USP重金属检查法
2020版《中国药典》重金属检验操作规程(USP)
一、目的：制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。
二、范围：本标准适用于参考美国药典标准检验品种重金属的测定。
三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。
四、内容：1、特殊试剂:1.1硝酸铅原液:将159.8毫克的硝酸铅溶于100毫升水中，加入1毫升硝酸，然后用水稀释至1000毫升。
制备此溶液并将其储存在无可溶性铅盐的玻璃容器中。
1.2标准铅溶液:临用新制，用水稀释10.0毫升硝酸铅原液至100.0毫升。
每毫升标准铅溶液含有相当于10微克的铅。
以每克被测物质100微升标准铅溶液为基础制备的对比溶液包含相当于每百万份被测物质1部分的铅。
2、方法一:2.1 pH3.5乙酸盐缓冲液:溶解25克醋酸铵在25毫升水中，加入6mol/l盐酸38毫升。
如果需要调节，可用6mol/l氢氧化铵或6mol/l盐酸调节pH值为3.5，用水稀释至100毫升，并混合。
2.2标准制备:将标准铅溶液（20微克铅）2毫升放入50毫升比色管中，用水稀释至25毫升。
使用pH计或短程pH指示纸作为外部指示剂，用1mol/l乙酸或6mol/l氢氧化铵调节到3.0到4.0之间的pH，用水稀释至40毫升，混匀。
2.3供试品制备:按照各专著的指示，将试验准备的溶液放入50mL比色管中，或使用各专著中指定体积的酸，溶于水中，用水稀释至25mL，单位为按公式计算的待测物质：2.0/（1000L）其中L是重金属限度，占百分数。
使用pH计或短程pH指示剂纸作为外部指示剂，用1mol/l 乙酸或6 mol/l氢氧化铵调节pH值在3-4之间，用水稀释至40毫升，并混合。
2.4 监测制备:在第三根50mL比色管中，放入按供试品制备指示制备的溶液25mL，并加入2.0mL标准铅溶液。
使用pH计或短程pH指示剂纸作为外部指示剂，用1mol/l乙酸或6mol/l氢氧化铵调节pH值在3-4之间，用水稀释至40毫升，并混合。
重金属检查法(USP和EP)
231 重金属检查法本试验系在规定的试验条件下，金属离子与硫化物离子反应显色，通过与制备的标准铅溶液目视比较测定， 以确证供试品中重金属杂质含量不超过各论项下规定的限度（以供试品中铅的百分比表示，以重量计） 。
【见分光 光度法和光散射项下测定法目视比较法 <851> 】【注意：对本试验有反应的典型物质有铅、汞、铋、砷、锑、锡、 镉、银、铜和钼等】除各论另有规定外，按第一法测定重金属。
第一法适用于在规定试验条件下，能产生澄清、无色溶液的物质。
第二法适用于在第一法规定试验条件下不能产生澄清、无色溶液的物质，或者适用于由于性质复杂， 化物离子与金属离子形成沉淀的物质，或者是不易挥发的和易挥发的油类物质。
第三法为湿消化法，仅用于第一 法、第二法都不适合的情况。
特殊试剂硝酸铅贮备液制备：取硝酸铅 159.8mg ， 溶于 100ml 水中，加 1ml 硝酸，用水稀释至 1000ml 。
制备和贮存 本溶液的玻璃容器应不含可溶性铅。
标准铅溶液制备：使用当天，取硝酸铅贮备液 10.0ml ， 用水稀释至 100.0ml 。
每 1mL 的标准铅溶液含相当 于 10μg 的铅。
按每克供试品取 100μL 标准铅溶液制备的对照溶液， 相当于供试品含百万分之一的铅。
方法ⅠpH3.5 醋酸盐缓冲液的制备： 取醋酸铵 25.0g 溶于 25mL 水中， 加 6N 盐酸液 38.0mL ， 必要时， 用 6N 氢氧化铵液或 6N 盐酸液调节 pH 至 3.5 ， 用水稀释至 100mL ， 混匀。
取标准铅溶液 2.0mL （相当于 20 μg 铅）于50mL 比色管中， 加水稀释至 25mL ， 以 pH 计或精密 pH 试纸作为外指示剂，用 1N 醋酸液或 6N 氢氧化铵液调节 pH 至 3.0~4.0 ， 用水稀释至 40mL ， 混匀。
