两种曲霉糖化性质的比较(实验报告)
发酵实验报告二、根霉曲糖化能力的测定
发酵工程学实验报告实验二根霉曲糖化能力的测定学院生命科学学院专业应用生物教育班级12应生A班姓名李顺昌学号124120218实验课程根霉曲的制备指导教师许波开课学期2014—2015学年下学期实验二根霉曲糖化能力的测定小组合作：是小组成员：李顺昌、李媛媛、方淑萍、周玉坤一、实验目的1.了解标准曲线的制作和使用方法2.掌握DNS（3,5-二硝基水杨酸）法测定糖化酶活力的基本原理和方法3.学会计算糖化酶的糖化DE二、实验设备与材料1.设备：天平、烧杯、三角瓶、水浴锅、离心机、722分光光度计等2.材料：根霉曲、柠檬酸缓冲液、DNS、0.1%葡萄糖溶液、1%淀粉溶液三、实验原理1.淀粉：由葡萄糖通过α-1,4糖苷键构成的直链淀粉和α-1,6位有分支的支链淀粉组成，其水解需淀粉酶和糖化酶的作用；淀粉酶的作用：首先酶解淀粉为小分子的糊精、寡糖和少量单糖；糖化酶的作用：其次通过糖化酶的作用将小分子的糊精和寡糖降解为还原性的单糖。
2.DNS法：利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。
3.DE（Dextrose Equivalent，葡萄糖值）：是糖化液中还原糖（以葡萄糖计）占干物质的百分比，工业上用DE值表示淀粉的水解程度或糖化程度。
四、实验方法步骤1.绘制标准曲线的方法先配制一系列浓度不同的标准溶液，用选定的显色剂进行显色，在一定波长下分别测定吸光度A。
以A为横坐标，浓度c为纵坐标，则得到一条拟合度较好的直线，称为标准曲线。
然后使用用完全相同的方法和步骤测定被测溶液的吸光度，便可从标准曲线上找出对应的被测溶液浓度或含量。
2.待测酶液的制备烘干：把发酵产物倒于平皿中，50℃烘干；制备酶粉：将烘干的发酵产物用研钵研磨成粉状（尽量磨细），装于塑料袋中备用；制备酶液：称取1g根霉曲粉，充分溶解于30mL缓冲液(即稀释30倍)，纱布（4层）过滤去除杂质，滤液备用。
两种曲霉糖化性质的比较
两种曲酶糖化性质的比较研究在国内传统的制酒行业中，由于黑曲霉含有丰富的酶系如液化酶、糖化酶、纤维素酶和蛋白酶等，自70年代大多都由米曲霉改为黑曲霉作糖化用菌种。
但在日本迄今仍在采用米曲霉做糖化菌，说明其中必有原因。
鉴于此，本实验以黑曲霉和米曲霉为研究对象，研究比较它们的液化酶和糖化酶（葡萄糖淀粉酶）生产性质。
黑曲霉是一种常见的真菌, 属于半知菌类曲霉属。
黑曲霉对营养要求较低, 只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素即能生长良好。
黑曲霉可以产生许多种酶, 现已成为工业应用常见的菌种之一。
根据bigelis1989年的统计, 25种主要商品酶制剂中就有15种来源于黑曲霉仁, 。
它们分别是α-淀粉酶、过氧化氢酶、纤维素酶、葡萄糖酶、糖化酶、葡萄糖氧化酶、半纤维素酶、橙皮昔酶、脂肪酶、果胶酶、蛋白酶、单宁酶。
美国准许使用的食品工业用酶生产菌种只有黑曲霉、酵母、枯草杆菌等约20种, 其中以黑曲霉所产酶类最多。
我国酶制剂工业生产用菌种中, 黑曲霉占了17种中3种, 即黑曲霉变异株和,它们分别用于糖化酶、果胶酶和酸性蛋白酶的生产[1]。
黑曲霉酶类在工业上具有重要的作用, 例如, 柠檬酸等有机酸的发酵生产、食品及饮料加工以及用于轻化工业、纺织工业、饲料加工和废物的处理等等。
总之, 黑曲霉生产的酶制剂具有用量大、应用范围广、安全性好的特点, 已愈来愈受到人们的重视。
米曲霉的菌丝由多细胞组成，是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。
在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业。
