医院检验中心中性粒细胞碱性磷酸酶染色偶氮偶联法

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碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)使用说明

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)使用说明

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)使用说明自备材料:1、载玻片、湿盒2、普通光学显微镜产品简介:碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH9.2~9.8。

此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在pH9.2~9.8的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸不萘酚,后者不偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。

该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠。

操作步骤(仅供参考):一、涂片或切片1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无需固定),水洗。

2、滴加配制好的ALP孵育液,放入湿盒中,避光孵育15~20min,水洗。

3、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min。

4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。

二、贴壁培养细胞1、取6孔板或其他容器培养的细胞,弃液,PBS清洗干净。

2、加入ALP固定液固定3min或4%多聚甲醛固定10~15min,PBS清洗。

3、滴加配制好的ALP孵育液,放入湿盒中,避光孵育15~20min,PBS清洗。

4、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min。

5、PBS清洗、镜检。

注意事项:1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。

2、培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。

血液病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性检测结果及意义

血液病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性检测结果及意义

血液病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性检测结果及意义商保军【期刊名称】《中国临床实用医学》【年(卷),期】2009(003)010【摘要】目的探讨血液病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性(NAP)检测结果及意义.方法采集250例血液病患者和50名健康人的静脉血制备血涂片,经Kaplow偶氮偶联法进行NAP细胞化学染色,显微镜油镜观察100个成熟中性粒细胞,以五级积分值记录结果.结果①本组正常健康人群中男性的NAP阳性率为26.9%,积分为31.5;女性NAP阳性率为25.0%,积分为39.5.对正常健康人群中男性和女性NAP 阳性率和积分结果进行比较,差异均无统计学意义(P>0.05);②急性淋巴细胞白血病(ALL)、类白血病反应(LR)、再生障碍性贫血(AA)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、真性红细胞增多症(PV)6组疾病NAP积分明显高于对照组(P <0.01);慢性髓细胞白血病(CML)、恶性组织细胞病(MH)、骨髓增生异常综合征(MDS-RAEBT)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)4组疾病NAP积分明显低于上述6组疾病和对照组(P<0.01);AML患者NAP积分略低于对照组,但差异无显著性(P>0.05),与ALL比较差异有高度显著性(P<0.01).结论 NAP活性检测是血液疾病中的重要诊断及鉴别诊断的指标.【总页数】2页(P94-95)【作者】商保军【作者单位】450003,郑州,河南省人民医院血液病研究所【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.中性粒细胞碱性磷酸酶活性在红细胞增多症鉴别诊断中的临床意义2.脑脊液中性粒细胞碱性磷酸酶活性检测在104例脑膜炎患儿鉴别诊断中的意义3.215例血液病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性结果分析4.中性粒细胞碱性磷酸酶活性在儿童长期发热鉴别诊断中的意义5.血液病患者血浆凝血因子X活性测定的临床意义因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

乙二胺四乙酸-K2对偶氮偶联法测定中性粒细胞碱性磷酸酶的影响研究

乙二胺四乙酸-K2对偶氮偶联法测定中性粒细胞碱性磷酸酶的影响研究

乙二胺四乙酸-K2对偶氮偶联法测定中性粒细胞碱性磷酸酶的
影响研究
赵志红;刘琳;李紫英
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2009(016)008
【摘要】中性粒细胞碱性磷酸酶测定原理根据显色方法分为偶氮偶联法和钙钻法。

后者因操作繁琐、耗时长,且有难闻气味而被淘汰,目前国内广泛应用的是偶氮偶联法。

有作者曾报道可以用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血替代新鲜血应用钙钴法测定碱性磷酸酶(NAP),EDTA对偶氮偶联法测定NAP的影响尚未见报道。

【总页数】2页(P647-648)
【作者】赵志红;刘琳;李紫英
【作者单位】河南省洛阳市中心医院,471000;河南省洛阳市中心医院,471000;河南省洛阳市中心医院,471000
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.乙二胺四乙酸-K2依赖性假性血小板减少症一例 [J], 苏庆军;王一男;陈建国
2.15%乙二胺四乙酸-K2致血小板计数严重失误1例 [J], 唐玉蓉
3.金属络合衍生-高效液相色谱法测定洗涤用品中乙二胺四乙酸和氮川三乙酸 [J], 夏泽敏;王继才;谭建华;李鑫宇;庞学斌;杨淡梅
4.RP-HPLC法测定诺氟沙星葡萄糖注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量 [J], 荣娜娜;李玉凤;任李玥;胡月新
5.RP-HPLC法测定诺氟沙星葡萄糖注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量 [J], 荣娜娜;李玉凤;任李明;胡月新
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中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法