取各论项下规定的供试品溶液 25mL 于 50mL 比色管中， 或用各论项下规定用 量的酸溶液样品， 用水稀释至25mL ，供试品以 g 计，按下式计算： 2.0/ （1000L ）式中 L 是重金属限度（ % ）。
(完整版)USP231重金属
USP<231>重金属本检验用以证实供试品中与硫离子作用显色的金属杂质含量，在规定检验条件下，不超过个论中规定的供试品重金属限度，以铅百分含量（重量比）计，与用标准铅溶液配制的对照进行目测比较（参看分光光度法和光散射法<851>中操作步骤部分的视觉比较）测定。
[注意：与本检验起反应的代表性物质为铅、汞、铋、砷、锑、锡、镉、银、铜和钼。
]除个论另有规定外，用方法I测定重金属含量。
方法I用于规定条件下可生成无色的、透明的制品的物质。
方法II适用于在方法I规定条件下无法生成无色透明制品的物质，或由于自身复杂特性，会对硫离子生成的金属沉淀造成干扰的物质，以及不挥发油和挥发油。
方法III湿消化法，仅在方法I和方法II均不适用时使用。
专用试剂硝酸铅贮备液：取硝酸铅159.8 mg，加已加硝酸1 mL的水100 mL，溶解，加水稀释至1000 mL。
于不含可溶铅盐的玻璃容器中配制和贮存该溶液。
标准铅溶液：使用当天配制。
取硝酸铅贮备液10.0 mL，加水稀释至100.0 mL。
每mL标准铅溶液相当于10 µg的铅。
以每g供试品100µL标准铅溶液为基准制备的参比溶液相当于每一百万份供试品中含有一份铅。
方法IpH 3.5醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25.0 g，加水25 mL，溶解，加6 mol/L盐酸38.0 mL。
如有需要，用6 mol/L氨水或6 mol/L盐酸调节pH 为3.5，用水稀释至100 mL。
混匀。
标准溶液：用移液管取标准铅溶液2 mL（20 µg的铅），置50 mL比色管中，用水稀释至25 mL。
使用pH计或窄范围pH试纸作外部指示剂，用1mol/L醋酸或6mol/L氨水调节pH至3.0-4.0，用水稀释至40 mL，混匀。
供试溶液：取如个论所述制备的供试液25 mL，置50 mL比色管中；或当个论另有规定时，使用个论中规定体积量的酸溶解，并用水稀释至25 mL。
2020版《中国药典》重金属检验操作规程(USP)
一、目的：制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。
二、范围：本标准适用于参考美国药典标准检验品种重金属的测定。
三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。
四、内容：1、特殊试剂:1.1硝酸铅原液:将159.8毫克的硝酸铅溶于100毫升水中，加入1毫升硝酸，然后用水稀释至1000毫升。
制备此溶液并将其储存在无可溶性铅盐的玻璃容器中。
1.2标准铅溶液:临用新制，用水稀释10.0毫升硝酸铅原液至100.0毫升。
每毫升标准铅溶液含有相当于10微克的铅。
以每克被测物质100微升标准铅溶液为基础制备的对比溶液包含相当于每百万份被测物质1部分的铅。
2、方法一:2.1 pH3.5乙酸盐缓冲液:溶解25克醋酸铵在25毫升水中，加入6mol/l盐酸38毫升。
如果需要调节，可用6mol/l氢氧化铵或6mol/l盐酸调节pH值为3.5，用水稀释至100毫升，并混合。
2.2标准制备:将标准铅溶液（20微克铅）2毫升放入50毫升比色管中，用水稀释至25毫升。
使用pH计或短程pH指示纸作为外部指示剂，用1mol/l乙酸或6mol/l氢氧化铵调节到3.0到4.0之间的pH，用水稀释至40毫升，混匀。
2.3供试品制备:按照各专著的指示，将试验准备的溶液放入50mL比色管中，或使用各专著中指定体积的酸，溶于水中，用水稀释至25mL，单位为按公式计算的待测物质：2.0/（1000L）其中L是重金属限度，占百分数。
使用pH计或短程pH指示剂纸作为外部指示剂，用1mol/l 乙酸或6 mol/l氢氧化铵调节pH值在3-4之间，用水稀释至40毫升，并混合。
