黄嘌呤氧化酶试剂盒
Elabscience黄嘌呤氧化酶比色法测试盒说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®黄嘌呤氧化酶（XOD）比色法测试盒Xanthine Oxidase (XOD) Activity Assay Kit产品货号：E-BC-K805-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪(540-560 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测血清、血浆及动物组织样本中的黄嘌呤氧化酶的活力。
检测原理黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XOD)主要存在于哺乳动物的乳汁及肝脾中，属需氧脱氢酶类，是体内核酸代谢中的重要酶。
在肝细胞损伤时，此酶早于SGPT释放于血清中，并且升高明显，其对鉴别肝细胞性黄疸及阻塞性黄疸有明显的测定意义，在缺氧过程中黄嘌呤脱氢酶很快形成黄嘌呤氧化酶，黄嘌呤氧化酶对自由基的产生起了重要作用。
XOD可催化次黄嘌呤生成黄嘌呤，与此同时产生超氧阴离子自由基，当有电子受体及显色剂存在的情况下，生成紫红色结合物，根据后者生成量的多少可以推算出XOD的活力。
本试剂盒检测组织样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法。
(货号：E-BC-K318-M)。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：酶标仪(540-560 nm，最佳检测波长550 nm)、37o C恒温箱试剂：双蒸水，生理盐水(0.9 %NaCl)试剂准备①检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。
②显色剂工作液的配制：将试剂四:试剂五按体积比= 1:1配制，现配现用，按需配制，避光待用，配好的显色剂显色剂工作液1 h用完。
黄嘌呤氧化酶（XOD）活性检测试剂盒说明书
黄嘌呤氧化酶（XOD微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1095规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体110 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：粉剂置于试剂瓶内EP管中；2、工作液的配制：用时在试剂二中加入9.375 mL试剂一充分溶解，用不完的试剂4℃可保存2周；按需用蒸馏水稀释10倍后备用，现用现配。
产品说明：XOD（EC 1.17.3.2）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。
XOD主要分布于哺乳动物的心、肺、肝脏等组织中，当肝功能受损时，XOD大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。
XOD催化黄嘌呤产生尿酸，尿酸在290nm下有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、匀浆器/研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.细菌、细胞或组织样本的制备：细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
蜂胶中白杨素衍生物抗高尿酸活性研究
特产研究49Special Wild Economic Animal and Plant ResearchDOI：10.16720/ki.tcyj.2021.136蜂胶中白杨素衍生物抗高尿酸活性研究徐军，杨美林，仲崇琳※（吉林省中医药科学院中医药基础所，吉林长春130012）摘要：为研究蜂胶中降尿酸活性成分白杨素Mannich碱衍生物对高尿酸血症小鼠模型的降尿酸作用及其机制，通过氧嗪酸钾诱导高尿酸血症小鼠模型对白杨素Mannich碱衍生物8-[(2,4-二氟苯氨基)甲基]-5,7-二羟基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮（CHY10）的降尿酸作用及尿酸合成相关酶基因进行研究。
采用尿酸测定试剂盒测定小鼠尿酸水平及尿酸合成关键酶黄嘌呤氧化酶（XO）活性情况，通过RT-PCR测定XO上游尿酸代谢相关酶5’-核苷酸酶（5’-NT）、腺苷脱氨酶（ADA）和嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）mRNA的表达水平，结果表明，灌胃给予高尿酸血症小鼠高浓度（10mg/kg）CHY10能明显降低血清尿酸水平（P＜0.05或0.01），具有显著的降尿酸作用；能在一定程度上抑制XO活性，但对其上游5’-NT、ADA和PNP的mRNA表达水平无明显影响。
关键词：白杨素衍生物；Mannich碱；高尿酸血症；血清尿酸；黄嘌呤氧化酶中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1001-4721（2021）06-0049-05XU Jun,YANG Mei-ling,ZHONG Chong-lin※(Jilin Province Academy of Traditional Chinese Medicine,Changchun130012,China):In order to study the anti-hyperuricemic effect and mechanism of chrysin mannich base derivative isolated from propolis.The hy-peruricemic mice model was induced by an intraperitoneal injection of uricase inhibitor potassium oxonate.CHY10,a chrysin mannich base derivative,[8-((2,4-difluoroanilino)methyl)-5,7-dihydroxy-2-phenyl-4H-1-benzo-4-ketone]was synthesized and the