法实验中采集苦丁茶并提取其中的二咖啡酰基奎宁酸。
将人肿瘤细胞系A549和MCF-7分别分装入培养皿中,培养24小时后,分别加入不同浓度的二咖啡酰基奎宁酸,经过一定时间的处理后,采用MTT法测定细胞存活率。
同时,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。
为了进一步探究抑制机制,通过Western blot 检测相关细胞凋亡和增殖相关标志物的表达水平变化。
结果二咖啡酰基奎宁酸对肿瘤细胞A549和MCF-7均表现出剂量依赖性的抑制作用。
随着二咖啡酰基奎宁酸浓度的增加,细胞存活率下降。
对A549细胞进行流式细胞术检测发现,二咖啡酰基奎宁酸处理后,细胞凋亡率显著增加。
进一步的Western blot结果表明,二咖啡酰基奎宁酸可以显著促进凋亡相关蛋白Bax的表达,同时抑制增殖相关蛋白PCNA的表达。
讨论本研究结果表明,苦丁茶中的二咖啡酰基奎宁酸对人肿瘤细胞A549和MCF-7具有体外抑制作用。
该作用可能通过增加细胞凋亡率实现。
进一步的结果表明,二咖啡酰基奎宁酸可以通过上调Bax蛋白的表达以及下调PCNA蛋白的表达来实现对细胞的抑制作用。
Bax蛋白是促进细胞凋亡的关键蛋白,而PCNA 蛋白具有促进细胞增殖的作用。
因此,推测二咖啡酰基奎宁酸通过调节细胞凋亡和增殖相关蛋白的表达来抑制细胞的生长。
结论苦丁茶中的二咖啡酰基奎宁酸表现出抑制人肿瘤细胞A549和MCF-7的体外作用,其机制可能涉及通过调节细胞凋亡和增殖相关蛋白的表达来实现。
这些结果为二咖啡酰基奎宁酸作为潜在的抗肿瘤药物的进一步研究和开发提供了重要的依据。
两株代谢咖啡酸人肠道来源菌株的筛选、鉴定及其代谢过程初探

杨雯,胡海明,刘洪涛,等. 两株代谢咖啡酸人肠道来源菌株的筛选、鉴定及其代谢过程初探[J]. 食品工业科技,2024,45(3):137−145. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023030023YANG Wen, HU Haiming, LIU Hongtao, et al. Screening and Identification of Two Human Intestinal Strains Metabolizing Caffeic Acid and Exploring Their Metabolic Processes[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(3): 137−145. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023030023· 生物工程 ·两株代谢咖啡酸人肠道来源菌株的筛选、鉴定及其代谢过程初探杨 雯1,胡海明2,刘洪涛2,魏晓博1,刘慧燕1, *,方海田1,*(1.宁夏大学食品科学与工程学院,宁夏食品微生物应用技术与安全控制重点实验室,宁夏银川 750021;2.湖北中医药大学基础医学院,湖北武汉 430065)摘 要:为了探索咖啡酸的体内代谢过程,本研究从人体肠道粪便中分离筛选出2株能代谢咖啡酸的菌株,通过细胞形态、16S rDNA 序列和系统发育树分析了其菌株特征,并研究了两株菌株代谢咖啡酸过程中的细菌总数和pH 变化,最后采用薄层层析法和高效液相色谱法对代谢产物进行确定,阐明咖啡酸代谢过程。
结果表明,2株菌分别为腐生葡萄球菌(Staphylococcus xylosus )和奇异变形杆菌(Proteus mirabilis )。
腐生葡萄球菌代谢咖啡酸含量从0.539 mg/mL 在6 h 后降至0.087 mg/mL ,12 h 后完全被代谢。
苦丁茶的降血糖活性物质基础与作用机理研究

苦丁茶的降血糖活性物质基础与作用机理研究苦丁茶的降血糖活性物质基础与作用机理研究随着生活方式的改变和不健康饮食习惯的盛行,糖尿病已经成为全球健康问题的重要组成部分。