2.4 监测制备:在第三根50mL比色管中，放入按供试品制备指示制备的溶液25mL，并加入2.0mL标准铅溶液。
使用pH计或短程pH指示剂纸作为外部指示剂，用1mol/l乙酸或6mol/l氢氧化铵调节pH值在3-4之间，用水稀释至40毫升，并混合。
USP 231中文
USP<231 >重金属-方法1+2此次试验是提供阐明被硫化物染色的重金属物质含量，在特定情况下，在测试物质中铅含量（重量）不超过标准规定的限值。
其方法为通过与标准配制的标准铅溶液目视比色。
注1：在此次试验具有明显回应（显色）的物质为铅，汞，砷，锡，锑，镉，银，铜与钼。
注2：在可见光与紫外光目视比色的方法见<851>除非另有个别标准文献中规定，一般采用方法1测定重金属含量。
方法1用于在特定测试条件下产生透明，无色的指示剂的物质。
方法2用于在方法1规定的试验条件下不产生透明，无色的指示剂的物质，或者由于其复合性质，通过硫化物离子或固定和挥发性物质干扰金属沉淀的物质油。
方法3是一个湿度消化的方法，仅在方法1与方法2都不适用的情况下使用。
1 特定试剂制备1.1硝酸铅储备液的配制159.8mg硝酸铅溶于含有1ml硝酸的100ml纯化水中，然后稀释到1000ml,稀释液为纯化水。
配制与存放使用玻璃容器，远离可溶性铅盐。
1.2铅标准溶液现用现配，稀释10ml硝酸铅储备液加水至100ml。
铅标准溶液浓度为10ug/ml.方法12-方法1所需试剂2.1 Ph3.5乙酸盐缓冲液25.0g的乙酸铵溶于25ml水中，加入38ml6mol/L的盐酸。
若有需要则使用6mol/L氨水或者6mol/L的盐酸调节ph至3.5.加水稀释至100ml.2.2配制标准液在50ml比色管中加入2ml铅标准溶液（10ug/ml）加水稀释至25ml.使用ph 计或者ph试纸作为外部检测指示器，用1mol/L的醋酸或者6mol/L氨水调节ph至3.0-4.0，然后加水稀释至40ml,混匀。
2.3试验液配制在50ml比色管中加入25ml测试液，（或使用指定体积的酸，在个别专着中规定的情况下，溶解并用水稀释至25 mL，待测物质的量（g），按公式2.0 /（1000L）计算，其中L为重金属限值，%。
）使用ph计或者ph试纸作为外部检测指示器，用1mol/L的醋酸或者6mol/L氨水调节ph至3.0-4.0，然后加水稀释至40ml,混匀。
美国药典重金属检测方法-中文
铑
10
40
0.0001
钌
10
40
0.0002
铬
25
100
0.002
钼
25
100
0.0002
镍
25
100
0.002
钒
25
100
0.005
铜
250
1000
0.002
镁
250
1000
0.001
样品制备
范围广泛的各种样品都可以用 USP<232>/<233> 进行分 析，所以提供适合所有样品类型的详细样品处理方法并不现 实。有些药物样品可以直接分析（不用溶解），而其他样品 可以用水性溶剂（如水或稀酸）或适当的有机溶剂（如 2-丁 氧乙醇 : 水（25 : 75）[3]，DMSO 或 DGME）简单稀释或 溶解进行制备。用水性或有机溶剂进行简单稀释或溶解的 方法必须考虑样品的化学稳定性，并且对于有机溶剂溶解， 还要考虑样品中组分化合物的不同挥发性。对许多 API 来 说，用有机溶剂稀释是首选方法，这种情况下有必要采取有 助于稳定分析物的方法，以避免因较高或较低挥发性（与校 正标准品相比）成分的存在而造成的回收率波动 [7]。
USP<232> 包括一个涉及元素形态的章节，指出 As 和 Hg 的某些形态值得关注，因为其毒性比其它形态要大得 多。As 的 PDE 是指无机 As，如果总 As 浓度超出限度， 必须用一种能够对不同 As 形态进行分离和定量的方法对样 品进行重新分析。这样做的原因是无机 As 比常见的有机形 式（如，砷甜菜碱）毒性大得多，因此形态分析必须能够分 离其不同化学形态，确定无机 As（亚砷酸盐（三价 As）和 砷酸盐（四价 As））的总量低于限量。同样，Hg 限量也是 指无机 Hg（Hg2+），虽然甲基汞（MeHg）是毒性更大的 形态，但通常认为药物中不可能存在 MeHg。但如果样品来 自于可能含有相当量甲基汞的原料（如，鱼组织），也必须 对其进行特别的分离和测定。
