蛋白质制备多肽的研究概况
蛋白质和多肽的结构与功能研究

蛋白质和多肽的结构与功能研究蛋白质和多肽是生命体的重要组成部分,它们不仅构成细胞的重要内容物,还参与了生命的各种代谢和功能调节。
蛋白质和多肽的结构与功能研究一直是生命科学的核心领域之一,其研究涉及到生命起源、生物合成和分解、生物学功能和疾病调节等方面。
本文介绍了蛋白质和多肽的结构特点以及其在生命科学中的重要性和应用。
蛋白质是由氨基酸分子组成的高分子化合物,分子量通常大于5000,分子结构复杂、多样性高,具有不同的生物学功能。
蛋白质的基本结构单元是氨基酸,其中包含了20种常见的氨基酸,它们的侧链结构和不同的氨基酸序列决定了蛋白质的结构和功能。
蛋白质的结构可以分为初级、二级、三级和四级结构四个层次。
初级结构指的是氨基酸的线性排列方式,即蛋白质的氨基酸序列。
在氨基酸序列中,某些特定的氨基酸连接方式和位置可以决定蛋白质的二级结构,如α-螺旋、β-折叠和无规卷曲等。
二级结构是由氢键和范德华力等相互作用而形成的具有稳定的结构单元。
三级结构是由氢键、离子键、疏水作用和范德华力等相互作用而形成的整体折叠结构,在蛋白质的结构和功能中都起着重要的作用。
四级结构指的是多个具有三级结构的多肽链通过非共价键的相互作用而形成的复合体,如酶分子和抗体分子等。
蛋白质的结构和功能密切相关,二级和三级结构具有稳定性和动态性的特点,主要参与了蛋白质的不同功能和调节过程。
多肽是由2-50个氨基酸组成的低分子平均相对分子质量低于5000的化合物。
多肽也是生物体内的重要代谢产物,具有不同的结构和生物学功能。
多肽的结构主要包括线性结构、环形结构和折叠结构。
其中,线性多肽通常由丝氨酸、胱氨酸等氨基酸组成,其结构是直链型,可以通过不同的修饰反应(如酯化、掺杂)得到多种不同的化合物。
环肽是指由两个氨基酸之间的肽键形成的环状化合物。
环肽的稳定性和生物活性都较高,因此在医学和生物技术领域有广泛应用。
折叠多肽是由多个氨基酸组成的立体空间结构,它表现出了与许多酶分子和蛋白质分子相似的特性,因此具有非常广泛的应用前景。
7.2 蛋白质与多肽类药物的制备

3、根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋自质
蛋白质的溶解度受溶液的pH、离子强度、溶剂 的电解质性质及温度等多种因素的影响。在同一特 定条件下,不同蛋白质有不同的溶解度,适当改变 外界条件,可以有选择地控制某一种蛋白质的溶解 度,达到分离的目的。
属于这一类的分离方法有蛋白质的盐溶与盐析 法、结晶法和低温有机溶剂沉淀法。 乙醇和丙酮是有机溶剂沉淀法中最常用的有机 溶剂,由于丙酮的介电常数小于乙醇,故丙酮沉淀 能力比乙醇强。
10、根据酶对蛋白质的作用来纯化蛋白质
对于酶蛋白——超氧化物歧化酶(SOD)的提取, 因SOD能抵抗蛋白酶的水解,可用蛋白水解酶降解其 他蛋白质,以便于SOD进一步的纯化。 γ—球蛋白、ACTH在分子中有活性中心,可用蛋白 酶水解切去与生物活性无关的分子部分,保留活性分 子片断,使产品纯化。 对于无胰岛素生物活性的胰岛素原,用蛋白水解 酶可切去胰岛素原分子中的C-肽,使胰岛素激活。 一些活性多肽常与其他蛋白质分子结合而不呈现活 性或不能够被提取,用蛋白水解酶可以使其与其它蛋 白质解离,恢复其生物活性和在溶液中的正常性质
7.2 多肽及蛋白质类药物的生产方法
一、蛋白质类药物的分离与纯化
(一)材料选择
蛋白质类药物的原料来源有动植物组织和微生 物等,原则是要选择富含所需蛋白质、多肽成分的、 易于获得和易于提取的无害生物材料。
对天然蛋白质类药物,为提高质量、产量和降低 生产成本,对原料的种属、发育阶段、生物状态、 来源、解剖部位、生物技术产品的宿主菌或细胞都 有一定的要求,了解这可使分离纯化工作事半功倍。
