实验三 种子生活力测定PPT课件
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一、实验目的和要求
1、实验目的
了解四唑法测定种子生活力的原理 掌握主要农作物种子四唑染色测定种子生
活力的方法步骤和判别有无生活力的鉴定 标准。
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一、实验目的和要求
2、实验要求
要求每组同学独立完成同一材料的生活力 测定。
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二、实验原理
2、四唑染色法测定种子生活力的基本原理
弱和死亡部分的差异显现出来，判断种子生活力。 染色方法：将经过样品准备或不须准备的规定数量种子分
别放入四唑溶液（0.1%）里染色。 将不同重复的样品分别放在小烧杯中，加入四唑溶液，以
淹没种子为宜； 移置在30℃的黑暗恒温箱内或弱光下进行染色2小时。因
为光线可能使四唑盐类还原而降低其浓度，影响染色效果。
利用四唑的无色溶液作为一种指示剂，以显示活 细胞中所发生的还原反应。
有生活力的种子胚部细胞具有脱氢酶，被种子吸 收的四唑盐类的无色溶液，参与了活细胞的还原 反应，从脱氢酶脱氢，被还原为红色而稳定的、 不扩散的、不溶于水的三苯基化合物。
无生活力的种子则无此反应。
借此可鉴别有生活力种子和无生活力种子。
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实验方法和步骤
结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复
间最大容许差距不得超过规定值； 平均百分率计算到最近似的整数。
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实验方法和步骤
观察鉴定
凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜 红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。
凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光 泽，并且活营养组织不染色部分已超过1/2，或超过 允许范围，以及组织软化的，为不正常种子。
凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色，且 组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。
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实验方法和步骤
样品准备
玉米：沿胚纵切。通过胚中轴和胚乳，纵向切开， 使胚的主要构造暴露出来，取其一半，用于四唑 染色。
每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为1次重 复，共3次重复。每粒种子沿胚纵切后保留一半， 供染色用，另一半不用
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实验方法和步骤
四唑染色 目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的健壮、衰
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实验仪器设备
材料：玉米、大豆种子。 设备和药品 设备：冰箱、培养箱、镊子、解剖刀、刀
片、吸水纸等。 药品：2，3，5-三苯氯化四氮唑。
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实验方法和步骤
样品准备
大豆：采用缓慢预湿后不须样品准备，但 在染色后观察鉴定前也需剥去种皮，以便 观察得更为清楚，鉴定更为可靠。
每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为 1次重复，共3次重复。
种子生活力测定原理及方法PPT课件
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• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
种子生活力测定
3、炒种法
数出一定数目的种子，放在锅里或铁板上炒， 能爆响的种子多为有生活力的种子，爆响频率 越快、声音越响，种子生活力就越强；虽然能 爆响，但声音弱而无力的，则是无生活力的种 子。
4、剥胚法
先将种子放在清水中浸泡10～24小时，然后剥去 种皮，放入铺有吸水纸的玻璃器皿中，将玻璃器 皿置于温度为20～25℃的湿箱中6～10小时，凡 是胚不腐烂，且各部分增长伸开，饱满而有光泽 的为有生活力的种子。
种子生活力测定
通过以下四种方法可鉴定果树种子生活力：
1、形态鉴定法
凡砧木种子大小均匀，籽粒饱满，千粒重较重， 种皮有光泽，无霉变气味，无病虫危害，剥去种 皮后，胚和子叶呈乳白色、不透明，压之有弹性、 不出油的种子为有生活力的种子；反之，则为失 去生活力或生活力极弱的种子。
2、染色法
将砧木种子浸入水中10～24小时，使种皮软化， 然后细心剥去种皮（桃、杏、李、核桃等有坚硬 木质外壳的种子，只需轻轻砸碎外壳，不需用水 浸泡），放入染色剂(5％红墨水，或0.1％靛蓝胭 脂红，或0.1％曙红溶液）中，染色1～2小时，再 将种子取出，用清水冲洗干净。观察染色后的种 子，凡胚和子叶完全染色者，为无生活力的种子； 胚或子叶部分染色者，为生活力弱的种子；胚和 子叶没有染色者，为有生活力的种子。
实验三种子和根系生活力的测定
实验三 种子和根系生活力的测定一、种子活力的测定种子是裸子和被植物的延存器官，种子质量和活力是农林业生产的基础。
（一）氯化三苯基四氮唑（TTC）法【原理】TTC（2，3，5－氯化三苯基四氮唑）的氧化态是无色的，可被氢还原成不溶性的红色 三苯基甲月朁（TTF）。
具有活力的组织和细胞在呼吸作用中，脱氢酶催化底物氧化脱氢产 生NADH、NADPH 等还原性物质，当TTC渗入组织或细胞时呼吸过程产生的还原物质可将 其还原成TTF（红色），组织或细胞被染成红色。
死细胞无呼吸，不发生这样的氧化还原反 应。
应用这一原理，可根据组织或细胞染色情况来检测种子、花粉根系等的活力。
应用TTC的水溶液浸泡种子，使之渗入种胚的细胞内，如果种胚具有生命力，其中的脱 氢酶就可以将TTC作为受氢体使之还原成为三苯基甲月朁 而呈红色， 如果种胚死亡便不能 染色，种胚生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色，因此，可以根据种胚染 色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生命力。
【仪器设备】1．小烧杯；2．刀片；3．镊子；4．温箱；5．培养皿；6． 棕色试剂瓶；7． 解剖针；8． pH试纸。
【试剂】0.1 %TTC溶液：0.1 g TTC溶于100 mL pH 7.0的磷酸缓冲液中。
【材料】 贮藏不同时间种子和死种子。
【方法步骤】1． 将新种子、陈种子或死种子，用温水（约30 ℃）浸泡2～6 h，使种子充分吸胀。
2． 随机取种子两份，每份50粒。
豆类种子要去皮，然后沿种胚中央准确切开，取其一 半备用。
3． 将准备好的种子分别放在培养皿中，加入TTC溶液，以浸没种子为度。
4． 将种子置于30 ℃～35 ℃的恒温箱中保温30 min染色。
也可在20 ℃左右的室温下 放置40～60 min。
5． 染色结束后要立即进行鉴定，因放久会褪色。
倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗 2～3次，逐个观察种胚被染色的情况，判断种子有无生活力。
凡种胚全部或大部分被染成红 色的即为具有生命力的种子。
实验三-种子生活力测定-PPT
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一、实验目的和要求
1、实验目的
了解四唑法测定种子生活力的原理 掌握主要农作物种子四唑染色测定种子生
活力的方法步骤和判别有无生活力的鉴定 标准。