USP232-233重金属检测方法-中文
铑
10
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钌
10
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铬
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钼
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镍
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钒
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铜
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0.002
镁
250
1000
0.001
样品制备
范围广泛的各种样品都可以用 USP<232>/<233> 进行分 析，所以提供适合所有样品类型的详细样品处理方法并不现 实。有些药物样品可以直接分析（不用溶解），而其他样品 可以用水性溶剂（如水或稀酸）或适当的有机溶剂（如 2-丁 氧乙醇 : 水（25 : 75）[3]，DMSO 或 DGME）简单稀释或 溶解进行制备。用水性或有机溶剂进行简单稀释或溶解的 方法必须考虑样品的化学稳定性，并且对于有机溶剂溶解， 还要考虑样品中组分化合物的不同挥发性。对许多 API 来 说，用有机溶剂稀释是首选方法，这种情况下有必要采取有 助于稳定分析物的方法，以避免因较高或较低挥发性（与校 正标准品相比）成分的存在而造成的回收率波动 [7]。
元素 镉 铅 无机砷 无机汞 铱 锇 钯 铂 铑 钌 铬 钼 镍 钒 铜 镁
每日剂量 PDE（µg/日） 5 10 15 15 100 100 100 100 100 100 250 250 250 250 2500 2500
虽然 USP<232> 中制定的 PDE 限度用任何 USP<233> （ICP-OES 或 ICP-MS）中参考的仪器技术都可以测定 [6]， 但许多新药中使用越来越复杂而珍贵的原料药，可能只包 含非常少的量。对这些毫克级样品进行大比例稀释制备， 意味着使用检测限尽可能低的仪器非常重要。低检测限和 宽动态范围线性校正（安捷伦 7700 系列达到 9 个数量级） 是 ICP-MS 最非常可贵的特性。低检测限对于 USP<232> 要求必须以最低限量进行控制的潜在毒性痕量元素（特别是 As、Cd、Hg 和 Pb）尤为重要。
(完整版)USP231重金属
USP<231>重金属本检验用以证实供试品中与硫离子作用显色的金属杂质含量，在规定检验条件下，不超过个论中规定的供试品重金属限度，以铅百分含量（重量比）计，与用标准铅溶液配制的对照进行目测比较（参看分光光度法和光散射法<851>中操作步骤部分的视觉比较）测定。
[注意：与本检验起反应的代表性物质为铅、汞、铋、砷、锑、锡、镉、银、铜和钼。
]除个论另有规定外，用方法I测定重金属含量。
方法I用于规定条件下可生成无色的、透明的制品的物质。
方法II适用于在方法I规定条件下无法生成无色透明制品的物质，或由于自身复杂特性，会对硫离子生成的金属沉淀造成干扰的物质，以及不挥发油和挥发油。
方法III湿消化法，仅在方法I和方法II均不适用时使用。
专用试剂硝酸铅贮备液：取硝酸铅159.8 mg，加已加硝酸1 mL的水100 mL，溶解，加水稀释至1000 mL。
于不含可溶铅盐的玻璃容器中配制和贮存该溶液。
标准铅溶液：使用当天配制。
取硝酸铅贮备液10.0 mL，加水稀释至100.0 mL。
