磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯
实验 磷酸甘油氧化
4.(trinder反应) H2O2+4-氨基安替比林+4-氯酚
生成醌亚胺（红色，500nm吸收峰）显色程度与TG浓度成正比。
[试剂器材]
1.R1试剂：Tris缓冲液(pH:7.6)
4-氯酚 亚铁氰化钾 150mmol/L 3.5 mmol/L 6umol/L
2. R2试剂：ATP≥0.15mmol/L
[临床意义]
1.血清TG升高见于：家族性脂类代谢紊乱、 肾病综合征、糖尿病、甲功减退、急性胰腺 炎、原发性甘油三酯增多症、动脉粥样硬化 等。 2.血清TG降低见于：脑梗死、甲亢、营养不 良、消化不良。
[注意事项]
• • •
• •
临床检测TG前要空腹。 若样品TG含量过高，要稀释样品。 样本中存在游离甘油，为得到真实甘油三 酯值，结果最好减去0.11 mmol/L. 操作时要防止试剂污染. 叠氮钠有腐蚀性,避免接触皮肤.
• 加入(ml) • 工作液 • H2O • 校准液 • 血清
空白管 1.0 0.01 —— ——
校准管 1.0 —— 0.01 ——
测定管 1.0 —— —— 0.01
分别混匀后在37℃保温10分钟。 （提前打开半自动生化分析仪），按程序操作进行 调零后读取吸光度值。
[参考范围]
＜1．71 mmol/L（一附院：0.4-1.71mmol/L） 临界值:1.71-2.26 mmol/L 高甘油三酯症＞2.26 mmol/L
GPO≥2500u/L 4-AAP(0.35mmol/L) POD≥150u/L LPL≥3000umol/L GK≥200u/L
3.甘油三酯标准液：2.26mmol/L 4.器材:半自动生化分析仪、微量加样器、试 管、水浴箱
检验科生化甘油三脂测定的标准操作规程
检验科生化甘油三脂测定的标准操作规程【目的】体外检测血清甘油三酯(TG)含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理上海科华生物工程股份有限公司的甘油三酯试剂盒采用的是甘油磷酸氧化酶法O H O H O H O ADPATP O H 2422222-3--3-2+−−−−−→−-++−−−−−−−→−++−−−−→−++−−−−−−→−+醌亚胺过氧化物酶氨基安替比林磷酸二羟丙酮甘油磷酸氧化酶磷酸甘油磷酸甘油甘油激酶甘油脂肪酸甘油脂蛋白脂肪酶甘油三酯ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺 血清中的甘油三酯在脂蛋白脂肪酶的作用下水解成甘油和脂肪酸,甘油在甘油激酶的催化下和ATP一起反应生成甘油-3-磷酸和ADP,其中的产物甘油-3-磷酸在甘油磷酸氧化酶的氧化下产生磷酸二羟丙酮和过氧化物,最后过氧化物在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和4-氯酚反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长550nm处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm 处吸光度的变化值与样本中甘油三酯的含量成正比.二、试剂1.试剂试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供试剂瓶内主要成分：g甘油-3-磷酸氧化酶，抗坏血酸氧化酶，甘油激酶，ATP,4-氨基安替比林，脂蛋白脂肪酶，过氧化物酶，ESPAS试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
十三血清甘油三酯的测定血清甘油三酯测定方法较多但主要
十三血清甘油三酯的测定血清甘油三酯测定方法较多但主要血清甘油三酯（TG）的测定方法较多，主要可以分为光度测定法、酶法、高效液相色谱法（HPLC）和质谱法等。