糖尿病是一种由胰岛素分泌不足或细胞对胰岛素反应性下降而导致的慢性代谢性疾病。
高血糖水平会严重影响人类健康,并引发多种并发症。
因此,寻找具有降低血糖水平的自然药物及其机制的研究变得十分重要。
苦丁茶(Gymnema sylvestre R. Br.)是一种生长于印度、斯里兰卡等地区的常见草本植物,被广泛应用于传统药物学中。
在古代,印度医学家使用苦丁茶治疗糖尿病已有数千年的历史。
近年来,针对苦丁茶提取物的降血糖活性进行了广泛研究,并确认其中存在多种活性物质,如皂苷类化合物和多糖等。
苦丁茶中的皂苷类化合物被证明具有显著的降低血糖水平的作用。
这些皂苷类化合物能够降低葡萄糖的吸收,抑制糖类的消化酶活性,减少肠道中葡萄糖的释放。
此外,它们还能增加胰岛素的分泌,提高胰岛素的敏感性,促进葡萄糖的利用和代谢,并减少肝脏中糖异生的产生。
另外,苦丁茶中的多糖也被发现可降低血糖水平。
多糖具有促进胰岛素分泌的作用,从而降低血糖。
此外,研究还发现,苦丁茶中的多糖还能抑制α-葡萄糖苷酶的活性,进一步减缓血糖升高的速度。
除了上述活性物质,苦丁茶还含有大量的多酚类化合物,如黄酮和鞣花酸。
这些多酚类化合物具有强大的抗氧化活性,可以保护胰岛β细胞免受氧化应激的损害,并保持其正常功能。
此外,苦丁茶还被研究发现可以改善胰岛素抵抗,促进葡萄糖的摄取和利用,并降低脂肪的堆积。
这些作用机制可能涉及到苦丁茶中活性物质对胰岛素信号通路的影响。
总结而言,苦丁茶中的皂苷类化合物、多糖和多酚类化合物等活性物质具有降低血糖水平的作用。
这些活性物质通过减少葡萄糖的吸收和增加胰岛素的分泌等方式发挥作用,并具有抗氧化和改善胰岛素抵抗等多种机制。
然而,尽管苦丁茶显示出很大的潜力,但在使用苦丁茶治疗糖尿病之前,还需要更多的研究来探索其作用机理以及潜在的不良反应和相互作用综上所述,苦丁茶中的活性物质包括皂苷类化合物、多糖和多酚类化合物,具有降低血糖水平的作用。
3,4-二咖啡酰奎宁酸水解产物

3,4-二咖啡酰奎宁酸水解产物3,4-二咖啡酰奎宁酸是一种重要的药物成分,具有广泛的应用价值。
本文将介绍其水解产物及相关信息。
水解是指化合物在水中发生断裂反应,形成新的分子。
3,4-二咖啡酰奎宁酸的水解产物指的是在水中,3,4-二咖啡酰奎宁酸分子发生水解反应后形成的产物。
让我们了解一下3,4-二咖啡酰奎宁酸的结构。
它是一种多酚类化合物,由两个咖啡酰基和一个奎宁酸基组成。
它常见于咖啡、茶叶和其他植物中,具有抗氧化、抗炎和抗菌等生物活性。
当3,4-二咖啡酰奎宁酸与水接触时,水分子会与其结合,引发水解反应。
水解过程中,咖啡酰基和奎宁酸基可能会发生断裂,形成一系列水解产物。
这些水解产物可能包括咖啡酸、奎宁酸、脱羧咖啡酸等。
咖啡酸是一种常见的多酚类物质,具有抗氧化和抗炎作用。
它在人体内可以抑制氧自由基的产生,减少细胞受到氧化损伤的程度。
奎宁酸是一种生物活性较强的化合物,具有抗菌和抗炎作用。
脱羧咖啡酸则是咖啡酸的一种衍生物,具有更强的抗氧化活性。
通过水解反应,3,4-二咖啡酰奎宁酸可以被分解为这些水解产物。
这些水解产物具有不同的化学性质和生物活性,因此可能具有不同的药理作用。
例如,咖啡酸可以起到抗氧化和抗炎作用,奎宁酸可以具有抗菌和抗炎作用,而脱羧咖啡酸则具有更强的抗氧化活性。
水解反应还可能影响3,4-二咖啡酰奎宁酸的药物代谢和吸收。
一些研究表明,水解反应可能会降低3,4-二咖啡酰奎宁酸的生物利用度,减少其在体内的药效。
因此,在药物研发和应用中,需要考虑水解反应对药物的影响。
3,4-二咖啡酰奎宁酸的水解产物具有重要的药理作用和应用价值。
水解反应可以将3,4-二咖啡酰奎宁酸分解为咖啡酸、奎宁酸和脱羧咖啡酸等水解产物,这些产物具有不同的化学性质和生物活性。
水解反应还可能影响药物的代谢和吸收。
因此,在药物研发和应用中,需要充分研究3,4-二咖啡酰奎宁酸的水解反应及其产物,以进一步发掘其药理作用和应用前景。
苦丁茶二咖啡酰奎尼酸与肠道微生物的相互作用