中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法

中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法[原理]中性粒细胞胞浆中的碱性磷酸酶在碱性环境中,能水解磷酸萘酚钠,释放的萘酚与重氮盐作用生成不溶性有色的偶氮染料,定位于胞浆中。

[试剂](1)固定剂,为40%甲醛25m1,加无水乙醇至100m1。

(2)丙二醇缓冲液。

①贮备液(0.2mol/L 2—氨基-2-甲基-1,3-丙二醇液)为2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇10.5g,蒸馏水加至500ml。

②应用液(0.05mol/L pH9.75),为0.2mol/L贮备液25m1, o.1mol/L盐酸 5m1,蒸馏水加至100m1。

(3)基质孵育液pH9.5-9.6(用前临时配制),α—磷酸萘酚钠20mg溶于0.05mol/L丙二醇缓冲液20m1,再加坚牢蓝RR(或坚牢紫酱)20mg,混合后用滤纸过滤,立即应用。

(4)10g/l亮绿。

[操作](1)新鲜血片或骨髓片用4-10℃的固定剂固定30秒。

(2)、在涂片上滴加新配过滤的孵育液,在室温下作用10-15分钟。

(3)水洗,10g/L亮绿复染2分钟。

(4)水洗,晾干镜检。

[结果观察](-):阴性反应。

(+):胞浆中含少量紫黑色,无紫黑色颗粒或红色物质。

(++):胞浆中含有中等量紫黑色颗粒或呈弥漫红色。

(+++):胞浆中有丰富的紫黑色颗粒或弥漫较深红色。

(++++):有极丰富的大紫黑色颗粒或弥漫深红色。

[参考值]中性粒细胞碱性磷酸酶活性积分值为10—50分。

[临床意义]基本同改良Gomor;氏钙钻法。

编写:谢平制定日期:2011.12.1[附注](1)若涂片不能及时测定,可固定干燥后放冰箱4℃保存。

(2)在甘油磷酸钠和巴比妥钠应临用前称取,分别为0.38和0.28,再加蒸馏水20m1即配成。

配制后的β-甘油磷酸钠不宜久放。

(3)涂片从孵育液拿出可不用水洗,直接加硝酸钻,但与硝酸钴作用后,应反复水洗,以免残留的硝酸钻与硫化胺作用后使整个涂片变黑,造成假阳性。

医学检验基础知识——血细胞化学染色的临床应用之碱性磷酸酶染色(NAP)

医学检验基础知识——血细胞化学染色的临床应用之碱性磷酸酶染色(NAP)

医学检验基础知识——血细胞化学染色的临床应用之碱性磷酸酶染色(NAP)对医疗卫生事业单位考试医学检验学的部分知识做了汇总,今天我们来学习医学检验基础知识-血细胞化学染色的临床应用之碱性磷酸酶染色(NAP),希望对大家的复习有所帮助。

(1)原理(偶氮偶联法):血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.4~9.6的条件下将基质液中的-磷酸萘酚钠水解,产生-萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之处。

(2)结果判断:阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀。

①(-)灰褐色沉淀,0分。

②(+)胞质出现灰褐色沉淀,1分。

③(++)胞质深褐色沉淀,2分。

④(+++)胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀,3分。

⑤(++++)胞质中完全充满棕黑色颗粒状沉淀,4分。

(3)正常血细胞的染色反应①除巨噬细胞可呈阳性反应外,其他血细胞均呈阴性反应。

②成熟中性粒细胞碱性磷酸酶积分值的计算:在油镜下,计数100个成熟中性粒细胞。

分别记录其分级情况,全部阳性反应的细胞之和即为阳性率,将所有阳性反应细胞均以+ 级表示后计算其总积分值。

中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)积分正常参考值是:7-51分。

(4)临床意义①生理变化:新生儿、在应激状态下紧张、恐惧、激烈运动等NAP活性可增高。

月经周期中经前期增高,经后降低,经后期恢复。

妊娠2~3个月的NAP积分值轻度增高,以后逐月增高,分娩时达高峰。

②病理性变化:见于可用来鉴别细菌性感染和病毒性感染、鉴别慢粒和类白血病反应及观察慢粒疗效的指标、鉴别急粒和急淋、鉴别阵发性睡眠性血红蛋白尿和再生障碍性贫血等。

例题:鉴别慢性粒细胞白血病与类白血病反应更好的选择( )。

A.酸性磷酸酶染色B.铁染色C.NAP染色D. -NBE染色E.PAS染色答案:C。

血液学检验2.2.5 中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)