下面将对其中几种常用的测定方法进行详细介绍。
1.光度测定法光度测定法是通过测量样品中TG与其中一试剂反应生成的有色产物的吸光度来确定TG浓度。
常用试剂有酚氨法、儿茶酚法和浮选酶法等。
这些方法简单、灵敏度高，但可能会受其他物质的干扰，如胆固醇、胆汁酸等。
2.酶法酶法是利用氧化酶来催化TG水解产生的氢过氧化物与试剂发生比色反应来测定TG浓度。
常用的试剂包括脂肪酶、过氧化氢酶和色氨酸等。
此类方法操作简便，测定结果准确可靠，但可能会受到干扰物质的影响。
3.高效液相色谱法（HPLC）HPLC是一种高效的分离和定量分析方法，常用于测定血清中各种代谢产物，包括TG。
一般使用反相色谱柱，流动相通常为乙腈-水或甲醇-水体系，通过在不同条件下分离目标化合物，并通过检测器进行定量分析。
该方法具有灵敏度高、特异性好的特点，但需要较复杂的设备和操作，且耗时较长。
4.质谱法质谱法是一种非常准确和灵敏的方法，可以用于测定血清中TG的浓度。
常用的质谱方法有气相色谱-质谱联用（GC-MS）和液相色谱-质谱联用（LC-MS）。
这些方法可以通过比较样品与内标物的质荷比来确定TG的浓度。
质谱法具有高灵敏度、高分辨率和高特异性等优点，但设备和操作成本较高。
综上所述，血清甘油三酯的测定方法较多，每种方法都有其优缺点。
在选择测定方法时，需要根据实验目的、样本特点以及实验条件来综合考虑，选择最适合的测定方法。
生化基础物质检测—脂类检测
主 要 试 TG试剂盒 剂 蒸馏水
主
采血器材
要
微量加样器
器
吸量管
材
恒温水浴箱
分光光度计
实验步骤
第一步
制备合格样本
第二步
反应液制备
第三步
混匀水浴测定
第四步
计算
第一步
用真空负压管采血，离心，待 用
第二步
取试管3支试管编号，按下表依次加样。
加入物 (μl) 蒸馏水 标准液 血清 工作液
空白管
20 － － 2000
第二步
洗板，阴性对照孔每孔加入PBS 50μl， 样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔 抗人AIF抗体工作液50μl。
第二步
每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀 10s，置37℃暗处反应15-20min。每孔 加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
第二步
分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光 值W2，最终测得的OD值为两者之差 （W1-W2），以减少由容器上的划痕或 指印等造成的光干扰。
误差分析
实验原理
空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），PTA-Mg2+具有选择性 沉淀载脂蛋白为 apoB 的脂蛋白 LDL，则上清液为 HDL，HDL 以 HDL-C 表示含量。
胆固醇酯酶
胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH
胆固醇氧化酶
胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2
试剂和器材
主 要 apoa试剂盒 试 校准液 剂 蒸馏水
主
采血器材
要
微量加样器
器
吸量管
材
恒温水浴箱
血清甘油三酯的酶法测定
—— 在规定 温度下 保 持 稳 定 1年 ;
——试 剂批 间差小 于 1%。
4,2 校 准物质 和质控 物
酶法测定甘油三酯使用 的校准物 和质控物应符合如下要求 : ——可使 用血清校 准 物 ,在 测 定 总甘 油 的方 法 中也 可使 用 甘油水 溶 液 校 准物 ;
情 况 下 甘 油 二 酯 和 甘 油 一 酯 之 和 不 足 甘 油 三 酯 的 3%,游 离 甘 油 约 0.11mmo1/L)。 甘 油 三 酯 重 量 多 以
三 油 酸 甘 油 酯 (相 对 分 子 质 量 885.5)计 。