4、根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质 离子交换剂作为一种固定相,本身具有正离子或 负离子基团,它对溶液中不同的带电物质呈现不同的 亲和力,从而使这些物质分离提纯。 蛋白质、多肽或氨基酸具有能够离子化的基团。 对蛋白质的离子交换层析,一般多用离子交换纤维和 以葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等为骨 架的离子交换剂。优点:蛋白质吸附容量较大、流速 较高、分辨率较高等。 对已知等电点的物质,在pH高于其等电点时, 用阴离子交换剂,在低于其等电点时,用阳离子交换 剂。
多肽和蛋白质药物口服吸收机制及策略的研究进展

在研究方法上,多肽和蛋白质药物口服吸收机制及策略的分析主要依赖于体 外实验、体内实验和数学模型等手段。体外实验包括对药物理化性质的分析、药 物在模拟胃肠道环境中的稳定性评估等;体内实验包括药代动力学分析、药物分 布和排泄等;数学模型则可以对药物吸收过程中的各种因素进行量化分析,有助 于深入理解吸收机制。
(1)调节细胞功能:多肽类药物可以调节细胞生长、分化、凋亡等过程, 从而达到治疗疾病的目的。
(2)抑制酶活性:一些多肽类药物可以抑制特定酶的活性,从而降低疾病 的发生和发展。
(3)调节免疫反应:多肽类药物可以调节免疫反应,包括细胞免疫和体液 免疫,从而达到治疗免疫相关疾病的目的。
3、多肽类药物的临床应用
在吸收机制分析方面,研究者们已明确了多种吸收途径,如淋巴途径、细胞 旁路途径和跨细胞途径等。这些途径在药物的吸收速度和程度上有着不同的影响。 例如,淋巴途径可以提高药物的生物利用度,而细胞旁路途径则可以迅速地将药 物分布到组织中。对于跨细胞途径,研究者们正在深入探讨其具体机制,以便为 药物设计和优化提供更多指导。
为确保口服蛋白多肽类药物制剂的稳定性,需在制剂制备过程中建立严格的 质量控制体系。一方面,要原料药的选取,保证原料药的质量和稳定性;另一方 面,要采用合适的制剂工艺和稳定剂,以延缓药物在储存和使用过程中的降解。 同时,应重视杂质的排除,防止其对药物疗效和安全性的影响。
临床试验是评价口服蛋白多肽类药物制剂疗效和安全性的关键环节。应遵循 国际通用的GCP(药物临床试验质量管理规范)原则,设立合理的试验方案,明 确评价标准,并采用适当的统计学方法进行分析。在试验过程中,要确保受试者 的权益和安全,同时密切不良反应的发生情况,以便对药物进行全面评估。
多肽类药物可根据其来源、功能和结构进行分类。根据来源,多肽类药物可 分为天然多肽、合成多肽和重组多肽。根据功能,多肽类药物可分为细胞因子抑 制剂、神经递质抑制剂、酶抑制剂等。根据结构,多肽类药物可分为环状多肽、 线状多肽和嵌合多肽。
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蛋白质制备多肽的研究概况摘要:近几年来,众多学者致力于此方面的研究,开发出了多种动植物蛋白资源多肽食品。
多肽具有多种重要的生理功能:营养平衡作用、抗溃疡、抗风湿、类胰岛素作用、降血脂、调节血压、提高免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老等作用。
目前利用天然蛋白水解法生产活性肽应用广泛。
本文论述了不同来源的蛋白质水解制备肽的研究应用进展。
关键词:蛋白质;多肽;应用;功能蛋白质是人体必需的营养成分之一,FAO/WHO规定每人每天应摄入蛋白质70~75 g,而我国人民实际摄入量只有65 g,在我国人民的膳食结构中,碳水化合物所占比重较大,而蛋白质所占比重较小,因此开发食品蛋白资源,改善人民膳食结构,提高我国人民蛋白质摄入数量和质量是一项十分紧迫的任务。