血液学检验2.2.5 中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)

临床意义(三)
(1)细菌性感染与病毒性感染的鉴别:前者 NAP积分增高,后者降低。 (2)类白血病反应与慢粒的鉴别:前者NAP 积 分 增 高 , 后 者 降 低 , 常 为 零 , 缓 解 期 NAP 积分值上升为正常。
(3)急性白血病类型鉴别: 急性粒细胞白血病NAP 积分值减低 急性淋巴细胞白血病NAP积分值增高 急性单核细胞白血病时NAP 积分值一般减低,
4.中性成熟粒细胞(++++);5.淋巴细胞 (-)
例:某病人计数100个成熟中性粒细胞, 其结果如下:
反应程度
个数
0
10
+
20
++
40
+++
20
++++
10
100个
阳性率为90%,积分为200。
积分 0 20 80 60 40
200分
正常参考值
碱性磷酸酶阳性主要见于成熟中性粒细胞 男性:阳性率3%-5%,积分3-73 女性:阳性率15%--70%,积分17-145
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
改良Gomori钙钴法 偶氮偶联法
(一)改良Gomori 钙钴法:
原理
二、偶氮偶联法(Kaplow)
中性粒细胞胞质中的碱性磷酸酶在PH9.6条件 下能水解磷酸萘酚钠,释放出磷酸和萘酚,后 者与重氮盐偶联形成不溶性的有色偶氮染料、 定位于细胞质酶所在的部位。
坚牢蓝RR(紫黑色)和坚牢紫酱GBC(棕红色)
临床意义(一)
NAP活性增高: 见于化脓性感染、急性淋巴细胞性白血病、再
生障碍性贫血、类白血病、多发性骨髓瘤、浆 细胞白血病、恶性淋巴瘤、骨髓纤维化等。

中性粒细胞碱性磷酸酶染色方法的比较

陈海波 , 王 莹莹
海南省农垦 总医院检验科 , 海南 海 口 5 7 0 3 1 1
摘要 :目的
比较 3种 中性粒 细胞碱性磷酸酶 ( N A P ) 染色方 法 的阳性率和 阳性指数 , 选择 一种染 色效果 好、 技 术范 围
宽 的方法用 于临床 。方法 根据 N A P活性水平分为低 、 中、 高组 , 选择 6 1 例 高 阳性组 、 1 0 0例正常 阳性组 、 5 1 例 低 阳性 组; 3组患者分别采用钙 一 钻法 、 未取代萘酚法 、 取代萘酚法 3种方法染色 , 记 录阳性率 和阳性指数并作统计学分 析。结
关键 词 :中性粒 细胞碱性磷酸酶 ; 染 色方法; 阳性率 ; 阳性指数
中图分 类号 : R 4 4 6 . 1
文献标识码 : A
文章编号 : 1 0 0 4—8 6 8 5 ( 2 0 1 5 ) 0 8—1 2 0 2— 0 3
Co mp a r i s o n o f n e u t r o p h i l a l k a l i n e p h o s p h a t a s e s t a i n i n g me t h o d
CHE N HaC l i n i c a l L a b o r a t o r y,Ha i n a n No n g k e n G e n e r a l Ho s p i t a l ,Ha i k o u,Ha i n a n 5 7 0 3 1 1 ,C h i n a
Ab s t r a c t : Ob j e c t i v e T o c o m p a r e t h r e e k i n d s o f n e u t r o p h i l a l k li a n e p h o s p h a t a s e ( N A P )s t a i n i n g p o s i t i v e r a t e m e t h o d a n d p o s i —

中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)

中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)预期用途:供骨髓细胞图片及血液细胞图片染色检查检验原理:本染色方法为偶氮偶联法,在PH9.2-9.8的碱性环境下,细胞中的碱性磷酸酶能将底物磷酸萘酚AS-BI水解,生成α-萘酚,再以稳定的重氮盐与萘酚偶联生成不溶性有色偶氮染料沉淀,定位于细胞浆中主要组成成分:储存条件:本试剂盒应储存于2℃-8℃低温环境。

样本要求:新鲜骨髓细胞涂片及血液细胞涂片(切勿使用抗凝血)检验方法:一、工作液配制(一)、浸染工作液配制(一份浸染工作量是43ml,至少可同时放置8-10张涂片)1、重氮盐溶液的准备:B液1ml与C液1ml彻底混匀,静置2分钟;2、染缸(自备染液缸)内加入蒸馏水40ml;3、将重氮盐溶液倒入染缸内,混匀4、再加D液1ml入染缸内,轻轻混匀(二)滴染工作液配制(一份滴染工作液是2.15ml)使用器材:一次性塑料试管、微量移液器,一次性吸嘴,滴管。