1 材料与方法1．1材料菌种：黑曲霉UV-48；米曲霉-41．2培养基种子培养基（土豆汁培养基；察式培养基）；发酵培养基（麸皮培养基；液体深层发酵液）1．3试剂1．33%可溶性淀粉；碘液；0.01MNacl-HAC缓冲液；6NHCL；DNS试剂；葡萄糖标准溶液1．4实验仪器电热恒温水槽（上海精宏实验设备有限公司，DK-8D）；721型分光光度计（上海欣茂仪器有限公司，2C409035）；立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂，LDZX-75KB)；恒温培养箱(上海实验仪器厂有限公司，DHP060)；气浴恒温摇床（太仓市实验设备厂，TCYQ）。
柠檬酸发酵过程中黑曲霉α-葡萄糖苷酶和糖化酶变化的研究
柠檬酸发酵过程中黑曲霉α-葡萄糖苷酶和糖化酶变化的研究杨赢;王德培;高年发【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2013(032)001【摘要】以目前柠檬酸生产菌为出发菌株,进行N+入诱变得到一株柠檬酸高产菌株黑曲霉LD20,将其在500m3发酵罐上进行发酵,分别对发酵过程中α-葡萄糖苷酶、糖化酶、总糖、总酸、还原糖、葡萄糖和pH进行了跟踪测定,结果表明糖化酶GA在20h达到最高酶活895.16U/mL,α-葡萄糖苷酶TGA在24h达到最高酶活322.52U/mL,在整个发酵过程中GA的平均酶活力是TGA的2.9倍,说明在柠檬酸发酵过程中,发酵液的糖化作用主要依赖于GA;在柠檬酸发酵后期TGA比GA对酸有更强的耐受性,主要起到转苷作用,将发酵液中的还原糖转化为非发酵性的糖类,从而生成不能被黑曲霉所利用的残糖.【总页数】3页(P22-24)【作者】杨赢;王德培;高年发【作者单位】天津科技大学生物工程学院,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业微生物教育部重点实验室,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业微生物教育部重点实验室,天津300457【正文语种】中文【中图分类】TQ921【相关文献】1.航天诱变黑曲霉ZM-8菌株固态发酵产β-葡萄糖苷酶的研究 [J], 刘星斌;张宗舟;蔺海明;马旭光2.柠檬酸高浓度发酵过程中糖化酶活性对柠檬酸发酵的影响 [J], 赵祥颖;乔君;马钦元;刘建军;田延军;范宜晓;赵晨3.低能N+注入选育黑曲霉β-葡萄糖苷酶高产菌株及其发酵优化研究 [J], 刁金山;王丽;陈振;刘会;聂光军;郑之明4.黑曲霉产β-葡萄糖苷酶发酵条件的研究 [J], 赵子高;吕世峰;杨付伟;闫振丽;王林凤5.黑曲霉液体发酵制备β-葡萄糖苷酶的研究 [J], 刘敏;欧阳嘉;勇强;余世袁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
两种曲霉糖化性质的比较
两种曲酶糖化性质的比较研究在国内传统的制酒行业中，由于黑曲霉含有丰富的酶系如液化酶、糖化酶、纤维素酶和蛋白酶等，自70年代大多都由米曲霉改为黑曲霉作糖化用菌种。
但在日本迄今仍在采用米曲霉做糖化菌，说明其中必有原因。
鉴于此，本实验以黑曲霉和米曲霉为研究对象，研究比较它们的液化酶和糖化酶（葡萄糖淀粉酶）生产性质。
黑曲霉是一种常见的真菌, 属于半知菌类曲霉属。
黑曲霉对营养要求较低, 只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素即能生长良好。
黑曲霉可以产生许多种酶, 现已成为工业应用常见的菌种之一。
根据bigelis1989年的统计, 25种主要商品酶制剂中就有15种来源于黑曲霉仁, 。
它们分别是α-淀粉酶、过氧化氢酶、纤维素酶、葡萄糖酶、糖化酶、葡萄糖氧化酶、半纤维素酶、橙皮昔酶、脂肪酶、果胶酶、蛋白酶、单宁酶。
美国准许使用的食品工业用酶生产菌种只有黑曲霉、酵母、枯草杆菌等约20种, 其中以黑曲霉所产酶类最多。
我国酶制剂工业生产用菌种中, 黑曲霉占了17种中3种, 即黑曲霉变异株和,它们分别用于糖化酶、果胶酶和酸性蛋白酶的生产[1]。
黑曲霉酶类在工业上具有重要的作用, 例如, 柠檬酸等有机酸的发酵生产、食品及饮料加工以及用于轻化工业、纺织工业、饲料加工和废物的处理等等。
总之, 黑曲霉生产的酶制剂具有用量大、应用范围广、安全性好的特点, 已愈来愈受到人们的重视。