将难于被人体吸收的食品蛋白质水解成易于被吸收的多肽是完成上述任务的关键。
多肽具有以下特点。
首先,多肽是信息的使者,可引起多种生理活动和调节生化反应。
其次,生物活性高, 1×l0-7mol/L就可发挥活性。
其三,分子小,结构易于改造,较易人工化学合成。
其四,透过多肽的片断可以深入研究蛋白质的性质,并且为改变和合成新的蛋白质提供基础材料。
多肽功能是多方面的:营养平衡作用、抗溃疡、抗风湿、类胰岛素作用、降血脂、调节血压、提高免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老等作用。
由于多肽具有多种重要的生理功能,因此人们一直热衷于多肽的结构和功能研究,研究方法也是层出不穷。
1 蛋白质水解肽的制备蛋白水解方式主要有化学水解和酶水解。
化学水解是利用强酸强碱水解蛋白,虽然简单价廉,但由于反应条件剧烈,生产过程中氨基酸受损严重,L-氨基酸易转化成D-氨基酸,形成氯丙醇等有毒物质,且难以按规定的水解程度控制水解过程,故较少采用;而生物酶水解是在较温和的条件下进行的,能在一定条件下定位水解分裂蛋白质产生特定的肽,且易于控制水解进程,能够较好的满足肽生产的需要。
反应产物与原料蛋白具有相同的氨基酸组成,并具有特殊的理化性能与生理功能,成为蛋白制品的发展方向[1-2]。
微生物发酵生产蛋白质与多肽的研究进展

微生物发酵生产蛋白质与多肽的研究进展摘要:微生物发酵、基因工程等相关技术的发展,激发了科研机构和个人对蛋白质和多肽的研究。
微生物发酵工艺在生产取得惊人的效益。
本文对近年来微生物发酵生产蛋白质和多肽,原料资源的开发与应用、生产技术和微生态制剂等产品研究成果及发展进行总结与分析。
关键词:微生物、发酵、多肽、蛋白质前景:随着技术的发展和社会需求的增长,近代生物工业已由糖分解生产简单化合物转入复合化合物的生物合成阶段.近代人生物工业发展规模的日益扩大,面临自然资源的匮乏问题,迫切需要开辟原料新资源,利用纤维、石油甚至空气等资源代粮发酵生产各种产品取得了成功。
这一研究进展改变了发酵工艺对原料依赖。
而且,微生物发酵技术生产的啤酒、酱油、酒精、青霉素、蛋白酶、干扰素、白介素、单细胞蛋白等产品已经深入到国民经济各个部门。
随着对纤维素水解研究的深入,人们发现取之不尽的纤维素资源代替粮食发酵生产各种产品和能源物质取得了成功。
研究表明,有些细菌可以固定大气中的氮、碳、空气来生产来生产蛋白质。
这些研究对于开辟人类未来粮食新资源有重要意义。
可以说,,微生物发酵技术有着广阔的发展前景,是具有生命力的既古老而又年轻的工艺。
1 微生物发酵生产多肽及蛋白质的获取微生物发酵生产多肽及蛋白质是利用微生物的生化代谢反应将植物体或动物组织中的大分子蛋白转化成小分子蛋白活性肽或小分子蛋白质,并通过微生物的代谢和发酵条件生产各种氨基酸排序和分子质量大小不同的生物活性肽及蛋白质。
2 微生物发酵生产多肽及蛋白质的应用多肽现已广泛应用于医药、化妆品、食品等行业。
2.1 微生物发酵生产蛋白质的应用通过发酵可获得大量的微生物菌体──单细胞蛋白。
单细胞蛋白食品具有高蛋白、低脂肪等优点。
功能肽除了具有一般蛋白质的营养作用外,对人体还具有非常重要的不可替代的调节作用,这种作用几乎涉及到人体的所有生理活动。
研究发现,一些调节人体生理机能肽的缺乏,会导致人体机能的转变。
多肽和蛋白质相互作用的研究进展

多肽和蛋白质相互作用的研究进展多肽和蛋白质是生命体内最为重要的分子,它们承载着生物系统的许多功能和生物过程。
多肽和蛋白质之间的相互作用研究一直是生物学和生物化学领域中的热门方向之一。
在过去的几十年间,研究人员们利用各种分析方法逐步揭示了多肽和蛋白质之间的相互作用机制,为相关领域的发展做出了重大贡献。