3 方法概述
3.1 总 甘 油 测 定
目前 ,临 床 实 验 室 普 遍 采 用 酶 法 测 定 血 清 甘 油 三 酯 。首 先 ,用 脂 肪 酶 水 解 甘 油 三 酯 为 甘 油 和 脂 肪
质 、血 红蛋 白等有 色 物 质 的干扰物 质 。
7.2 精 密 度 和 准确 度 的评 价
无论 选 用 何 种 原 理 测 定 甘油 三酯 的酶试 剂 ,均 应 对 其 适 用 性 、线 性 范 围 、检 测 限 、灵 敏 度 、特 异 性 等 进 行评 价 。选 用 的分 析 系统 (试 剂 、校 准物 质 和仪 器 )应 在 评 价 并 保 证 其 精 密 度 和准 确 度 之 后 用 于 病 人 样 品分 析 ;应 用 中 的分 析 系统应监 测 和保 持其精 密 度 和 准 确 度 。应 尽 量 选 用 分 析结 果 可 溯 源 至 公 认 参 考 系统 (见 附 录 B)的 分 析 系统 。可应 用 二 级参 考 物 质 或参 考 测 量 程 序评 价 准确度 。选 用 的分 析 系 统 的 测 定结 果 与参 考 测 量 程 序测 定 结果 之 间 的相 对 不 准 确 度 (相 对 偏 差 )小 于 ±5%。
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)简介：甘油三酯(Triglyceride，TG）又称三酰甘油，是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成。
用酶学方法测定TG是生化检测中的常用方法，其特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。
Leagene甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等，甘油三脂被LPL水解为甘油和脂肪酸，后者经甘油激酶和ATP磷酸化，G-3-P被磷酸甘油氧化酶氧化，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应，生成红色苯醌亚胺(Trinder反应)。
分光光度计在进行比色测定。
本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、生理盐水或PBS2、离心管、小试管或96孔板3、水浴锅或恒温箱4、分光光度计或酶标仪5、全自动或半自动生化分析仪操作步骤(仅供参考)：编号名称TC1243100TStorage试剂(A): GPO-PAP 工作液Tris-HCl buffer2×50ml-20℃避光LPL、GK磷酸甘油氧化酶(GPO)过氧化物酶(POD)4-氨基安替比林对氯酚试剂(B): Glycerol标准(1.7mmol/L) 1ml RT 试剂(C): ddH2O 1ml RT 使用说明书1份1、样本处理：①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。
②细胞样本：a、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，离心，弃上清，留取沉淀。
2023年检验类之临床医学检验技术(士)每日一练试卷B卷含答案
2023年检验类之临床医学检验技术（士）每日一练试卷B卷含答案单选题（共50题）1、下列哪一种立克次体病的主要病理变化没有皮疹A.Q热B.流行性斑疹伤寒C.恙虫病D.洛矶山斑点热E.地方性斑疹伤寒【答案】 A2、患者，女，35岁。
发热、咽痛1天。
查体：扁桃体Ⅱ度肿大，有脓点。
实验室检查：血清ASO水平为300U/ml，10天后血清ASO水平上升到1200IU/ml。
诊断：急性化脓性扁桃体。