操作:取B液50μl,C液50μL混匀,静置2分钟,再加蒸馏水2ml,D液50μl,混匀,二、染色步骤1、干燥涂片,滴加A液固定剂(用前恢复室温,并充分摇匀)固定约30-60秒,蒸馏水冲洗,甩干;2、滴加或浸入工作液15分钟,蒸馏水冲洗2-3分钟,甩干3、E液(使用前务必摇匀!)复染1-2分钟,蒸馏水冲洗,干后镜检4、计算积分:反应结果以积分值报告,油镜下计数100个中性杆状核、分叶核粒细胞,分别记录其分级情况,所有阳性细胞积分相加即为积分。

如:参考范围:阳性反应主要见于成熟中性粒细胞(杆状及分叶核粒细胞)中,健康成人一般的中性粒细胞碱性磷酸酶积分值为13-130,但各个实验室条件各异,实验室应有自己的参考值。

检验结果的解释NAP阳性颗粒为蓝色检验方法的局限性仅限于形态学染色观察使用注意事项1、5Tests只限滴染使用2、使用前应恢复室温,用前请摇匀试剂;B,C液请充分混匀,所用容器必须洁净,工作液颜色为金黄色3、应采用新鲜涂片作NAP染色,放置过久则酶的活性会降低;使用抗凝血涂片染色阳性结果不稳定4、工作液配制以后应在十分钟以内使用5、需用感染发热病人或正常人外周血涂片作为阳性对照6、每次试剂使用后,请迅速盖好密封保存,以免挥发及影响效果7、本品应由专业人士使用及进行结果的判读7、使用前应详细阅读使用说明书及产品包装标识,在有效期内使用,并做好个人卫生防护8、生产批号、效期见外包装9、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。

中性粒细胞碱性磷酸酶染色偶氮偶联法-检验科临检室作业书

中性粒细胞碱性磷酸酶染色偶氮偶联法1.实验原理在PH9.2-9.8的缓冲溶液中,细胞中的碱性磷酸酶能将底物磷酸苯酚钠水解,生成α-苯酚和磷酸钠,再以稳定的重氮盐与酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。

2.标本采集2.1病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史,凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎症或有畸形,晚期妊娠的妇女作骨穿时要慎重。

2.2标本种类:新鲜抽取的骨髓穿刺液。

2.3标本采集要求:2.3.1高压消毒的穿刺针,一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器。

2.3.2临床上首选穿刺部位为髂后上棘,翻身困难,需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺部位。