米曲霉的菌丝由多细胞组成，是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。
在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业。
1 材料与方法1．1材料菌种：黑曲霉UV-48；米曲霉-41．2培养基种子培养基（土豆汁培养基；察式培养基）；发酵培养基（麸皮培养基；液体深层发酵液）1．3试剂1．33%可溶性淀粉；碘液；0.01MNacl-HAC缓冲液；6NHCL；DNS试剂；葡萄糖标准溶液1．4实验仪器电热恒温水槽（上海精宏实验设备有限公司，DK-8D）；721型分光光度计（上海欣茂仪器有限公司，2C409035）；立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂，LDZX-75KB)；恒温培养箱(上海实验仪器厂有限公司，DHP060)；气浴恒温摇床（太仓市实验设备厂，TCYQ）。
豆酱种曲培养过程中米曲霉Y29与3.042产酶特性比较
Ｃｏｍｐ ｉｏ ｆｔ ｅ ｅ ｚ ｍｅ ｃ ａｒ ｔ ｉｔｃ ｔ ｅｎ ａｒｓ ｎ ｏ ｈ ｎ ｙ ｈ ａｃ ｅｒｓ ｉ ｓ ｂｅ ｗｅ Ａｓ ｒ ｌ ｓ ｏ ｙ ａｅ Ｙ２ ｎ ． ｏ ｙ ａｅ Ｓｈ ｇｈ ｅｗｅ ０ ２ ｐｅ ｇｉ ｕ ｒ ｚ ９ ａ ｄ Ａ ｌ ｒ ｚ ａｎ ａｉｂｌ ｄ ３． ４
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米 曲 霉 （ ｐ ｒ ｉ ｕ ｒ ｚ ｅ 是 我 国传 统 酿 造 食 Ａｓ ｅｇ ｌ ｓ ｙ ａ ） ｌ ｏ
高 、 合性状 优 良的 米 曲 霉菌 株 Ｙ２ ｃ 综 ９ 。为 进 一 步研
品豆 酱 的生 产菌 种 ， 是一 类产 蛋 白酶 、 粉酶 等复合 它 淀 酶 的菌 株 。在豆酱 生 产 中 ， 曲是 豆酱 生产 制 曲 的种 种
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学生实验报告-黑曲霉-2014
实验一黑曲霉孢子固定化及其对淀粉糖化的效果分析一、目的要求1. 学习、掌握用包埋法固定微生物细胞的技术及固定化细胞增殖技术。
2. 了解固定化细胞的应用技术。
3. 掌握评价固定化细胞应用效果的方法。
二、试剂①马铃薯斜面培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，定容至1000ml，pH值自然。
②生长培养基：同上（不加琼脂），200ml，灭菌。
③发酵培养基：配制1%、2%、3%、4%的可溶性淀粉溶液各200ml，pH=5.0，灭菌。
④3g海藻酸钠溶于80ml蒸馏水中，灭菌。
⑤0.1M CaCl2溶液250ml，灭菌。
⑥无菌水，500ml，灭菌。
三、实验步骤1. 制备黑曲霉孢子悬液将斜面黑曲霉孢子刮下，用无菌水制成5×108个/ ml孢子的悬液10 ml。
2. 制备海藻酸钠菌悬液将10 ml孢子悬液加入到80ml海藻酸钠溶液中，加入10ml无菌水定容至100ml，配成海藻酸钠浓度为3%、黑曲霉孢子浓度为5×107个/ ml的海藻酸钠菌悬液。
3. 制粒和固定用制粒装置将海藻酸钠菌悬液滴入0.1M CaCl2溶液中使之成粒。
固定化球直径为3mm，室温下固定5小时。
4. 固定化细胞预培养固定化球用无菌水冲洗三次，称重，每瓶15-20g装入生长培养基，25~28℃，220r/min震荡预培养36小时。
5. 摇床发酵培养：固定化球过滤，无菌水冲洗后转入发酵培养基。
对照：0.5%、1%、2%可溶性淀粉，28℃，220r/min震荡培养。
处理：含有15-20g固定化凝胶球的相同浓度的可溶性淀粉，50~60℃，220r/min，24小时6. 还原糖测定用3,5-二硝基水杨酸比色法测还原糖生成量。
取3支25ml刻度试管，编号（对照1管，处理每个浓度2管），按下表精确加入待测液和试剂。