A.血清AS01200IU/mlB.血清肌酐18μmol/LC.血清BUN13.8mmol/LD.血清补体CE.尿纤维蛋白降解产物显著增高【答案】 D3、在肌肉营养不良时，下列酶明显升高的是A.ALPB.ALTC.ASTD.CKE.ACP【答案】 D4、血管紧张素是A.激活血小板物质B.舒血管物质C.调节血液凝固物质D.缩血管物质E.既有舒血管又能缩血管的物质【答案】 D5、患者，女，18岁，入院前1月因受寒后咽喉肿痛、不咳、低热但未作治疗；10天前出现颜面及双下肢水肿，晨起为甚，且逐渐加重，同时尿少，2次／天，呕吐及皮肤瘙痒，腰痛，但无肉眼血尿及尿频、尿痛、关节痛等症患者可能存在病变的系统为A.消化系统B.泌尿系统C.运动系统D.循环系统E.呼吸系统【答案】 B6、经辣根过氧化物酶(HRP)作用后显蓝色，加酸终止变黄色的底物是A.邻苯二胺B.四甲基联苯胺C.ABTSD.对硝基苯磷酸酯E.伞基磷酸酯【答案】 D7、组成凝血活酶的是A.PTB.因子Ⅰ、Ⅴ、Ⅷ、ⅩⅢC.APTTD.FⅤA.FⅩA.CaE.因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ【答案】 D8、用作粪便污染监测指标的细菌是A.伤寒沙门菌B.霍乱弧菌C.痢疾志贺菌D.大肠埃希菌E.变形杆菌【答案】 D9、特种蛋白免疫分析仪是基于抗原-抗体反应原理，不溶性免疫复合物可使溶液浊度改变，再通过浊度检测标本中微量物质的分析方法。
A.温育系统故障B.伪浊度C.边缘效应D.携带污染E.比色系统故障【答案】 B10、节肢动物对人类产生最严重的危害是A.刺叮吸血B.直接寄生人体内C.作为传病媒介，传播疾病D.毒害E.作为过敏原引起超敏反应【答案】 C11、IgG类抗体的纯化方法不包括A.亲和层析法B.离子交换层析法C.电泳法D.凝胶过滤法E.盐析法【答案】 C12、艰难梭菌感染后，应选用下列哪种药物治疗A.红霉素B.氯霉素C.甲硝唑D.青霉素E.四环素【答案】 C13、不属于Ⅰ型变态反应的疾病是（）。
临床生物化学和检验试题及答案
一、单选题（题数：40，共80.0 分）1最大的钙储备库是（2.0分）2.0 分A、肝脏B、骨骼C、肾脏D、血液E、骨骼肌我的答案：B2磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯时，其中苯酚及4-氨基安替比林是（2.0分）2.0 分A、还原剂B、催化剂C、皂化剂D、显色剂E、氧化剂我的答案：D3维生素B12又称（2.0分）2.0 分A、凝血维生素B、钴胺素C、转钴胺素D、硫胺素E、核黄素我的答案：B4经测定，一血清标本的含氮量为10g／L，那么蛋白质的浓度是（2.0分）2.0 分A、57.5g／LB、62.5g／LC、72.5g／L67.5g／LE、52.5g／L我的答案：B5下列物质中，哪一种不含血红素（2.0分）2.0 分A、过氧化物酶B、血红蛋白C、过氧化氢酶D、肌红蛋白E、铜蓝蛋白我的答案：E6关于O2与Hb结合和解离正确的是（2.0分）2.0 分A、当血液的H+浓度增高时，Hb对O2的亲和力降低B、当血液的PaO2增高时，氧解离曲线左移C、体温升高增加Hb对氧的亲和力D、当血液的PaCO2增高时，氧解离曲线左移E、2，3-DPG增加Hb对氧的亲和力我的答案：A7碱中毒时，将导致（2.0分）0.0 分A、酸中毒，排碱性尿B、碱中毒，排酸性尿C、低血钾，排碱性尿高血钾，排酸性尿E、低血钾，排酸性尿我的答案：B8尿蛋白选择性指数(SPI)测定的临床意义，错误的是（2.0分）2.0 分A、可估计激素治疗的疗效B、可作为肾病综合征分型的-项指标C、可推测病理组织类型D、SPI越大提示病变越轻E、SPI越大，选择性越高我的答案：E9地方性甲状腺肿因（2.0分）2.0 分A、缺硒B、汞中毒C、铁过剩D、缺碘E、铜代谢异常我的答案：D10肝癌的筛查指标是（2.0分）2.0 分A、PbAB、CEAC、TPAD、AFPE、hCG我的答案：D11在体液中细胞内液与细胞外液钠离子浓度的分布是（2.0分）2.0 分A、外液大于内液Cl+C、K+D、Na+E、内液大于外液我的答案：A12下列哪项不属于糖皮质激素的生理作用（2.0分）2.0 分A、抑制蛋白质合成B、参与应激反应C、拮抗生长素D、降低血糖E、保钠排钾作用我的答案：D13代谢性酸中毒时肾的主要代偿方式是（2.0分）2.0 分A、泌H+.