小于3岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位。

3.标本储存:滴加95%乙醇盖满血膜10分钟,水洗待干,室温避光保存。

4.标本运输:室温运输。

5.标本拒收的标准:溶血,稀释标本不能作测定。

6.试剂:6.1试剂名称:中性粒细胞碱性磷酸酶染色试剂。

6.2试剂生产厂家:上海太阳生物技术公司6.3试剂组成:试剂1.固定剂:甲醛10ml加甲醇90ml混合,2℃~8℃避光保存,有效期6个月。

试剂2.贮存液:200mgα-磷酸苯酚钠(AS-BI)溶于1mlN-N二甲基甲酰胺+200mlTris-Hcl缓冲液,2℃~8℃避光保存。

试剂3.Tris-Hcl缓冲液,Tris4.85g溶于200ml蒸馏水,加浓Hcl1滴~2滴,PH固定为9.1。

试剂4.作用液:取贮存液2ml于温水中30℃预热5分钟加坚固蓝BB盐2mg,混合。

试剂5.中性红溶液:2℃~8℃避光保存。

7.操作步骤:7.1新鲜干燥涂片滴加固定剂作用2~5秒,水洗,待干。

7.2滴加作用液室温染色15~20分钟,水洗,待干。

7.3中性红复染3分钟,水洗,干后镜检。

8.结果判断:阳性反应,棕黑色颗粒定位于胞桨中。

在油镜下计数100个中性粒细胞,求出碱性磷酸酶阳性细胞百分比,并求出积分。

9.临床意义:NAP的积分,参考值为35-70分。

医院检验科完整SOP程序文件

C1、HAVAbIgM标准操作规程
C2、PreS1标准操作规程
C3、HBSAg标准操作规程
C4、HBSAb标准操作规程
C5、HBEAg标准操作规程
C6、HBcAb标准操作规程
C7、HBcAbIgM标准操作规程
C8、HCVIgG标准操作规程
C9、HCVIgM标准操作规程
C10、HDVAg标准操作规程
C11、HDVIgG标准操作规程
附件七临床输血申请单
附件八输血记录单
附件九输血不良反应回报单
一、科室设置
1、科室各实验室设置及负责人
2、科室人员结构
姓名
性别
出生
年月
学历
毕业院校
参加工作时间
现任职称
手机
3、科室平面图
4、检验中心工作流程图
住院病人就诊检验流程
门诊病人就诊检验流程
二、检验中心工作职责
(一)检验中心各级人员工作职责
1、检验中心主任、副主任工作职责
D26、TdT(MRD白血病残留病灶)测定标准操作规程
D27、血小板糖蛋白测定标准操作规程
D28、CD23(Ige低亲和力受体)测定标准操作规程
D29、CD95 / Fas测定标准操作规程
D30、FCM试剂配制标准操作规程
D31、Bcl-2测定标准操作规程
D32、ANNEXIN V测定标准操作规程
D33、P53测定标准操作规程
D10、铁染色标准操作规程
D11、酸性磷酸酶(ACP)染色标准操作规程
D12、红细胞渗透脆性试验标准操作规程
D13、自体溶血试验标准操作规程
D14、血清酸化溶血试验(Ham试验)标准操作规程
D15、热溶血试验(定性)标准操作规程
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医院检验中心中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP) 染色偶氮偶联法[ 原理]
中性粒细胞胞浆中的碱性磷酸酶在碱性环境中,能水解磷酸萘酚钠,释放的萘酚与重氮盐作用生成不溶性有色的偶氮染料,定位于胞浆中。

[ 试剂]
(1)固定剂,为40 %甲醛25m1,加无水乙醇至100m1。

(2)丙二醇缓冲液。

①贮备液(0 . 2mol/L 2—氨基-2-甲基
-1 ,3- 丙二醇液) 为2- 氨基-2- 甲基-1 ,3- 丙二醇10 .5g,蒸馏水加至500ml。

②应用液(0.05mol/L
pH9.75),为0.2mol/L 贮备液25m1,o.1mol/L 盐酸5m1 ,蒸馏水加
至100m1。

(3)基质孵育液pH9.5-9 . 6(用前临时配制),a—磷酸萘
酚钠20mg溶于0.05mol/L丙二醇缓冲液20m1,再加坚
牢蓝RR(或坚牢紫酱)20mg,混合后用滤纸过滤,立即应用
(4)10g/l 亮绿
[ 操作]
(1)新鲜血片或骨髓片用4- 10C的固定剂固定30秒
(2)在涂片上滴加新配过滤的孵育液,在室温下作用
10-15 分钟。

(3)水洗,10g/L 亮绿复染 2 分钟。

(4)水洗,晾干镜检。

[ 结果观察]
(-) :阴性反应。

(+) :胞浆中含少量紫黑色,无紫黑色颗粒或红色物质。

(++) :胞浆中含有中等量紫黑色颗粒或呈弥漫红色。

(+++) :胞浆中有丰富的紫黑色颗粒或弥漫较深红色。

(++++) :有极丰富的大紫黑色颗粒或弥漫深红色。

[ 参考值]
中性粒细胞碱性磷酸酶活性积分值为10—50 分。

[ 临床意义]
基本同改良Gomo;氏钙钻法。

[ 附注]
(1)若涂片不能及时测定,可固定干燥后放冰箱4C保存。

(2)在甘油磷酸钠和巴比妥钠应临用前称取,分别为0.38 和
0. 28,再加蒸馏水20m1即配成。

配制后的B -甘油磷酸钠
不宜久放。

(3)涂片从孵育液拿出可不用水洗,直接加硝酸钻,但与硝酸
钴作用后,应反复水洗,以免残留的硝酸钻与硫化胺作用后使整个涂片变黑,造成假阳性。

(4)每次染色时,应同时做 1 份感染思者的血片为阳性对照,
以增加结果的可靠性。

对照片可 1 次涂几十片,固定干燥
后,放冰箱可保存几个月。

(5)硫化胺试剂本身黄色很谈,若变深黄色,应及时更换。

试剂放置时间越长黄色越深。

这说明硫大量析出,硫
离子浓度大大减少。

易引起假阴性。

这是试验成功与
否的关键。

操作时释放的H2S较臭,应注意室内通风
(6)送检时应送血片或骨髓片至少两张,以备复查。

涂片
要厚薄均匀,太厚的涂片会造成NAP积分偏高。

(7)不要与生化碱性磷酸酶(AKP) 混淆,而错送静脉血。

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