effects of CHY10with different doses(10,5,2.5mg/kg)on XO activity(key enzymeof uric acid metabolism)were determined in the hyperuricemic mices.The ef-fects of CHY10with different doses on5’-NT,ADA,PNP(other enzymes of uric acid metabolism)mRNA expression level were examined by the means of RT-PCR,the results showed that serum uric acid levels in the model group were increased obviously(P＜0.01).Compared with the model group,serum uric acid levels were decreased significantly in groups received CHY10at the doses of10,5,2.5mg/kg(P＜0.05or P＜0.01).CHY10at doses of10,5,2.5mg/kg had no significant effect on the mRNA expression of5’-NT,ADA,PNP in hyper-uricemia mice(P＞0.05).Theirfore,CHY10can reduce the serum uric acid levels and XO activities in oxonate-induced hyperuricemia mice,but have no effect on the mRNA expression of5’-NT in liver as well as ADA and PNP under the experimentalcondition.:chrysin derivatives;Mannich base;hyperuricemia;serum uric acid;xanthine oxidase(XO)高尿酸血症是指血液中的尿酸浓度超出正常范围的一种代谢性疾病[1]。
超氧化物歧化酶测定试剂盒(SOD底物法)产品技术要求lepu
超氧化物歧化酶测定试剂盒(SOD底物法)适用范围：用于体外定量测定全血中的超氧化物歧化酶的活性。
1.1规格试剂1a:5×20mL，试剂1b:1×105mL，试剂2: 3×10mL，稀释液：1×100mL。
1.2主要组成成分试剂1a主要组分：试剂1b主要组分：试剂2主要组分：稀释液主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1a：白色或淡黄色晶块，试剂1b：无色或淡黄色透明溶液，试剂2：白色或淡黄色晶块，稀释液：无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在505nm处测定试剂空白吸光度，应≤1.9；2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.8。
2.4 分析灵敏度测试2.0U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0012。
2.5 准确度在样品中加入一定体积的纯品，计算回收率，应介于90%-110%之间。
2.6 重复性批内变异系数（CV）应不超过10％。
2.7 线性2.7.1在[0.1,5.5]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 [0.1,0.66)U/L区间内绝对偏差不超过±0.08U/L；[0.66，5.5]U/L区间内相对偏差不超过±12%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定，相对极差≤12％。
2.9 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
超氧化物歧化酶(SOD)测试盒【测总SOD(Cu-Zn,Mn,总)】
水补水至 75ml，配好后的试剂避光 4℃冷藏 1 年（不同规格参照下表）
96T
75ml
48T
37.5ml
4、试剂 F：用时加蒸馏水 75ml 溶解后备用。
96T
75ml
48T
37.5ml
显色剂的配制：按照试剂 E：试剂 F：冰乙酸=3：3：2 的体积比配成显色剂，即用即配。配好的显色剂
4℃避光冷藏 3 个月。
0.1
0.1
0.1
0.1
Buffer C（ml）
0.1
0.1
0.1
0.1
Buffer D 工作液（ml）
0.1
0.1
0.1
0.1
用旋涡混匀器充分混匀，置 37℃恒温水浴 40 分钟
显色剂（ml）
2
2
2
2
混匀，室温放置 10 分钟，于波长 550nm 处，1cm 光径比色杯，蒸馏水调零，测定各管吸光度值。
注：试剂 E，试剂 F 必须分开进行配制，切不可将试剂 E，试剂 F 混合后再进行配制，否则不显色。
七．实验操作步骤
1、对于测定分型所用的样本上清前处理办法：取样本 0.2ml 加 Buffer G 0.2ml，涡旋混匀 1 分钟，以 3500~4000 转/分，离心 15 分钟，取上清进行 CuZn-SOD 测定。此上清即为经过处理的样本，Mn-SOD 的 活力丧失，而 CuZn-SOD 活力不受影响。 2、对照上清制备：取生理盐水 0.2ml 加 Buffer G 0.2ml，涡旋混匀 1 分钟，以 3500-4000 转/分，离心 15 分钟，取上清作 CuZn-SOD 的对照上清。
注 1：a*代表样本取样量和蒸馏水取样量。
注意
抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒
抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒说明书修订日期：2015.07.13 Cat number：KGT012Store at4℃for6monthsFor Research Use Only（科研专用）一、测定原理模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统，产生超氧阴离子自由基O2—，加入电子传递物质及gress 氏显色剂，使反应体系呈现紫红色，可用分光光度计测其吸光度，当被测样本中含有O2。