一、多肽和蛋白质的相互作用机制多肽和蛋白质之间的相互作用涉及到众多的分子间相互作用。
其中,最为重要的是疏水相互作用、静电相互作用和氢键相互作用。
疏水相互作用即由于两个分子的亲水性差异,从而使其在氢键势垒下形成一股向疏水性分子的趋向力。
静电相互作用则是说两个分子间电荷的相互吸引或排斥,这种吸引或排斥是由分子中带电荷的基团对其他分子所带电荷的基团产生的电场相互作用而形成的。
氢键相互作用则是指两个分子间氢键的相互作用。
对于多肽和蛋白质之间的相互作用,这几种相互作用共同作用,相互牵制,从而形成特定的空间构象。
二、多肽和蛋白质的相互作用研究方法目前,研究人员们常用的多肽和蛋白质之间的相互作用研究方法主要有表面等离子共振(SPR)、循环双聚体结合分析法(CDR)、荧光熄灭和荧光共振能量转移(FRET)等方法。
SPR是目前最流行的研究多肽和蛋白质相互作用的方法之一,通过监测分子在反应过程中与金属表面间距离的改变,它可以非常精确地测量蛋白质与多肽之间的相互作用强度。
CDR的原理是在组合了多肽和蛋白质的循环系统中,通过改变循环的 pH 值等条件,来观察多肽和蛋白质之间的相互作用。
荧光熄灭和荧光共振能量转移法是利用荧光标记来测定多肽和蛋白质之间的相互作用,其中荧光共振能量转移法可以同时测量分子之间的距离和相互作用强度。
三、多肽和蛋白质的相互作用在生物科学领域的应用多肽和蛋白质之间的相互作用,在生物医学、药物研究、食品添加剂等领域中都有着重要的应用价值。
在生物医学领域,相关研究可以帮助人们更好的理解和治疗多种疾病。
例如,研究人员可以利用多肽和蛋白质之间的相互作用,为癌症患者提供更精确的治疗方案。
多肽合成研究进展

多肽合成研究进展[摘要]多肽是一类生物活性很高的物质。
本文从化学合成和生物合成两个方面综述了多肽的合成,介绍了固相合成、液相分段合成法、施陶丁格连接、天然化学连接、光敏感辅助基连接、可去除辅助基连接、化学区域选择连接、氨基酸的羧内酸酐(NCA)法、组合化学法、酶解法、基因工程法、发酵法等合成方法的原理及其优缺点,对多肽合成方法的发展及其中药资源领域的应用进行了展望,为相关研究提供参考。
多肽是一类介于氨基酸和蛋白质之间的物质,由一种或多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成。
已发现存在于生物体内的多肽达数万种多肽是一种蛋白质的结构片段,能起到蛋白质的活性基团作用,是人体新陈代谢、调节活动的重要物质。
通过研究多肽的结构与功能之间的关系,进而了解多肽中各氨基酸系列的功能。
在进行化合物的设计时,尽可能选择短肽,以便提高其生理活性,并且减少临床不良反应。
在美国FDA1999年允许大豆蛋白制品标注可以预防心血管疾病的功能之后,随着人们对多肽中各氨基酸系列功能了解的不断深人及多肽药物和保健品的持续高速发展、多肽合成技术的日益成熟,越来越多的活性多肽已被开发并广泛应用于医药领域,多肽药物的开发越来越受到人们的重视,其市场需求也在日益增加。
本文对近年来多肽的合成方法与研究进展进行综述。
1.多肽合成的分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成和生物合成。
化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。
在合成含有特定顺序的多肽时,由于合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了合成目标产物的定向性。
多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。