每mL标准铅溶液相当于10 µg的铅。
以每g供试品100µL标准铅溶液为基准制备的参比溶液相当于每一百万份供试品中含有一份铅。
方法IpH 3.5醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25.0 g，加水25 mL，溶解，加6 mol/L盐酸38.0 mL。
如有需要，用6 mol/L氨水或6 mol/L盐酸调节pH 为3.5，用水稀释至100 mL。
混匀。
标准溶液：用移液管取标准铅溶液2 mL（20 µg的铅），置50 mL比色管中，用水稀释至25 mL。
使用pH计或窄范围pH试纸作外部指示剂，用1mol/L醋酸或6mol/L氨水调节pH至3.0-4.0，用水稀释至40 mL，混匀。
供试溶液：取如个论所述制备的供试液25 mL，置50 mL比色管中；或当个论另有规定时，使用个论中规定体积量的酸溶解，并用水稀释至25 mL。
USP 231重金属
USP<231>重金属本检验用以证实供试品中与硫离子作用显色的金属杂质含量，在规定检验条件下，不超过个论中规定的供试品重金属限度，以铅百分含量（重量比）计，与用标准铅溶液配制的对照进行目测比较（参看分光光度法和光散射法<851>中操作步骤部分的视觉比较）测定。
[注意：与本检验起反应的代表性物质为铅、汞、铋、砷、锑、锡、镉、银、铜和钼。
]除个论另有规定外，用方法I测定重金属含量。
方法I用于规定条件下可生成无色的、透明的制品的物质。
方法II适用于在方法I规定条件下无法生成无色透明制品的物质，或由于自身复杂特性，会对硫离子生成的金属沉淀造成干扰的物质，以及不挥发油和挥发油。
方法III湿消化法，仅在方法I和方法II均不适用时使用。
专用试剂硝酸铅贮备液：取硝酸铅159.8 mg，加已加硝酸1 mL的水100 mL，溶解，加水稀释至1000 mL。
于不含可溶铅盐的玻璃容器中配制和贮存该溶液。
标准铅溶液：使用当天配制。
取硝酸铅贮备液10.0 mL，加水稀释至100.0 mL。
每mL标准铅溶液相当于10 µg的铅。
以每g供试品100µL标准铅溶液为基准制备的参比溶液相当于每一百万份供试品中含有一份铅。
方法IpH 3.5醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25.0 g，加水25 mL，溶解，加6 mol/L盐酸38.0 mL。
如有需要，用6 mol/L氨水或6 mol/L盐酸调节pH 为3.5，用水稀释至100 mL。
混匀。
标准溶液：用移液管取标准铅溶液2 mL（20 µg的铅），置50 mL比色管中，用水稀释至25 mL。
使用pH计或窄范围pH试纸作外部指示剂，用1mol/L醋酸或6mol/L氨水调节pH至3.0-4.0，用水稀释至40 mL，混匀。
供试溶液：取如个论所述制备的供试液25 mL，置50 mL比色管中；或当个论另有规定时，使用个论中规定体积量的酸溶解，并用水稀释至25 mL。
重金属检查法 USP和EP
231重金属检查法本试验系在规定的试验条件下，金属离子与硫化物离子反应显色，通过与制备的标准铅溶液目视比较测定，以确证供试品中重金属杂质含量不超过各论项下规定的限度（以供试品中铅的百分比表示，以重量计）。
【见分光光度法和光散射项下测定法目视比较法<851>】【注意：对本试验有反应的典型物质有铅、汞、铋、砷、锑、锡、镉、银、铜和钼等】除各论另有规定外，按第一法测定重金属。
第一法适用于在规定试验条件下，能产生澄清、无色溶液的物质。
第二法适用于在第一法规定试验条件下不能产生澄清、无色溶液的物质，或者适用于由于性质复杂，易干扰硫化物离子与金属离子形成沉淀的物质，或者是不易挥发的和易挥发的油类物质。
第三法为湿消化法，仅用于第一法、第二法都不适合的情况。
?特殊试剂?硝酸铅贮备液制备：取硝酸铅159.8mg，溶于100ml水中，加1ml硝酸，用水稀释至1000ml。
制备和贮存本溶液的玻璃容器应不含可溶性铅。
?标准铅溶液制备：使用当天，取硝酸铅贮备液10.0ml，用水稀释至100.0ml。