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一、实验目的和要求
2、实验要求
要求每组同学独立完成同一材料的生活力 测定。
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二、实验原理
2、四唑染色法测定种子生活力的基本原理 利用四唑的无色溶液作为一种指示剂，以显示活
使胚的主要构造暴露出来，取其一半，用于四唑 染色。 每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为1次重 复，共3次重复。每粒种子沿胚纵切后保留一半， 供染色用，另一半不用
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实验方法和步骤
四唑染色 目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的健壮、
衰弱和死亡部分的差异显现出来，判断种子生活力。 染色方法：将经过样品准备或不须准备的规定数量种子
间最大容许差距不得超过规定值； 平均百分率计算到最近似的整数。
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分别放入四唑溶液（0.1%）里染色。 将不同重复的样品分别放在小烧杯中，加入四唑溶液，
以淹没种子为宜； 移置在30℃的黑暗恒温箱内或弱光下进行染色2小时。因
为光线可能使四唑盐类还原而降低其浓度，影响染色效 果。
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实验方法和步骤
观察鉴定
凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的 鲜红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。
片、吸水纸等。 药品：2，3，5-三苯氯化四氮唑。
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实验方法和步骤
样品准备 大豆：采用缓慢预湿后不须样品准备，但
在染色后观察鉴定前也需剥去种皮，以便 观察得更为清楚，鉴定更为可靠。 每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为 1次重复，共3次重复。
试验三牧草种子生活力的测定
实验三 牧草种子生活力的测定——氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应， 而无生活力的种胚则无此 反应。
当 TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或 NADPH ） 还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作 用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子 的生活力强弱。
TTC 还原反应如下：TTC （无色） TTF （红色）【仪器与用具】培养皿 1 套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂 瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。
【试剂】TTC 溶液的配制：取 1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成 0.1％的 TTC 溶液。
药液 p Ｈ应在 6.5～7.5，以 pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加 水）。
【方法】1.将牧草种子用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。
2.随机取上次测过的种子1 份 50 粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加 TTC 溶液，以浸没种子为度。
4.放入 30～35℃的恒温箱内保温 30min.也可在 20℃左右的室温下放置 40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗 2～3 次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无 生活力，把判断结果记入表 1内。
表1 染色法测定种子生活力记载表方法种子名称供试粒数有生活力种 子粒数无生活力 种子粒数有生活力种子 占供式粒数的%【注意事项】1.TTC 溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变+Cl + CN N NN + 2HCN N NNHHCl红则不可再用。
2.染色温度一般以 25～35℃为宜。
3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分 坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。
实验3 种子生活力的测定
实验3 种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。
特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。
通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
一、 氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或NADPH ）还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC 还原反应如下：TTC（无色）TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。
【试剂】TTC 溶液的配制：取1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。
药液p Ｈ应在6.5～7.5，以pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC 溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1 染色法测定种子生活力记载表+Cl+CN N NN +2HCN N NNHHCl【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
种子生活力的测定PPT课件
种子生活力测定的必要性：
• 1、休眠种子必须进行生活力测定： • 2、快速预测种子发芽能力
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一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。
谢谢您的观看！
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四、实验过程
1 .小麦、玉米种子四唑染色测定 ⑴ 浸种：软化种子，活化有关酶 ⑵ 样品准备
小麦： 200n×(2-4) 沿胚纵切 20n 玉米： 200n×(2-4) 沿胚纵切 50n×2 ⑶ 染色 浸入0.1%四唑溶液中，35℃ 0.5-1h
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⑷ 观察鉴定 小麦：观察切片、胚和盾片 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②盾片上下任一端1/3不染色 ③胚根大部分不染色，但不定根原基体 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤 玉米：观察切面 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②胚根 1/3不染色 ③盾片上下1/3不染色 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤
二、材料和用具 1. 种子材料：小麦、玉米、大豆 2. 试剂：0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具：镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
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三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸收的指示剂，参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL （辅酶ⅠH2) （四唑）（辅酶Ⅰ）（甲 月替）（氯化氢） 2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界有用物质，而死亡的细胞则丧失了这一 能力。有生活力的种子，胚部细胞不让染料进入，因而不容易被染色；而丧失生活力 的种子，胚部细胞丧失了选择透过性，染料可以自由的进入到细胞内，使胚部染色。
2022种子活力的概念及与生活力发芽力的关系优秀ppt
种子活力下与）发芽发力的芽相并互关长系图成解正（引常自I植sely株，19的57）能力，通常用发芽势和发芽率表示。
种子活力----通常指田间条件下的出苗能力及与此有关的生产性能和指标。 1、 种子生活力 ----是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具有生命力（即活的）种子数占种子总数的 百分率。
种子生产与经营专业
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种子活力的概念及与生活力、发芽力的关系
一、种子活力的概念
种子活力是种子质量的重要指标，与种子田间出苗密切相关。 播种成苗是关系到作物生产、种子生产成败的首要环节。长期 以来，人们多用发芽率来衡量种子的播种品质，但生产中常遇到发芽 率与田间出苗率不相符的情况，便试图寻找一种能准确预测种子田间 出苗情况的指标，从而提出一个新的概念---------种子活力。
种子活力是种子质量的重要指标，与种子田间出苗密切相关。
种子活力指的是种子的健壮程度和生产潜能。
种子活力的概念及与生活力、发芽力的关系
长期以来，人们多用发芽率来衡量种子的播种品质，但生产中常遇到发芽率与田间出苗率不相符的情况，便试图寻找一种能准确预测
种子田间出苗情况的指标，从而提出一个新的概念---------种子活力。
种子认
证和种子检验中得到广泛应用。但生活力测定快速，有时可用于暂时
替代来不及发芽的种子发芽率，但最后结果还是要用发芽率作为正式
依据。
二、活力、生活力和发芽力含义的差异及相互关系
高发芽率种子批间在田间表现的差异 二、活力、生活力和发芽力含义的差异及相互关系 ①种子发芽和幼苗生长的速率和整齐度 二、活力、生活力和发芽力含义的差异及相互关系 1、 种子生活力 ----是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具有生命力（即活的）种子数占种子总数的 百分率。 种子活力是种子质量的重要指标，与种子田间出苗密切相关。 种子劣变过程中发芽力（生活力）与活力的相互关系图解 高发芽率种子批间在田间表现的差异 种子活力指的是种子的健壮程度和生产潜能。 种子活力与发芽力的相互关系图解 （引自Isely，1957） 二、活力、生活力和发芽力含义的差异及相互关系 2、种子发芽力----是指种子在适宜条件下（实验室可控制的条件下）发芽并长成正常植株的能力，通常用发芽势和发芽率表示。 种子活力是指充分成熟，充实饱满，色泽正常，健康无病虫，完整无损伤，耐藏性好的非休眠种子，在广泛环境条件下，表现出抗逆 性强，发芽出苗快速整齐，茁壮生长，正常发育，能长成健壮、整齐、正常幼苗和植株，达到高产和优质的潜在能力。 种子活力----通常指田间条件下的出苗能力及与此有关的生产性能和指标。 二、活力、生活力和发芽力含义的差异及相互关系 种子活力的概念及与生活力、发芽力的关系
种子生活力测定PPT课件
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任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗，不 要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情况 （可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活力 的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生活 力的种子。
有
无生活力的种子
生活Leabharlann 力的种子
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任务5 计算： 种子生活力（%）=（有生活力的种子数／检测种子数）
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
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种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
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项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
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项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
×100%（保留整数） 先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
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项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载表
产地 送检样品重（g）
品种名称
重复
Ⅰ
Ⅱ
检验粒数
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
. 填表日期：
年月日
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项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
种子生活力测定
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载 表
产地 送检样品重（g）
品种名称
ห้องสมุดไป่ตู้
重复 检验粒数
Ⅰ
Ⅱ
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
填表日期：
年月日
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
任务1 浸泡：将种子用温水（约30--35℃）浸泡5h左右，使种 子充分吸胀，便于染色（一般用先泡好的种子）。
任务2 试样数取与切取：随机数取4份，每份50粒种子。沿种 胚中线纵向切成两半，取其中的一半（一定要带胚并且要 完整的暴露在切面上），置于编号的培养皿中备用。
任务3 样品染色：向上述4个培养皿中加入 5%的红墨水溶液，将切好的种子浸没，室 温下浸10min染色。
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗， 不要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情 况（可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活 力的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生 活力的种子。