多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。
逐步合成简洁迅速,可用于各种生物活性多肽片段的合成。
片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。
近年,多肽液相片段合成法发展迅速,在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。
多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物及其制备方法和应用

多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物及其制备方法和应用第一部分:引言1.1 介绍多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物在当今的科学研究和生物技术领域,多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物已经成为一个备受关注的研究领域。
这种聚合物具有独特的特性和广泛的应用前景,可以在医药、食品安全和生物传感等领域发挥重要作用。
本文将深入探讨多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的制备方法、特性及其在生物领域中的应用。
1.2 关于多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的重要性随着生物技术与材料科学的不断发展,多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物在蛋白质分离、检测和生物传感领域中展现出了独特的优势。
通过对特定蛋白质分子的选择性识别和结合,这种聚合物可以提高分离和检测的灵敏度和准确性,为生物医学和生命科学研究提供了有力的支持。
第二部分:多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的制备方法2.1 分子印迹技术在多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物中的应用多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的制备涉及到分子印迹技术,这是一种通过特异性识别目标分子的方法。
在制备多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物过程中,分子印迹技术起着至关重要的作用,它可以通过分子间的特异相互作用,如氢键、范德华力、静电相互作用等,实现对目标蛋白质分子的选择性识别和结合。
2.2 制备多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的方法在制备多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的过程中,主要包括模板蛋白的选择、功能单体的设计、聚合反应、模板蛋白的去除等步骤。
选择合适的模板蛋白作为目标分子,然后设计相应的功能单体,使其能够与模板蛋白特异性结合。
接着进行聚合反应,将功能单体与交联剂聚合成聚合物,同时模板蛋白被锁定在聚合物内部。
最后通过适当的条件,将模板蛋白从聚合物中去除,得到多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物。
第三部分:多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物的应用3.1 在生物传感领域的应用多肽交联的蛋白质分子印迹聚合物在生物传感领域具有重要的应用价值。