每1mL的标准铅溶液含相当于10μg的铅。
按每克供试品取100μL标准铅溶液制备的对照溶液，相当于供试品含百万分之一的铅。
重金属方法A供试溶液：12ml待测水溶液，2ml pH为3.5的缓冲溶液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。
对照溶液：10ml的标准铅溶液（1ppm or 2ppm Pb），2ml pH为3.5的缓冲溶液，2ml 的待测液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。
空白溶液：10ml的水，2ml pH为3.5的缓冲溶液，2ml的测试溶液。
混合后加1.2ml 的硫代乙酰胺试液，立即混合，同空白溶液比较，对照溶液显浅棕色。
2分钟后，供试的溶液颜色不得比对照溶液深。
方法B用含最少量水的溶剂（例如含15％水的二氧杂环乙烷或含15％水的丙酮）溶解规定量的供试品，制成待测液供试溶液：12ml待测液，2ml pH为3.5的缓冲溶液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。
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标准操作规程Standard Operating Procedure1.简述1．1重金属是指在规定实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属盐类杂质。
1．2硫化钠或硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解产生硫化氢，与供试品中重金属在规定实验条件下所显颜色，与一定量的标准铅溶液在同样操作条件下所显的颜色比较。
1．3由于实验条件不同。
分为三种检查方法：第一法适用于在规定条件下能生成澄清无色溶液的供试品。
第二法适用于在规定条件下不能生成澄清无色溶液的供试品；第三法适用于那些不能用一法和二法的样品。
2 仪器2．1仪器设备50ml纳氏比色管2．2试剂和溶液a)硫代乙酰胺试液: 称取硫代乙酰胺4g加水溶解，用水稀释至100ml，摇匀。
b)甘油基准试液: 称取200g甘油加水至总重量为235g,然后加142.5ml1N氢氧化钠溶液和47.5ml的水。
临用前用0.2ml硫代乙酰胺试液和1ml甘油基准试液混合,在沸水浴中加热20秒钟,立即使用.c)硝酸铅贮备液：称取硝酸铅0.1598g，置1000ml量瓶中，加硝酸1ml与水100ml溶解后，用水稀释至1000ml 摇匀，作为贮备液。
标准铅溶液临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻SOP-QM 402-14 页号Page：2/4度，摇匀，即得（每1ml相当于10μg的Pb）。
d）PH3.5醋酸盐缓冲液: 取醋酸铵25.0g，加水25ml溶解后，加38.0ml6N盐酸,如有必要用6N氨水或6N盐酸调PH至3.5 ，用水稀释至100ml，摇匀。
第一法：标准溶液的制备取50ml比色管，用移液管移取2.0ml标准铅溶液(20 μgPb),用水稀释到25ml，用1N醋酸或6N氨水溶液调PH至3.0~4.0之间，用窄围的精密pH试纸作指示，然后加水稀释至40ml，摇匀。
供试品溶液的制备另取一支50ml比色管，加入按该品种项下规定的方法制成的供试液25ml；或加入供试品的量以g计, 按公式2.0/1000L计算,其中L为重金属的限度(%)，用该品种项下规定的酸的体积溶解，加水溶解并稀释至25ml，供试品溶液用1N醋酸或6N氨水溶液调PH至3.0～4.0之间，用窄围的精密pH试纸作指示,然后加水稀释至40ml，摇匀。
对照溶液的制备取第三只比色管，加入与上述供试品溶液方法同样制备的任意25ml，加入2.0ml标准铅溶液，用1N醋酸或6N氨水溶液调PH至3.0~4.0之间，用窄围的精密pH试纸作指示,然后加水稀释至40ml，摇匀。