单位：ml对照 处理① 处理② 待测液（？%淀粉）1 1 1 蒸馏水1 1 1 3,5-二硝基水杨酸 1.5 1.5 1.5摇匀，沸水浴中，5分钟，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，蒸馏水定容至25ml 。
曲霉的实验报告
曲霉的实验报告曲霉的实验报告曲霉（Aspergillus）是一类真菌，广泛分布于自然环境中，尤其是在土壤和植物遗体上。
它们具有很强的适应能力和生存能力，对环境变化有较高的耐受性。
曲霉的研究在生物学、医学以及食品工业等领域都有重要的意义。
本次实验旨在探究曲霉的生长特性及其对环境的影响。
实验一：曲霉的生长条件为了研究曲霉的生长条件，我们设立了一组对照实验和三组不同条件的实验组。
对照组使用标准培养基，而实验组则分别在不同的温度、湿度和光照条件下进行培养。
结果显示，曲霉在标准培养基上的生长速度较快，菌丝的生长范围广泛且密集。
而在高温条件下，曲霉的生长速度明显减慢，菌丝的数量和范围也较对照组明显减少。
相反，在低温条件下，曲霉的生长速度明显加快，菌丝的数量和范围也相应增加。
这表明曲霉对温度的适应性较强，但过高或过低的温度对其生长有一定的限制。
另外，实验组中的高湿度条件下，曲霉的菌丝生长迅速，范围广泛且密集。
而在低湿度条件下，曲霉的生长受到一定的限制，菌丝的数量和范围较对照组明显减少。
这表明曲霉对湿度的适应性较强，但过低的湿度对其生长有一定的影响。
在光照条件方面，实验组中的强光照下，曲霉的生长速度明显加快，菌丝的数量和范围也相应增加。
而在弱光照条件下，曲霉的生长受到一定的限制，菌丝的数量和范围较对照组明显减少。
这表明曲霉对光照的适应性较强，但过弱的光照对其生长有一定的影响。
实验二：曲霉对环境的影响为了研究曲霉对环境的影响，我们进行了一组土壤污染实验。
在实验开始时，我们在一块土壤样本上均匀撒播了曲霉孢子，并在一定时间后进行了观察。
结果显示，曲霉在土壤中迅速生长并繁殖，形成了大量的菌丝。
同时，我们还观察到土壤中的有机物质被曲霉分解，产生了一种特殊的气味。
这表明曲霉具有分解有机物的能力，对土壤中的有机物质起着重要的降解作用。
另外，曲霉的生长也会对土壤的物理性质产生一定的影响。
由于菌丝的生长，土壤的结构变得更加松散，通气性和保水性也相对增强。
两种曲霉糖化性子的比较
两种曲酶糖化性质的比较研究在国内传统的制酒行业中，由于黑曲霉含有丰富的酶系如液化酶、糖化酶、纤维素酶和蛋白酶等，自70年代大多都由米曲霉改为黑曲霉作糖化用菌种。
但在日本迄今仍在采用米曲霉做糖化菌，说明其中必有原因。
鉴于此，本实验以黑曲霉和米曲霉为研究对象，研究比较它们的液化酶和糖化酶（葡萄糖淀粉酶）生产性质。
黑曲霉是一种常见的真菌, 属于半知菌类曲霉属。
黑曲霉对营养要求较低, 只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素即能生长良好。
黑曲霉可以产生许多种酶, 现已成为工业应用常见的菌种之一。
根据bigelis1989年的统计, 25种主要商品酶制剂中就有15种来源于黑曲霉仁, 。
它们分别是α-淀粉酶、过氧化氢酶、纤维素酶、葡萄糖酶、糖化酶、葡萄糖氧化酶、半纤维素酶、橙皮昔酶、脂肪酶、果胶酶、蛋白酶、单宁酶。
美国准许使用的食品工业用酶生产菌种只有黑曲霉、酵母、枯草杆菌等约20种, 其中以黑曲霉所产酶类最多。
我国酶制剂工业生产用菌种中, 黑曲霉占了17种中3种, 即黑曲霉变异株和,它们分别用于糖化酶、果胶酶和酸性蛋白酶的生产[1]。
黑曲霉酶类在工业上具有重要的作用, 例如, 柠檬酸等有机酸的发酵生产、食品及饮料加工以及用于轻化工业、纺织工业、饲料加工和废物的处理等等。
总之, 黑曲霉生产的酶制剂具有用量大、应用范围广、安全性好的特点, 已愈来愈受到人们的重视。
米曲霉的菌丝由多细胞组成，是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。
在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业。