泌NH3不变,重吸收HCO3-增加B、泌H+.泌NH3减少,重吸收HCO3-增加C、泌H. 泌NH3及重吸收HCO3-增加D、泌H+.泌NH3增加,重吸收HCO3-减少E、泌H+.泌NH3及重吸收HCO3-减少我的答案：C14按照WHO的标准,空腹血糖的测定时,空腹一般至少是多少时间（2.0分）2.0 分A、7小时B、6小时C、10小时D、12小时E、8小时我的答案：E15分泌胰岛素的细胞是（2.0分）2.0 分A、D细胞B、A细胞C、C细胞D、B细胞E、PP细胞我的答案：D16下列哪项对早期AMI检出更为敏感（2.0分）0.0 分A、CK2B、CK1C、AMYD、CK3E、CK4我的答案：B17有害的微量元素是（2.0分）2.0 分A、硒B、钴C、锰D、铝E、锌我的答案：D18进行预染脂蛋白.琼脂糖电泳后，自阴极起脂蛋白区带依次为（2.0分）2.0 分A、α-脂蛋白.前β-脂蛋白.β-脂蛋白.CMB、CM.β-脂蛋白.前β-脂蛋白.α-脂蛋白C、CM.α-脂蛋白.前β-脂蛋白.β-脂蛋白CM.α-脂蛋白.β-脂蛋白.前β-脂蛋白E、α-脂蛋白.-β脂蛋白.前β-脂蛋白.CM我的答案：B19确定蛋白质标准溶液浓度的最根本的方法是（2.0分）2.0 分A、紫外吸收法B、凯氏定氮法C、奈氏试剂显色法D、茚三酮反应E、双缩脲反应我的答案：B20肝脏进行生物转化时甲基供体是（2.0分）2.0 分A、甲基胞嘧啶B、蛋氨酸C、S-腺苷蛋氨酸D、甲基腺苷E、胆碱我的答案：C21广泛分布于含油的植物组织中的是（2.0分）2.0 分A、维生素B1B、维生素KC、维生素B12D、维生素EE、维生素C我的答案：D22对动脉粥样硬化起防御作用的脂蛋白是（2.0分）2.0 分A、HDLGVIC、IDLD、VLDLE、IDL我的答案：A23载脂蛋白B48主要存在于（2.0分）2.0 分A、FFAB、VLDLC、CMD、LDLE、HDL我的答案：C24脂蛋白电泳时向正极迁移速度最快的是（2.0分）2.0 分A、IDLB、HDLC、LDLD、CME、VLDL我的答案：B25某患者血pH7.49,PaCO26.67kPa(50mmHg),[HCO3-]40mmol/L,其酸碱平衡紊乱的类型是A.代谢性酸中毒（2.0分）0.0 分A、代谢性碱中毒B、呼吸性碱中毒C、呼吸性酸中毒D、呼吸性碱中毒合并代谢性碱中毒我的答案：A26Lichtwitz首先采用“临床化学”作为教科书名公开出版是哪一年（2.0分）2.0 分A、1941年B、1915年C、1931年D、1901年E、1918年我的答案：E27氯化铵负荷试验主要用于诊断（2.0分）2.0 分A、以上都不是B、高钾性酸中毒C、混合性酸中毒D、远端小管酸中毒E、近端小管酸中毒我的答案：D28神经元特异性烯醇化酶是（2.0分）2.0 分A、AFPB、PSAC、NSED、CEAE、HCG我的答案：C29下列哪项不能作为葡萄糖测定的标本（2.0分）2.0 分A、脑脊液B、全血C、溶血液D、血清E、尿液我的答案：C30下列化合物哪一个不是胆色素（2.0分）2.0 分A、胆素原族B、胆素族C、胆绿素D、胆红素E、血红素我的答案：E31最早测定Cl-的方法是（2.0分）0.0 分A、火焰光度法B、库仑电量分析法C、离子选择电极法D、汞滴定法E、分光光度法我的答案：C32促进胰高血糖素释放的因素是（2.0分）2.0 分A、胰泌素B、迷走神经兴奋C、促胰酶素D、高血糖E、高氨基酸我的答案：C33血清hCG峰值出现在（2.0分）2.0 分A、分娩前B、停经第一天C、分娩时D、妊娠8～10周E、妊娠2～5周我的答案：D34下列关于摄取.