操作方法在上述三只比色管中分别加入2ml醋酸缓冲溶液（PH3.5）, 然后加1.2ml硫代乙酰胺_甘油基准试剂，加水稀释到50ml，摇匀，放置2分钟，同置白色背景下，至上向下透视.供试品溶液的颜色不得深于标准溶液的颜色；对照溶液的颜色相同于或较深于标准溶液的颜色( 注:如对照液的颜色浅于标准品溶液,则以第二法代替第一法)。
第二法：pH3.5醋酸盐缓冲液照第一法配制标准溶液的制备用移液管取4ml标准铅溶液到适宜的试管中，并加入10ml6N盐酸。
照方法一配制供试品溶液的制备称取一定量的样品(以g计算) ,按公式4.0/1000L 2.0/1000L计SOP-QM 402-14 页号Page：3/4 算,其中L为重金属的限度(%)，置适宜的坩埚中,加适量的硫酸预以湿润,在低温小心炽灼,直至全部炭化,(炭化过程坩埚盖可不盖严),炭化物中加2ml硝酸和5滴硫酸,小心加热,直至不再挥发白色烟雾,于500－600℃炽灼（最好在高温炉中）直至炭完全灰化（不得超过2小时），如果未完全炭化，则可将残渣冷却后加入几滴硫酸使脱水，然后重新炽灼。
放冷，加5ml 4ml6N盐酸,加盖,在蒸气浴上蒸10分钟15分钟,放冷，等量转移到一个试管中。
再用5ml6N盐酸少量多次冲洗坩锅，并将洗液转移到试管中。
去盖,在蒸气浴上缓缓蒸发至干。
残渣加1滴盐酸湿润之，再加10ml热水，蒸煮2分钟，滴加6N氢氧化铵，直至溶液对石蕊试纸刚呈碱性。
用水稀释至25ml 。
用1N醋酸溶液调PH至3.0~4.0之间，用窄围的PH精密试纸作外指示剂,如需要，予以过滤，用10ml水淋洗坩埚和滤器，合并滤液和洗液于50ml比色管中，加水稀释至40ml，摇匀。
对照液的制备——用移液管取4ml标准铅溶液至与上述相同的坩锅中，溶液中含有被测物的量相当于供试液含量的10％。
在蒸气浴上蒸发至干。
在与供试液相同的条件下，在同一高温炉中同时炽灼燃烧。
放冷，加5ml6N盐酸,加盖,在蒸气浴上蒸10分钟。
放冷，等量转移到一个试管中。
再用5ml 6N盐酸少量多次冲洗坩锅，并将洗液转移到试管中。
3.3.5操作方法分别在标准溶液、供试液、对照液的试管中小心地逐滴加入氢氧化铵，调PH到9。
放冷，逐滴加入冰醋酸调PH到8，再加入过量的5ml冰醋酸。
用PH计或窄围的PH精密试纸作外指示剂，测定PH，如有必要，用1N醋酸溶液或6N氢氧化铵调PH至3.0－4.0之间。
如有必要，过滤，用数ml水冲洗，合并滤液和洗液到50ml到比色管中，加水稀释至40ml。
加入2ml醋酸缓冲溶液（PH3.5）, 然后加1.2ml硫代乙酰胺_甘油基准试剂，加水稀释到50ml，摇匀，放置2分钟，同置白色背景下，至上向下透视，供试品溶液的颜色不得深于标准溶液的颜色，对照品溶液的颜色相同于或深于标准溶液。
[注——如对照品溶液的颜色浅于标准溶液，则用第三法检查供试品。
]第三法标准品溶液的配制取8ml硫酸和10ml硝酸的混合液，置一干燥洁净的100ml凯氏烧瓶中，再加适量硝酸 ,使相当于供试品中增加的硝酸量，加热使产生白色烟雾，放冷，小心加入10ml水，如处理供试品溶液用过氧化氢，则加入相当于供试液中耗用量的30%过氧化氢，缓缓煮沸至产生白色浓烟雾。
再放冷，小心加入5ml水，混合，再缓缓煮沸至产生白色浓烟雾，并使体积剩2~3ml。
放冷，以数SOP-QM 402-14 页号Page：4/4 ml水小心稀释，加标准铅溶液2.0ml，摇匀，移入50ml比色管中,用水淋洗烧瓶，洗液并入比色管中，直至达25ml,摇匀。
供试品溶液的制备按公式2.0/1000L计算样品数量,其中L为重金属的限度(%)如为固体样品称取一定量的样品(以g计算), 置一干燥洁净的100ml凯氏烧瓶中[注—如反应时会产生大量的泡沫，则需用300ml的烧瓶]。
钳住烧瓶使成450角,加足量8ml硫酸和10ml硝酸的混合液,使样品完全湿润,加酸时先缓缓加热至反应开始,每次加酸后再加热至反应开始,待反应平息,分次补充加入同样的酸混合液,每次加酸后再加热 ,直至总量18ml混合酸加完,加热至微沸至溶液变黑,放冷，加入2ml硝酸，继续加热使溶液呈黑色。