通过对特定蛋白质分子的高效识别和检测,可以实现对生物标志物的快速、准确检测,对疾病的早期诊断和治疗提供了重要的支持。
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蛋白质制备多肽的研究概况摘要:近几年来,众多学者致力于此方面的研究,开发出了多种动植物蛋白资源多肽食品。
多肽具有多种重要的生理功能:营养平衡作用、抗溃疡、抗风湿、类胰岛素作用、降血脂、调节血压、提高免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老等作用。
目前利用天然蛋白水解法生产活性肽应用广泛。
本文论述了不同来源的蛋白质水解制备肽的研究应用进展。
关键词:蛋白质;多肽;应用;功能蛋白质是人体必需的营养成分之一,FAO/WHO规定每人每天应摄入蛋白质70~75 g,而我国人民实际摄入量只有65 g,在我国人民的膳食结构中,碳水化合物所占比重较大,而蛋白质所占比重较小,因此开发食品蛋白资源,改善人民膳食结构,提高我国人民蛋白质摄入数量和质量是一项十分紧迫的任务。
将难于被人体吸收的食品蛋白质水解成易于被吸收的多肽是完成上述任务的关键。
多肽具有以下特点。
首先,多肽是信息的使者,可引起多种生理活动和调节生化反应。
其次,生物活性高, 1×l0-7mol/L就可发挥活性。
其三,分子小,结构易于改造,较易人工化学合成。
其四,透过多肽的片断可以深入研究蛋白质的性质,并且为改变和合成新的蛋白质提供基础材料。
多肽功能是多方面的:营养平衡作用、抗溃疡、抗风湿、类胰岛素作用、降血脂、调节血压、提高免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老等作用。
由于多肽具有多种重要的生理功能,因此人们一直热衷于多肽的结构和功能研究,研究方法也是层出不穷。
1 蛋白质水解肽的制备蛋白水解方式主要有化学水解和酶水解。
化学水解是利用强酸强碱水解蛋白,虽然简单价廉,但由于反应条件剧烈,生产过程中氨基酸受损严重,L-氨基酸易转化成D-氨基酸,形成氯丙醇等有毒物质,且难以按规定的水解程度控制水解过程,故较少采用;而生物酶水解是在较温和的条件下进行的,能在一定条件下定位水解分裂蛋白质产生特定的肽,且易于控制水解进程,能够较好的满足肽生产的需要。
反应产物与原料蛋白具有相同的氨基酸组成,并具有特殊的理化性能与生理功能,成为蛋白制品的发展方向[1-2]。
生物活性肽(bioactive peptide)的生产制备有以下3种途径[3-4]:①从自然界的生物体中提取其本身固有的各种天然活性类物质;②通过蛋白质降解途径获得具有各种生理功能的生物活性肽;③应用合成方法来制备生物活性肽。
天然生物体中存在着具有各种生理功能的生物活性肽,但这些生物活性肽的提取成本较高,且其在生物体内的含量普遍很低,很难实现大规模生产;合成法虽可按人们的意愿合成任意活性肽,但成本高、副反应多且易残留有毒化合物。
目前应用最多的是天然蛋白水解法生产活性肽。
2 不同来源蛋白质制备活性肽的研究应用2.1 动物蛋白我国幅员辽阔,畜禽动物饲养量逐年增加,畜禽副产品资源丰富。
然而,畜禽副产品利用现状却不容乐观,大部分内脏、血液仍然处于初级加工状态,生化利用以提高附加值的很少。
技术、设备等投入费用限制了畜禽副产的深度利用。
2.1.1 动物血液蛋白Chang(2007)[5]将猪血红蛋白先用碱性蛋白酶Alcalase,再用复合风味蛋白酶(Flavourzyme)进行水解,水解产物的蛋白构成用SephadexG-50凝胶层析进行分析,分析了水解产物的抗氧化能力、还原能力、铁离子鳌合能力以及DPPH清除能力。