抑制剂时，则比色时测定管的吸光度低于对照管的吸光度，而如果被测样本中含有产生O2。
物质时，则比色时测定管的吸光度高于对照管的吸光度，通过以维生素C做标准，可计算出被检物品对O2。
的影响能力。
二、试剂盒组份组份KGT01250assaysBuffer A 5.0mLBuffer B 5.0mLBuffer C 5.0mLBuffer D350μLBuffer D稀释液 5.0mL试剂E1支试剂F1支Vc标准品4支注意事项1．Buffer A室温较低时会有部分结晶析出，溶解后加蒸馏水稀释10倍至1×Buffer A50ml。
2．Buffer D用前用Buffer D稀释液按1︰14稀释至1×Buffer D（不可冷冻，4℃可保存2个月）。
3．试剂E配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。
4．试剂F配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。
5．显色剂配制：试剂E︰试剂F︰冰乙酸＝3︰3︰2的体积比配制，4℃避光保存（冰乙酸自备）。
6．Vc标准贮备液配制：将一支Vc标准品加蒸馏水定容至5ml（Vc标准配制后当天内使用）Vc标准品工作液（0.15mg/ml）配制：取1ml贮备液加4ml蒸馏水，5倍稀释现配现用。
Vc标准品配制后见光极易分解，配制的0.15mg/ml Vc标准品工作液需30分钟内检测。
三、操作步骤试剂测定管对照管标准管1×Buffer A （mL ） 1.01.0 1.0蒸馏水（mL ）0.050.15mg/ml Vc 标准品（mL ）0.05样品（ml ）0.05Buffer B （mL ）0.10.10.1Buffer C （mL ）0.10.10.11×Buffer D （mL ）0.10.10.1用涡旋混匀器充分混匀，置37水浴40分钟显色剂（ml ）2.02.02.010min 后倒入1cm 光径比色杯中，蒸馏水调零，波长550nm 处比色。
5'-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求beijian
5＇-核苷酸酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中5’-核苷酸酶的活性。
1.1 规格具体产品规格见下表:1.2 组成成分1.2.1 试剂的组成试剂1：GOOD’S缓冲液 100mmol/L 4-氨基安替比林 2mmol/L核苷酸磷酸化酶 0.1U/ml黄嘌呤氧化酶 0.2U/ml过氧化物酶 0.6U/mlBSA 1g/L试剂2：GOOD’S缓冲液 100mmol/L5’-次黄嘌呤核苷酸 10mmol/LTOOS 0.15g/L1.2.2 校准品的组成（选配）5’-核苷酸酶（5.0～100.0）U/L该校准品为血清基质冻干校准品1.2.3 质控品的组成（选配）5’-核苷酸酶（5.0～100.0）U/L该质控品为血清基质冻干质控品校准品、质控品有批特异性，具体靶值见靶值表。
2.1 外观2.1.1 外包装完整无破损；2.1.2 试剂1：无色或淡黄色澄清透明无杂质的液体；2.1.3 试剂2：无色或黄色澄清无杂质的液体；2.1.4 校准品：白色或浅黄色冻干粉，复溶后为浅黄色溶液，无不溶物；2.1.5 质控品：白色或浅黄色冻干粉，复溶后为浅黄色溶液，无不溶物。
2.2 净含量净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在主波长546nm、副波长800nm、37℃条件下，试剂空白吸光度小于0.4；2.3.2 试剂空白吸光度变化率在主波长546nm、副波长800nm、37℃条件下，试剂空白吸光度变化率不大于0.01。
2.4 线性2.4.1 线性范围[5.0，100.0]U/L，相关系数r＞0.990。
2.4.2 线性偏差（20.0，100.0]U/L线性范围内，相对偏差不超过±10%；[5.0，20.0]U/L线性范围内，绝对偏差不超过±2.0U/L。
2.5 分析灵敏度检测浓度为67.8U/L的样本时, 吸光度变化率不小于0.01。
2.6 重复性2.6.1 试剂重复性测试高、低浓度的血清样本或质控品，重复测试10次,CV≤10%；2.6.2 校准品重复性用试剂测定1瓶校准品，重复测定10次，CV≤10%；2.6.3 质控品重复性用试剂测定1瓶质控品，重复测定10次，CV≤10%。
小鼠黄嘌呤氧化酶实验步骤
小鼠黄嘌呤氧化酶实验步骤
小鼠黄嘌呤氧化酶实验步骤可能如下：
1. 准备试剂和设备：包括小鼠组织样本、缓冲液、显色液、透明胶膜、离心机等。
2. 提取小鼠组织样本：将小鼠组织样本（如肝脏、肾脏）取出并迅速冷冻在液氮中，然后研磨成粉末。
3. 制备酶提取液：向合适的体积的缓冲液中加入适当的蛋白溶解酶，使之溶解。
4. 组织提取：将研磨好的小鼠组织样本加入已制备好的酶提取液中，均匀搅拌，然后用离心机离心，收集上清液。
5. 蛋白浓度检测：使用蛋白浓度检测试剂盒等方法测定所提取的酶样的蛋白质含量。
6. 酶活性测定：将提取的酶样液加入含有底物的试管中，进行酶活性反应。
底物可以是黄嘌呤或其他适当的底物。
7. 停酶步骤：在一定时间后，加入停酶液停止酶反应，从而保留最终的底物产物。
8. 显色步骤：将停酶后的试管中的底物产物加入显色液中，观察颜色变化，使用分光光度计测定吸光度值。
9. 数据分析：根据测定的吸光度值计算小鼠黄嘌呤氧化酶的活性，可以进行统计比较和结果分析。
请注意，以上实验步骤仅供参考，具体步骤可能因实验目的、试剂、设备等不同而有所不同，需根据实际情况进行调整。
同时，在进行实验时，应遵守实验操作规范，并注意实验设备和试剂的安全使用。
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3. 组织XOD活力（U/gprot）=（测定OD值-空白管OD值）/呈色物摩尔消光系数×（反应液总体积/取样量）×（1/光径×反应时间）÷匀浆蛋白含量（gprot/L）
七、注意点：
1.试剂一、试剂四放-20℃保存，尽量避免反复冻融。
2.组织块要用生理盐水漂洗后，滤纸吸干，称重后0℃以下可保存3个月以上。
3.血浆中XOD的检测：血浆在检测过程中容易引起混浊，需在测试前以3000-3500转/分，离心10分钟，小心吸取澄清的上清，弃去上层的脂肪与下层沉淀，若仍有混浊可反复离心。