1 材料与方法1．1材料菌种：黑曲霉UV-48；米曲霉-41．2培养基种子培养基（土豆汁培养基；察式培养基）；发酵培养基（麸皮培养基；液体深层发酵液）1．3试剂1．33%可溶性淀粉；碘液；0.01MNacl-HAC缓冲液；6NHCL；DNS试剂；葡萄糖标准溶液1．4实验仪器电热恒温水槽（上海精宏实验设备有限公司，DK-8D）；721型分光光度计（上海欣茂仪器有限公司，2C409035）；立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂，LDZX-75KB)；恒温培养箱(上海实验仪器厂有限公司，DHP060)；气浴恒温摇床（太仓市实验设备厂，TCYQ）。
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两种曲酶糖化性质的比较研究
××××××××××在国内传统的制酒行业中，由于黑曲霉含有丰富的酶系如液化酶、糖化酶、纤维素酶和蛋白酶等，自70年代大多都由米曲霉改为黑曲霉作糖化用菌种。
但在日本迄今仍在采用米曲霉做糖化菌，说明其中必有原因。
鉴于此，本实验以黑曲霉和米曲霉为研究对象，研究比较它们的液化酶和糖化酶（葡萄糖淀粉酶）生产性质。
黑曲霉是一种常见的真菌，属于半知菌类曲霉属。
黑曲霉对营养要求较低，只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素即能生长良好。
黑曲霉可以产生许多种酶，现已成为工业应用常见的菌种之一。
根据bigelis1989年的统计，25种主要商品酶制剂中就有15种来源于黑曲霉仁。
它们分别是α-淀粉酶、过氧化氢酶、纤维素酶、葡萄糖酶、糖化酶、葡萄糖氧化酶、半纤维素酶、橙皮昔酶、脂肪酶、果胶酶、蛋白酶、单宁酶。
美国准许使用的食品工业用酶生产菌种只有黑曲霉、酵母、枯草杆菌等约20种, 其中以黑曲霉所产酶类最多。
我国酶制剂工业生产用菌种中, 黑曲霉占了17种中3种, 即黑曲霉变异株和,它们分别用于糖化酶、果胶酶和酸性蛋白酶的生产[1]。
黑曲霉酶类在工业上具有重要的作用，例如，柠檬酸等有机酸的发酵生产、食品及饮料加工以及用于轻化工业、纺织工业、饲料加工和废物的处理等等。
总之，黑曲霉生产的酶制剂具有用量大、应用范围广、安全性好的特点，已愈来愈受到人们的重视。
米曲霉的菌丝由多细胞组成，是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。
在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业。
1 材料与方法
1.1 实验材料菌种：黑曲霉UV-48；米曲霉-4
1.2 实验培养基
种子培养基（土豆汁培养基；察式培养基）；发酵培养基（麸皮培养基；液体深层发酵液）1.3 实验试剂
1.33%可溶性淀粉；碘液；0.01MNacl-HAC缓冲液；6NHCL；DNS试剂；葡萄糖标准溶液；无菌水
1.4 实验用具
水浴锅；三角瓶；试管；721型分光光度计；高压蒸汽灭菌锅；电子天平；恒温培养箱；摇床；电炉；酒精灯；吸管；量筒
1.5 实验方法
1.5.1 菌种培养
斜面菌种培养：将米曲霉和黑曲霉分别接种于土豆汁培养基和察式培养基上，于30~32℃下培养4~7天，待产生孢子后置于5℃中备用。
军种扩大培养：从斜面培养基中挑取一环孢子接种于麸皮培养基上，于30~32℃下培养，待长满孢子后备用。
1.5.2 液化酶和糖化酶的发酵生产
孢子悬浮液的制备：挑取经扩培的菌种孢子，接入内含10ml无菌水的试管中，制成孢子悬浮液，并在此基础上，继续稀释成108个/ml孢子悬液。
稀释时可利用血球计数板推断选择适宜稀释度的孢子悬液。
液化酶和糖化酶的发酵:取5%孢子悬浮液接种于液体深层发酵液中，置于30~32℃，200r/min旋转式摇床上控温发酵，并定期测定酶活力，和PH。
1.5.3 酶活测定
粗酶液制备:定期取20ml发酵液经纱布过滤，1000g冷冻离心5min，取上清作为粗酶液。
液化酶活性测定；取1.5ml 1.33%可溶性淀粉于60C水浴5Min，加0.5ml酶液（或双蒸水作为空白对照），60℃反应10min，取O.1ml反应液加入10ml碘液，摇匀后680nm处测OD。