结果表明,猪血红蛋白水解产物还原能力低,但是铁离子鳌合能力以及DPPH清除能力高。
于美娟(2007)[6]用精制木瓜蛋白酶(测得活力为30万个单位)和AS1. 398中性蛋白酶两酶复合水解猪血红蛋白,水解率(DH)达24.50%,氮溶解指数(TCA-SNI)为73.52%,总氮得率为74.64%。
郭善广[7]通过复合蛋白酶(Pancreatin 胰酶:复合蛋白酶Protamex=3:1)酶解制备了猪血红蛋白酶解产物,将其产物采用活性炭吸附脱色。
脱色祛除94.36%的高铁血红素从而改善终产物的色泽。
酶解产物及脱色产物具有还原力和DPPH自由基清除能力。
2.1.2 动物肌肉及结缔组织Jae-Y oung Je等[8]采用超滤(UF)、柱层析、高效液相色谱(HPLC)等方法从明太鱼骨架蛋白酶解物中分离得到分子量为672Da、氨基酸序列为Leu-Pro -His-Ser-Gly-Tyr的多肽具有最高的抗氧化活性,用电子自旋共振法(ESR)测得其清除羟自由基能力为35%。
2005年EreshaMendis、Niranjan Rajapakse等[9]用胰蛋白酶水解巨乌贼皮肤明胶得到的水解物对脂质过氧化具有很强的抑制作用,优于α-生育酚,具有很高的清除自由基能力,其中抗氧化活性较高的2个特征性肽段为Phe-Asp-Ser-Gly-Pro-Ala-Gly-Val-Leu(880.18Da)和Asn-Gly-Pro-Leu-Gln-Ala- Gly-Gln- Pro-Gly-Glu-Arg(1241.59Da)。
同年,他们又从巨乌贼肌肉组织中酶解分离得到2段肽Asn-Ala-Asp-Phe-Gly-Leu-Asn-Gly-Leu-Glu-Gly-Leu-Ala(1307Da)和Asn-Gly-Leu-Glu-Gly-Leu-Lys(747Da)具有很高的清除自由基能力,并提出这些多肽抗氧化活性可能与疏水性氨基酸有关[10]。
SAIGA[11]用木瓜蛋白酶或actinase酶水解猪肌原纤维得到的水解产物在pH值7.1有和维生素E有相似的抗氧化能力。
首次发现酸性多肽和碱性多肽一样具有高的抗氧化能力,其抗氧化原理可能为鳌合金属离子。
Shin-IchiTogashi等[12]的研究表明紫河车蛋白提取物具有明显的抗氧化作用,并提出这一提取物的抗氧化作用不仅仅与提取物中含有的酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸等有关,还与从紫河车提取物胶原质中制得的多肽有关。
吴继卫等[13]应用中性蛋白酶( SM98011、SM97010)、碱性蛋白酶和风味蛋白酶分别水解鲨鱼、牡蛎、扇贝和毛虾,并测定了酶解液的抗氧化能力,结果表明, SM98011和SM97010蛋白酶的酶解液具有较高的抗氧化能力。
曾庆祝等[14]的研究表明,枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解扇贝边所得酶解物具有较好的羟自由基清除效果,其清除率分别为84.37%和79.93%,这二种酶解物均可提高小鼠血液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和超氧化物歧化酶(SOD)活力,并降低小鼠肝脏中丙二醛(MAD)含量。
2.1.3 酪蛋白胡文琴[15]采用正交试验设计,以羟自由基清除率为衡量指标,筛选三种蛋白酶水解酪蛋白的最佳条件。
试验结果表明,酪蛋白最佳酶解条件为木瓜蛋白酶、pH值7.5、酶浓度8%、温度45℃和时间90min,在此条件下,羟自由基清除率为71.28%,抗脂质过氧化能力为59.28%。
酶法水解动物蛋白制取抗氧化多肽起步较晚,是基于植物蛋白的基础上发展起来的[16]。