苦丁茶二咖啡酰奎尼酸与肠道微生物的相互作用苦丁茶主要由冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物苦丁茶冬青(I.kuudingcha C.J.Tseng)和大叶冬青(tifolia Thunb)制得,是我国重要别样茶饮料,具有悠久的饮用历史和多种生物活性。
苦丁茶含有三萜皂苷、多糖和多酚等多种活性成分,其中苦丁茶多酚主要是咖啡酰奎尼酸(Caffeoylquinicacids,CQAs)类化合物。
苦丁茶CQAs包括单咖啡酰奎尼酸(mono-CQAs)和二咖啡酰奎尼酸(diCQAs)等。
由于苦丁茶中diCQAs含量很高,并且相比mono-CQAs,关于diCQAs的研究比较少,因此,本文选择苦丁茶diCQAs作为研究对象。
膳食多酚具有抗氧化、抗炎症、降脂减肥等多种活性,引起研究者的广泛关注。
但是由于其分子量大和多羟基等化学结构特性,多酚的生物利用率很低。
膳食多酚在上消化道中变化很少,大部分以固有形式进入结肠,与栖息其中的大量的肠道微生物发生相互作用。
肠道微生物具有巨大的代谢潜力,也与宿主健康密切相关。
膳食多酚和肠道菌群能够发生双向的作用,多酚能够影响肠道微生物菌群结构和代谢通路,微生物能够代谢多酚转化为代谢产物,增加其生物利用率。
因此,膳食多酚可能是通过影响肠道微生物来发挥其生物活性的。
本课题以冬青苦丁茶为原料,分离纯化三种diCQA化合物,在明确它们在消化道中的变化的基础上,研究其与肠道微生物的相互作用,对阐述苦丁茶diCQAs 的生物活性和作用机制具有重要意义。
主要研究内容及结果如下:1、苦丁茶三种diCQA化合物单体的分离纯化本节采用柱层析-高速逆流色谱(HSCCC)联用手段纯化苦丁茶的diCQAs化合物。
采用热水浸提并冷冻干燥,得到苦丁茶水溶性成分;利用HP-20大孔树脂吸附苦丁茶水溶性组分,经过纯水洗脱后,收集70%乙醇洗脱组分,得到苦丁茶diCQAs混合物;采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.1%盐酸溶剂体系,通过HSCCC分离得到3,4-diCQA以及3,5-和4,5-diCQAs的混合物;最后,通过Toyopearl HW-40S 凝胶层析得到3,5-和4,5-diCQA化合物。
抗病毒食物

4、鹅血:鹅血中含有大量的免疫球蛋白,可提高机体免疫力,升高血中白细胞,促进淋巴细胞吞噬功能,对艾滋病病毒有较强的抑制作用。
5、大蒜:动物实验表明,大蒜油中的联丙烯硫化合物有消除强致癌物的作用,并能抑制肿瘤的生长。大蒜中的植物杀菌素,对细菌和病毒有较强的杀灭和抑制作用,艾滋病毒放入大蒜片中5分钟便全部死亡。
1、.黄瓜:黄瓜可清热利尿,其中的葫芦素可提高人体免疫力,抗病毒及肿瘤作用。黄瓜尾部及头蒂部的苦味化合物进入人体内,可杀死艾滋病病毒。
2、苦瓜:苦瓜清热利尿,其中的苦味蛋白对人体内的艾滋病病毒有抑制作用,是防癌之佳品。
3、.海带:海带含有丰富的碘,能促进炎症的渗出和吸收。其中的硫酸酯可保护免疫系统的细胞不受艾滋病病毒的侵害,有预防艾滋病作用。
6、蘑菇:英国米德尔塞克斯大学的科学家说,蘑菇中含有多种抗病毒成分,有些还能增强人体免疫机能,对病毒有较强的抑制作用。
7、橘子、山楂和猕猴桃:最近,据北京青年报报道,中科院上海药物研究所的科学家在中草药抗SARS成分研究中发现,在橘子、山楂和猕猴桃中含有一种抗SARS活性成分。虽然,橘子、山楂和猕猴桃中含量很少,不过这种成分既可以提取,也可以合成。
1,3-二咖啡酰奎宁酸在用于制备治疗肝癌的药物中的应用[发明专利]
![1,3-二咖啡酰奎宁酸在用于制备治疗肝癌的药物中的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/e5cc252002d8ce2f0066f5335a8102d276a26136.png)
专利名称:1,3-二咖啡酰奎宁酸在用于制备治疗肝癌的药物中的应用