转化胆红素的机制，哪一项是错误的（2.0分）2.0 分A、肝细胞能将胆红素转变为尿胆素原B、肝细胞膜上存在有特异载体系统C、在肝细胞浆中存在有特异载体系统D、肝细胞膜能结合某些阴离子E、肝细胞能将胆红素转变为葡萄糖醛酸胆红素我的答案：A35磷在以下哪段肠道吸收最快（2.0分）2.0 分A、十二指肠B、回肠C、降结肠D、升结肠E、空肠我的答案：E36不能影响血清尿素浓度的是（2.0分）2.0 分A、肾功能状态B、肝功能状态C、全身肌肉重量D、胃肠道出血E、饮食中蛋白质摄入量我的答案：C37在评价血液葡萄糖水平时下列哪项是不正确的（2.0分）0.0 分A、抗凝剂一般用草酸钾加氟化钠B、全血葡萄糖浓度比血浆低10％～15％C、分析前放置一段时间会使结果偏低D、血浆是测定葡萄糖的较好样品E、毛细血管内血液葡萄糖低于静脉血我的答案：A383-B-羟类固醇脱氢酶缺乏引起的CAH病的主要临床表现是（2.0分）2.0 分A、肾上腺皮质功能衰竭B、早天C、男女均呈两性同体D、高血压E、男性假性早熟我的答案：C39酶耦联法测定酶活性，根据动力学要求，待测酶和指示酶分别应满足（2.0分）2.0 分A、1级和0级反应B、0级和0级反应C、混合级和混合级反应D、0级和1级反应E、1级和1级反应我的答案：D40下列哪种药物可使皮质醇水平升高（2.0分）2.0 分A、雌激素药B、利福平C、苯妥英钠D、E、奋乃静我的答案：A二、多选题（题数：10，共20.0 分）1有关酸碱平衡紊乱正确的是（2.0分）2.0 分A、呼吸性酸中毒是原发性PaCO2增高，血浆pH有下降趋势B、代谢性酸中毒是原发性降低，血浆pH有下降趋势C、酸碱平衡紊乱失代偿pH-定异常D、代偿性酸碱平衡紊乱其和PaCO2都已恢复正常E、混合型酸碱平衡紊乱pH有可能正常我的答案：ABE2高脂蛋白血症病人进行血浆静置实验后，血浆外观叙述错误的是（2.0分）0.0 分A、V型：透明B、Ⅰ型：上层奶油状，下层浑浊C、Ⅲ型：奶油上层下层混浊D、Ⅳ型：混浊E、Ⅱa型：透明或轻度混浊我的答案：AB3下列哪些项是HDL所起作用（2.0分）2.0 分A、促进脂质通过肠壁的运输B、激活脂蛋白脂肪酶C、输送肝细胞外的过量胆固醇进入肝脏后排泄限制动脉粥样硬化的发生发展E、促进血浆中胆固醇酯化我的答案：BCDE4正常人空腹12小时候抽血做血清脂蛋白电泳，会出现那几条电泳谱带（2.0分）2.0 分A、前β-脂蛋白B、α-脂蛋白C、CMD、脂蛋白(a)E、β-脂蛋白我的答案：ABE5有关C肽的描述正确的是（2.0分）0.0 分A、肝脏降解B、有较强的生物学活性C、与胰岛素等分子分泌D、血C肽浓度比胰岛素低E、胰岛素原降解的产物我的答案：BCE6Ⅳ型高脂蛋白血症血清脂类表现不正确的是为（2.0分）2.0 分A、血浆CM水平明显增加B、血浆总胆固醇和LDL-C水平明显增高C、脂蛋白电泳时前β-脂蛋白带深染D、血浆TG升高E、血浆静置实验：多呈混浊状我的答案：AB7LDL受体的配体（2.0分）2.0 分A、含ApoE的脂蛋白含Apo(a)的脂蛋白C、含ApoB100的脂蛋白D、含ApoC的脂蛋白E、含ApoA的脂蛋白我的答案：AC8下列关于酸碱平衡的调节正确的是（2.0分）0.0 分A、pH↓使得呼吸变浅变慢，CO2排出减少B、肾可直接排出多余的固定酸C、肾小管可分泌H+，回收Na+D、肾可直接排出多余的E、血液中／缓冲体系最为重要我的答案：BCE9下列哪些是以胆固醇为原料合成的化合物（2.0分）2.0 分A、皮质醇B、1,25－(OH)2D3C、雌二醇D、胆汁酸E、胆红素我的答案：ABCD10关于血脂检测错误的做法是（2.0分）0.0 分A、静脉采血时止血带使用不超过lminB、血脂分析前应低脂饮食一周C、发现血脂或脂蛋白异常应间隔2周再复查一次，方能作出诊断D、一次检查血中总胆固醇明显增加即可诊断E、采集餐后血液检查我的答案：CE。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯(Triglyceride,TG)
一、实验目的
测定血清中的甘油三酯含量，为临床诊断疾病提供依据。
二、实验原理