水解动物蛋白和植物蛋白相比,工艺复杂且提取效率低,但我国丰富的畜禽副产资源为这一领域提供了的原料,如何提高酶法水解动物蛋白的效率是亟待攻克的难题。
总之,酶法水解动物蛋白制取抗氧化多肽,在我国是一个具有挑战性的和应用前景的领域。
2.2 大豆蛋白大豆肽是经蛋白酶作用后,再经特殊处理而得到的大豆蛋白的酶水解产物。
水解过程:完整蛋白质→大分子肽→小分子肽→游离氨基酸。
大豆肽通常是由3-6个氨基酸组成的低肽混合物,相对分子量低于1000,主要分布在300-700范围内,其氨基酸组成基本与大豆蛋白一样,必需氨基酸比例平衡,含量丰富,但大豆肽还有不同于大豆蛋白的特性。
因此,大豆肽在食品工业中应用非常广泛。
2.2.1应用于营养疗养食品蛋白质在人体内酶解时,并非完全将其水解成氨基酸,而是大部分停留在多肽状态,多肽可以由肠道直接吸收,因为人体肠道中存在着一个不同于氨基酸转运系统的特殊多肽转运系统。
此体系能直接将小分子肽转运至小肠粘膜上的内皮细胞内而迅速被消化吸收。
其吸收速度为混合氨基酸制剂的2~2.5倍。
2.2.2应用于功能和保健食品大豆肽能在人体内与胆酸结合,具有降低人体血清胆固醇、降血压和减肥功能[17]。
每日食用30~40g大豆肽,人体内胆固醇和甘油三酯的水平均明显降低。
大豆肽能阻碍肠内胆固醇的再吸收,并促进其排出体外。
为此,大豆肽可用于生产具有降胆固醇、降血压、预防心血管系统疾病、肥胖病蛋白患者蛋白补给等功能的保健食品,以及婴幼儿奶粉、代奶粉和甜点心等非致敏性保健食品[18]。
2.2.3应用于运动员食品大豆肽易于消化吸收,能迅速给机体提供能量,促进脂质代谢和恢复体力,故可用于运动食品。
大豆肽制成的强化运动员饮料,可明显增强运动员的体力和耐力,并迅速消除肌肉疲劳,恢复体力。
2.2.4应用于发酵食品大豆肽能促进微生物的生长发育和代谢,已被广泛地应用于发酵工业。
因此大豆肽可用于生产酸奶、干酪、醋、酱油和发酵火腿等发酵制品,还有提高生产效率、稳定品质等效果,并可用于生产酶制剂[19]。
在发酵行业中通常需要培养各种菌类,通过菌类的生长、繁殖、代谢,得到发酵产物。
菌类在培养基的生长、繁殖过程中氮源是不可缺少的营养素之一,氮源的优劣直接关系到菌体的生长情况、发酵周期的长短、产品得率高低等诸多方面的问题。
大豆蛋白活性肽富含生长因子,能促进微生物的生长发育、增加代谢速度、促进双歧杆菌的发酵以及乳酸菌和其它菌类的繁殖[20]。
在谷氨酸的生产中,以大豆蛋白肽替代等量的氮源,可将发酵期缩短6~10h,通过镜检,菌体生长旺盛,产酸量也得到了相应的提高。
在酸奶生产菌种的制备过程中,添加1%的大豆蛋白活性肽,不仅使发酵菌株增殖效果明显,而且提高了产品的产酸率,保证了产品的质量稳定性。
与生产大豆蛋白相比,制备大豆肽需要增加一定量的设备和工艺程序,所以生产成本比较高,价格也比较高,这也是多肽类制品进入市场较困难的主要原因。
目前,大豆肽尚未大量生产,产量少,用量少,也是推广困难的重要因素之一。
将大豆蛋白酶解成肽后,常常不可避免会产生少量苦味物质[21],影响产品的风味。
今后一个时期研究的中心问题是如何使各个单元操作相互配合,每个单元操作严格控制或找出新的方法获得良好风味的大豆肽,并利用其开发出更多的系列食品。
总之,随着理论和工艺条件的不断完善,大豆肽的质量不断提高,随着脱臭、脱苦技术的不断改进,其风味将得到很大的改善,大豆肽产品必定会被更多的消费者认识和接受,成为人们日常生活中的一种优质的蛋白质营养品[22]。
2.3 蛋清蛋白蛋清中含有丰富的蛋白质资源,且与人体的蛋白模式相似,可以很好地被人体全面吸收。
蛋清中主要含有卵清蛋白(54%)、卵类粘蛋白(11%)、卵类转铁蛋白(12%)、卵粘蛋白(3.5%)等。
近年来,酶工程等生物技术的迅速发展为深度开发蛋白质提供了基础及可能。