每个样品作两个重复。
糖化酶（葡萄糖淀粉酶）活性测定；0.1ml1.33%可溶性淀粉加0.1ml酶液（或双蒸水作为空白对照）60℃水浴反应20min，立即加入1mlDNS试剂，沸水浴5MIN后冷却，加入4.8ml水，在520nm处测定OD值。
1.5.4 发酵液中还原糖含量的测定
葡萄糖标准曲线的制作(取9支25*25试管，分别按下表加入试剂):
项目0 1 2 3 4 5 6 7 8 葡萄糖标准溶液（ML）0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 蒸馏水（ML） 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4
DNS试剂（ML） 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
将各管溶液混匀均匀，在沸水浴中加热5分钟，取出后立即用冷水冷却到室温，再向每官加入21.5ml蒸馏水，摇匀。
于520nm波长处测OD值。
以葡萄糖MG数为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。
项目
空白还原糖
0 1 2 3
发酵液溶液（mL）0 1.0 1.0 1.0
蒸馏水（mL） 2 1.0 1.0 1.0
DNS试剂（mL） 1.5 1.5 1.5 1.5
加入试剂后，其余操作均于制作标准曲线时相同，测定后，取样品的OD值在标准曲线上查相应的糖量，用下式计算出发酵液中还原糖的含量。
还原糖浓度（mg/ml）=（还原糖mg数*稀释倍数）/ 发酵液体积
1.5.5 发酵液PH测定
定期取发发酵液用酸度计测其PH。
2 实验结果
2.1 酶活测定
发酵
时间（h）
液化酶糖化酶
米曲霉黑曲霉米曲霉黑曲霉
24 9.22 9. 18 0.85 0.67
48 9.53 9.74 0.90 0.70
72 15.43 9.80 0.96 0.94
96 9.65 9.60 3.51 3.23
表1.1 酶活力（U）的变化
从表中数据可以看出，米曲霉具有远比黑曲霉高的液化酶活性，而糖化酶活性测定中发现，米曲霉具有比黑曲霉略高的活性。
2.2 发酵液中还原糖含量测定及pH变化
图1 葡萄糖标准曲线
发酵
时间（h）
米曲霉黑曲霉
pH 还原糖（mg/mL）pH 还原糖（mg/mL）
24 4.74 19.36 4.31 19.80
48 5.04 8.22 4.89 16.87
72 6.65 2.75 5.66 6.29
96 7.34 1.82 6.67 4.69
表1.2 PH、糖的变化
从表中数据可看出，黑曲霉还原糖能力明显大于米曲霉，且米曲霉和黑曲霉的糖化酶都比较耐酸，但黑曲霉糖化酶的最大值高于米曲霉。
3讨论
从实验数据来看，米曲霉具有比黑曲霉高的液化酶活性和略高的糖化酶活性，黑曲霉具有多种活性强大的酶系，可用于工业生产，如淀粉酶用于淀粉的液化、糖化以及酒精工业或制造葡萄糖和消化剂。
产生耐酸性蛋白酶用于蛋白质分解或食品、消化剂的制造。
果胶酶用于水解聚半乳糖醛酸、果汁澄清和植物纤维精炼。
还有柚苷酶、橙皮苷酶、葡萄糖氧化酶、纤维素酶等。
黑曲霉还能分解有机质，产生多种有机酸如抗坏血酸、柠檬酸、葡萄糖酸等。
某些菌系除了在甾体化合物11-a位起羟化作用外，还能将羟基孕甾酮转化为雄烯。
此外该菌还常常被用来做微量元素的测定菌和霉腐试验菌,也可用作发酵饲料[2]。
米曲霉能产生淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、溶血酶等，有的已做成酶制剂用于工业生产。
有些菌系能产生多种有机酸，许多菌株还能产生大量的曲酸。
米曲霉也是酒厂和酱油厂常用的生产菌。
本省永春酱油厂还有从酱油曲中分离出产蛋白酶高的优良菌株。
米曲霉发酵所加工的产品及食品对人类或动物具有一定的保健功效，初步研究表明，米曲霉在茶叶（尤其普洱茶）渥堆发酵中起着重要的作用。
所以，研究米曲霉特性对大力发展轻工业，研发高质量的产品有着广泛的发展前景。