专利类型:发明专利
发明人:王玮,邢春艳
申请号:CN202210352914.9
申请日:20220401
公开号:CN114652710A
公开日:
20220624
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了1,3‑二咖啡酰奎宁酸在用于制备治疗肝癌的药物中的用途,并且通过研究证实了1,3‑二咖啡酰奎宁酸可通过促进肝癌细胞中抑癌基因p53的表达量,从而起到抑制肝癌发生发展的效果。
为肝癌的临床治疗提供了新的思路。
申请人:北京济全生物科技有限公司
地址:100070 北京市丰台区南四环西路188号六区8号楼5层
国籍:CN
代理机构:北京中和立达知识产权代理有限公司
代理人:郑茹
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苦丁茶二咖啡酰奎尼酸与肠道微生物的相互作用苦丁茶主要由冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物苦丁茶冬青
(I.kuudingcha C.J.Tseng)和大叶冬青(tifolia Thunb)制得,是我国重要别样茶饮料,具有悠久的饮用历史和多种生物活性。
苦丁茶含有三萜皂苷、多糖和
多酚等多种活性成分,其中苦丁茶多酚主要是咖啡酰奎尼酸(Caffeoylquinicacids,CQAs)类化合物。
苦丁茶CQAs包括单咖啡酰奎尼酸(mono-CQAs)和二咖啡酰奎尼酸(diCQAs)等。
由于苦丁茶中diCQAs含量很高,并且相比mono-CQAs,关于diCQAs的研究比较少,因此,本文选择苦丁茶diCQAs作为研究对象。
膳食多酚具有抗氧化、抗炎症、降脂减肥等多种活性,引起研究者的广泛关注。
但是由于其分子量大和多羟基等化学结构特性,多酚的生物利用率很低。
膳食多酚在上消化道中变化很少,大部分以固有形式进入结肠,与栖息其中的大量的肠道微生物发生相互作用。
肠道微生物具有巨大的代谢潜力,也与宿主健康密切相关。
膳食多酚和肠道菌群能够发生双向的作用,多酚能够影响肠道微生物菌群结构和代谢通路,微生物能够代谢多酚转化为代谢产物,增加其生物利用率。
因此,膳食多酚可能是通过影响肠道微生物来发挥其生物活性的。
本课题以冬青苦丁茶为原料,分离纯化三种diCQA化合物,在明确它们在消化道中的变化的基础上,研究其与肠道微生物的相互作用,对阐述苦丁茶diCQAs 的生物活性和作用机制具有重要意义。
主要研究内容及结果如下:1、苦丁茶三种diCQA化合物单体的分离纯化本节采用柱层析-高速逆流色谱(HSCCC)联用手段纯化苦丁茶的diCQAs化合物。
采用热水浸提并冷冻干燥,得到苦丁茶水溶性成分;利用HP-20大孔树脂吸
附苦丁茶水溶性组分,经过纯水洗脱后,收集70%乙醇洗脱组分,得到苦丁茶diCQAs混合物;采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.1%盐酸溶剂体系,通过HSCCC分离得到3,4-diCQA以及3,5-和4,5-diCQAs的混合物;最后,通过Toyopearl HW-40S 凝胶层析得到3,5-和4,5-diCQA化合物。
分离得到的3,4-、3,5-和4,5-diCQA 的纯度分别达到94.8%、84.6%和 87.3%。
2、苦丁茶diCQAs的体外模拟消化过程本节采用体外模拟消化体系,研究了苦丁茶diCQAs在口腔、胃、小肠和大肠中的水解和变化情况,并采用Caco-2细胞模型检测了 diCQAs及其肠道代谢产物的抗炎症活性。
结果表明,苦丁茶diCQAs在人工唾液、胃液和胰液中保持稳定,不会被消化酶水解,Caco-2单层细胞模拟的肠壁细胞也不能水解diCQAs;在体外粪样厌氧发酵模拟的肠道微生物
代谢过程中,diCQAs能被水解成mono-CQAs和游离咖啡酸(CA),进一步代谢产物
二氩咖啡酸(DHCA)也能够被检测到,且diCQAs的水解程度与培养体系的碳源和