继续加热,再加硝酸,直至不变黑,然后激烈加热使产生白色浓烟雾。
放冷，小心加入5ml水，缓缓加热至产生白色浓烟雾，再继续加热直至体积仅剩数ml,放冷，小心加入5ml水.观察颜色如呈黄色,可小心加入30%过氧化氢1ml,再蒸发至产生白色浓烟雾, 并使体积仅剩2~3ml.若溶液仍呈黄色,可重复加水5ml并以过氧化氢处理,放冷, 以数ml水小心稀释，淋洗烧瓶,洗液并入比色管中不得过25ml,摇匀.如为液体样品取规定的样品, 置一干燥洁净的100ml凯氏烧瓶中[注—如反应时会产生大量的泡沫，则需用300ml的烧瓶]。
钳住烧瓶使成450角,小心加入数ml的8ml硫酸和10ml硝酸混合液,缓缓加热至反应开始,待反应平息,按固体样品项下自”分次补充加入同样的酸混合液”起同样处理.对照溶液的制备——按固体样品项下供试液的制备方法，取等量的样品，同法操作至“放冷, 以数ml水小心稀释”。
加入2.0ml标准铅溶液（20 µg Pb），摇匀。
转移至50ml比色管中，用水淋洗烧瓶，将洗液并入比色管中至体积达到25ml，混合摇匀。
操作法供试品溶液、标准品溶液及对照溶液均按下列规定进行处理,用氢氧化铵调节pH3.0~4.0,可用窄PH精密试纸作外指示剂,当接近此特定的围时可用稀氨液.然后用水稀释至40ml,摇匀.在上述比色管中分别加入2ml醋酸缓冲溶液（PH3.5）, 然后加1.2ml硫代乙酰胺_甘油基准试剂，加水稀释到50ml，摇匀，放置2分钟5分钟，同置白色背景下，至上向下透视，供试品溶液的颜色不得深于标准溶液的颜色，标准品溶液的颜色相同于或深于标准品溶液的颜色。
附上我的翻译231重金属重金属检查法是指在规定实验条件下检测能与硫离子作用显色的金属杂质的量。
通过目视比较标准铅溶液对照品（见分光光度法和色差计法操作项下的目视比色法851），以供试品中铅的百分数（按重量）计算，不能超过各论中规定的重金属限度。
[注意——此法代表性的金属杂质有铅、汞、铋、砷、锑、锡、镉、银、铜、钼]除另有规定外，测定重金属的含量采用第一法。
第一法适用于在规定条件下能生成澄清无色溶液的物质。
第二法适用于在第一法规定条件下不能生成澄清无色溶液的物质，或由于是络合物，其硫离子能与重金属发生沉淀反应，或是不挥发油和挥发油。
第三法是湿法，适用于那些不能用第一法和第二法的物质。
特殊试剂硝酸铅贮备液——称取硝酸铅159.8mg，加1ml硝酸与100ml水溶解后，加水稀释至1000ml。
制备此溶液并贮存在无可溶性铅盐的玻璃容器中。
标准铅溶液——在使用当天，量取10.0ml硝酸铅贮备液，加水稀释至100.0ml。
每1ml标准铅溶液相当于10µg的铅。
取100ul的标准铅溶液制成对照溶液，如与1g的供试品同法制成的溶液颜色相同，那1g供试品就相当于含有百万分之一的铅。
第一法PH3.5的醋酸盐缓冲液——取醋酸铵25.0g，加水25ml溶解后，加6N盐酸38.0ml。
如有必要用6N氨水或6N盐酸调PH至3.5，用水稀释至100ml，混合摇匀。
标准溶液的制备——取一支50ml比色管，用移液管移取2.0ml标准铅溶液（20µg Pb）,用水稀释至25ml。
用PH计或窄围的精密PH试纸指示，用1N 醋酸或6N氨水溶液调PH至3.0~4.0之间，然后加水稀释至40ml，混合摇匀。
供试品溶液的制备——取一支50ml比色管，加入按该品种项下规定的方法制成的供试液25ml；或加入以g计，按公式2.0/(1000L) （其中L为重金属的限度，以百分比计）算出的供试品的量，用该品种项下规定的酸的体积溶解，并加水稀释至25ml。
用PH计或窄围的精密PH试纸指示，用1N醋酸或6N氨水溶液调PH至3.0~4.0之间，然后加水稀释至40ml，混合摇匀。
对照溶液的制备——取第三支比色管，加入与上述供试液同法制备的任意溶液25ml，加入2.0ml标准铅溶液。
用PH计或窄围的精密PH试纸指示，用1N醋酸或6N氨水溶液调PH至3.0~4.0之间，然后加水稀释至40ml，混合摇匀。