产品简介：
产品编号产品名称产品包装产品价格
S0056谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒100次319.00元
谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit)是一种简单易行的通
过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase)活性的试剂盒。
绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中性组成部分。
细胞内也有很少量
的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。
本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
本试剂盒如果和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(S0058)配合使用，可以定量检测出样品中不含硒的
谷胱甘肽过氧化物酶。
谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用。
细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽
(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。
谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。
在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发
生明显上调或下调。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有
机醇。
如果以过氧化氢为底物进行检测，则同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的酶活性会干
扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。
本试剂盒利用了一种间接测定的方法。
谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH
产生GSSG，而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出
谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。
在上述反应中，谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此
NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
本试剂盒利用了如下的反应原理，GPx为谷胱甘肽过氧化物酶，GR为谷胱甘肽还原酶，R-OOH为过氧
化物。
本试剂盒提供的有机过氧化物试剂(t-Bu-OOH)在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应，也不会被细胞内的过氧化氢酶催化而分解。
因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。
由于t-Bu-OOH不能被不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶所催化，所以本试剂盒可以比较特异地定量检测最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
可检测组织匀浆产物、细胞裂解产物等样品中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
一个试剂盒可进行100次检测。
包装清单：
产品编号产品名称包装
S0056-1 样品匀浆液100ml
S0056-2 谷胱甘肽过氧化物酶检测缓冲液50ml
S0056-3 谷胱甘肽还原酶40μl
S0056-4 NADPH 5mg
S0056-5 还原型谷胱甘肽(GSH) 14mg
S0056-6 过氧化物试剂(t-Bu-OOH) 200μl —说明书1份
保存条件：
谷胱甘肽还原酶4℃保存，其余-20℃保存，半年有效。
NADPH溶解后宜-70℃保存，4℃可以保存一天，-20℃保存一周后NADPH会减少10%以上。
GSH在配制成溶液后，适当分装，-20℃保存。
注意事项：
本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。
如果在样品中的还原剂无法避免，例如DTT、巯基乙醇等，则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。
0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
常用的Triton X-100、Tween 20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，会影响本试剂盒的测定。
如果必须使用这些去垢剂，最好使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
为消除样品中可能含有的可以消耗NADPH的酶的干扰，可以检测不加过氧化物试剂的样品作为对照。
样品可以立即测定，也可以-70℃冻存待以后测定。
一定要严格控制反应时的温度，否则会引起较多误差。
NADPH不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
谷胱甘肽还原酶配制在接近饱和的硫酸铵溶液中，存放一段时间后容易出现硫酸铵结晶，属正常现象。
室温孵育促进晶体溶解后可继续使用。
如果有水分蒸发到管壁上，则需先离心，随后再促进晶体溶解。
如果出现盖子未盖紧导致水汽泄漏的情况，则需补加蒸发掉的水量，然后再促进晶体溶解。
可在晶体溶解后使用，但不溶解晶体直接使用也可以，此时可以使用的酶的总体积会稍稍减小一些。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。