微生物组成相关。
苦丁茶三种diCQA化合物以及其肠道代谢产物三种mono-CQAs、CA和DHCA 都能够降低脂多糖(LPS)诱导的Caco-2细胞的IL-8的产量。
3、苦丁茶diCQAs 在体外对肠道微生物的影响本节采用体外厌氧发酵模型和高通量测序技术研究
了多种碳源培养条件下苦丁茶diCQAs对肠道微生物的影响。
结果表明,diCQAs的添加能够提高微生物的多样性;相比不同的碳源,是否
添加diCQAs对微生物菌群结构的影响更大;diCQAs能够提高Bacteroides、Escherichia/Shigella、Bifidobacterium、Parasutterella、Alistipes、Romboutsia、Oscillibacter、Veillonella、Butyricimonas、
Phascolarctobacterium、Lachnospiracea incertae sedis、Gemmiger、Streptococcus、Clostridium sensustricto 和 Haemophilus 属的丰度,减少Ruminococcus、Anaerostipes、Dialister、Megasphaera、Megamonas 和Prevotella等属;diCQAs还会影响pH和短链脂肪酸的产量,能够提高乙酸和乳酸的含量,减少丙酸和丁酸的生成。
总体来看,苦丁茶diCQAs具有一定的肠道微生态调节功能。
4、肠道来源的苦丁茶diCQAs水解菌株和酶的初步研究本节从人体粪便中分
离了一株肠道来源的具有水解苦丁茶diCQAs活性的乳杆菌Lactobacillus
sp.M-B。
Lactobacillus sp.M-B 在利用葡萄糖生长时,不能水解 diCQAs;能够水解3,4-diCQA和少量4,5-diCQA,几乎不能水解3,5-diCQA。
Lactobacillus sp.M-B能够表达一种位于细胞内的CQAs水解酶,通过硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换和Sephadex G-100分子筛凝胶层析手段纯化该水解酶。
目标CQAs水解酶的分子量大约为50 kDa,能够水解diCQAs各个位置上的咖啡酰基生成对应的mono-CQAs,也可以将mono-CQAs水解成CA,最适宜的反应温度和pH分别是37 ℃和6.5。
Mg2+可以激活该CQAs水解酶的活性,可能是其辅酶;Mn2+和EDTA,能够抑制其活性,尤其是EDTA的抑制率可达90%。
5、苦丁茶diCQAs在体内调节脂代谢、炎症和肠道菌群的活性本节采用C57BL/6J小鼠模型,研究了苦丁茶diCQAs对高脂膳食饲养小鼠的脂代谢、炎症和肠道菌群结构的影响。
结果表明,苦丁茶diCQAs能够减少小鼠肝脏、附睾脂肪和肾周脂肪的质量,降低血清中总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL-C)的浓度;能够降低肝脏中脂肪合成和积累相关基因(FAS、SREBP-1c、PPARγ和LXRα)的表达,促进脂代谢相关
基因(CPT-1和PPARa)的表达,具有一定的减脂的作用;能够降低血清中炎症因子和内毒素脂多糖(LPS)的水平,减少肝脏中炎症因子的转录水平的表达,具有一定的抗炎症活性。
苦丁茶diCQAs能够调节肠道微生物的多样性和菌群的整体结构,虽然不能调节Firmicutes和Bacteroidetes的丰度及其比值,但是diCQAs能够提高高脂膳食小鼠的Akkermansia、Bifidobacterium等属的相对丰度,降低Bilophila、Olsenella等属的丰度,并且肠道菌群的变化与脂代谢具有相关性。
综合来看,苦丁茶diCQAs可能通过调节肠道菌群结构,特别是提高Akkermansia的丰度,来降低宿主机体的脂肪积累和炎症水平,但具体的准确机制还需要进一步研究。