血清中甘油三酯经脂蛋白脂酶（LPL）作用，可水解为甘油和游离脂肪酸(FFA)，甘油在ATP和甘油激酶(GK)的作用下生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶作用生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与4-氨基安替比林（4-APP）和4-氯酚在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色醌类化合物，其显色程度与TG的浓度成正比。
三、试剂
1.甘油三酯液体稳定酶试剂
GOODs缓冲液（PH=7.2） 50 mmol/L
脂蛋白脂酶≥4000 U/L
甘油激酶≥40 U/L
磷酸甘油氧化酶≥500 U/L
过氧化物酶≥2000 U/L
ATP 2.0 mmol/L
硫酸镁 15 mmol/L
4-AAP 0.4 mmol/L
4-氯酚 4.0 mmol/L
2.三油酸甘油酯标准液 2.26 mmol/L（200mg/dl）
准确称取三油酸甘油酯（平均分子量：885.4）200mg加
Triton X-100 5ml，用蒸馏水定容至100ml，分装后，4℃
保存。
四、实验步骤
1.取三支试管按下表操作
加入物空白管（B）标准管(S)
测定管(U)
血清（μl）——
10
标准液（μl）— 10 —
蒸馏水（μl）10 —
—
酶试剂（μl） 1000 1000 1000
混匀置37度水浴保温5分钟，以空白管调零，在波长500nm处测各管的吸光度。
五、计算
血清TG(mmol/L)=A
测定管/A
标准管
×标准液浓度
六、参考范围
正常成人血清TG为0.55~1.70 mmol/L；
临界阈值：2.30 mmol/L；
危险阈值：4.50 mmol/L。
七、临床意义
1.血清TG增高常见于家族性脂类代谢紊乱、肾病综合征、糖尿病、甲状腺功能减退、急性胰腺炎、糖原积累病、胆道梗阻、原发性甘油三酯增高症、动脉粥样硬化等。
2.血清TG降低见于慢性阻塞性肺疾患、脑梗死、甲状腺功能亢进、营养不良和消化吸收不良综合征等。
八、注意事项
1.实验中所用酶试剂应在4℃避光保存，出现红色时不能
再用，试剂空白的
吸光度应 0.05 。
2.血清TG易受饮食的影响，在进食脂肪后可以观察到血清中的甘油三酯明显上升，2-4小时内即可出现血清浑浊，8小时以后接近空腹水平。
因此，要求空腹12小时后再进行采血，并要求72小时内不饮酒，否则会使检测结果偏高。
3.本实验方法的线性上限为11.3 mmol/L ，若所测TG值超过了11.0 mmol/L，则可用生理盐水稀释后再测。
4.实验中没有进行抽提和吸附，所以血清中游离的甘油对TG测定结果有一定的影响。
5.三油酸甘油酯标准液配好后切勿冷冻保存。
九、选择原因
本实验的一步终点法，具有简便、快速、微量且试剂较稳定等优点，适用于手工和自动化测定；其主要缺点是所测TG 值包括了血清中游离的甘油。
为了除去FG的干扰，常用的方法有外空白法和内空白法两种:
1.外空白法即同时使用不含LPL的酶试剂测定FG作空白值，此法需作双份测定，使成本加倍，但是可同时得到血清中FG数据；
2.内空白法又称为两步法或双试剂法，将酶试剂分作两部分，其中LPL和4-AAP组成试剂Ⅱ，其余部分为试剂Ⅰ，血清先加试剂Ⅰ，37℃孵育后，因无LPL存在，TG不被水解，FG在GK和GPO的作用下反应生成H2O2，但因不含4-AAP，不能完成显色反应，故可除去FG的干扰；再加入试剂Ⅱ，即可测出TG水解生成的甘油。
内空白法虽然增加了操作步骤，但不增加试剂成本，且排除FG干扰效果好，预孵育5 min 即可排除4 mmol/L FG的干扰。
本法线性范围在11.4mmol/L 以内，精密度为：批内CV≤3%、批间CV≤5%。
加入不同浓度TG，平均回收率98.6%，加入甘油的平均回收率10
3.6%。
与乙酰丙酮法比较：y＝0.996x－4.2，r＝0.9996。
因为LPL除水解TG外，亦能水解甘油一酯和甘油二酯(血清中这二者的浓度约占TG的3%)，所以本法测定结果包含了后二者的值。